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检验仪器分析技术及应用讲义I. 介绍检验仪器分析技术是一种采用仪器设备进行分析和检测的方法，在科学研究和工业生产中具有重要的应用价值。
本讲义将介绍一些常见的检验仪器分析技术及其在不同领域的应用。
II. 光谱分析技术1. 紫外可见光谱紫外可见光谱是一种常用的分析技术，可用于分析物质的吸收特性。
它在药学、环境科学、食品安全等领域具有广泛的应用。
2. 红外光谱红外光谱是一种用于研究物质的分子结构的技术。
它可以用于药物研究、材料分析等领域。
3. 原子吸收光谱原子吸收光谱是分析和检测金属元素含量的一种常用方法。
它在环境监测、食品安全等方面有着重要的应用。
III. 色谱分析技术1. 气相色谱气相色谱是将样品中的化合物分离并定量分析的一种技术。
它在药物分析、环境检测等领域得到了广泛应用。
2. 液相色谱液相色谱是一种将样品中的化合物分离并定量分析的技术。
它在生物医药、环境检测等领域有着重要的应用。
3. 离子色谱离子色谱是一种用于分离和检测离子化合物的分析技术。
它在环境监测、食品安全等方面具有重要意义。
IV. 电化学分析技术1. 电化学传感器电化学传感器是一种将物理化学性质转化为电信号的传感器。
它在生物传感、环境监测等方面具有广泛的应用。
2. 电化学分析方法电化学分析方法是一种利用电化学原理进行分析和检测的技术。
它在药物分析、环境监测等领域得到了广泛应用。
V. 质谱分析技术质谱分析技术是一种将化合物的质量信息进行分析和检测的技术。
它在化学合成、药学研究等方面具有重要的应用。
VI. 应用案例1. 药物分析检验仪器分析技术在药物分析领域被广泛应用，可用于药物质量评价、成分分析等方面。
2. 环境监测检验仪器分析技术在环境监测领域起到了重要作用，可用于检测大气污染物、水体污染物等。
3. 食品安全检验仪器分析技术在食品安全领域有着广泛的应用，可用于检测食品中的残留农药、重金属等有害物质。
VII. 结论检验仪器分析技术在科学研究和工业生产中扮演着重要角色，通过对不同领域的应用案例的介绍，我们可以看到其在药物分析、环境监测、食品安全等方面的重要性。
仪器分析各章习题与答案重点讲义资料第⼀章绪论问答题1. 简述仪器分析法的特点。
第⼆章⾊谱分析法1．塔板理论的要点与不⾜是什么?2．速率理论的要点是什么?3．利⽤保留值定性的依据是什么?4．利⽤相对保留值定性有什么优点?5．⾊谱图上的⾊谱流出曲线可说明什么问题?6．什么叫死时间?⽤什么样的样品测定? ．7．在⾊谱流出曲线上，两峰间距离决定于相应两组分在两相间的分配系数还是扩散速率?为什么?8．某⼀⾊谱柱从理论上计算得到的理论塔板数n很⼤，塔板⾼度H很⼩，但实际上柱效并不⾼，试分析原因。
9．某⼈制备了⼀根填充柱，⽤组分A和B为测试样品，测得该柱理论塔板数为4500，因⽽推断A和B在该柱上⼀定能得到很好的分离，该⼈推断正确吗?简要说明理由。
10．⾊谱分析中常⽤的定量分析⽅法有哪⼏种?当样品中各组分不能全部出峰或在组分中只需要定量其中⼏个组分时可选⽤哪种⽅法?11．⽓相⾊谱仪⼀般由哪⼏部分组成?各部件的主要作⽤是什么?12．⽓相⾊谱仪的⽓路结构分为⼏种?双柱双⽓路有何作⽤?13．为什么载⽓需要净化?如何净化?14．简述热导检测器的基本原理。
15．简述氢⽕焰离⼦化检测器的基本结构和⼯作原理。
16．影响热导检测器灵敏度的主要因素有哪些?分别是如何影响的?17．为什么常⽤⽓固⾊谱分离永久性⽓体?18．对⽓相⾊谱的载体有哪些要求?19．试⽐较红⾊载体和⽩⾊载体的特点。
