分子生物学实验室常用仪器设备简介(精)
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分子生物学离心机是实验室常规仪器设备生物学实验室常规设备介绍:1、超净工作台/生物安全柜细胞培养需要无菌要求高的环境,在进行操作细胞的实验时,需要在100级的空气下进行,那我们就需要购买能提供百级洁净度的超净工作台或生物安全柜了。
2、二氧化碳培养箱细胞培养所用的缓冲体系是碳酸氢钠+HEPES体系,所以需要二氧化碳提供缓冲能力维持pH。
这时我们就需要一个二氧化碳培养箱来对细胞进行培养。
并且由于二氧化碳培养箱通常不具有制冷压缩机,所以需要用户确定其细胞房内在夏天也有全天候的空调制冷,否则会造成箱内温度超标。
3、倒置显微镜需要倒置显微镜的帮助。
对于一些荧光免疫细胞实验(IF),则还需要购买倒置的荧光显微镜。
4、纯水机/超纯水机细胞培养还需要超纯水系统,普通的纯水和蒸馏水是无法用于细胞培养的,而超纯水主要用于配置一些培养基和试剂,超纯水的进水可为自来水或二级纯水(质量好些的去离子水,电阻10兆欧左右)。
5、移液枪,电动移液枪细胞实验操作时,需要使用各种吸头及移液管,所以配置移液枪是必要的。
6、离心机细胞培养需要离心收集传代细胞,一般转速在1000转到1500转之间,所以需要购买低转速的常温离心机,而且要带10ml,50ml及培养板的转子。
另外还需要一台高速冷冻离心机用于收集细胞沉淀或细胞上清。
分子生物学实验室台式低速离心机TDZ57、低温冰箱细胞在冻存时需要存放-70到-80度过夜再放入液氮罐,这样则需要一个低温冰箱。
8、传递窗细胞房在构建时要与外界隔绝,这样就需要购买传递窗来传递物品,减少污染的几率,并且将所有进入细胞室的物品都在传递窗内进行紫外杀菌,可以保证洁净室的安全。
9、高压灭菌锅各类细胞实验室器皿在使用前后都需要做灭菌处理,灭菌条件一般为121℃,20~30分钟,这样就需要一台放置在洁净室外的高压灭菌锅来保障生物安全性。
10、细胞培养中需要的各种耗材各类细胞培养板,细胞培养瓶,平皿移液管等。
11、其余仪器对于细胞实验还可能需要振荡器及磁力搅拌器用于混匀液体;还有一些沾满细胞的难清洗的不锈钢类或玻璃类器皿,则需要超声波清洗机的帮助;如果涉及免疫实验,肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的话,则需要购买制冰机;另外破碎细胞可能会需要超声波细胞破碎仪;最后需提及的是如果细胞房较大,则要配备手推车。
分子生物学实验室实验器材清单第一篇:分子生物学实验室实验器材清单分子生物学实验室所需试剂、耗材清单1、普通化学试剂,共计约2.89万。
名称 95%乙醇AR 无水乙醇AR DEPC EDTA二钠AR 柠檬酸钠AR 柠檬酸三钠AR L-精氨酸BR Tris 苯酚AR 变色硅胶冰乙酸AR 丙酮AR 二甲苯AR 二乙醇胺cp 甘露醇AR 甘油AR 高碘酸AR 甲醇AR 磷酸氢二钠AR 硫酸AR 硫酸铵AR 硫酸镍AR 氯仿AR 氯化钾AR 氯化镁氯化钠AR 氯金酸AR 莽草酸明胶CP 钼酸钼酸铵AR 尿素AR 牛肉浸膏BR 硼酸AR 氢氧化钠AR 去离子甲酰胺三乙醇胺碳酸钙AR 单位单价(元)瓶 7 瓶 10 瓶 150 瓶 50 瓶 27 瓶 15 瓶 126 瓶 220 瓶 36 瓶 19 瓶 10 瓶 18 瓶 20 瓶 38 瓶 15 瓶 28 瓶 240 瓶 8.4 瓶 11 瓶 14 瓶 10 瓶 102 瓶 28 瓶 20 瓶 18 瓶 10 瓶 196 瓶 390 瓶 35 瓶 290 瓶 380 瓶 18 瓶 90 瓶 18 瓶 10 瓶 780 瓶 25 瓶 23 购置数量金额(元)140 20 200 10 1500 9 450 9 243 9 135 5 630 10 2200 9 324 18 342 9 90 5 90 1 20 1 38 1 15 2 56 2 480 5 42 1 11 3 42 17 170 1 102 10 280 2 40 1 18 10 100 1 196 3 1170 1 35 1 290 1 380 5 90 1 90 10 180 10 100 4 3120 1 25 1 23 碳酸钠AR 碳酸氢钠AR 无水碳酸钾AR 硝酸硝酸银销酸钴盐酸AR 乙酸钾AR 乙酸锌AR 蔥酮 AR 消毒/双氧水30% AR Trypan Blue Tween-20 硝酸钾硫酸铁氢氧化钾甲醛 500ml 硼砂乳酸 500ml 硝酸钙乙酸钠异丙醇 AR 异戊醇 AR SDS 合计瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶瓶 16 22 10 350 48 14 45 36 68 11 32 20 15 15 15 8 12 27 12 46 10.45 40 38 1 1 1 5 1 2 1 1 1 4 1 1 1 1 1 15 5 1 1 4 8 8 40 12 16 22 10 1750 48 28 45 36 68 44 32 20 15 15 15 120 60 27 12 184 83.6 320 1520 28890.62、分子生物学试剂, 共计约4.5万元。
分子生物学科耗材及仪器
以下是一些常见的分子生物学科耗材及仪器:
1. 实验耗材:
- 移液器和吸头:用于准确量取液体。
- 离心管和离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 培养皿和培养箱:用于细胞培养和微生物培养。
- PCR 管和 PCR 仪:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。
- 电泳槽和电泳仪:用于核酸和蛋白质的电泳分离。
- 试剂瓶和移液器:用于储存和分配试剂。
- 一次性手套和实验服:用于保护实验人员的安全。
2. 实验仪器:
- 紫外可见分光光度计:用于测定核酸和蛋白质的浓度。
- 凝胶成像系统:用于观察电泳结果。
- 实时荧光定量 PCR 仪:用于定量检测基因表达。
- 离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 移液器:用于准确量取液体。
- 生物安全柜:用于处理危险的生物样本,提供安全的实验环境。
这些耗材和仪器是分子生物学实验中常用的工具,它们的选择和使用将取决于具体的实验需求和研究目的。
在进行分子生物学实验时,正确选择和使用合适的耗材及仪器是确保实验成功和结果准确性的重要因素。
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。
(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。
