Mayer'苏木素染液(免疫组化)说明书

苏丹Ⅲ染色试剂盒说明书货号：G1511规格：3×50mL保存：RT避光，12个月。

产品组成：名称3×50ml Storage试剂(A):Mayer苏木素染色液50ml RT避光试剂(B):苏丹Ⅲ分化液50ml RT试剂(C):苏丹Ⅲ染色液50ml RT避光产品说明：脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。

中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。

中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。

在正常情况下，除脂肪细胞外其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴，如果细胞质内出现大量脂滴即为脂肪变性，常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。

中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。

苏丹染料脂质染色的机理一般认为纯属物理学的脂溶作用和吸附作用。

苏丹类染料由于在脂质中的溶解度大于在有机溶剂的溶解度，所以染色时染料便从染液中转移到被染的脂质中去，使脂质呈现出染液的颜色。

苏丹Ⅲ染色液主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性，细胞内出现多数中性脂肪滴；鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。

标本不采用含有乙醇的固定液(如需固定可采用10%中性福尔马林)、也不采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。

自备材料：70%乙醇、蒸馏水、显微镜、甘油明胶封片剂操作步骤(仅供参考)：1、新鲜组织低温切片，一般-20℃～-25℃。

如样本为脂肪瘤，应调节至-30℃。

2、冰冻切片6～15μm(6～8μm为佳)，贴于载玻片上。

3、蒸馏水稍洗。

4、入Mayer苏木素染色液，复染核1min。

5、自来水洗后，苏丹Ⅲ分化液分化数秒，流水洗至核为蓝色。

6、蒸馏水冲洗后，入70%乙醇稍微浸洗一下。

7、入苏丹Ⅲ染色液，浸染30min。

8、70%乙醇分化数秒，自来水洗。

苏木素伊红(HE)染色试剂盒北京华越洋----------------------------------------------------------------------------------------- -产品简介：Ø华越洋生物生产的苏木素伊红(HE)染色试剂盒(Hematoxylin and eosin staining kit)综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。

可以用于组织切片或培养细胞的染色。

Ø 苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。

Ø 本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。

使用的苏木素伊红染色试剂盒，染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。

Ø 染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。

本试剂盒至少可以染色300个样品。

包装清单：苏木素染色液: 200毫升伊红染色液:200毫升说明书:1份保存条件：室温保存，至少一年有效。

注意事项：Ø 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。

如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。

如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇、无水乙醇以及二甲苯。

Ø 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。

样品数量很多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。

Ø 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：1.样品处理a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟蒸馏水2分钟。

b) 对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。

c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。

华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。

(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。

(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。

该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。

对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。

这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。

但染色时间较长，需要20分钟以上。

如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。

（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。

B液： 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。

华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素1g 无水酒精10ml硫酸铝钾20g蒸馏水200ml氧化汞0.5g冰醋酸8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。

(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精20ml硫酸铝钾5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。

(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠20mg硫酸铝铵5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。

该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。

对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。

这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。

但染色时间较长，需要20分钟以上。

如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。

（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。

B液：29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。

免疫组化用户自备试剂：1．粘片剂APES 或POLY-L-LYSINE（博士德公司有售）。

2．免疫组化专用PBS（pH7.2-7.6）配法：1000ml 蒸馏水中加氯化钠8.5g, Na2HPO42.8g,NaH2PO4 0.4g。

如果用的是含水磷酸盐，应加上分子式中水的含量。

3．0.01M 枸橼酸盐缓冲液：1000ml 蒸馏水中加枸橼酸三钠（C6H5Na3O7·2H2O）3g, 枸橼酸(C6H8O7·H2O ) 0.4g。

4．DAB显色试剂盒（博士德公司有售）。

A.石蜡切片热修复抗原染色程序:1. 载玻片防脱片剂处理:可选择APES 或Poly-Lysine。

捞片后置烤箱58-60 ℃30-60 分以使切片紧密粘附。

2. 切片常规脱蜡至水。

脱蜡前，应将组织切片在室温中放置60min或60 °C 恒温箱中烘烤20min。

然后按下列步骤进行：1) 组织切片置于二甲苯中浸泡3 次，每次10 min ；2) 无水乙醇中浸泡3 次，每次10 min ；3) 依次通过质量分数为95% 、70% 、50% 的梯度乙醇溶液，每次 10 min ；4) PBS 中浸泡10 min 。

3. 30%H2O2 1 份+蒸馏水10 份混合,室温5-10 分钟以灭活内源性酶。

蒸馏水（可用PBS）洗3 次。

4. 热修复抗原:将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10 分钟后，反复1-2 次。

冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2 次。

5. 滴加5%BSA 封闭液,室温20 分钟。

甩去多余液体, 不洗。

6. 滴加适当稀释的一抗（小鼠或兔IgG），37 ℃ 1 小时左右或20℃时2 小时左右。

也可4℃过夜。

PBS（pH7.2-7.6）洗2 分钟×3 次。

（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。

一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。

广州市外显子生物技术有限公司Http//
Mayer苏木素染色液说明书
货号：S-1507
组成：
组成规格
Mayer 100ml
说明书1份
产品简介：
苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的主要成分是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

