兔子免疫程序
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42传染病会对家兔的健康造成重大影响,带来巨大的经济损失。
预防和控制家兔传染病最主要的措施是免疫接种和药物预防。
家兔不同年龄阶段,注射疫苗及使用药物的种类、剂量、方法都有所不同。
为保障兔群安全生产,促进养兔业健康发展和经济效益的提高,笔者根据经验及相关材料,介绍一下在预防家兔传染病中疫苗和药物的使用程序,供广大养兔从业者交流学习。
一、免疫接种免疫接种一般采取皮下注射等方法,皮下注射时选择皮肤游离性比较好的部位,如颈后部、颈背部等活动比较频繁的部位进行多点注射,利于疫苗的吸收利用,产生较高的免疫力。
为保障免疫效果切实可靠,得到较好的经济效益,养兔场应该根据兔病的流行特点及当地实际情况,有选择性、针对性地制定免疫程序。
根据笔者多年的研究实践结果,常见免疫程序如下:1.仔、幼兔免疫程序。
25~28日龄,大肠杆菌多价灭活疫苗2毫升,皮下注射;30~35日龄,巴、波二联灭活苗2毫升,皮下注射;40~45日龄,兔瘟灭活苗1毫升,皮下注射;50~55日龄,魏氏梭菌病灭活苗2毫升,皮下注射;60~65日龄,兔瘟单联或含兔瘟联苗1毫升,皮下注射。
2.青、成年兔免疫程序。
防疫方法:一年2次或3次定期防疫,所有存栏青年、成年兔全部进行免疫注射;各疫苗注射间隔3~5天。
主要疾病:兔瘟、巴氏杆菌、魏氏梭菌病、波氏杆菌病、大肠杆菌病、葡萄球菌病、沙门氏杆菌病等。
疫苗品种:单联、二联、三联等均可。
3.繁殖母兔。
兔瘟防疫,用兔瘟灭活苗加倍用量,有利于幼兔43获得较高水平的母源抗体。
4.种公兔等。
按疫苗常量使用。
疫苗注射时应注意的事项包括:(1)选择国家正规厂家生产的标准疫苗。
(2)疫苗使用前应细看说明书及瓶签,检查疫苗有无破损、变质,严格按要求使用,疫苗用前应充分震荡使沉淀混合均匀。
(3)接种疫苗前必须检查家兔的健康状况,凡体温高、病兔、怀孕后期的母兔均暂不注射,病兔、孕兔在痊愈或生产后要及时补防。
(4)注射时要避开大的血管和神经,注射动作要迅速,消毒要严格,剂量要准确。
家兔主要传染病免疫程序(新推荐)(供参考)江苏省农科院兽医研究所南京天邦生物科技有限公司薛家宾兔病应以防为主,特别是规模兔场。
对于重大传染病必须进行免疫预防和药物预防。
科学的防病程序的建立在兔病防治中占有重要的地位,是保证养兔成功的主要关健之一。
提出如下防病程序供参考。
1 毛兔、獭兔免疫程序仔、幼兔免疫力的建立35~40日龄兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗 2 ml皮下注射60~65日龄兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml 皮下注射非繁殖青年兔、成年产毛兔免疫程序(每年2次定期免疫)第1次兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml皮下注射间隔6个月第2次兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml皮下注射繁殖母兔、种公兔(每年2次定期免疫)第1次兔病毒性出血症灭活疫苗 1 ml皮下注射兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml皮下注射或兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗 2 ml皮下注射产气荚膜梭菌病(魏氏梭菌病)灭活疫苗 2 ml 皮下注射间隔6个月第2次兔病毒性出血症灭活疫苗 1 ml皮下注射兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml皮下注射或兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗 2 ml皮下注射产气荚膜梭菌病(魏氏梭菌病)灭活疫苗 2 ml 皮下注射2 肉兔免疫程序商品肉兔(70日龄出栏)35~40日龄兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗2ml 皮下注射或兔病毒性出血症(兔瘟)灭活疫苗 2 ml 皮下注射商品肉兔(70日龄以上出栏)35~40日龄兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗2ml 皮下注射60~65日龄兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗1ml 皮下注射或兔病毒性出血症(兔瘟)灭活疫苗1ml 皮下注射繁殖母兔、种公兔(每年2次定期免疫)第1次兔病毒性出血症灭活疫苗 1 