弱化F1F0-ATP酶植物乳杆菌的突变分析及其作为益生添加物在四川泡菜
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四川泡菜中潜在益生性植物乳杆菌的筛选及安全性评价史梅莓;伍亚龙;杨恺;吕鹏军;汪冬冬;唐垚;王勇;张其圣【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2022(43)22【摘要】为筛选具有潜在益生作用和安全性的植物乳杆菌,以四川泡菜中分离的114株植物乳杆菌为出发菌株,进行耐酸性、耐胆盐能力、耐模拟胃肠液能力、自聚能力、致病菌共聚性、抗生素耐药性和溶血性研究。
经过pH2.0酸性条件、0.2%浓度胆盐培养后,初步筛选出13株耐受能力较好的菌株。
对13株菌进行模拟胃肠液、聚集能力、耐药性和溶血性试验。
结果表明,13株菌模拟胃肠液耐受存活率均高于75%,自聚集能力23%~52%,与致病菌单增李斯特菌和大肠埃希氏菌的共聚集能力分别为10%~29%和16%~37%。
在药敏和最小抑菌浓度(MIC)试验中,潜力菌株对10种常见抗生素的耐药性表现基本一致,对β-内酰胺类、酰胺醇类抗生素较敏感,对氨基糖苷类、喹诺酮类、糖肽类、大环内酯类和四环素类抗生素有较强耐受性;13株菌均无溶血现象,说明具有一定的安全性。
因此,筛选得到的13株植物乳杆菌均有潜在的益生作用和较高安全性,研究结果为益生菌的开发提供了菌种资源。
【总页数】8页(P165-172)【作者】史梅莓;伍亚龙;杨恺;吕鹏军;汪冬冬;唐垚;王勇;张其圣【作者单位】四川省食品发酵工业研究设计院有限公司;四川益动源生物科技有限公司;四川东坡中国泡菜产业技术研究院【正文语种】中文【中图分类】TS201.3【相关文献】1.传统乳制品中潜在益生植物乳杆菌的体外筛选2.弱化F1F0-ATP酶植物乳杆菌的突变分析及其作为益生添加物在四川泡菜中的应用探索3.一株具降胆固醇功能的海洋源植物乳杆菌的筛选及其益生性能分析4.一株益生性植物乳杆菌的体外安全性评价5.四川泡菜中植物乳杆菌的筛选与鉴定因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
泡菜中植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶的克隆表达吴长力; 陈颖琪; 陈桂柳; 林梦哲; 张宏梅【期刊名称】《《中国调味品》》【年(卷),期】2019(044)009【总页数】4页(P9-12)【关键词】亚硝酸盐还原酶; 基因表达; 包涵体; 植物乳杆菌【作者】吴长力; 陈颖琪; 陈桂柳; 林梦哲; 张宏梅【作者单位】广东工业大学生物工程系广州 510006【正文语种】中文【中图分类】TS201.25亚硝酸盐广泛存在于咸鱼、腌制肉类和腌制蔬菜中,过量的亚硝酸盐除了能与人体内蛋白质的降解物结合生成强致癌物质亚硝胺外,还可与血红蛋白结合而造成正铁血红肮症,对人体危害极大。
有报道指出各地区亚硝酸盐中毒事件逐年增加,所以食品中亚硝酸盐的污染情况及其控制已成为食品安全相关领域研究的一大热点[1-4]。
在食品及其配料的亚硝酸盐清除方法中,比较有效的降解方法是生物降解法。
目前报道较多的是乳酸菌对发酵食品中亚硝酸盐的降解,如Hashimoto等人在泡菜中添加乳酸菌,发现亚硝酸盐含量明显降低[5];另外,在发酵食品如香肠、咸鱼和泡菜中,已筛选出许多能降解亚硝酸盐的乳酸菌株,如植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、沙克乳杆菌(Lactobacillus sakei)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)等[6-8]。
有关乳酸菌降解食品中亚硝酸盐的研究机理表明, 这些乳酸菌在生物发酵后期, 主要通过亚硝酸还原酶来降解亚硝酸盐。
该酶是植物硝态氮同化过程中的一个十分重要的酶,所以,获得来源丰富和高效的亚硝酸盐还原酶是实现食品中亚硝酸盐降解的重要途径。