20．对⽓相⾊谱的固定液有哪些要求?21．固定液按极性⼤⼩如何分类?22．如何选择固定液?23．什么叫聚合物固定相?有何优点?24．柱温对分离有何影响?柱温的选择原则是什么?25．根据样品的沸点如何选择柱温、固定液⽤量和载体的种类?26．⽑细管⾊谱柱与填充柱相⽐有何特点?27．为什么⽑细管⾊谱系统要采⽤分流进样和尾吹装置?28．在下列情况下⾊谱峰形将会怎样变化?(1)进样速度慢；(2)由于汽化室温度低，样品不能瞬间汽化；(3)增加柱温；(4)增⼤载⽓流速；(5)增加柱长；(6)固定相颗粒变粗。
检验仪器分析技术及应用公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]一绪论临床检验技术技术分类：①临床化学检验分析技术（包括自动生化分析、干化学分析、血气分析、电解质分析、电泳分析）②临床免疫学检验分析技术③临床血液学检验和尿液检验分析技术（血细胞分析、血液凝固分析、血液流变分析、流式细胞分析、血红细胞沉降分析和尿液分析）④临床微生物学检验分析技术⑤临床分子生物学检验分析技术二．血细胞分析技术血液由血浆（55%）和血细胞（45%）组成。
（填空题）所谓血细胞计数主要是指计数单位容积中红细胞、白细胞和血小板的个数。
（填空题）白细胞被称为人体卫士，它可以防止外来微生物的侵害及其他感染。
血细胞计数有变阻脉冲法（简称变阻法）、光电计数法和激光计数法。
（大题）变阻法血细胞计数原理：血细胞是电的不良导体，将血细胞置于电解液中，由于细胞很小，一般不会影响电解液的导通程度。
但是如果构成电路的某一小段电解液截面很小，其尺度可与细胞直径相比拟，那么当有细胞浮游到此时，将明显增大整段电解液的等效电阻。
如果该电解液外接恒流源(不论负载阻值如何改变，均提供恒定不变的电流)，则此时电解液中两极间的电压是增大的，产生的电压脉冲信号与血细胞的电阻率成正比。
如果控制定量溶有血细胞的电解溶液，使其从小截面通过，也即使血细胞顺序通过小截面，则可得到一连串脉冲，对这些脉冲计数，就可求得血细胞数量。
由于各种血细胞直径不同，所以其电阻率也不同，所测得的脉冲幅度也不同，根据这一特点就可以对各种血细胞进行分类计数。
这就是变阻脉冲法原理。
（填空题）变阻脉冲法计数在大多数细胞计数器中是利用小孔管换能器装置实现的。
（填空题）脉冲的个数与通过小孔的细胞个数相当，脉冲的幅度与细胞体积成正比。
脉冲信号经过下列步骤得出细胞计数结果：放大，阈值调节，甄别，整形。
（填空题）体积不同的红细胞、白细胞、血小板，其产生的脉冲幅度也不同，排列序列以白细胞最大，红细胞次之，血小板最小。
第一章引言内容提要：仪器分析与化学分析的区别与联系、仪器分析方法的分类及发展趋势。
重点难点：仪器分析方法的分类一、仪器分析和化学分析分析化学是研究物质的组成、状态和结构的科学，它包括化学分析和仪器分析两大部分。
化学分析是指利用化学反应和它的计量关系来确定被测物质的组成和含量的一类分析方法。
测定时需使用化学试剂、天平和一些玻璃器皿。
仪器分析是以物质的物理和物理化学性质为基础建立起来的一种分析方法，测定时，常常需要使用比较复杂的仪器。
仪器分析的产生为分析化学带来革命性的变化，仪器分析是分析化学的发展方向。
仪器分析的特点（与化学分析比较）L级，甚至更低。
适合于微量、痕量和超痕量成分的测定。
g、灵敏度高，检出限量可降低：如样品用量由化学分析的mL、mg级降低到仪器分析的选择性好：很多的仪器分析方法可以通过选择或调整测定的条件，使共存的组分测定时，相互间不产生干扰。
操作简便，分析速度快，容易实现自动化。
仪器分析的特点（与化学分析比较）相对误差较大。
化学分析一般可用于常量和高含量成分分析，准确度较高，误差小于千分之几。
多数仪器分析相对误差较大，一般为5%，不适用于常量和高含量成分分析。
需要价格比较昂贵的专用仪器。
仪器分析与化学分析关系仪器分析与化学分析的区别不是绝对的，仪器分析是在化学分析基础上的发展。