ml皮下注射兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml皮下注射或兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗 2 ml皮下注射产气荚膜梭菌病(魏氏梭菌病)灭活疫苗 2 ml 皮下注射间隔6个月第2次兔病毒性出血症灭活疫苗 1 ml皮下注射兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病三联灭活疫苗 2 ml皮下注射或兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗 2 ml皮下注射产气荚膜梭菌病(魏氏梭菌病)灭活疫苗 2 ml 皮下注射。
皮肉兔免疫程序与防病制度1、免疫程序2、防病制度一、3日龄前滴服复方黄连素2~3滴/兔,预防仔兔黄尿病。
二、15~16日龄滴服痢菌净(莫氏滴滴康)3~5滴/兔,每天1次,连续两天,预防仔兔胃肠炎。
三、25~83日龄选用抗球虫药,配伍抗菌药。
连续用药3~4个疗程,每个疗程7天,停药15天,再开始下一个疗程。
防兔球虫病及细菌性疾病。
配伍与饮用方法:兔病球康+兔兔康拌料50KG,连用3天,沙拉沙星10G,兑水50KG,饮用3天,保胎壮仔灵每50G拌料100KG连用1个月,烟酸诺氟沙星10G,兑水50KG,饮用2天,地克珠利(通扬球精、齐鲁球敌)10ML,恩诺沙星10G,兑水50KG,饮用2天。
或第一个疗程用一种药,第二、三个疗程换另一种药也可。
四、仔兔断奶注射头孢畜健一次,100KG体重1支,仔兔补料阶段,加喂兔乐1袋拌料100斤,注意预防肚胀、拉稀、消化不良、胃肠炎等疾病。
五、60~70日龄内服丙硫苯咪唑25毫克/兔,连续用药3次每次间隔三天。
或皮下注射乾坤长效虫净0.2ML/兔,1次即可,预防寄生虫病。
六、25~90日龄选用人工盐、复合B等能促进胃肠蠕动的药,隔3~5天内服一次,能有效的预防大肠便秘。
七、每年的6、7、8月份,每兔每次内服磺胺嘧啶1/4片,病毒灵1/2片,广东星鲨复合B粉1克,成年兔加倍,每天一次,连续3~5天,每个月用药一疗程。
预防传染性口炎。
气温在30℃以上时,饲料中添加清瘟败毒散或饮用抗应激药物如速补之星。
八、基础兔每三个月驱虫一次,每年的7~8月份皮下注射乾坤长效虫净0.2ML/兔,隔10天注射一次,预防兔患豆状囊尾蚴病,兔群一旦发生此病,淘汰老弱病兔,选用青壮年兔进行治疗,其方法是:除去护场犬,禁用被犬污染的饲料原料和饮水,兔场内彻底消毒多次,最好用火焰消毒,内服丙硫苯咪唑50毫克/兔,隔三天一次,连续40~50天,治愈率达90%。
九、母兔产仔前,内服复方新诺明1片/兔,每天1次,连续3~5天,或饮用葡萄糖2500G,含碘食盐450G,速补康30G,氧氟沙星10~15G,兑水50KG的混合液300ML/兔,每天1次,连续3~5天。
兔子的免疫程序一.母兔妊娠中后期1. 妊娠15天以上至产前的母兔每3-5天口服抗菌素1次,药物可选复方新诺明、复方敌菌净、磺胺脒,严格按说明用量。
有效预防妊娠期一般病菌感染,如胃肠病和部分炎症等。
2. 妊娠20天的母兔增补维生素和葡萄糖或胡萝卜喂量。
可调整新陈代谢,有效预防母兔毒血症。
3. 妊娠25天的母兔饲料中按量加入沈氏回春散,连喂3天。
调节母兔内分泌,对保胎产生作用。
二. 哺乳期的仔兔和母兔1. 初生仔兔3天内人用氯霉素眼药水滴口腔,每兔每次2滴,连漳1-2次。
能较好地预防仔兔急性肠炎2. 产后当天的母兔肌肉或皮下注射产后康,按说明使用,仅1次。
可起到消炎抗菌和防病作用。
3. 产后3天的母兔加喂维生素C、B,每天2次,每次每兔各1片,连用3天。
重点预防毒血症。
4. 产后母兔选3-4种抗菌素,每3-5天用一种,每种用一次。
预防各种细菌感染。
5. 在哺乳期的仔兔产箱每天检查1-2次,对潮湿和污染的垫物勤更换。
明显地防止仔兔患身螨病。
6. 仔兔开食到断奶前用3-4种抗球虫药物,如球立克、痢特灵、氯苯胍、敌菌净等,7-10天连结交替用一种。
以药预防为主,很好地预防球虫病。
三. 幼兔期断奶兔(幼兔)1.36天和80天颈部皮下注射兔球净,每兔0.2毫升,共两次。
加喂抗球虫药。
同时继续预防球虫病,直至100日龄。
2. 40日龄兔(幼兔)颈部皮下注射巴、波二联疫苗,每兔2毫升。
有效预防巴、波杆菌病感染。
3.45日龄初兔和75日龄加强免疫45日龄皮下注射兔瘟疫苗,每兔2毫升,75日龄加强兔瘟免疫。
有效预防兔瘟病。
四.中成兔期1. 季节性兔瘟免疫每6个月注射一次兔瘟疫苗,每兔皮下注射2毫升。
有效预防兔瘟病。
2.季节性巴、波免疫从36日龄起,每4个月注射1次巴、波二联疫苗,每次每兔2毫升。
有鼻炎病,注射兔鼻康。
预防巴、波杆菌病。
3.全部中成兔每6个月注射一次伊维菌素,每次每公斤体重0.02毫升。
