饲料中霉菌的检验

饲料中霉菌的检验 The document was finally revised on 2021品种名称：高盐察氏培养基英译名称：Salt Czapek-Dox Agar品种编号：021030高盐察氏培养基用途：用于饲料中霉菌的检验(GB13092-91)。

高盐察氏培养基使用原理：硝酸钠提供氮源;磷酸二氢钾是缓冲剂;硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁提供必须的离子;含量较高的氯化钠具有抑制细菌和减缓生长速度快的毛霉科菌种的作用;蔗糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。

高盐察氏培养基配方(每升)：硝酸钠2g磷酸二氢钾 1g硫酸镁 0.5g氯化钾 0.5g硫酸亚铁0.01g氯化钠 60g蔗糖30g琼脂 15g最终pH ±高盐察氏培养基使用方法：1、称取高盐察氏培养基109g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌30min，备用。

2、以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中，振摇30min，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

3、根据对样品污染情况的估计，选择3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、将凉至45℃左右的培养基注入平皿中，待凝固后，倒置于25—28℃温箱中培养。

5、3d后开始观察结果，共培养观察1周。

6、计算方法：通常选择菌落数在30—100之间的平皿进行计数，同稀释度的2个平皿的菌落数乘以稀释倍数，即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。

质量控制：本品下列菌株接种后25—28℃培养72h生长情况如下表。

菌名菌号生长状况菌落特征黑曲霉ATCC16404 良好菌丝白色孢子黑色白色念珠菌ATCC10231 良好菌落表面呈奶油色贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

贮存期三年。

高盐察氏培养基规格：250g。

饲料中霉菌检测应注意的问题作者：艾格木别尔地·铁木尔来源：《畜牧兽医科学》 2017年第7期摘要:霉菌在饲料中寄生繁殖能够产生大量霉菌毒素，这些毒素会严重影响到饲料质量，这些含有霉菌毒素的饲料被动物进食之后，轻者会出现中毒症状，重者会导致动物中毒死亡，给养殖户造成严重的经济损失。

因此，对于饲料生产企业来说，必须重视饲料霉菌的检测，确保饲料质量。

本文主要结合实际情况就饲料中霉菌检测应注意的问题您行了分析，希望通过本次研究对同行有一定帮助。

关键词: 饲料；霉菌检测；注意问题中图分类号：S816 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）07-0193-01进入新世纪以来，随着饲料加工行业以及畜牧产业不断向前发展，对饲料质量和品质的要求越来越高，其中严格控制好饲料中霉菌含量是确保饲料品质的重要微生物指标。

饲料中的霉菌通常情况下对温度条件极其敏感，如果控制不好，将会对饲料安全造成严重威胁。

饲料中霉菌含量超标会显著降低饲料的营养价值，影响动物的繁殖能力，干扰动物的免疫系统，影响动物的生长发育和生产性能，因此，饲料中霉菌检测过程中要严格按照卫生标准进行检测，为饲料企业和饲养户提供准确的检测数据，切实保证饲料质量。

本文主要就霉菌检测需要注意的几点问题进行论述，现将具体内容报告如下：1 霉菌接种计数霉菌检测主要采用平板计数方法进行，要严格按照相应卫生保准对待检样品的污染程度进行全面评估，然后对饲料样本的做至少3个稀释浓度梯度，保证能够准确计数，保证每一个稀释度都要充分混合均匀，每次递增一次稀释度就需要更换一支吸管，确保每次稀释液浓度不会受到污染。

2 确定合适的培养时间霉菌检测和细菌检测的时间具有很大的差异性，霉菌检测需要在特定的温度和环境才能繁殖生长，相对于细菌来说起培养难度更大，因此，霉菌检测需要更长时间的培养。

