气相色谱法测定角鲨烯软胶囊中角鲨烯含量

超高效液相色谱法测定保健食品中角鲨烯[摘要] 目的研究采用超高效液相色谱法测定保健食品中角鲨烯的含量。

方法样品用95 %乙腈水溶液超声波提取法提取, 采用ODS-C18(2.1 mm*100 mm, 1.7 um)色谱柱分析, 95%乙腈水溶液为流动相, 0.25 mL/min流速对角鲨烯洗脱，用DAD检测器在210 nm处分析。

结果采用超高效液相色谱法比常规高效液相色谱法省时20min，测定角鲨烯的回收率和相对标准偏差分别在94.6 %～103.4 %，1.3%～2.5%之间；方法最低检出浓度0.2 mg/kg，比常规高效液相色谱法降低25倍。

结论该方法快速，适用于保健食品中角鲨烯含量的测定。

角鲨烯是一种脂质不皂化物，最初是从鲨鱼的肝油中发现的,1914年被命名为Squalene,其化学名称为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯,属开链三萜,又称鱼肝油萜,具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能,是一种无毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物质[1，2]。

角鲨烯已经被广泛应用于保健食品中，但是至今为止，我国尚未出台关于角鲨烯测定的国家标准或者规范性文件。

近年来，已经有一些学者建立了分析角鲨烯的方法，如气相色谱法（GC）[3~5]，高效液相色谱法（HPLC）[6，7]，气相色谱质谱联用法（GC-MS）[8~11]等，但是这些方法大都分析时间较长；现采用超高效液相色谱法（UPLC）法测定保健食品中角鲨烯的含量，对测定条件进行优化，比常规HPLC法省时20 min，且灵敏度高，准确性好，是一种简便、快速、准确、环保的检测方法。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 仪器与设备UPLC色谱系统（Waters）ODS-C18 (2.1 mm×100 mm,1.7 um)；FB11005超声仪（Fisherbrand）；K-S22型电热恒温水浴锅（上海精密实验设备有限公司）；BT 224S电子天平（sartorius）。

角鲨烯软胶囊
角鲨烯：
各种鲨鱼的肝脏中都含有角鲨烯,一般认为深海鲨鱼肝中含量高。

如铠鲨肝油中含量为40%~74%,小刺鲨含49%~89%;江海鲨鱼中含量低,如扁鲨、翅鲨等含量<1.5%;闽南近海水层的鲨鳐类含量为0.012%~0.116%,姥鲨幼鱼含量为0.031%~0.46%。

角鲨烯含量因鱼种不同而变化,即使同种鲨鱼亦存在年龄、地理、种群上的差异。

其他动物油脂中也含有较低角鲨烯,如牛脂、猪油中含量低于不皂化物的5%。

作用：
1、保肝作用，促进肝细胞再生并保护肝细胞，从而改善肝脏功能
2、抗疲劳和增强机体的抗病能力，提高人体免疫功能。

3、保护肾上腺皮之功能，提高机体的应激能力。

4、抗肿瘤，尤其在癌切除外科手术后或采用放化疗时使用，效果显著，其最大的特点是防止癌症向肺部转移。

5、升高白细胞的作用
药用效果：
5. 是一种健身滋补
主要功能：
1、促进血液循环：帮助预防及治疗因血液循环不良而引致的病变，如心脏病、高血压、低血压及中风等。

2、活化身体机能细胞：帮助预防及治疗因机能细胞缺氧而引致的病变，如胃溃疡、十二指肠溃疡、肠炎、肝炎、肝硬化、肺炎等。

全面增强体质，延缓衰老，提高抗病(包括癌症)的免疫能力。

3、消炎杀菌：帮助预防及治疗细菌引致的疾病，如感冒、皮肤病、耳鼻喉炎等。

包藏液体的胶囊是蓝鲨的软骨，营养丰富，可含于口内，让胶囊慢慢溶化，对治理喉咙不适效果良好。

4、修复细胞，加快伤口愈合。

可外用，治疗刀伤、烫伤等。

外用时用针刺破胶囊，直接涂抹。

角鲨烯的提炼方法。

气相色谱法测定蝉花中角鲨烯的含量凡军民;贾君;谢春芹;韩艳丽【摘要】Objective] To establish a method of capillary gas chromatography to detect the content of squalene in Cordyceps cicadae.[Method] Squalene in Cordyceps cicadae Shing was detected by gas chromatography.And the squalene contents in different parts of C.cicadae were com-pared.The optimal condition for the detection of squalene in C.cicadae was obtained.[Result] C.cicadae (1 g) was extracted by ultrasonic ex-traction,the product was methyl esterified at 40 ℃for 5 min by 1 m L of 0.5 mol/L sodium hydroxide-methanol solution and then extracted by n-hexane.The squalene could be determined quantitatively by GC.When the squalene concentration was from 21.43 to 214.30 μg/mL,there was a good linear relation (r=0.999 2) and a perfect method precision (RSD =3.71%),and the recovery rate was 77.80%-97.32%,and the aver-age recovery rate was 88.10% (n=9).[Conclusion] This method was simple and rapid with low pollution and high sensitivity,and it is suitable for determination of squalene content in C.cicadae.%[目的]建立毛细管气相色谱（GC）测定蝉花中角鲨烯含量的方法。