(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。
在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。
(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。
分子生物学实验室简介分子生物学实验室是一个专门从事分子生物学研究的实验室,致力于通过对生物分子的研究,揭示生命现象的本质和机制。
分子生物学实验室通常配备了一系列先进的仪器设备和技术,为研究人员提供了一个理想的工作环境,推动了分子生物学领域的发展。
本文将介绍分子生物学实验室的设备和研究内容,并讨论其在科学研究和医学领域中的重要性。
一、实验室设备1. 基础设施分子生物学实验室通常拥有一系列基础设施,包括干净的实验台和工作台、恒温培养箱、高速离心机、特定生物样本的防护罩等。
这些设备为研究人员的实验提供了一个严谨和稳定的工作环境,保证了实验结果的可靠性。
2. 分子生物学实验仪器分子生物学实验室还配备了一系列先进的分子生物学实验仪器,如PCR仪、DNA测序仪、蛋白质电泳仪、核酸纯化仪等。
这些仪器利用生物样本中的DNA、RNA和蛋白质等分子,进行分析和研究。
它们的使用使得研究人员能够更准确地描述生物分子的结构和功能,为研究提供了强有力的实验手段。
二、研究内容1. 基因研究分子生物学实验室主要进行基因研究,该领域关注基因是如何操控生物体的生长、发育和功能的。
实验室通过克隆、表达和纯化特定基因,研究基因的结构、功能和调控机制。
此外,还利用基因工程技术对基因进行改造,探索基因在疾病治疗、农业生产和生物工程等方面的应用潜力。
2. 蛋白质研究蛋白质是生物体内执行各种生物学功能的重要分子。
分子生物学实验室通过对蛋白质的表达、纯化和结构分析,研究蛋白质的结构和功能。
实验室还利用蛋白质工程技术,对蛋白质进行改造,寻找新的生物学功能和药物设计的靶点。
3. DNA和RNA研究DNA和RNA是生物体内遗传信息的携带者,也是分子生物学研究的关键对象。
实验室通过DNA和RNA的提取、放大、测序和基因组分析等技术手段,深入研究基因组、转录组和蛋白质组的结构和功能。
这些研究对于理解遗传信息的传递和转录调控机制非常重要。
三、重要性1. 科学研究分子生物学实验室是推动科学研究的关键力量。
(一) 温度控制系统:1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。
-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2.液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等,要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液氮罐(-196℃)具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。
3.培养箱:37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用来维持培养液的酸度(pH值)。
37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。
4. 水浴锅:用于保温。
25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温。
25-100℃水浴箱用于常规试验。
5.烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要温度低些。
用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
(二)水的净化装置:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高。
1. 蒸馏水皿:单蒸水常难以满足实验要求。
双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。
多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质,不能完全除去水中溶解的气体杂质(Mn2 、Cu2 、Zn2 、Fe3 、Mo(Ⅵ))。
2. 离子交换器:去离子水—用离子交换法制取的水,称去离子水。
去离子效果好,但不能除去水中的非离子型杂质,其中常含有微量的有机物(树脂等)。
3.超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。
用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介实验室主要仪器,设备的简介及使用方法微量移液器微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数。
移液器常见的四种规格分别是:0.5~10μl(读数窗显示0.5~10.0,每转1档为0.1μl);10~100μl(读数窗显示10.0~100, 每转1档为1μl);20~200μl(读数窗显示20~200, 每转1档1μl);100~1000μl(读数窗显示100~1000, 每转1档为5μl).量液的操作步骤:1.将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头)2.将微量移液器按钮轻轻压至第一停点;3.垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液样面下几毫米,千万不要将吸嘴直接插到液体底部;4.缓慢、平稳地松开控制按钮,吸上样液。
否则液体进入吸嘴太快,导致液体倒吸入移液器内部,或吸入体积减少;5.等一秒钟后将吸嘴提离液面6.平稳地把按钮压到第一停点,再把按钮压至第二停点以排出剩余液体;7.提起微量移液器,然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。
量液操作注意问题:1.未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2.一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏。
3.不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。
4.不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5. 移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。