不少仪器分析方法的原理，涉及到有关化学分析的基本理论；不少仪器分析方法，还必须与试样处理、分离及掩蔽等化学分析手段相结合，才能完成分析的全过程。
仪器分析有时还需要采用化学富集的方法提高灵敏度；有些仪器分析方法，如分光光度分析法，由于涉及大量的有机试剂和配合物化学等理论，所以在不少书籍中，把它列入化学分析。
应该指出，仪器分析本身不是一门独立的学科，而是多种仪器方法的组合。
可是这些仪器方法在化学学科中极其重要。
它们已不单纯地应用于分析的目的，而是广泛地应用于研究和解决各种化学理论和实际问题。
因此，将它们称为“化学分析中的仪器方法”更为确切。
检验仪器分析技术及应用讲义作者：日期：一-绪论临床检验技术技术分类：①临床化学检验分析技术（包括自动生化分析、千化学分析、血气分析'电解质分析、电泳分析）②临床免疫学检验分析技术③临床血液学检验和尿液检验分析技术（血细胞分析、血液凝a分析、血液流变分析'流式细胞分析'血红细胞沉降分析和尿液分析）④临床微生物学检验分析技术⑤临床分子生物学检验分析技术二-血细胞分析技术血液由血浆（55%）和血细胞（45%）组成。
（填空题）所谓血细胞计数主要是指计数单位容积中红细胞-白细胞和血小板的个数。
（填空题）白细胞被称为人体卫士 *它可以防止外来微生物的侵害及其他感染。
血细胞计数有变阻脉冲法（简称变阻法）'光电计数法和激光计数法。
（大题）变阻法血细胞计数原理：血细胞是电的不良导体，将血细胞覺于电解液中*由于细胞很小，一般不会影响电解液的导通程度。
但是如果构成电路的某一小段电解液截面很小，其尺度可与细胞直径相比拟，那么当有细胞浮游到此时*将够显增大整段电解液的等效电阻。
如果该电解液外接恆流源（不论负载阻值如何改变，均提供恆定不变的电流），则此时电解液中两极间的电压是增大的，产生的电压脉冲信号与血细胞的电阻率成正比0如果控制定量溶有血细胞的电解溶液*使其从小截面通过，也即使血细胞顺序通过小截面 > 则可得到一连串脉冲，对这些脉冲计数，就可求得血细胞数量。
由于各科血细胞直径不同，所以其电阻率也不同，所测得的脉冲幅度也不同 > 根扌居这一特点就可以对各种血细胞进行分类计数。
这就是变阻脉沖法原理。
（填空趣）变阻脉冲法计数在大多数细胞计数器中是利用小孔管换能爲装置实现的。
（填空题）脉冲的个数与通过小孔的细胞个数相当，脉冲的幅度与细胞体积成正比0脉冲信号经过下列步骤得出细胞计数结果：放大 > 阖值调节，甄别*整形0（填空题）体积不同的红细胞'白细胞、血小板，其产生的脉冲幅度也不同，排列序列以白细胞最大*红细胞次之*血小板最小。
（简答）什么叫细胞直方图：以体积为橫坐标，以细胞的相对数量为纵坐标。
把细胞在一个个很小的体积S（小于2fld，又称通道 > 频道）的数董分布情况表达出来•我们称之为直方图。
红细胞直方图（显示a从24- 36011）血小板直方图（显示S 0-36fl）白细胞直方图（显示ffl是30-450fl *在直方图上表现为3个白细胞亚群> 35-90fl a的淋巴细胞群，可以包括淋巴细胞，91-160fl IS的单个核细胞群，可以包括单核细胞、幼稚细胞• 161—450fI ffi的粒细胞群•可以包括嗜酸性细胞 ' 嗜碱性细胞、中性粒细胞。
）白细胞直方图徐显示分类外，还显示4个报竽区域，如果某个报鹫区域里的计数值异常增多*就在此区域出现R 报警，R1为直方图上淋巴峰左側区域有异借，可能有血小板凝块 ' 巨大血小板 ' 有核红细胞、不溶性红细胞和冷凝集素等因素的影响• R2为直方图上淋巴峰和单和峰之间的区域有异常*可能有异型淋巴细胞、幼稚淋巴细胞' 浆细胞'嗜酸性细胞或嗜碱性细胞等因素的影响，R3为直方图上核峰和中性粒峰之间的区域有异常有不成熟粒细胞、嗜酸性粒细胞尊因素的影响，R4为直方图上中性粒峰右側区域有异常 ' 粒细胞&量过多，Rm为以上区域2个或2个以上同时有异常。