在进行饲料中霉菌检查过程中，很多霉菌通常在接种3d后才能观察，有些不容易生长的霉菌需要连续培养7d以上才能观察到霉菌形态和特征。

各国饲料中霉菌毒素的标准饲料是畜禽生产中不可或缺的重要物质，它直接关系到畜禽的生长发育和生产性能。

然而，由于饲料原料的多样性和保存条件的不同，饲料中往往会存在着各种霉菌毒素，它们对畜禽的生长发育和健康产生着严重的危害。

因此，各国都对饲料中的霉菌毒素制定了严格的标准，以保障畜禽生产的安全和质量。

本文将就各国饲料中霉菌毒素的标准进行介绍和比较。

首先，美国对饲料中的霉菌毒素制定了严格的标准。

根据美国农业部的规定，玉米和小麦中的黄曲霉毒素B1的含量不得超过20ppb，玉米和小麦中的赤霉素的含量不得超过5ppb，玉米中的玉米赤霉烯醇的含量不得超过10ppb。

此外，美国还对其他饲料原料中的霉菌毒素含量进行了详细的规定，以确保饲料的安全性。

与此同时，欧盟对饲料中的霉菌毒素也有着严格的标准。

根据欧盟的规定，饲料中的黄曲霉毒素B1的含量不得超过20ppb，赤霉素的含量不得超过5ppb，玉米赤霉烯醇的含量不得超过5ppb。

此外，欧盟还对其他饲料原料中的霉菌毒素含量进行了详细的规定，以确保饲料的安全性。

除了美国和欧盟，中国对饲料中的霉菌毒素也有着严格的标准。

根据中国农业部的规定，饲料中的黄曲霉毒素B1的含量不得超过20ppb，赤霉素的含量不得超过5ppb，玉米赤霉烯醇的含量不得超过5ppb。

此外，中国还对其他饲料原料中的霉菌毒素含量进行了详细的规定，以确保饲料的安全性。

综上所述，各国对饲料中的霉菌毒素都制定了严格的标准，以保障畜禽生产的安全和质量。

饲料生产企业和畜禽养殖户在生产和使用饲料时，应严格按照国家的标准进行生产和使用，以确保畜禽的健康和生产性能。

同时，相关部门也应加强对饲料中霉菌毒素的监测和检测工作，及时发现和处理问题饲料，以保障畜禽生产的安全和质量。

霉菌总数检测操作规程1 原理根据霉菌生理特性，选择适宜霉菌生长而不适宜细菌生长的培养基，采用平板计数法测定霉菌总数。

2 试剂与仪器2.1 所用器具三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针、移液器2.2 仪器：分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅2.3 所用试剂和培养基高盐察氏培养基取高盐察氏培养基109g，加入蒸馏水1L，搅拌加热至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌30 min，备用。

3、操作步骤3.1配制0.85%生理盐水称取氯化钠8.5g溶于1000mL蒸馏水中。

3.2 锥形瓶加入生理盐水90mL，试管中加入生理盐水9mL，121℃灭菌30min。

（三角烧瓶个数与样品数量一致，试管数量与稀释次数相关）。

3.3 将1000μL枪头、培养皿、5mL枪头、称量勺、带6颗玻璃珠具塞试管，121℃灭菌30min。

（注意计算数量）3.4 枪头、培养皿置于烘箱103℃烘干。

（1-3步需提前一天完成）3.5 对称量房间进行紫外灭菌30分钟，关灯静置60 min。

以无菌操作取样品10g于含90mL 生理盐水三角烧瓶中，于振荡器上振荡30min，制成1:10的均匀稀释液。

3.6 吸取1:10稀释液10mL注入带玻璃珠的试管，置微型混合器上混合3min。

3.7 用1000μL枪头吸取1:10稀释液1mL，沿管壁慢慢注入含有灭菌生理盐水9mL的试管中，于振荡器上混合均匀，制成1:100的均匀稀释液。

3.8 另取一只1mL灭菌吸管，按照上述操作方法，作10倍递增稀释，如此每递增稀释一次，更换一支灭菌吸头。

3.9 选择3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，吸取该稀释的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个培养皿。

3.10 稀释液移入培养皿后，及时将凉至46℃±1℃的高盐察氏培养基（可放置46℃±1℃水浴锅内保温）注入培养皿约15mL，小心转动培养皿使试样与培养基充分混匀。