本研究前期在泡菜中分离了一株可高效降解亚硝酸盐,并通过菌种鉴定的植物乳杆菌L10(Lactobacillus plantarum L10),在此基础上,本研究通过基因工程技术,将植物乳杆菌中获得的nirS基因导入到大肠杆菌中进行表达,并诱导产生重组亚硝酸盐还原酶,旨在为该酶在食品安全领域中的实际应用提供理论参考。
六株植物乳杆菌的益生特性研究
郑越;段涛;宋丹;乔琳;陈丽仙;王薇薇;宾石玉
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2022(48)10
【摘要】该试验旨在研究不同来源的6株植物乳杆菌(分别为LP15-1、LP15-2、LC16-1、LP17-1、LP17-3、RS048)的益生特性。
试验通过测定菌株的耐酸耐胆盐能力、模拟胃肠道耐受能力、抑制有害菌能力分别对结肠上皮细胞系Caco-2和空肠上皮细胞系IPEC-1细胞的黏附性等特性,考察植物乳杆菌的益生特性。
研究结果表明,6株植物乳杆菌在pH=2的酸环境中孵育3 h存活率均在43%以上;除
LC16-1和LP17-1外,其余4株均能在0.3%(质量分数)的胆盐中存活;在模拟胃肠液中存活率均高于95%,对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌K88和大肠杆菌K99有较好的抑制能力;对Caco-2和IPEC-1有一定的黏附能力。
其中植物乳杆菌LP15-1各项益生特性均比较优良,可作为潜在的益生菌株进行进一步研究和应用。
【总页数】7页(P119-125)
【作者】郑越;段涛;宋丹;乔琳;陈丽仙;王薇薇;宾石玉
【作者单位】广西师范大学生命科学学院;国家粮食和物资储备局科学研究院【正文语种】中文
【中图分类】S85
【相关文献】
1.自然发酵泡菜汁中植物乳杆菌的分离鉴定与体外益生特性研究
2.植物乳杆菌LPL10的体外益生特性研究
3.植物乳杆菌生理特性及益生功能研究进展
4.具有益生特性植物乳杆菌的筛选及其发酵特性的研究
5.不同来源植物乳杆菌的益生特性研究
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植物益生菌对植物的益生效应及其应用
林吉恒;王睿之;马风兰;陈美龄;周陈伟;徐娟;阮晖;何国庆
【期刊名称】《中国生物防治学报》
【年(卷),期】2010(000)0S1
【摘要】本文综述了植物益生菌对宿主植物产生的益生作用(包括促生作用和生防作用),以及植物益生菌与其宿主植物协同发挥的生物修复作用。
并从改善植物内生菌微生态群落的角度出发,提出引入野生或重组植物益生菌以提高植物健康状态和生物修复功能,以及以植物益生菌为载体引入外源功能基因开辟一条新颖转基因途径等策略,以期实现植物内生菌资源的深度开发。
【总页数】6页(P100-105)
【作者】林吉恒;王睿之;马风兰;陈美龄;周陈伟;徐娟;阮晖;何国庆
【作者单位】浙江大学生物系统工程与食品科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】S476
【相关文献】
1.植物根际促生菌对植物生长的有益作用 [J], 李京
2.弱化F1F0-ATP酶植物乳杆菌的突变分析及其作为益生添加物在四川泡菜中的应用探索 [J], 宋菲菲;林凯;蔡婷;徐顾榕;袁春红;张庆;向文良
3.NaCl对盐生植物和非盐生植物生理效应的比较 [J], 衣艳君;赵可夫
4.益生菌与益生协同剂协同效应的研究 [J], 李晓卉
5.益生元对益生菌的增殖效应实验在本科教学中的应用 [J], 刘丽艳;冯坤;娄文勇;苏健裕;吴虹
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影响泡菜发酵过程中SOD酶活性的因素研究罗潇;吕嘉栃;于鑫【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2018(043)009【摘要】以保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus )、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum )、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus )、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei )以及乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis )为发酵菌种,以 7 种常见蔬菜为原料,研究了在泡菜发酵过程中影响 SOD 酶活的因素.