洁净区微生物基础知识培训共44页

拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
洁净区环境控制及微生物知识培训
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ，而是 让儿童 练习良 好道德 行为， 克服懒 惰、轻 率、不 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴

三、微生物的作用
33
1.微生物在自然界物质转化中的作用
C.微生物在其他物质循环中的作用
三、微生物的作用
其他物质循环包括氧循环、硫循环、磷循环等，生物 圈中的各种化学元素，经生物化学作用在生物圈中的转化 和运动，是推动地球向更有利于生物生存繁衍方向演化的 巨大动力，是地球化学循环的重要组成部分。
微生物在有机物的矿化中起决定性作用，地球上有机 物的矿化90％都是由细菌和真菌完成的。
体积小，比表面积大 吸收多，转化快
生长旺，繁殖速度快 适应性强，易变异 分布广，种类多
一、微生物基础知识
微生物的特点 （小、多、快、强、广）
6
2.微生物的特点
生长旺，繁殖速度快
一、微生物基础知识
12:01
7
2.微生物的特点
生长旺，繁殖速度快
一、微生物基础知识
时间 开始时 1小时后 2小时后 5小时后
培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活
菌的数量。
15
5.菌落 细（真）菌菌落与真菌菌落的不同：
一、微生物基础知识
16
5.菌落
一、微生物基础知识
17
2 Chapter
第二章
微生物的发现
1.细菌的发现 2.细菌从哪里来
18
1.细菌的发现
二、微生物的发现
19
1.细菌的发现
二、微生物的发现
细菌数 1 8 64
32 768
12:01
8
2.微生物的特点
一、微生物基础知识
细菌名称 乳酸菌
大肠杆菌 根瘤菌
枯草杆菌
代时 38分 18分 110分 31分
每日分裂次数 38 80 13 46

空气净化度监测
根据98年版
GMP的有关规 级别 定，洁净室分 为四个等级， 100级 即100级区、 10，000级区 10,000级 、100，000 级和300， 000级，各级 100,000级 别的要求如下 ：
300,000级 洁净度 尘粒最大允许数/立方米 ≥0.5μm 3,500 350,000 ≥5μm 0 2,000 微生物最大允许数 浮游菌/立 沉降菌/ 方米 皿 5 100 1 3

洁净环境监测的方法



1）、尘埃粒子数测定：尘埃粒子计数器。 2）、微生物的测定：主要有沉降菌测定和浮游菌 测定两种方法。 3）、风量的测定：风速仪测定。 测试状态 有静态测试和动态测试两种状态。 静态测试是，室内测试人员不得多于2人。 测试报告中应标明测试时所采用的状态。 测试时间 对单向流，测试时应在净化空气调节系统正常运行 时间不少于10min后开始。 对于非单向流，测试时应在净化空气调节系统正常 运行时间不少于30min后开始。
一、几个概念



13、无菌 sterile 不存在活的生物。 14、灭菌sterilization(sterilise) 使达到无菌状态的方法。 15、无菌原料药sterile API 不存在活的微生物的原料药 16、非无菌原料药 non-sterile API 所含活的微生物量符合卫生学标准的原料药。
二、空气净化系统的空气处理措施


3）、送风方式 垂直层流（100级）：顶送下回 水平层流（100级）：侧送侧回 乱流（10000级）：顶送侧回 乱流（100 000～300 000级）：顶送侧回、上送 上回 4）、换气次数 10000级洁净室换气次数n≥25次/h 100000级洁净室换气次数n≥15次/h 300000级洁净室换气次数n≥12次/h