低温台式高速离心机离心机的分类低速:每分钟几千转高速:每分钟1 ~ 3万转超速:每分钟3万转以上离心机的功能:分离,纯化低速:细胞等大分子高速:DNA,蛋白等超速: 病毒,蛋白等,根据用途又可分为分析超速离心机和制备超速离心机。
低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术本实验室所用离心机为台式高速离心机(IBM),配有角式转头:24×1.5ml;极限转速20000rpm台式高速离心机使用步骤1、把离心机放置于平面桌或平面台上,目测使之平衡,用手轻摇一下离心机,检查离心机是否放置平衡。
1培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置.例如:用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养;其他分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件.2冰箱冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器.分子生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存.具体来说,不同温度下保存的物品如下:a.4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等.b.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.c.-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存.d.0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.3摇床摇床是实验室常用仪器,一般有常温型和低温型两种.对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求.例如:用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度和37度,诱导表达需要20-37度;在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制;用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用;用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度.对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温.4水浴锅水浴锅也是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分.例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应;用于DNA杂交过程中水浴控温.5烘箱烘箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干.烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择.例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干;用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干.6纯水装置纯水装置包括蒸馏水器和纯水机.蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些,但是使用方便,可以储存一定量的纯水.纯水使用也有不同的级别,一般实验用水需要纯水,用于PCR、DNA测序、酶反应均需要超纯水.7灭菌锅分子生物学所用到的大部分实验用具都应严格消毒灭菌.包括实验物品、试剂、培养基等.灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的.用户需要根据自己的需要选购.8天平天平用于精确称量各类试剂.实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别.9液体量器液体量器用于精密量取各类液体.常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯.10pH计用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性.有时也需要利用pH 计测定样品溶液的酸碱度.11分光光度计分光光度计通过测定吸光值,从而用于分析样品核酸和蛋白的含量及纯度;同时也可以测定培养菌液的浓度.12离心机离心机有冷冻和常温之分.主要用于收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物.有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境.例如在感受态制备过程中必须保证低温环境,所以需要冷冻离心机.13超净工作台分子生物学中凡是涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成,还有感受态制备,转化反应等,都需要无菌的环境.14电泳系统实验室常用的电泳主要是三种:水平电泳用于核酸DNA/RNA的琼脂糖电泳检测;垂直电泳用于蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测;转印电泳用于将蛋白转印到膜上做western 检测.15PCR仪PCR仪有不同的类型,分别用于不同的实验.普通和梯度PCR仪用于基因克隆和基因检测过程中DNA/RNA的扩增.荧光定量PCR仪用于核酸定量分析、基因表达差异分析、单核苷酸多态性检测、甲基化检测.原位PCR仪用于鉴定和定位带有靶序列的细胞在组织中的位置.16凝胶成像分析系统/紫外检测仪凝胶成像系统用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶和蛋白聚丙烯酰胺凝胶的观察和拍照,有些可以进行切胶操作.紫外检测仪可以用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶的观察,胶回收时切胶操作,但是不能连接电脑拍照.17制冰机实验室常用的是雪花制冰机,制冰机一般是按每日制冰量分成不同型号.分子实验室中制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境,以减少核酸酶或蛋白质酶的水解.感受态制备也需要长时间冰浴.18磁力搅拌器在配置试剂过程中,有些试剂较难溶解,这时需要借助磁力搅拌器.磁力搅拌器可以加速溶解固体内容物.磁力搅拌器一般带加热功能.19生物安全柜分子实验中涉及的试剂和样品很多是有毒的,对于操作人员来说伤害较大.为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散,可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护.20微波炉和电炉用于溶液的快速加热,电泳琼脂糖凝胶的加热溶化配制,固体培养基的加热溶化.21液氮罐分子生物学实验中感受态细胞的制备需要液氮处理.感受态的保存也可以存于液氮中.22微管移液器微管移液器也有不同型号,是用于准确量取特定体积的溶液.。