预防各种寄生虫病,最好定期使用抗球虫药。
獭兔养殖免疫程序材料及保管员职责1、材料经验收后入库,分别摆放整齐。
2、做好入库、出库清单,标明物品数量及价格。
3、领取物品时,必须由主管领导批准及财务手续手后方可领取。
4、凡外单位及本公司人员借用工具,由当事人写出借条,经领导批准后办理有关借用手续,用后及时收回,若造成丢失损坏,由当事人赔偿。
5、领用药品及低值易耗品,由领料人签字并注明领用原因。
6、采购原料经主管领导批准后办理,并提前向公司有关领导及财务汇报,做出报表,以便及时添置购买入库。
7、注重物品防温、防鼠等工作,若造成损失者,由责任人赔偿。
富源县后所镇纯丰獭兔养殖场技术员职责1、认真组织饲养员学习养殖技术。
2、与饲养员一道对兔子进行生产观察,发现问题,做出处理解决。
3、提出生产方案,制定生产目标。
4、向主管领导定期汇报种兔生产情况。
5、作好种兔场的档案建立,以及卫生防疫。
6、负责对外培训,养殖技术及来人技术业务解答和指导饲养员职责1、认真搞好本职工作,努力钻研养兔技术,熟练掌握操作规程。
2、按照喂养时间,做到定时定量的饲养方法,灵活掌握喂养量,保证投料及饮水清洁充足。
3、严格卫生防疫制度,防大于治,定期作好兔场内外卫生的消毒工作以及兔子的疾病预防。
4、注意观察兔子情况,添加饲料,观察兔子的精神、食欲打扫卫生看兔的粪便及其它情况,发现问题要及时处理并报告技术员。
5、严格个人卫生及消度制度,进入场内要穿工作服及工作鞋,严禁将兔场内的工作服及工作鞋穿出室外。
6、做好自己所管理的兔子的情况,因管理不当造成兔子丢失,无故死亡等,由当事人负责。
场长职责1、熟爱国家法律,法规和政策。
2、认真执行公司的章程和规章制度。
3、积极配合总经理的工作。
4、熟悉养兔技术与管理。
5、组织职工技术培训和思想教育。
6、负责兔场人员和外来人员学习技术培训。
7、负责兔场环境卫生和安全工作监督。
8、执行种兔场场长负责制,严格审查。
9、掌握职工的思想动态和工作监督。
安全生产制度为了发展养殖业,搞好市场经济,促进各项工作的顺利进行,提高效益,确保公司安全,特定措施如下:1、种兔场职工必须认真执行领导的分工安排,各负其责,各司基职,搞好自己的本职工作。
小鼠免疫程序admin一、抗原的准备1、收到抗原时,首先要了解抗原的种类、性质和浓度,以便采取不同的处理方法。
2、多肽抗原,一般分多肽—偶联KLH和多肽—偶联BSA(或GGG)或裸多肽三种。
多肽—偶联KLH一般用于免疫,而多肽—偶联BSA或裸肽一般用于检测,在免疫时注意区分使用。
3、分装(1)收到抗原后,应及时按免疫需要分装,避免反复冻融。
(2)如抗原是大肠杆菌重组蛋白,可能存在不溶性沉淀,分装前,应用超声粉碎仪粉碎,要注意,在冰浴中进行,超声强度应以溶液不产生泡沫的水平为准,超声强度过大,易产生泡沫导致蛋白变性,超声强度太低效果不佳,每次2-3秒,重复3-4次,超声完毕立即分装。
(3)分装管应用不粘附蛋白的样品管,要用二种不同颜色的标签明确区分免疫用抗原和检测用抗原,并写明分装日期,抗原名,浓度和剂量。
A 免疫用抗原:一般50ug/每只小鼠×5只=250ug/1个分装管,备做首次免疫用。
另分装2个100ug/1管,备做融合前加强免疫用,再分装25ug/只/×5=125ug/1个分装管,共分装4-5管,备加强免疫用。
B 检测用抗原:100ug/每管,分装共3管。
C 分装好的抗原除马上免疫用管外,其余均装入小塑料袋中,写好抗原名标签,马上存入-700C。
剩余抗原交保管员存-700C,并填好交接班表格。
二、免疫程序1、多肽类抗原(包括MAP型多肽),第一次用福氏完全佐剂,每只50-100ug ,腹腔注射,总剂量0.5ml/只,第二次起用福氏不完全佐剂,剂量为25-50ug/0.5ml/只,间隔3周,第三次注射后10天测血(ELISA法),如滴度未达到1:104, OD1.0以上,则继续免疫,如ELISA已达滴度,则可取血清送WB或ICC检测。
2、蛋白类抗原:所用抗原的剂量等与多肽类相同,但进程有差异,首次免疫21天后,第二次免疫后,每次间隔为10天。
三、抗原的乳化抗原乳化前,应检查抗原管有否颗粒状沉淀,如有沉淀,应超声粉碎后,立即溶解在0.01M PH7.2 PBS中(PBS应为无菌液),每只小鼠腹腔注射总量0.5ml,用2-5ml注射器,取1.25ml含抗原的PBS,另一支注射器取(等体积)福氏完全佐剂或不完全佐剂,用不锈钢连接接头连接,反复推拉混合约10-30分钟,平放静置30分钟,如水乳相不再分离,即可注射小鼠。