精品课件
消毒注意事项
• 消毒剂浓度合适，针对特定范围内的细菌选择相应的消毒剂 • 消毒剂在一定周期内轮换使用，以防细菌耐药。我公司常用消 毒剂为：0.2%新洁尔灭、75%酒精溶液 • 紫外灯消毒时记录使用时间，紫外灯的输出功率随使用时间增 加而降低。国产紫外灯的平均寿命（点到70%额定功率的时间）一 般为2000h，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。我 公司规定紫外灯使用时间为1000h。
可引起局部感染 道和尿道感染 化脓性感染、中耳炎、肺炎 结膜炎 使糖分解，药液产生有机酸
使制剂霉坏，酸败变质
精品课件
洁净室内微生物在哪里
• 空气 •水 • 人员 • 器具
精品课件
空气中的微生物
• 灰尘——微生物的飞行器 • 微生物不是凭空存在，99%的微生物都附在颗粒上。控制空 气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 • 灰尘、微粒具有沉降和粘附在趋势，所以同一区域内，地 面是微粒相对集中在地方，也是微生物相对较多的地方，墙 壁也容易粘附灰尘。
精品课件
如何阻断人体污染源
◆ 《药品生产质量管理规范》中明确规定：进入洁净室（ 区）的人员不得化妆和佩带饰物，不得裸手直接接触药品。 ◆《药品生产质量管理规范》中明确规定：无菌工作服必须 包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。
精品课件
• ①洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量一般为10～300 个／(min·人)， 躯体一般活动时的发菌量为150～1000 个／(min·人)，快步行走时的发菌量为900— 2500 个／(min·人)。 • ②咳嗽一次的发菌量一般为70～700 个／(min·人)，喷嚏一次的发菌量一般为4000～ 60000 个／(min·人)。 • ③穿平常衣服时发菌量为3300～62000 个／(min·人)。 • ④无口罩发菌量：有口罩发菌量为(1：7)～(1：14)。 • ⑤发菌量：发尘量为(1 ： 500)～(1：1000)。 • 可知洁净室内穿无菌衣人员的静态发菌量一般不超过300 个／(min·人)，动态发菌量 一般不超过1000 个／(min·人)

• 步骤：在皿底标记取样点号、取样日期、 时间，在取样点打开皿盖，皿底放在平面 上，将皿盖斜靠在皿底边缘，保证皿盖不 掉下来且尽可能少的覆盖培养基表面。测 试结束后，小心盖上培养皿，传出洁净区。
• 30-35℃的培养箱中培养3天。
沉降菌的监测方法
• 沉降菌监测的注意点： • 摆放位置和高度（抑制物质的引入）
洁净区环境控制及微生物 知识培训
zwx 2013.10
制药生产洁净控制
主要:
（一）人员控制系统 （二）公用工程控制系统 （三）设备控制系统 （四）物料控制系统 （五）生产过程控制系统 （六）质量检测控制系统
相关术语
• 洁净室(区)：需要对尘粒及微生物含量进行控制 的房间(区域)。
• 悬浮粒子：洁净室内悬浮在空气约在0.1µm至 5µm之间的固体和液体粒子，用于空气洁净度分 级。
• 非本岗位人员进入洁净区（包括维修、辅助人员） 应定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业 等方面的培训及考核。非本岗位人员进入洁净区 要严格按规定程序进出、作业，并有登记记录。
洁净区卫生管理规程
工作服应制定清洗周期，工作服包括服装和一切用于 包裹头、脸、手臂等的遮护用品。不同空气洁净度级别使 用的工作服应分别清洗、整理，必要时消毒或灭菌。
1
＜1 1
＜1 1
＜1
1
1
3
1
3
1
5
3
3
1
3
1
10
8
-
-
-
-
洁净室环境控制
• 压差的控制：洁净区与非洁净区之间、不同级别 洁净区之间的压差应当不低于10帕斯卡。必要时， 相同洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间 也应保持适当的压差梯度。