Leagene Mayer苏木素染色液属于明矾苏木素液的一种，苏木精含量小，无氧化膜形成，对细胞核染色很清晰，不着染胞质和纤维成分，属进行性染色，故染色后不需盐酸乙醇分化，染色时间约3～5min。

常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核，尤其适用于在经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染，此时染色时间较短(通常5-10min)，染完后即可进行蓝化，不必分化。

在特殊染色中，Mayer苏木素染色液与天青石蓝B联合染色，使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。

保存：4℃避光保存，保质期12个月。

细胞核染色原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

注意事项：
1.脱蜡应尽量干净。

系列乙醇应经常更换新液。

2.您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

染色结果：
结果判定：
细胞核呈蓝色。

北京雷根生物技术有限公司
天狼星红染色液
简介：
天狼星红染色液主要由天狼星红染色液、Mayer 苏木素染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。

采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚6μm ，常规脱蜡至水。

3、天狼星红染色液滴染。

4、流水稍微冲洗，去除切片表面染液。

5、Mayer 苏木素染色液染细胞核。

6、流水冲洗10min 。

7、常规脱水透明，中性树胶封固。

注意事项：
1、为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7μm 为宜。

3、本法染色稳定，不易褪色。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 DC0041 2×50ml DC0041 2×100ml Storage 试剂(A): 天狼星红染色液 50ml 100ml 4℃ 避光 试剂(B): Mayer 苏木素染色液 50ml 100ml 4℃ 避光 使用说明书 1份。

苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：EnVision TM FLEX Hematoxylin (Link)【包装规格】3×45mL【预期用途】用于对组织细胞切片中的细胞核染色。

【主要组成成分】苏木素水溶液【储存条件及有效期】室温下避光保存。

有效期12个月。

【适用仪器】组织染色机（Autostainer Link 48）【检测方法】1.检测步骤1)将抗原修复液按照1：50比例配制好，放置在免疫组化预处理系统（PT Link）中2)运行免疫组化预处理系统（PT Link）至65度，将切片放置在抗原修复液中3)加热至95度，持续20分钟，降温至65度4)将切片取出放置在洗脱缓冲液工作液中，5分钟后，放置在自动染色系统上染色5)过氧化物酶阻断剂5分钟6)洗脱缓冲液工作液冲洗7)一抗20分钟8)洗脱缓冲液工作液冲洗9)二抗20分钟10)洗脱缓冲液工作液冲洗11)DAB显色10分钟12)自来水冲洗13)苏木素染色液复染5分钟14)自来水冲洗15)70%酒精，80%酒精，90%酒精，100%酒精，100%酒精各2分钟16)二甲苯透明5分钟17)二甲苯透明5分钟18)封片2.质量控制程序1) 每次染色过程中都应当同时对一份已知的阳性对照标本进行染色，以确定染色时所使用的全部试剂是否有效。

若阳性对照标本没有出现阳性染色结果，此次检测样本的标记过程应当视为无效。

2) 应当同时采用阴性对照试剂对每份标本进行染色，以排除发生非特异性染色的可能性。

如果不能明确区分非特异性染色和特异性染色，此次检测样本的标记过程应当视为无效。

更多信息及使用说明请参见DAB染色液试剂盒（代码K8002）使用说明书和Dako自动染色系统（Autostainer Link 48）仪器操作手册。

【检测结果的解释】含有DAB的底物缓冲液可以在一抗所识别的目标抗原部位产生褐色。

阳性对照样本应当在其目标抗原的预期部位出现褐色。

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
1 改良型Mayer's 苏木素染液
改良型Mayer's 苏木素染液
改良型Mayer's 苏木素染液是由氧化的苏木精和铝离子组成的复合体，可将细胞核染成蓝色。

染液无乙醇，无汞。

可清晰并锐利的对核进行染色，无背景染色。

可用于免疫组化DAB 或AEC 后的复染。

实验流程
1. 免疫组化常规操作完成后，DAB 或AEC 显色（HRP 系统）。

2. 显色强度合适时，用自来水冲洗终止显色。

•
3. 甩去样品上的自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染 30sec~3min 。

4. 用自来水完全冲洗掉复染液，PBS 或去离子水浸泡切片3~5min ，使胞核返蓝。

5. 脱水、透明、封片。

•
注意事项
HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间，要根据实验原理，结合具体情况而定。

结果
细胞核：蓝色。

温馨提示
1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。

2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。

储存温度
避光储存于室温。

包装清单 货号
品名 包装 HCY108
改良型Mayer's 苏木素染液 100mL 说明书 1份。

北京雷根生物技术有限公司
苏木素无水乙醇溶液(5%)
简介：
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE 染色，是病理学和组织学最常用
的一种染色方法。

苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的主要成分
是DNA ，在DNA 的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA 双螺旋的外
侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

苏木素无水乙醇溶液(5%)属氧化苏木素的染色液，主要由苏木素和乙醇组成，并已被氧化，
可立即用于多种苏木素染色，亦可与其他染液配套使用。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据实验具体需求操作。

注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。

2、 系列乙醇应经常更换新液。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 DH0040 Storage 苏木素无水乙醇溶液(5%) 100ml RT 避光 使用说明书 1份。