兔用疫苗程序商品肉兔免疫程序日龄免疫疫苗免疫途径剂量21 波氏杆菌+大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗颈部皮下注射 1.0ml30 兔波氏杆菌+巴氏杆菌病蜂胶二联灭活疫苗颈部皮下注射 1.0ml兔球净(长效抗球虫药)颈部皮下注射 0.2ml40 兔瘟蜂胶灭活疫苗或颈部皮下注射 2.0ml兔瘟+巴氏杆菌病蜂胶二联灭活疫苗60 兔瘟蜂胶灭活疫苗或颈部皮下注射 1.0ml兔瘟+巴氏杆菌+魏氏梭菌病蜂胶三联灭活疫苗注:如疫区可视情况免疫魏氏梭菌和葡萄球菌病单苗,可在45日龄以后免疫一次。
如发生兔瘟蜂胶灭活疫苗4ml进行紧急免疫注射,注射时注意局部和注射针头的消毒,以免引发注射部位的脓肿。
种兔免疫程序日龄免疫疫苗免疫途径剂量21 波氏杆菌+大肠杆菌病蜂胶二联灭活疫苗颈部皮下注射 1.0ml30 兔波氏杆菌+巴氏杆菌病蜂胶二联灭活疫苗颈部皮下注射 1.0ml兔球净(长效抗球虫药)颈部皮下注射0.2ml40 兔瘟蜂胶灭活疫苗或颈部皮下注射 2.0ml兔瘟+巴氏杆菌病蜂胶二联灭活疫苗60 兔瘟蜂胶灭活疫苗或颈部皮下注射 1.0ml兔瘟+巴氏杆菌+魏氏梭菌病蜂胶三联灭活疫苗首次配种前14天兔波氏杆菌+巴氏杆菌病蜂胶二联灭活疫苗颈部皮下注射 1.5ml首次配种前7天兔葡萄球菌蜂胶灭活苗颈部皮下注射 1.5ml以后兔瘟+巴氏杆菌病、波氏+巴氏杆菌病、葡萄球菌病等疫苗一隔5-6个月免疫一次,兔球净一隔2个半月注射一次。
注:如疫区可视情况免疫魏氏梭菌,可在二免后5-6个月免疫一次。
如发生兔瘟可用兔瘟蜂胶灭活疫苗4ml进行紧急免疫注射,注射时注意注射局部和注射针头的消毒,以免引发注射部位的脓肿。
备注:以上程序仅供参考。
实际生产中可以根据养殖场的具体情况而定粪便识兔病1、兔子粪便圆大光润,是健康的表现。
2、粪便细小成连珠状,说明兔子脱水,应停喂干草,多喂鲜嫩洗净的青草以及清洁饮水。
3、粪便干结、粒小,说明兔子有内热。
内服果导片两粒、大黄苏打片两粒、食母生或乳酶生两粒同时内服,每天早晚各一次。
仔兔免疫程序1.仔、幼兔免疫力的建立25-28曰龄大肠杆菌病多价灭活疫苗 2 ml 皮下注射30-35曰龄巴氏、波氏杆菌病二联灭活疫苗 2 ml 皮下注射或巴氏杆菌病灭活疫苗 1 ml 皮下注射 40-45曰龄兔瘟灭活疫苗 2 ml 皮下注射 50-55曰龄魏氏梭菌病灭活疫苗 2 ml 皮下注射60-65曰龄兔瘟灭活疫苗 1 ml 皮下注射或其它含兔瘟的联苗按说明使用2.青、成年兔免疫程序防疫方法一年2次或3次定期防疫,所有存栏青年、成年兔全部进行免疫注射。
各种疫苗注射至少间隔3-5天。
主要疾病兔瘟、巴氏杆菌病、魏氏梭菌病、波氏杆菌病、大肠杆菌病、葡萄球菌病、沙门氏杆菌病等。
疫苗品种单苗、二联苗、三联苗均可。
繁殖母兔兔瘟防疫用兔瘟灭活疫苗加倍用量,有利于幼兔获得较高水平的母源抗体。
其它病预防同前。
种公兔等按疫苗常量使用。
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------品名规格(毫升) 头份用途和用法.----------------------------------------------------------------------------------------------------------------兔瘟灭活疫苗 40 20 40 20 预防兔瘟病。
每6个月注射一次。
作紧急预防时应用3-4倍量。
———————————————————————————————————————-------—兔禽多杀性巴氏 40 20 40 20 预防兔、禽巴氏杆菌病。
每4-6个月注射一次。
杆菌病灭活疫苗———————————————————————————————————————----------兔产气荚膜梭菌 40 20 40 20 预防兔产气荚膜梭菌病。
兔场免疫程序与药物保健技术一、免疫程序1. 地克珠利(商品名为杀球灵等),按每公斤饲料或饮水添加1毫克饲喂进行预防;治疗时剂量加倍,连用3-5天。
1、20天大肠杆菌苗兔皮下注射2毫升/只。
2、25-27天魏氏梭菌苗皮下注射1-2毫升/只。
3、33-35天种兔场用兔瘟、兔巴氏杆菌病单苗;扩繁场、农户用兔瘟-巴氏杆菌病二联苗,皮下注射2毫升/只。
4、60天用兔瘟-巴氏杆菌病二联苗,皮下注射2毫升/只。
5、60天后(青年兔、成年兔)每3-4个月一次,用兔瘟-巴氏杆菌病二联苗,皮下注射2毫升/只;魏氏梭菌单苗,皮下注射2毫升/只二、药物保健技术(一)球虫病1. 地克珠利(商品名为杀球灵等) 3月龄内兔按每公斤饲料或饮水1-2毫克连续添加饲喂进行预防。
2. 莫能菌素 3月龄内兔按每公斤饲料20-40毫克连续添加饲喂进行预防。
(二)螨病1、种母兔配种前用长效伊维菌素注射液按0.2ml/公斤体重注射一次以控制螨病。
2、种公兔每3个月用长效伊维菌素注射液按0.2ml/公斤体重注射一次。