霉菌总数检测操作规程1 原理根据霉菌生理特性，选择适宜霉菌生长而不适宜细菌生长的培养基，采用平板计数法测定霉菌总数。

2 试剂与仪器2.1 所用器具三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针、移液器2.2 仪器：分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅2.3 所用试剂和培养基高盐察氏培养基取高盐察氏培养基109g，加入蒸馏水1L，搅拌加热至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌30 min，备用。

3、操作步骤3.1配制0.85%生理盐水称取氯化钠8.5g溶于1000mL蒸馏水中。

3.2 锥形瓶加入生理盐水90mL，试管中加入生理盐水9mL，121℃灭菌30min。

（三角烧瓶个数与样品数量一致，试管数量与稀释次数相关）。

3.3 将1000μL枪头、培养皿、5mL枪头、称量勺、带6颗玻璃珠具塞试管，121℃灭菌30min。

（注意计算数量）3.4 枪头、培养皿置于烘箱103℃烘干。

（1-3步需提前一天完成）3.5 对称量房间进行紫外灭菌30分钟，关灯静置60 min。

以无菌操作取样品10g于含90mL 生理盐水三角烧瓶中，于振荡器上振荡30min，制成1:10的均匀稀释液。

3.6 吸取1:10稀释液10mL注入带玻璃珠的试管，置微型混合器上混合3min。

3.7 用1000μL枪头吸取1:10稀释液1mL，沿管壁慢慢注入含有灭菌生理盐水9mL的试管中，于振荡器上混合均匀，制成1:100的均匀稀释液。

3.8 另取一只1mL灭菌吸管，按照上述操作方法，作10倍递增稀释，如此每递增稀释一次，更换一支灭菌吸头。

3.9 选择3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，吸取该稀释的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个培养皿。

3.10 稀释液移入培养皿后，及时将凉至46℃±1℃的高盐察氏培养基（可放置46℃±1℃水浴锅内保温）注入培养皿约15mL，小心转动培养皿使试样与培养基充分混匀。

饲料霉菌总数的测定国标一、引言饲料是动物生产过程中重要的营养来源。

然而，由于储存条件不当或生产过程中的不洁，饲料可能会受到霉菌污染。

霉菌不仅会降低饲料的品质和营养价值，还可能产生有害的毒素，对动物的健康造成威胁。

因此，为了保证饲料的质量和安全性，饲料霉菌总数的测定国标应当制定和实施。

二、目的和范围本国标的目的在于规定了饲料霉菌总数的测定方法和评价标准，以确保饲料的质量和安全性。

本国标适用于各类饲料样品的霉菌总数测定。

三、术语和定义1. 霉菌总数：指在给定条件下，饲料样品中可生长的霉菌的总数。

2. CFU/g：菌落形成单位/克，表示饲料中每克含有的活菌数量。

四、设备和试剂1. 培养基：按照相关标准配制。

2. 培养皿：直径90-100mm，透明的玻璃或塑料培养皿。

3. 称量仪器：用于准确称量饲料样品。

4. 移液器、均衡培养皿等常规实验室设备。

五、操作步骤1. 取样：从饲料样品中随机取样，确保样品具有代表性。

2. 准备培养基：按照相关标准配制培养基。

3. 加入样品：将取得的样品加入到含有培养基的培养皿中。

4. 均匀涂布：使用均衡培养皿，将样品均匀涂布在培养基上。

5. 培养：将培养皿置于恒温培养箱中，在适当的温度下培养一定时间。

6. 菌落计数：在培养箱中取出培养皿，使用放大镜和计数器进行菌落计数。

7. 记录结果：记录每个培养皿中的菌落数量，并计算平均值。

8. 结果评价：根据国家标准，评价菌落总数是否符合规定的标准要求。

六、结果评价标准根据国家标准，饲料霉菌总数的评价标准如下：1. 优等品：霉菌总数不超过×× CFU/g。

2. 一等品：霉菌总数不超过×× CFU/g。

3. 合格品：霉菌总数不超过×× CFU/g。

4. 不合格品：霉菌总数超过×× CFU/g。

七、注意事项1. 操作过程中要注意无菌操作，避免样品污染。

2. 使用的培养基要符合相关标准，以确保结果的准确性和可比性。