存在着2个以上的细胞同时通过细孔的现象称为重合现票。
为了在物理上最大限度地减少重合现象' 开发出了鞘流法 > 具体方法为：具体做法是用一毛细管对准小孔管■细胞混悬液从毛细管喷出，同时与四周流出的躺液一起流过啟感区，保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞液，四周被鞘液ffl绕•鞘流技术可应用于两种细胞计数原理：一为电阻抗原理•鞘流通过小孔的敏感区进行细胞计数，另一种为激光计数原理•细胞液流室校长，与激光垂直相交，激光光束对流经的每一个细胞照射后产生光散射■利用此原理进行细胞计数。
（大题）为控制细胞通过小孔时的精密度*除采用鞘流技术外，各厂家还采用了一系列相关技术：脉冲编辑-高精度体积分析*扌m流技术 ' 防反流装置VonBchrcns感应爲 ' 延时计数。
定董装置中的特殊部件主要有负压泵、压力调节器、废液瓶等。
（大题）白细胞分类技术：1•容量、电导-光散射法（VCS）体积（V）:测量使用的是电阻抗原理。
电导法（C）: 根据细胞璧能产生高频电流的性能采用高频电磁探针，测量细胞部结构、细胞核和细胞浆的比例以及细胞质粒的大小和密度。
光散射（S）:是根据细胞表面光散射的特点提供了注重细胞类型的鉴别方式*来自激光光源的单邑光束直接进入计数池的敏感区，在io~7（r时对每一个细胞进行扌m描分析，提供了细胞结构 ' 形态的光散射信息。
2.阻抗与鈔频联合法：此类仪爲白细胞分类通过三个不同检测系统完成.a嗜酸性细胞检测系统b嗜碱性细胞檢测系统C淋巴、单核 ' 粒细胞（中性 ' 嗜碱性 ' 嗜酸性）检测系统3.光散射与细胞化学技术联合法4.多角度偏振光散射技术。
测量正常标本时*可以从这4个角度（（）<卜3>、10\7-11> ' 90’垂直光散射<70-110>对白细胞进行测量。
同一种特定的程序自动存储和分析数据，将白细胞分为嗜酸性粒 ' 中性粒、嗜碱性粒 ' 淋巴和单核五种。
（大题）血红蛋白测量原理：血红蛋白的单位是gZIOOmK新制是g/L）•临床检验时因难以从血液中将其分离出来而采用相对比色法进行间接测量。
用溶血剂将经过稀释的血液中的红细胞破坏•血红蛋白便溶解出来，再加入转化试剂进而转化为颜色稳定的氛化血红蛋白。
血红蛋白含量越高 > 它的颜色就越深，透光性就越差（或吸光性越强）。
用光电器件检测透射光强度，并与已定标的血红蛋白值相比校•即可得出血红蛋白含量。
常用的光路系统为了防止光散射和外来光千扰，均采用双波长法测量。
在血液样品中加入氟化钾> 将生成亂化血红蛋白，这是一种顏色很稳定的物质0它的光密度曲线在54（）iim处有一个吸收峰。
（填空）血样分析一般包括吸样、稀释、送样等过程。
三-流式细胞分析技术（简答题）流式细胞仪（FCM）:主要功能：可进行细胞多参量分析•包括细胞大小、形状、蛋白荧光、氧化还原状态 ' 膜的结构、流动性 ' 微黏性、膜电位 ' 酶活性 ' 钙离子含量' pH '染色质结构' DNA合成 ' 城基比例等；进行细胞表型分析；细胞分选' DMA含量分析以及细胞分化周期分析等。
FCH工作原理：將待測细胞染色后制成单细胞悬液。
用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的璘酸缓冲液在高压下从勒液管喷出•鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包国着样品高速流动，组成一个圆形的流束 > 待测细胞在鞘液的包被下单行排列'侬次通过监测区域。
流式细胞仪通常以激光作为激发光源。
经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激光荧光。