长毛兔白细胞介素-4基因的克隆和真核表达质粒的构建应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,在国内首次从ConA诱导培养的长毛兔外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到IL-4 基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,经菌落PCR、酶切分析、序列测定鉴定及序列分析,克隆得到的IL-4 基因(序列号:EF606761)的开放阅读框含有441个核苷酸,编码147个氨基酸,其中前24个氨基酸组成信号肽,成熟肽含123个氨基酸残基。
与Genbank中已登录的欧洲兔IL-4基因(序列号:AF169169)的核苷酸序列和推知氨基酸序列同源性均为100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、大熊猫和鼠等的核苷酸同源性在57.0%(大熊猫)~69.8%(人)之间;编码氨基酸同源性在43.0%(鼠)~53.6%(人)之间。
构建的进化树结果都表明,兔与人的亲缘关系相对较近,与鼠的亲缘关系最远。
单抗制备抗原免疫兔子操作流程
单抗制备的操作流程包括以下步骤:
1. 制备兔子的源抗原:根据需要制备的单抗,选择相应的目标蛋白或多肽,将其纯化或合成为抗原。
可以通过细菌、酵母或哺乳动物细胞表达目标蛋白来获得抗原。
2. 兔子免疫:将制备好的抗原与适量的兔子血清混匀,然后注射到兔子体内。
通常先进行初次免疫,随后再进行多次增强免疫以提高抗原的免疫效果。
3. 血清采集:在兔子开始出现很好的免疫应答后,使用无菌器具采集兔子的血清。
以血管穿刺或静脉采血的方式收集兔子的血样。
4. 血清处理:将采集得到的血清置于冰箱中静置一段时间,以促使血清凝固。
然后使用离心机将血清离心,将上清部分即为富含目标单抗的抗体血清。
5. 单抗纯化:可以通过酸性沉淀、阳离子交换层析、亲和层析或凝胶过滤等方法对抗体血清进行纯化,以获取单抗。
6. 验证单抗:使用相应的分析方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)或Western blotting等方法来验证单抗的效力和特异性。
7. 应用:将制备好的单抗与其他实验方法结合使用,如免疫组
织化学染色、免疫印迹、流式细胞术等,用于检测、测定或研究目标分子在生物系统中的表达、定位、相互作用等。
需要注意的是,单抗制备的具体操作步骤可能会因实验目的、抗原的性质和兔子的品系等因素而有所不同,可以根据实际需求进行相应的调整。
在进行实验操作时,应遵守相关的实验室安全规范和伦理规定。
獭兔养殖技术规程6:仔兔推荐免疫程序仔兔免疫的重要性仔兔免疫是獭兔养殖过程中必不可少的一个环节。
实施仔兔免疫可以防止许多传染病,降低獭兔养殖中损失的风险。
而遗漏或者不及时实施仔兔免疫,会造成严重影响和后果。
因此,为了獭兔养殖健康稳定地发展,必须非常重视仔兔免疫的实施。
仔兔免疫的具体步骤1. 疫苗接种时间疫苗接种时间是非常关键的。
因为仔兔细胞免疫系统的成熟需要一定的时间。
因此,过早或过晚给仔兔接种疫苗都可能会冒险。
具体而言,一般情况下,一周岁以下的仔兔都是需要接种疫苗的,而具体接种时间要根据不同的疫苗而定。
2. 疫苗接种前的准备工作在给仔兔接种疫苗之前,必须做好充分的准备工作。
这包括:•根据兽医的要求,检查宠物的身体状况和免疫力水平;•清洁接种器具及采集接种样本的工具;•采集样本和记录相关的信息;•安排好接种的时间和地点;•检查疫苗的名称、过期期限和保险条件,确定疫苗合格;3. 仔兔疫苗的分类和选择不同的疫苗适用于不同的病原体和不同的獭兔品种,因此,要根据实际情况选择适合的疫苗。
例如,常规的一些仔兔疫苗包括:•百日咳疫苗•细小病毒疫苗•肺炎疫苗•传染性肝炎疫苗•兔病毒性出血热疫苗•风湿热疫苗•锥虫病疫苗养殖者应该在对獭兔进行养护和疫苗接种之前,先咨询专业的兽医,以了解哪种疫苗是必须接种的,并得到传染病的防疫方案。
4. 疫苗接种程序接种程序是獭兔养殖中给仔兔接种疫苗的具体操作。
以下是一般情况下常见的疫苗接种方法:1.确定接种的部位(一般都是在下颌部)2.用酒精消毒接种部位3.拉起兔子的下唇,迅速用接种器将疫苗注入4.确保接种器口罩处不接触到任何物品,避免污染,并消毒接种器口罩5. 疫苗接种后的注意事项在给仔兔接种疫苗之后,需要照顾好它们,帮助它们恢复体力和健康。
以下是一些疫苗接种后需要注意的事项:•喂食新鲜饮食以保证兔子的营养供给;•提供清洁、舒适的环境,避免交叉感染;•监测仔兔身体反应,如进食、拉屎、出汗情况等;•添加一定的维生素和营养剂,帮助兔子从疫苗接种的疲劳中恢复过来。
免疫兔子操作1.选取健康成年的新西兰大白兔作为免疫对象,重量应在四斤以上,明显可见耳静、动脉,健康。
2.抗原注射以前需要收集一些正常血清,已备检测抗体时作为阴性对照。
耳动脉取血1ml。