头发断面
15μm
肉眼可见 5μm






2、发菌量 分析国外试验资料可以认为： （１） 洁净室内当工作人员穿无菌服时： 静止时的发菌量 一般为10-300 个/min.人躯体一般活动时的发菌量为 150-1000 个/min.人快步行走时的发菌量为 900-2500 个/min.人 （２） 咳嗽一次一般为 70~700 个/ min.人喷嚏一次一般为 4000~62000 个/ min.人 （３） 穿平常衣服时发菌量 3300~62000 个/ min.人 （４） 无口罩发菌量:有口罩发菌量 1:7~1:14 （５） 发菌量：发尘量 1:500~1:1000 据国内事例： （６） 手术中人员发菌量 878 个/ min.人 所以，可知洁净室内无菌衣人员的静态发菌量一般不超过 300 个/ min.人，动态发菌量一般不超过1000 个/ min/人，以 此作为计算依据是可行的。 洁净室之建筑主体构造，一般是用钢筋或骨水泥，但无论是 何种构造，必须满足如下之条件：A.不会因温度变化与振动 而发生裂痕；B.不易产生微尘粒子，且很难附着粒子；C.吸 湿性小；D.为了维持室内之湿度条件，热绝缘性要高




感性认知
一般微粒粒径对比
0.3μm 微尘粒 \ 0.5μm 微尘粒
PM2.5可吸入颗粒 2.5μm 微尘粒
肉眼可视 (5μm)
人类头发 (15μm)
感性认知
一般自然界气体等级
外大气层
1,000
大气层 田园地带
100,000
10,000
街市区
1,000,000
工业地带
10,000,000
空气洁净级别
大量临床资料表明，注射剂（尤其是静脉注射剂）如污 染了7~12μm的尘粒，可导致热原反应、肺动脉炎、微 血栓或异物肉芽肿等，严重的还会致人死命。而如果污 染了细菌，轻则局部红肿化脓，重则引起全身细菌性感 染。因此，对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针 剂生产洁净室非常重要。 人是洁净室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人 每分钟向周围排放1000个以上的含菌粒子，女性为750 个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为10~300个/min， 一般活动时发菌量为150~1000个/min，行走时发菌量为 900~2500个/min。咳嗽一次发菌量为70~700个/min，喷 嚏一次为4000~60000个/min。所以在洁净室中，人的数 量和活动应有特别严格的限制。

微生物可通过空气、水、食品等途径传播，此处 将重点介绍空气中微生物的控制方法。
微生物危害及对人体的影响
1 感染传播
细菌、病毒等微生物会引起感染传播，引起疾病。
2 食品卫生
细菌在食品中繁殖，容易导致食品污染。
3 药物耐受性
细菌、病毒等微生物的药物耐受性会影响治疗效果。
洁净区域的定义与分类
1
洁净区定义
注意事项 易燃，对皮肤的刺激性较大。
地面、墙壁等表面消毒 消毒率较高，使用范围较广
含氯量不宜过高，会对地面 产生腐蚀性。
具有毒性，对人体造成伤害， 使用时要注意控制醛气浓度。
环境监测程序
设备选择
选择能满足环境监测数据采集 和管理的设备。
软件选择
根据设备类型、使用要求等选 择合适的监测软件。
操作流程
温度和湿度控制
要根据不同环境对温度和湿 度进行控制，保证洁净区域 内的环境舒适。
检测和维护
要对通风系统进行定期监测， 发现问题及时维护和处理。
环境相关的质量控制
对于洁净区域的环境质量进行相关的质量控制，包括环境监测、污染控制、物料灭菌、器具消毒等。不 断优化过程、提高管理水平和经验，提高洁净区域的质量保障和研究水平。
着装要求
穿戴干净的制服或衣服，佩 戴适当的防护用品。
操作流程
对不同操作流程进行操作规 程的制定和员工的培训，确 保操作的标准化和规范化。
相关法规
员工培训需要对相关法规进 行解析，使员工清楚了解洁 净操作的相关法律法规。
消毒剂的种类与使用方法
种类 酒精类 含氯类 醛类
使用范围 手术器械等器材表面消毒
涉及非常规流程的问题处理技巧
1 问题的分析和定位 2 方案的制定和实施 3 维护和管理