分子生物学实验室需要的仪器配置(1)培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都就是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置。
例如:用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养;其她分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件。
(2)冰箱冰箱就是实验室保存试剂与样品必不可少的仪器。
分子生物学实验中用到的试剂有些要求就是4度保存,有些要求就是负20度保存,实验人员一定要瞧清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。
具体来说,不同温度下保存的物品如下:a、4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
b、-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素与DNA、蛋白质样品等。
c、-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存。
d、0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
(3)摇床摇床就是实验室常用仪器,一般有常温型与低温型两种。
对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求。
例如:用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度与37度,诱导表达需要20-37度;在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制;用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用;用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度。
对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温。
(4)水浴锅水浴锅也就是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。
例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应;用于DNA杂交过程中水浴控温。
(5)烘箱烘箱就是用于灭菌与洗涤后的物品烘干。
烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择。
例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干;用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干。
(6)纯水装置纯水装置包括蒸馏水器与纯水机。
蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些,但就是使用方便,可以储存一定量的纯水。
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一,它研究的是生物分子层面的生命过程,旨在深入揭示生命的本质和机制。
而在分子生物学研究中,实验室仪器则是不可或缺的工具,它们不仅可以帮助研究者进行实验操作,还能够提高实验结果的可靠性和精度。
本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。
一、PCR扩增仪PCR(聚合酶链式反应)扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一,是通过对核酸单链进行不断反复的扩增,从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。
PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备,它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却,以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。
根据不同的实验需求,PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。
二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法,尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。
电泳仪则是进行电泳实验的设备。
电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求,可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。
其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一,它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。
三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR(实时PCR)技术是PCR技术的一种延伸,它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况,从而实时定量测定PCR反应产物的含量。
荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备,它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。
荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。
四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备,它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征,以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。
在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1.安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2.操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介实验室主要仪器,设备的简介及使用方法微量移液器微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数。
移液器常见的四种规格分别是:0.5~10μl(读数窗显示0.5~10.0,每转1档为0.1μl);10~100μl(读数窗显示10.0~100, 每转1档为1μl);20~200μl(读数窗显示20~200, 每转1档1μl);100~1000μl(读数窗显示100~1000, 每转1档为5μl).量液的操作步骤:1.将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头)2.将微量移液器按钮轻轻压至第一停点;3.垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液样面下几毫米,千万不要将吸嘴直接插到液体底部;4.缓慢、平稳地松开控制按钮,吸上样液。
否则液体进入吸嘴太快,导致液体倒吸入移液器内部,或吸入体积减少;5.等一秒钟后将吸嘴提离液面6.平稳地把按钮压到第一停点,再把按钮压至第二停点以排出剩余液体;7.提起微量移液器,然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。
量液操作注意问题:1.未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2.一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏。
3.不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。
4.不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5. 移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。
低温台式高速离心机离心机的分类低速:每分钟几千转高速:每分钟1 ~ 3万转超速:每分钟3万转以上离心机的功能:分离,纯化低速:细胞等大分子高速:DNA,蛋白等超速: 病毒,蛋白等,根据用途又可分为分析超速离心机和制备超速离心机。
低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术本实验室所用离心机为台式高速离心机(IBM),配有角式转头:24×1.5ml;极限转速20000rpm台式高速离心机使用步骤1、把离心机放置于平面桌或平面台上,目测使之平衡,用手轻摇一下离心机,检查离心机是否放置平衡。
2、打开门盖,将离心管放入转子内,离心管必须成偶数对称放入,且要事先平衡,完毕用手轻轻旋转一下转子体,使离心管架运转灵活。
3、关上门盖,注意一定要使门盖锁紧,完毕用手检查门盖是否关紧。
4、插上电源插座,按下电源开关(电源开关在离心机背面,电源座上方)。
5、设置转子号、转速、时间:在停止状态下时,用户可以设置转子号、转速、时间,此时离心机处于设置状态,停止灯亮、运行灯闪烁;按下启动离心开始(常用,最高转速为13000r/min,时间最长为20分钟);注意:对应的转子一定要设置在相应的转速范围内,不可超速使用,否则对试管或转子有损坏。
6、离心机时间倒计时到“0”时,离心机将自动停止,当转子停转后,打开门盖取出离心管,关断电源开关。
注意事项:1、离心机在运转时,不得移动离心机,不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整,四只橡胶机脚都应与台面接触和均匀受力,以免产生振动。
3、离心前,离心管加液要平衡,若加液差异过大运转时会产生大的振动,此时应停机检查,使加液符合要求,离心试管必须成偶数对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂,会引起较大振动应立即停机处理。
5、离心机彻底停止后,才可开盖,取样恒温气浴摇床使用及性能:摇床(振荡器)为实验室的常规设备。
广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。
实验室常用的液体摇匀,微生物、细菌和细胞培养。
SHK-99-Ⅱ型台式空气恒温摇床,采用微电脑控制系统,温度范围:室温+5℃~60℃,精度±0.5℃;时间范围:1分钟~99小时59分钟;转速范围:60RPM~250RPM操作程序:1)样品瓶牢固放入弹簧夹中2)接通电源开关,仪器进入准备状态3)参数设定,(设定温度、时间、转速等参数)4)按启动键仪器开始工作,按暂停键可暂停托盘的旋转;5)按下控制面板的电源键两秒,显示屏显示消失,关闭电源总开关超净工作台使用及性能:超净工作台为分子生物学无菌操作提供可能,分为垂直送风和水平送风两种。
超净台由三相电机作鼓风动力,功率145~260W左右,将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来,形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流,即所谓“高效的特殊空气”,它除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和细菌孢子等等。
超净空气的流速为24~30m/min,这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染,这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。