3.家兔脊柱两旁选6点皮内注射,每点注0.1ml,间隔2周后再于上述部位选不同点注射(不要选择临近位点,否则溃疡愈合不好)。
每次免疫的抗原量约50μg。
第一次用完全弗氏佐剂。
4.二周之后进行第二次免疫,第二次免疫以及以后均使用不完全弗氏佐剂,方法和用量同第一次。
5.第八天耳缘静脉取血1ml检测抗体效价。
6.每隔两周进行一次免疫,免疫后的第八天进行耳动脉取血检测抗体效价,若效价达到1:16以上,免疫后的第十天进行取血,取血量为40ml。
不要取太多,否则会造成兔子贫血。
最后一次取血可以采用颈动脉放血。
血清的分离:如果用三角瓶或平皿盛血,将器皿倾斜放置于37℃烘箱2hr,转移到4℃沉淀过夜,第二天早上用吸管吸取血清。
如果用离心管收集,37℃烘箱放置2hr,转移到4℃沉淀过夜,第二天早上离心,10000RCF,10分钟。
在血清中加入NaN3 至终浓度0.02%,分装后-20℃保存。
效价测定采用琼脂扩散法。
⑴将血清倍比稀释,加入外周孔。
⑵中间孔加动物Ig。
⑶37℃湿盒琼扩24小时,观察结果。
结果判定1.抗Ig的效价测定琼脂扩散效价达1﹕16为合格。
2.纯度鉴定采用琼扩法。
中间孔加抗Ig血清,外周孔加Ig和标准品Ig。
在抗Ig与Ig以及标准品Ig均出现一条沉淀线,且这两条沉淀线相互融合者,说明提取的Ig是纯的。
2011.6
高免血清制备免疫程序
1.动物选择:1.8-2Kg左右健康雄性家兔3只。
2.抗原:初次免疫剂量1.5mg/次/只,二次免疫剂量1.0mg/次/只,初免与二免疫间隔
时间为14天。
初次免疫用弗氏完全佐剂,二次免疫用弗氏不完全佐剂。
(支原体抗原提取:培养液(浓度达108),测蛋白含量,10000转离心30分钟,收集沉淀冻融3-5次。
)
3.加强免疫:采用10%铝胶佐剂,抗原剂量1.0mg/次/只,每次间隔时间1周,免疫次
数根据实际情况决定。
4.从第二次采血后需作琼扩试验检测抗休量
注意事项:
1.兔要选择好,饲养好,保证健康,但不能喂得过肥。
2.抗原来源一定要确实,不能有变异,如支原体在培养过程污染,已变成其它的微生
物。
兔子免疫流程《兔子免疫流程:一场保护小萌宠的“健康战役”》嘿,养兔子的小伙伴们,今天咱们来唠唠兔子免疫这个重要的事儿,就像是给咱们的兔子宝贝打造一套超级防御盔甲的过程呢。
首先,咱们得知道打疫苗这事儿可不能马虎。
一般小兔子来到家里后,要是它还很年幼,可别急着带去打疫苗哦。
就像小朋友得先长大一点,体质强一点才能打针一样。
通常小兔子要等到断奶后一两周左右,这时候它的身体已经开始有了一些对付外界病菌的小本事了。
要带兔子去打针,那可有点像去一场小小的冒险。
就好比我第一次带我的小兔叽去打疫苗的时候,兔子那小眼神啊,充满了疑惑和小紧张。
到了宠物医院,它就窝在小笼子里,耳朵动来动去的,似乎在说:“主人,这是要干啥嘞?”兽医拿出注射器的时候,感觉就像拿出了小魔杖。
不过这个小魔杖可不会魔法,全靠药性保护兔子呢。
有些兔子很乖,打针的时候就乖乖趴着,但也有像我家那调皮蛋一样的,蹦跶个不停。
这时候就考验主人我这个“超级英雄”的功力了,得一边安抚它的小情绪,一边帮着兽医固定住它。
有时候感觉像在抓一个毛茸茸的小团子,又怕太用力弄疼它。
常见的兔子疫苗嘛,就像兔子健康城堡的坚固城墙。
比如说兔瘟疫苗,那可是重中之重。
这可是预防兔子们遇上瘟疫这个大恶魔的厉害武器。
在打疫苗后的那几天,可不能掉以轻心。
就像把一个刚打完预防针的小娃娃带回家一样,要小心呵护。
得观察兔子有没有啥不对劲的地方,吃的咋样,拉的粑粑是不是正常的小颗粒。
要是兔子突然变得蔫蔫的,那就像警报拉响了一样。
还有啊,免疫这事儿可不是一劳永逸的。
就像我们人也不是打了一针啥疫苗就一辈子都不怕病了。
兔子的疫苗也是有持续时间的,得按照兽医说的时间去打加强针。
这加强针就像是给兔子的防御盔甲进行修补升级呢。
而且啊,在免疫的过程中,环境因素也很重要哦。
干净整洁的兔窝就像兔子健康成长的温馨小窝。
要是兔窝脏兮兮的,那病菌就像一群小坏蛋似的开始入侵,就算打了疫苗可能兔子也还是会受到威胁。
就像是给兔子穿上了盔甲,结果自己老在脏泥巴里打滚,那还有啥用呢?所以定期打扫兔窝也很关键,小兔子在干净的窝里才能安心享受生活嘛。
小鼠免疫程序admin一、抗原的准备1、收到抗原时,首先要了解抗原的种类、性质和浓度,以便采取不同的处理方法。
2、多肽抗原,一般分多肽—偶联KLH和多肽—偶联BSA(或GGG)或裸多肽三种。
多肽—偶联KLH一般用于免疫,而多肽—偶联BSA或裸肽一般用于检测,在免疫时注意区分使用。
3、分装(1)收到抗原后,应及时按免疫需要分装,避免反复冻融。
(2)如抗原是大肠杆菌重组蛋白,可能存在不溶性沉淀,分装前,应用超声粉碎仪粉碎,要注意,在冰浴中进行,超声强度应以溶液不产生泡沫的水平为准,超声强度过大,易产生泡沫导致蛋白变性,超声强度太低效果不佳,每次2-3秒,重复3-4次,超声完毕立即分装。