消ห้องสมุดไป่ตู้与灭菌
消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作， 从事医疗器械生产与检验的人员都应当了解消 毒与灭菌的方法及意义，严格遵守操作规程， 否则会影响产品质量，危害患者安全。
消毒与灭菌-概念
无菌：
“无菌”从定义上来说是一个绝对的概念，一切有 生命活动的微生物的营养细胞及其芽胞或孢子都 不存在。
人员污染的预防
进入洁净区的人员应该严格按照更衣程序执行。 进入洁净区的工作人员须养成良好的个人卫生
习惯，做到勤剪指甲、勤理发、勤剃须、勤洗 澡、勤换衣服。 进入洁净车间的人员不得化妆、不得佩带饰物、 手表等表面粗糙的物体。 洁净区内人员的动作不宜过大，应缓慢、不得 随意脱下口罩。 洁净区内定期手消
器具
器具携带的微生物一般较少，来源有以下： 1.器具从非洁净区移入洁净区时带入。 2.环境微生物沉积。 3.人员微生物污染。 预防措施，器具在进出洁净区时应进行全面清洁，
在洁净室内的仪器及用具应定期进行维护清洁保养， 洁净区内人员进去洁净区时应按照要求进行清洁， 在洁净区内应定期进行手部消毒。
洁净室微生物相关基础知识培训
前言
《医疗器械生产质量管理规范植入性医疗器械实施细则》规 定：
生产企业应当确定产品生产中必须避免污染、在相应级别的 洁净室（区）内进行生产的过程
在洁净区内的人员数量严格控制的基础上。洁净区内的工作 人员（包括维修、辅助人员）应定期进行卫生和微生物学基 础知识、洁净作业等方面的培训及考核；对进入洁净室的临 时外来人员应进行指导和监督。
如何控制空气中的微生物
基本的控制：洁净室自身基本的空气过滤自净系统 就是控制空气尘埃及微生物的基本保证。
清洁打扫：按照规定要求定期对环境进行打扫能有 效清除洁净室沉积的尘埃微粒。

洁净室中最大的微生物污染源
1、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。 2、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。 3、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。
人体内外微生物的分布
1、皮肤：表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八叠球菌属细菌、类白喉棒杆 菌、金黄色葡萄球菌等 2、口腔：唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉棒杆 菌等 3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌 、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌 等。 4、下呼吸道：包括气管、支气管和肺 。健康人的下呼吸道是无菌的。
热力灭菌法：使蛋白质、酶及核酸永久性破环，细胞膜溶解，导致细胞发生 不可逆转的死亡。 1、干热灭菌法—采用灼烧或干热空气灭菌 ，使用方便，适用于玻璃器皿和 瓷器等耐高温的固体物的灭菌 。 2、湿热灭菌法—利用热蒸汽杀死微生物。 高压蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽进行灭菌的方法 ，蒸汽的穿透力较热空 气强可以杀死一切微生物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐高温 的个体 。最可靠最适用最广泛的灭菌方法。
• 4、枯草杆菌 结膜炎
• 5、酵母菌 使糖分解，药液产生有机酸
• 6、霉菌
使制剂霉坏，酸败变质
洁净室内微生物在哪里
• 空气 •水 • 人员 • 器具
空气中的微生物
• 灰尘——微生物的飞行器 • 微生物不是凭空存在，99%的微生物都附在颗粒上。控制 空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 • 灰尘、微粒具有沉降和粘附在趋势，所以同一区域内，地 面是微粒相对集中在地方，也是微生物相对较多的地方，墙 壁也容易粘附灰尘。
消毒注意事项
• 消毒剂浓度合适，针对特定范围内的细菌选择相应的消毒剂 • 消毒剂在一定周期内轮换使用，以防细菌耐药。我公司常用消 毒剂为：0.2%新洁尔灭、75%酒精溶液 • 紫外灯消毒时记录使用时间，紫外灯的输出功率随使用时间增 加而降低。国产紫外灯的平均寿命（点到70%额定功率的时间）一 般为2000h，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。我 公司规定紫外灯使用时间为1000h。