光散射信号在前向小角度进行检测'这种信号基本上反映了细胞体积的大小。
这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核物质的浓度•经光电倍增管接收后可转换为电信号。
细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而宪现的。
流式细胞仪中所用的淤;月有中性滤片、带通減月、带阻減月•长波通滅片、短波通減月、长波通双色性反射片（填空题）影响流式细胞术分析的因素：细胞的荧光染色、激光光源的稳定性、细胞流速的稳定性、细胞悬液样品的影响（细胞黏连•团決常造成管道阻寒*重叠细胞可造成分析误差。
）流式细胞仪的组成：光学系统*液流系统，电子系统'计算机系统和数据转换处理系统。
（大题）流式细胞仪的临床应用：在免疫学中的应用（外周血T淋巴细胞亚群的测定，T淋巴细胞亚群用于器官移植后排斥反应的监测，肺泡灌洗液中T淋巴细胞亚群的测定，在艾滋病监测中的应用，细胞染色和细胞因子的测定）；在血液病学中的应用。
四-血凝分析技术生物学方法：凝固法*即將凝血因子激活剂加入到待检血浆中，使血浆发生体外凝a，凝血仪连续记录血浆凝圏过程中的一系列变化*并将这些变化信号转变成数据'用计算机收集、处理数据后得出检测结果。
（填空题）可分为三类：电流法'鮎度法'光学法。
（判斷题）凝血仪根据这种由于血液凝固而导致光强度的变化来判斷凝固终点的方法称之为光学法。
（填空或判斷题）散鈔比浊法：根据待检样品在凝因过程中散鈔光的变化来确定凝a终点的检测方法。
透射比浊法：根据待检样品在凝a过程中吸光度的变化来确定凝a终点的检测方法。
粘度法：在待检样品中加入小铁珠，利用变化的礁场使小铁珠产生运动，随着血浆的凝圈，血浆粘稠度增加*小铁珠的运动强度逐渐减弱，仪器根据小铁珠运动强度的变化来确定凝圏终点0生物化学方法是以酶学方法为基础的直接定董法，其优点是用酶学方法直接定量；测定结果准确；重复性好；便干自动化；标准化；所需样品量小。
五-血液流变学分析技术影响血液流变特性因素：红细胞的特性 ' 白细胞的变形性 ' 血小板的聚集性、纤维蛋白原浓度等血液流变特性：红细胞聚集性*红细胞变形性 ' 血液猫度（全血鮎度〈与流变场中切变率有一定关系＞、运动黏度'相对猫度、比粘度'还原粘度）。
血液粘度的测量是其中最重要的指标。
测量血液猫度的仪器目前普遍应用的是毛细管粘度计及回转锥板式黏度计。
毛细管法测血粘度的理论依据是泊肃叶定律。
血液黏度的影响因索：血液中细胞因素的影响＜红细胞对血液鮎度的影响（红细胞压积是主要影响因紊），白细胞对血液鮎度的影响，血小板对血液粘度的影响＞;血浆血清鮎度对血液黏度的影响；温度对血液黏度的影响；酸碱度及渗透压对血液黏度的影响；血液流速对血液黏度的影响；血管对血液猫度的影响；其他如性别＞新生儿，运动，时间，李节等。
六-尿液分析技术尿液分析仪是某些化学成分含量的专用自动化仪爲，可分为湿式和千式化学系统两大类。
自动尿液分析的原理和方法：（填空或选择题）按测试项目分类：8项尿液分析仪包括尿虽白（PRO）、尿糖（GLU） '尿PH（PH）、尿酮体（KET）'尿胆红素（BIL）、尿胆原（URO. UBG） '尿潜血（ERY）、尿亚硝酸盐（NTT）。
9项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞（WBC或LUE） j_10项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞・尿比重011项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞-尿比重和颜色或维生素C。