(3)分装管应用不粘附蛋白的样品管,要用二种不同颜色的标签明确区分免疫用抗原和检测用抗原,并写明分装日期,抗原名,浓度和剂量。
A 免疫用抗原:一般50ug/每只小鼠×5只=250ug/1个分装管,备做首次免疫用。
另分装2个100ug/1管,备做融合前加强免疫用,再分装25ug/只/×5=125ug/1个分装管,共分装4-5管,备加强免疫用。
B 检测用抗原:100ug/每管,分装共3管。
C 分装好的抗原除马上免疫用管外,其余均装入小塑料袋中,写好抗原名标签,马上存入-700C。
剩余抗原交保管员存-700C,并填好交接班表格。
二、免疫程序1、多肽类抗原(包括MAP型多肽),第一次用福氏完全佐剂,每只50-100ug ,腹腔注射,总剂量0.5ml/只,第二次起用福氏不完全佐剂,剂量为25-50ug/0.5ml/只,间隔3周,第三次注射后10天测血(ELISA法),如滴度未达到1:104, OD1.0以上,则继续免疫,如ELISA 已达滴度,则可取血清送WB或ICC检测。
2、蛋白类抗原:所用抗原的剂量等与多肽类相同,但进程有差异,首次免疫21天后,第二次免疫后,每次间隔为10天。
三、抗原的乳化抗原乳化前,应检查抗原管有否颗粒状沉淀,如有沉淀,应超声粉碎后,立即溶解在0.01M PH7.2 PBS中(PBS应为无菌液),每只小鼠腹腔注射总量0.5ml,用2-5ml注射器,取1.25ml 含抗原的PBS,另一支注射器取(等体积)福氏完全佐剂或不完全佐剂,用不锈钢连接接头连接,反复推拉混合约10-30分钟,平放静置30分钟,如水乳相不再分离,即可注射小鼠。
1. 将抗原蛋白溶于生理盐水中(可以溶解为0.2mg/mL的抗原溶液);2. 与等体积的弗氏完全佐剂双推法混匀(此时抗原浓度约0.1mg/mL);3. 经腹部皮下多点注射免疫BALB/C小鼠(注射约0.25mL);4. 2周后用等量抗原与不完全弗氏佐剂同上法混匀后免疫;5. 再过1周后连续每周用以上4.的方法加强免疫1次(抗原可减半),共3次;6. 最后一次免疫3d后,可通过断尾取血测血清效价,若达到预期目的,即可放血收集抗血清。
这是一般常用程序,最佳程序与你所用的抗原类型、免疫方法、佐剂类型等有关,需要通过实验确定多抗制备动物免疫点击次数:449 发布时间:2012-3-19制备好抗原后,就要进行动物免疫了,免疫这一步除了动物自身的因素外,实验者也要有良好的计划才能得到更好的免疫效果。
这里就几个常见的问题作一下简单的讨论。
动物的选择。
常见的可以用来制备抗体的动物有:小鼠(Mouse)、大鼠(Rat)、豚鼠(Guinea pig)、仓鼠(Hamster)、兔(Rabbit)、绵羊(Sheep)、山羊(Goat)、马(Horse)、驴(Donkey)、奶牛(Cow),还有的还用鸡或者鸭的。
选择动物无非就是考虑两个问题,第一个问题是能否具有较好的免疫效果。
特别是对于抗原是蛋白质的情况,为了保证免疫成功,就要求宿主动物与抗原来源物种之间需要有较远的亲缘关系,如果不太确定亲缘关系的远近,可以把抗原的序列与被免疫的动物相应的蛋白的序列进行一个对比,优先选择同源性较低的物种进行免疫。
选择动物的第二个问题是抗血清产量的问题,其实很多情况下需要的血清量就很大程度上限制了选择余地。
根据实验目的不同,抗血清的用量也有所不同。
比如说只想做几次Western Blot只需要一点点血清就够了,此时就可以选用小鼠这样的小动物,而如果想生产二抗作为商业使用,则可选用羊、驴、马这样的大型动物,大型动物还可以进如果是制备单克隆抗体,那选择的余地就更小了,目前主流做单抗的动物主要有小鼠、兔、大鼠。
而且除了Epitomics公司外,其它单位是不可以制备兔单抗的(已申请专利)。
另外需要指出的是,实验动物都有相应的法律法规,在进行实验之前需要参考相应的规定,只有获得了相关的资质才可以进行实验。
实验动物也由相应的机构繁殖和保种,选择动物应该使用特定的动物品系,以保证实验的稳定性。
免疫佐剂(Adjuvant)。
免疫佐剂主要有两个作用:一是刺激机体引起免疫反应,另一个作用是将抗原包起来延缓释放,起到相当于多次刺激的效果。
可以用来制备抗体的免疫佐剂主要有这么几类:铝盐、油乳、脂质体、CpG、细胞因子、经过处理的微生物或其代谢物。
关于它们各自的特性我这里就不作详细的介绍了,有兴趣的可以看看这篇文献:《我国免疫佐剂的研究进展》(刘悦竹,2008)。
目前应用得比较广泛的商品化佐剂主要有三种:弗氏佐剂(Freund's Adjuvant)、Ribi Adjuvant、Titermax。
弗氏佐剂是应用最多的佐剂,分为弗氏完全佐剂(Freund's Complet Adjuvant,FCA)和弗氏不完佐剂(Freund's Incomplete Adjuvant,FIA),弗氏完全佐剂由石蜡油和羊毛脂以及结核分枝杆菌的细胞壁成分组成,它是细胞免疫的刺激剂。