保健食品中角鲨烯的气相色谱分析周茂君1,向仕学1,殷德桂2,张正江31 四川省疾病预防控制中心(成都 610031)2 四川省自贡市沿滩区卫生防疫站3 四川省永川市卫生防疫站[关键词] 保健食品;角鲨烯;气相色谱分析[中图分类号]O65717+1 [文献标识码]C [文章编号]1006-4028(2003)02-0186-02 角鲨烯(Squalenum )的化学名称为2,6,10,15,19,23)六甲基)2,6,10,14,18,22)二十四碳六烯。

别名:鲨烯、三十碳六烯、鱼肝油萜,Spinacene 。

该品为无色或微黄色澄明油状液体,系从深海鲨鱼肝油中精馏而成。

因其具有提高血红蛋白的携氧能力,促进新陈代谢,提高机体免疫力和降低血清总胆固醇,防止动脉粥样硬化等功能,而常作为功效成分添加于保健食品中。

角鲨烯的含量测定方法有滴定分析法、薄层色谱法(TLC 法)、气相色谱法(GC 法)及红外光谱分析法(IR 法)。

保健食品可能使用多种功效成分和相关赋形剂,其组分较为复杂,为满足保健食品市场的监督监测,新产品的开发研制及生产控制,而建立了气相色谱法测定保健食品中角鲨烯的定量分析方法。

1 实验部分111 仪器与试剂 GC-14A 型气相色谱仪(日本岛津公司),配氢火焰离子化检测器,泰立公司TL -9800色谱工作站。

三氯甲烷(AR);角鲨烯校准溶液:准确称取角鲨烯标准品(纯度\9912%)011000g 于烧杯中,以三氯甲烷溶解定量移入50m l 容量瓶中,加入三氯甲稀释至刻度。

此溶液每毫升含210mg 角鲨烯,于冰箱保存。

112 分析步骤11211 色谱分析条件 色谱柱:53mm @2m 玻璃柱,内装涂渍0128%OV -17+218%QF -1/chromosorb WAW DMCS (80~100目)。

温度:色谱柱温度230e 汽化室 260e 检测器 260e 。

气体B 氮气(N 2)B 氢气(H 2)B 空气(Air)=150kPa:60kPa:50kPa 。

中文通用名角鲨烯英文通用名Squalene标准号WS-10001-(HD-0818)-2002药品名称角鲨烯药品英文名Squalene主要成分本品为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯构成的不饱和烃，系从鲨鱼肝油中精馏制得，含C30H50不得少于90.0%。

处方性状本品为无色或微黄色澄明油状液体；有鱼肝油特臭，易氧化。

本品在丙酮、乙醚、四氯化碳中极易溶解，在水中不溶。

相对密度本品的相对密度（中国药典2000年版二部附录VI A）为0.854～0.862。

折光率本品的折光率（中国药典2000年版二部附录VI F）为1.494～1.499。

酸值取乙醇与乙醚各15ml，置锥形瓶中，加酚酞指示液5滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）至微显粉红色，再加本品 5.0g，振摇使完全溶解，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）滴定，酸值（中国药典2000年版二部附录VII H）不得过0.3。

鉴别（1）取本品0.5ml，加0.5%溴的四氯化碳溶液5ml，振摇，溴的颜色即消失。

（2）在含量测定项下记录的气相色谱图中供试品主峰的保留时间应与角鲨烯参比溶液峰的保留时间一致。

检查过氧化值取本品1.0g，加冰醋酸-氯仿（6︰4）30ml，振摇使溶解，加碘化钾的饱和溶液1ml，振摇1分钟，加水100ml与淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L）滴定至蓝紫色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。

消耗硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L）不得过1.5ml。

溶液的颜色本品的颜色与黄绿色3号标准比色液（中国药典2000年版二部附录IX A第一法）比较，不得更深。

水分与挥发物本品的水分与挥发物（中国药典2000年版二部附录VII H）不得过0.1%。

含量测定照气相色谱法（中国药典2000年版二部附录V E）测定。

色谱条件与系统适用性试验以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度2%，柱温为250℃，理论板数按角鲨烯峰计算应不低于1500，角鲨烯峰与内标物质峰的分离度应符合要求。