并对SOD酶性质、邻苯三酚自氧化法检测SOD酶活力的最佳条件进行了初步研究.结果表明:不同发酵条件下,泡菜中SOD酶活性达到最大值的时间各不相同.25 ℃下,接种量、装料量改变时,在发酵时间内SOD酶活性总体呈先升高后降低的趋势,接种量为20 %时,泡菜在发酵第4 天SOD酶活性达到最大值95.75 U/mL;装料量为60%时,在发酵第 5 天达到最大值 101.52 U/mL;pH 为 5.0、温度为25 ℃时SOD酶活性较稳定,在检测时间内波动较小,不同浓度的Zn2+、Cu2+和Mn2+对SOD酶活性影响较小, Fe2+对SOD酶活性有较强的抑制作用;邻苯三酚自氧化法检测SOD酶活性的最佳条件为波长320 nm,邻苯三酚浓度4.5 mmol/L.【总页数】6页(P30-35)【作者】罗潇;吕嘉栃;于鑫【作者单位】陕西科技大学食品与生物工程学院,西安 710021;陕西科技大学食品与生物工程学院,西安 710021;陕西科技大学食品与生物工程学院,西安 710021【正文语种】中文【中图分类】TS255.54【相关文献】1.发酵条件对泡菜发酵过程中微生物菌系的影响 [J], 杨瑞;张伟;陈炼红;程甜甜2.四川泡菜中两株优良乳酸菌的鉴定及不同发酵条件对其发酵泡菜品质的影响 [J], 敖晓琳;张小平;史令;张先琴3.乳酸菌对泡菜发酵过程中亚硝酸盐含量变化及泡菜品质的影响研究 [J], 周光燕;张小平;钟凯;孙桂丹;Kristina Lindstrom4.湿态和半干态泡菜发酵过程中水分活度对挥发性成分的影响及差异解析 [J], 汪冬冬; 陈功; 李恒; 唐垚; 张伟; 朱翔; 李梅; 张其圣5.温度对甘蓝泡菜发酵过程中风味的影响 [J], 汪冬冬;鲍永碧;管锐;唐垚;明建英;李嘉仪;黄润秋;陈功;张其圣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
第34卷第5期 Vol. 34,No. 5西华大学学报(自然科学版)Journal of XihuaU?iversity(Natural Science)2015年9月Sep. 2015•生物工程!弱化U F。
-A T P酶植物乳杆菌的突变分析及其作为益生添加物在四川泡菜中的应用探索(西华大学食品与生物工程学院,四川省食品生物技术重点实验室,西华大学古法发酵(酿造)生物技术研究所,四川成都610039)摘要:从退化的植物乳杆菌中筛选到弱化F J。
- ATP酶突变株LPS08、LP S21和LP S24。
在LP S08的F F。
- ATP酶5亚基中,P he- 91、Ser- 380和Leu- 436分别被Leu、Pro和Pro替换,导致F F。
-ATP酶的活性降低了5.61% ;LPS21中,Leu-268突变改变了 5亚基的构像,导致F^-ATP酶活性降低43 44% ;LP S24中A6-205、Ser-38。
和Pro-419分别被Ser、Leu和Le u所取代,降低F1F0-ATP酶活性19.46%。
LPS。
8、LPS21和LP S24分别接人初始pH6.5的MRS液体培养基中37 }培养72 h后,pH值分别为3.73、3.82和4.25,酸度(乳酸计)分别为2.。
、1.56和。
.95g/1。
mL。
按1。
6CFU/mL盐卤量分别将3株突变株接人pH4.6的无菌泡菜中,3。
C孵育7d后,仅有LPS21的泡菜盐卤pH维持在4.2以上,满足四川泡菜对酸味口感的要求。
同时,盐卤中LP S21菌体的含量(7.27 log CFU/mL)满足国际上益生菌食品中关于活菌量的要求。
因此,弱化F F -ATP酶LP S21突变株作为益生添加物添加到泡菜中生产益生菌泡菜时,能够从根本上解决益生菌泡菜在常温下贮存、运输和销售过程中的后酸化问题。