工作人员就在这样的无菌条件下操作,保持无菌材料在转移接种过程中不受污染。
操作程序:1)使用工作台时,先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面,然后用消毒剂擦拭消毒。
2)接通电源,提前30分钟打开紫外灯照射消毒,处理净化工作区内工作台表面积累的微生物,15分钟后,关闭紫外灯,开启送风机。
3)工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4)操作结束后,清理工作台面,收集各废弃物,关闭风机及照明开关,用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
5)最后开启工作台紫外灯,照射消毒30分钟后,关闭紫外灯,切断电源。
注意事项:操作时一定注意关掉紫外,防止对实验人员造成伤害灭菌锅使用及性能:细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、器皿及实验用具,应严格灭菌;应将实验器械,试剂等进行高压消毒。
对于经过导入DNA重组分子的菌株,操作后必须进行严格的高压消毒灭活处理;大批实验物品、试剂、培养基等可以使用大型消毒器进行消毒。
一些不能经受高压、高温消毒的试剂可用滤器滤膜除菌,器皿可用紫外线照射、75%乙醇或0.1%的十二烷基硫酸钠(SDS)浸泡消毒。
所有的细胞培养、细菌培养的操作,都应在紫外线消毒后的超净工作台中进行操作程序:1)开盖:转动手轮,使锅盖离开密封圈,添加蒸馏水刚没至板上2)通电:将控制面板上电源开关按至ON处,若水位低(LOW)红灯亮3)堆放物品:需包扎的灭菌物品,体积不超过200mm×100mm×100mm为宜,各包装之间留有间隙,堆放在金属框内,这样有利于蒸汽的穿透,提高灭菌效果,灭菌时间:121℃,20min,;如为液体,液体必须装在可耐高温的玻璃器皿中,且不可装满,2/3即可,121℃,18-20min3)密封高压锅:推横梁入立柱内,旋转手轮,使锅盖下压,充分压紧4)设定时间和温度,开始灭菌5)灭菌结束,所有东西放入干燥箱干燥,排尽水气注意事项:如是手动的灭菌锅,在灭菌过程中,应注意排净锅内冷空气,锅内冷空气如排放不净,会影响灭菌效果,达不到彻底灭菌的目的。
要等温度降为“0”,才可打开灭菌锅锅盖;由于高压蒸汽灭菌时,要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽,操作时,必须严格按照操作规程操作,否则容易发生意外事故。
PCR仪PCR仪,也称DNA热循环仪、基因扩增仪,是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段,它的每一循环包括在三种不同温度进行DNA变性、引物复性、DNA聚合酶催化的延伸反应的三个过程PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域,如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等操作步骤1、开机:打开开关,视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后,显示RUN-ENTER菜单准备执行程序。
2、放入样品管,关紧盖子。
3、如果要运行已经编好的程序,则直接按《Proceed》,用箭头键选择已储存的程序,按《Proceed》,则屏幕显示按《Proceed》选择ENABLE,则开始执行程序。
4、如果要输入新的程序,则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》,1)命名新的程序,最多8个字母,输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。
2)输入程序步骤:名字输入后,确认,然后输入相关程序5、输入完成的程序后,到RUN-ENTER菜单,选择新程序,开始运行。
6、其它:用《pause》可以暂停一个运行的程序,再按一次继续程序。
用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。
如何设置一个PCR程序:一般分为8步:1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。
2、变性:一般用95℃,30s~2min,一般45s~1min。
3、退火:温度自定,30s~2min。
4、延伸:72℃,对于〈1kb=1min,每增加1kb加1min。
5、循环数:一般25~35个循环(2,3,4步循环)。
6、最终延伸:72℃,5~15min。
7、保存:4℃,时间设为0。
8、END。
电泳仪电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。
电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。
而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备。
实验室所用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂)操作程序:1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。
2.按电源开关,显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后,同时系统初始化,蜂鸣4声,设置常设置。
屏幕转成参数设置状态,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。
3.确认各参数无误后,按“启动”键,启动电泳仪输出程序。
在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣4声,提醒操作者电泳仪将输出高电压,注意安全。
之后逐渐将输出电压加至设置值。
同时在状态栏中显示“Run”,并有两个不断闪烁的高压符号,表示端口已有电压输出。
在状态栏最下方,显示实际的工作时间(精确到秒)4.电泳结束,仪器显示:“END”,并连续蜂鸣提醒。
此时按任一键可止鸣注意事项1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。
同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。
2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。