固相微萃取2气相色谱2质谱联用法测定海水中角鲨烯及其与赤潮的关系赵明桥　李攻科Ξ　栾天罡　张展霞(中山大学化学系,广州510275)摘　要　首次报道了应用聚二甲基硅氧烷纤维作为固相微萃取的萃取头,色2质联用法快速测定海水中角鲨烯的方法。

研究了萃取平衡时间、搅拌速度、介质离子强度、pH 值、以及解吸温度、解吸时间等条件对测定效果的影响。

该方法具有简便、快速、灵敏度高、不使用有毒有机溶剂的优点,其检测限为0.005μg ΠL ,相对标偏差介于4.9%～6.2%,回收率在92.0%～9510%之间,能有效地应用于海水中角鲨烯的测定。

海水中角鲨烯浓度的变化,可能作为赤潮预报的一个指标,通过对其变化的监测,为海洋赤潮的预报、防治提供科学依据。

关键词　角鲨烯,赤潮海水,固相微萃取,色质联用,测定1　引 言赤潮发生日趋频繁〔1〕,已成为世界性的海洋灾害。

海水中无机盐对赤潮的影响研究较多,除维生素B 1、B 12、叶绿素a 外,有机物与赤潮的关系未见报道。

作者在对赤潮海水有机物的研究中发现,赤潮发生后,海水中角鲨烯的含量相对于赤潮前降低〔2〕。

其浓度在赤潮前后的变化,可能作为赤潮预报的一个指标〔2,3〕。

国内外有关角鲨烯的分析报道较少。

已有的方法主要是测定鱼肝油中的角鲨烯,其预处理几乎都要进行皂化和族分离,再用气相色谱或超临界流体色谱测定〔4～7〕。

海水中角鲨烯浓度很低,且基体十分复杂,上述预处理方法不适于海水中角鲨烯的测定。

对样品中痕量超痕量有机物的预处理,主要采用液液萃取(LLE )、固相萃取(SPE ),该方法相当费时,达不到赤潮研究快速化要求,且LLE 、SPE 需使用大量有毒有机试剂,易造成环境二次污染。

本文应用固相微萃取(s olid 2phase microextraction ,SPME )技术〔8〕,萃取后直接测定海水中的角鲨烯。

SPME 是在SPE 基础上发展起来的一种样品预处理技术,具有简便、快速、高效和无需溶剂等特点,其最小检出限可达到亚ng ΠL 数量级,该方法与色谱或色质联用,样品的萃取、富集、脱除基体和进样一步完成,大大提高了分析速度和方法的灵敏度,已广泛应用于环境、食品、医药卫生、生物化学、法医检验等复杂基体样品领域〔9.10〕。

角鲨烯质量标准角鲨烯是一种重要的有机化合物，广泛应用于医药、化妆品、食品等领域。

为了确保产品质量和安全性，制定了一系列的角鲨烯质量标准。

本文将详细介绍角鲨烯质量标准的相关内容。

首先，角鲨烯的外观应为无色或淡黄色的液体，无悬浮物和沉淀物。

其气味应为特有的香气，无异味或刺激性气味。

其次，对于角鲨烯的纯度要求较高。

一般来说，角鲨烯的纯度应不低于98%。

纯度的测试可以通过高效液相色谱法（HPLC）进行，确保不同批次之间的纯度稳定性。

除了纯度要求，角鲨烯的含量也是一个重要指标。

一般来说，角鲨烯的含量应不低于90%。

含量的测试可以通过气相色谱法（GC）进行，确保产品中有效成分的含量符合标准要求。

此外，角鲨烯的酸值也是一个重要指标。

一般来说，角鲨烯的酸值应小于2.0 mgKOH/g。

酸值的测试可以通过酸碱滴定法进行，确保产品的酸碱平衡性符合标准要求。

此外，对于角鲨烯的重金属含量也有严格要求。

一般来说，重金属（如铅、汞、镉等）的含量应小于10 ppm。

重金属含量的测试可以通过原子吸收光谱法（AAS）进行，确保产品不含有害重金属成分。

此外，对于角鲨烯的微生物限度也有一定要求。

一般来说，角鲨烯应符合微生物限度试验的要求，如总菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌等指标应符合国家相关标准。

最后，角鲨烯的包装和储存也需要符合相关要求。

一般来说，角鲨烯应采用密封包装，并存放在干燥、阴凉、避光的环境中，避免阳光直射和高温。

综上所述，角鲨烯质量标准涉及到外观、纯度、含量、酸值、重金属含量、微生物限度等多个方面。

只有符合这些标准要求，才能确保角鲨烯产品的质量和安全性。

在使用角鲨烯产品时，消费者也应选择正规渠道购买，并注意产品的生产日期和有效期限。