弗氏不完全佐剂不含分枝杆菌,其它同弗氏完全佐剂。
弗氏不完全佐剂仅能刺激体液免疫。
通常在免疫动物时,先使用弗氏完全佐剂进行首次免疫,后用弗氏不完全佐剂作为加强免疫,二者使用前都需要与抗原进行完全乳化。
弗氏佐剂会引起动物局部肉芽肿或者无菌性脓肿,人体接触可能导致风湿病,误入眼睛可能造成失明,因此在操作时需要注意防护。
Ribi佐剂则采用可被代谢的角鲨烯代替矿物油,同时它也含有分枝杆菌的成份,与弗氏佐剂相比,它毒性小,可以减小动物的局部接种反应,但是同样可以产生高亲和力的抗体(抗原为蛋白质)。
Titermax不像弗氏佐剂和Ribi那样是油包水的结构,而是由角鲨烯和非离子型嵌段聚合物组成,此聚合物是由疏水性的聚氧丙烯和亲水性的聚氧乙烯形成的异分子多聚体组成的。
由于同时存在亲水部分和疏水部分,故可以和抗原形成稳定的乳浊液。
Titermax毒性低,但是价格贵,而且对于弱免疫原性的抗原能否引起机体的免疫反应尚存在争议。
另外向大家推荐一款国产的佐剂,由北京康碧泉公司研制,商品名叫Quickantibody,此佐剂不含蛋白质成分,而且免疫方式简单,无需乳化抗原(只需要简单混合即可免疫),同时免疫周期短,抗原用量少,推荐大家使用。
佐剂和抗原的乳化大部分佐剂在使用前都需要乳化,很多网友问起过乳化方法的问题,在这里我简单地向大家介绍几种我个人觉得比较好的方法吧。
先来了解一下怎么样才算乳化好了。
对于弗氏佐剂这类油包水结构的佐剂来说,乳化完成后,可以取一滴乳化过的液滴滴在一杯清水里,看看此液滴是否分散,如果不分散则表明乳化完全,否则还要接着乳化。
关于乳化的方法,比较好用的有三种:第一种比较费时间,就是将抗原和佐剂放在EP管里,然后用枪反复吹打,然后放在涡旋仪上反复涡旋。
第二种方法就是将抗原和佐剂用枪混合后放在超声破碎仪下超声,这个方法比较快速,但是需要一个配有小探头的超声破碎仪。
第三种方法也就最简单最常用的方法了:准备好两个玻璃注射器和一个鲁尔接头,将抗原和佐剂用枪在EP 管内混合好,然后吸入一个注射器内,再用鲁尔接头将另一个注射器与它接上,把抗原和佐剂来回在两个注射器内推动,两分钟左右就可以完成乳化工作。
如果没有鲁尔接头,也可以用一小截一次性输液管将两个注射器连接,不过有网友反映这个不是很好用。
免疫方案(1)免疫部位:常见的免疫部位有皮下、肌肉、腹腔、脚垫、静脉、脾脏。
大型动物多为皮下或肌肉免疫,小型动物可采用后面的免疫部位。
制备多抗时,整个流程可采用同一种免疫部位,也可以多种部位联合使用,但是初次免疫都建议在皮下进行。
在制备单抗时,甚至还可以将脾脏取出进行体外免疫,脾脏免疫最大的优势就是可以大大减小免疫剂量并缩短周期,而且还可以解决高同源性蛋白无法免疫成功的问题。
但体外免疫不能形成完整的免疫应答反应,抗体无法成熟,所产生的抗体全部为IgM,不能产生其它类型的抗体。
对体外免疫感兴趣的朋友可以看看这篇文献:《体外免疫法制备单克隆抗体的研究》(陆芹章,1994)。
(2)免疫形式。
抗原通常需要与佐剂混合充分后才进行免疫,也有改进不用佐剂的方法,比如可以将抗原跑SDS-PAGE胶,然后将胶进行磨碎充分即可进行免疫,这样可以将抗原(蛋白质类抗原)纯化,而且还可以延缓抗原的释放。
也有人将抗原从SDS-PAGE胶上转移到NC膜上或者PVDF膜上然后将其磨碎进行免疫,还有人将抗原连接到琼脂颗粒等固相载体上,这样可以增加抗原的颗粒化程度,也可以增大抗原与机体免疫应答系统的接触。
(3)免疫剂量。
免疫剂量根据被免疫的动物、免疫部位以及抗原的本身的特性相差很远。
如果用兔制备多抗,首次免疫(皮下)一般在200-1000ug之间,对于大鼠,首次免疫(皮下)为100-500ug,对于小鼠,首次免疫(皮下)一般在10-100ug之间,加强免疫一般为首次免疫剂量的20%-50%。
尾静脉或脾内方式加强则可减至几微克至十微克。
对于体型比较大的动物可酌量增加(不能按照体重比增加),具体的用量请大家参考文献。
(4)免疫周期。
首次免疫后,一般在10-15d左右抗体的产量会达到一个峰值,但是此时抗体亲和力不够,大部分都是IGM,因此需要进行加强免疫,加强免疫一般在首次免疫后三至四周进行。
第二次、第三次加强免疫间隔可以缩短至2-3周。
这个时间不太能长也不能太短,太短起不到加强的效果,而且还容易引起免疫耐受,如果相隔太久,则前面的免疫将失去初步刺激的效果。
如果是采用脾内免疫,则可以在一定程序上缩短免疫周期。
实验一免疫血清的制备一、实验目的熟悉免疫血清的制备过程;了解动物实验的基本知识。
二、实验原理将抗原物质经适当途径,按照预先制定的免疫方案免疫动物,经过一定时间,可刺激机体产生特异抗体并释放入血液,当血中抗体达到一定效价时采血,分离血清,即为特异性免疫血清(又称为抗血清)。
因抗原具有多种表位,可激活多个克隆的B细胞活化产生抗体,因此,这种免疫血清又称为多克隆抗体。