关键词!植物乳杆菌;F1F- ATP酶;突变分析;益生添加物;四川泡菜中图分类号:T S201.3 文献标志码:A文章编号:1673 -159X(2015)05-0097-06doi :10. 3969/j. issn. 1673 -159X. 2015.05.018R e d u c e d F1F0 -A T P a s e M u ta tio n A n a ly s is o f L a c t o b a c illu s P la n t a r u m a n d I t sA p p lic a tio n in S ic h u a n P ic k le a s P r o b io tic s A d ju n c tSONGFei-fei,LINKai,CAI Ting,XUGu-rong, YUANChun-hong,ZHANGQing,XIANGWen-liang* (Provincial Key Laboratory of Food Biotechnology o f Sichuan,School of Food and Bioengineering,Institute of Traditional Brewing Technology,Xihua University,Chengdu610039 China)Abstra c t :Three mutatioii strains L.p l antarum LPS08,LPS21 arid LP S24 witli reduced F2F0 - ATPase activity were screeiied from acid productioii=686116以11〇?L. .a n tr—C C T C C207202. I F!F0 - ATPase一subu?it of LP S08,P he- 91,Ser- 380 arid Leu- 436 w ere replaced by Leu,Pro arid Pro,respectively.But these rnutatioiis do iiot rnarkedly affect F!F q reductioii of activity of5.61%. I11mutant strain LP S21,Leu-268 mutation h a s chaiiged the F2F。
一ATPase5 triggered a great chaiige with43.44% F1F。
- ATPase activity reductioii.I11LPS24,the Asii-205,Ser-spectively replaced by Ser,Leu arid Leu.For these rnutatioiis,F1F。
- ATPase activity decreased19.46% .I iitia l uid瓜已过^瓜,the pH values respectively rnediated by rnutatioii straiii LP S08,LPS21 arid LP S24 were3.73,3.68arid4.25,arid their acidities were2.0 g/100 0l,1.56 g/100 arid0.95g/100 after cultured at37 0C for72h.Cornpared with p a n t straiii C C T C C 207202,oiily the rnutatioii straiii LPS21 could overcorne post- acidificatioii wheii their cultures were icorporated ito aseptic Sichuaii pickle products at6log salt b rie level arid kept at30 0Cup to7 days,arid its viable cou?i products(7.27 log CFU/01)收稿日期:2014 -09 -18基金项目:教育部春晖项目(Z2014061);四川省应用基础项目(2014J Y0045);四川省教育厅重点项目(14Z A0110);四川省食品生物技术 重点实验室项目(S Z JJ2014 - 007)$通信作者:向文良(1973 —),男,副教授,博士,主要研究方向为中国西南地区特色发酵食品微生物分子生态与生物过程学。
E-i rndl:b io u?ic o m@m a i1•x h u.ed u.c?98西华大学学报(自然科学版#2015 Ealso satisfied the criteria for a probiotic food product.Therefore%the F1F。
- ATPase rnutaiit straiii LPS21 tures adjuict in S ichuaii pickle products to preveiit post- acidificatioii during the product haridiiig,transportation arid storage at arnbi-eiit ternperature.K eyw ord s:%,plantarum;F1F。
一ATPase;mutant analysis;probiotics adjunct;Sichuan pickle四川泡菜作为中国泡菜的典型代表,以其独特的风味享誉国内外。
近年来,随着我国泡菜产业的高速发展和人们泡菜消费量的急剧增加,富含乳酸的传统益生泡菜由于货架期短,销售区域狭窄,已 不能满足行业发展的要求;因而,国内绝大多数泡菜企业开始生产灭菌泡菜。
灭菌泡菜产品中不含活的乳酸菌,延长了产品货架期、拓展了销售区域,但也因此失去了乳酸菌带来的益生功能。
将益生菌作为益生添加物添加到食品中是目前国际上生产非奶益生食品的重要方法[1_2]。
为了弥补泡菜因灭菌而失去的益生功能,国内部分企业也开始尝试向灭菌后的泡菜中添加乳酸菌;但是,这些企业为了节约成本,对添加了益生菌的泡菜产品往往不愿意采用冷链贮存、运输和销售,因此产品常常出现后酸化。
后酸化是制约灭菌泡菜添加益生菌以生产益生菌泡菜的关键难题。
那么,能否寻找到一种既能在灭菌泡菜中正常繁殖,又防治后酸化的乳酸菌作为益生添加物呢?植物乳杆菌是泡菜发酵中后期的优势菌种[3一4],也是非奶益生食品常选用的益生添加物[1_2]。
植物乳杆菌具有较强的产酸能力和耐酸性[5],当外界环境的p H值降低时,植物乳杆菌质膜上的F F - ATP酶通过水解A TP提供能量将细胞内的H'泵出胞外,维持胞内p H接近中性,胞内代 谢不受影响,从而能够在低p H值环境中继续生长和产酸。
这是导致灭菌泡菜添加植物乳杆菌后在常温下C存、运输和销售发生后酸化的主要原因。
Fi F〇 - A TPae是一种跨膜蛋白酶复合物,由胞外的F和嵌入细胞膜的F 2部分构成[6]。
其中,F i由a、5、7、S和.5种亚基构成。
所有乳酸菌中都含有F^。
- ATP酶,它不仅可以调控乳酸菌胞内的pH,还可以增强细胞的耐酸性[7_8],促进能量A TP转 化。
Jaichumjai等[9]研究表明:低活性的F^。
- ATP 酶变异株对酸性环境非常敏感,当外界环境p H值降到一定程度时,细胞内H'的泵出效率降低,代i射受到影响,产酸能力下降。
因此,选用低活性F^。
-ATP酶的植物乳杆菌突变菌株作为益生添加物,成为泡菜添乳 治 常温下、运输和销售环节发生后酸化的有效方法。
基于此,我们以产酸退化的植物乳杆菌为研究对象,筛选弱化- ATP酶突变株,分析- ATP酶5亚基的突变以及突变对- ATP酶活性的影响,评估无菌四川泡菜中添加弱化F^。
- ATP植乳 的 化繁况,为四川泡菜筛选益生添加物提供新途径。
1材料与方法1.1材料产酸退化的植物乳杆菌和出发菌株CCTCC 207202,由四川高福记生物科技有限公司提供。
1.2方法1.2.1 弱化F^。
- ATP酶植物乳杆菌的筛选100 ,L产酸退化植物乳杆菌活化后的悬液分别涂布于含有。
和500 ,g/m L新霉素的MRS固体 培养基平板上,37 }培养2 ~3d,挑选微小的菌落做后续分析。
1.2.2 弱化F^。
- A TP酶植物乳杆菌的生长特性 分析过夜培养的菌体接种到不同初始p H值的MRS 液体培养基中,37 }静止培养,560 ?m测定不同培养时间菌悬液的O D值,p H计测定培养液p H值。