混合斑检验10用
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第13章 精斑斑检验页数:33
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精斑检验实验.页数:22
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精斑鉴定试纸如何检测精斑页数:2
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第十五章 精斑检验页数:73
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精斑检测页数:4
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FENGE精斑检测试纸操作说明指南页数:3
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结核感染T淋巴细胞斑点试验技术在学校结核密切接触者中筛查潜伏结核感染的应用
卡介苗的学生组中较未接种过卡介苗的学生组中更容易出现阳性（ｒ＝１２．５４，Ｐ＝ｏ．００），Ｔ・ｓＰＣ．１６，Ｐ＝ｏ．２８）。结论１研和Ｔ－ｓＰＯＴ．ＴＢ结果一致性低（＾妇即
＝０．０７，Ｐ＜Ｏ．０１），但Ｔ．ｓＰＯＴ．１１Ｂ结果不受ＢｃＧ接种的影响，特异性优于髑Ｔ。 【关键词】结核；接触者追踪；结核菌素试验
２．咖：由经过专门培训的护士用皮内注射法
（Ｍｏｎｔｏｕｓ法，１９０８年）做佟Ｔ实验的接种和判定。 试剂为结核菌素纯蛋白衍生物（ＰＰＤ５ＴＵ），成都生 物制品研究所生产，批号００７２００７０１０１。注射部位
在左前臂背侧上１／３处，皮内注射０．１
表ｌ御反应硬结平均直径［人数（％）］
ＩＩｌｌ，聊试验
结果在７２ ｈ后测定，硬结平均直径＝（横径＋纵
同学院（金融管理学院）４３７名（５４．４％）；男生３９２
进行统计学分析。组间比较采用，检验，２种试验
方法的比较采用ＭｃＮｅｍａｕｒ检验，惭＞Ｏ．７５为一
差异有统计学意义。
结 果
致性较好，Ｋ卿口＜Ｏ．４为一致性较差，Ｐ＜０．０５为
１．聊试验结果：８０３名学生中，聊反应硬结
平均直径＜５、５一＜ｌＯ、１０一＜１５和≥２０ ｍｍ，分别 为３４．１％（２７４／８０３），１６．８％（１３５／８０３），２６．８％
Ｐ＝Ｏ．２８）．Ｃｏｎｄｕｓｉ蚰ｓ
ｍｔｅ
ｏｆ Ｌ１’ＢＩ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏＵｅｇｅ ｗ鹊９．１％．Ｄｕｒｉｎｇ ｔｌｌｅ ｌａｔｅｎｔ ＴＢ ｓｃｒｅｅ血ｎｇ，雒∽ｅｍｅｎｔ ｂｅｔｗｅｅｎ
Ｔ．ＳＰＯＴ．ＴＢ ｉｓ
ｎｏｔ
Ｗｊｔｈ Ｔ．ＳＰＯＴ．ＴＢ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒｅｓｕｌｔｓ鹊山ｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｆｏｒ ｄｉａ印０８ｉｓ ｏｆ ｌａｔｅｎｔ ＴＢ，ｔｈｅ ｔｅｓｔｓ ｗ酗ｌｏｗ
＝０．０７，Ｐ＜Ｏ．０１），但Ｔ．ｓＰＯＴ．１１Ｂ结果不受ＢｃＧ接种的影响，特异性优于髑Ｔ。 【关键词】结核；接触者追踪；结核菌素试验
２．咖：由经过专门培训的护士用皮内注射法
（Ｍｏｎｔｏｕｓ法，１９０８年）做佟Ｔ实验的接种和判定。 试剂为结核菌素纯蛋白衍生物（ＰＰＤ５ＴＵ），成都生 物制品研究所生产，批号００７２００７０１０１。注射部位
在左前臂背侧上１／３处，皮内注射０．１
表ｌ御反应硬结平均直径［人数（％）］
ＩＩｌｌ，聊试验
结果在７２ ｈ后测定，硬结平均直径＝（横径＋纵
同学院（金融管理学院）４３７名（５４．４％）；男生３９２
进行统计学分析。组间比较采用，检验，２种试验
方法的比较采用ＭｃＮｅｍａｕｒ检验，惭＞Ｏ．７５为一
差异有统计学意义。
结 果
致性较好，Ｋ卿口＜Ｏ．４为一致性较差，Ｐ＜０．０５为
１．聊试验结果：８０３名学生中，聊反应硬结
平均直径＜５、５一＜ｌＯ、１０一＜１５和≥２０ ｍｍ，分别 为３４．１％（２７４／８０３），１６．８％（１３５／８０３），２６．８％
Ｐ＝Ｏ．２８）．Ｃｏｎｄｕｓｉ蚰ｓ
ｍｔｅ
ｏｆ Ｌ１’ＢＩ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏＵｅｇｅ ｗ鹊９．１％．Ｄｕｒｉｎｇ ｔｌｌｅ ｌａｔｅｎｔ ＴＢ ｓｃｒｅｅ血ｎｇ，雒∽ｅｍｅｎｔ ｂｅｔｗｅｅｎ
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案例一送检混合斑≠与案件有关案例二混合斑中的女性成分来源于谁 ...
案例一送检混合斑≠与案件有关案例二混合斑中的女性成分来源于谁？案例三性犯罪案件中嫌疑人衣物上女性成分检验案例四性犯罪案件中嫌疑人外生殖器擦拭物检验1案例五性犯罪案件中嫌疑人外生殖器擦拭物检验2案例一送检混合斑≠与案件有关【案情简介】某年某月某日，某市陈某，自诉被一男子强奸,并送来当时擦拭用的卫生纸。
经DNA分析检验,在卫生纸上检测到一男性精子STR位点基因型,但纸上提取的女性DNAD的STR位点的基因型却与陈某的STR位点的基因型不同。
进一步了解案情得知陈某只是凭印象认为这块从旅店公用纸篓内取出的卫生纸是其本人所用。
后又将旅店公用纸篓内的其它卫生纸提取进行检验，其中有一团卫生纸上提取的女性DNA的STR基因型与陈某DNA的STR基因型一致，而该团卫生纸上提取的精子DNA的STR基因型与犯罪嫌疑人DNA的STR基因型一致，因此才认定了犯罪嫌疑人。
【启示】在进行此类案件检验鉴定时,要同时提取混合斑中女性成分进行个体DNA的PCR-STR分析，得出嫌疑人和受害人的STR基因型，以便与嫌疑人、受害人进行比对，以确定嫌疑人和受害人，不能单凭所留的精斑,就认定或排除犯罪嫌疑人，尤其案件发生在公关场所时要考虑是否是其他人员留在现场。
案例二混合斑中的女性成分来源于谁？【案情简介】某年某月某日，某地刘某将张某（女，14岁）骗至家中，现场勘查提取了一团卫生纸上有可以斑迹，经精斑种属检验，确定为人精斑，但犯罪嫌疑人拒不交代其罪事实，刘某称现场的卫生纸是与妻子发生性行为是所留。
为了查明案情，卫生纸送实验室进行检验。
同时提取刘某、刘某妻子、被害人张某血样送检。
【实验室检验】卫生纸团取斑痕处剪碎，用生理盐水浸泡过夜，第二天取出用玻璃棒充分搅拌，吸取上清液，离心，去上清，留沉渣。
第一步，取沉渣，加入TES液400ml，10%SDS40ul,10mg/ml 蛋白酶K10ul,56℃水浴2h。
取出，离心，10000rpm，10min.留取上清液做女性成分的检测用。
精-血混合斑检出单一STR分型3例
次提取 １ ０处 血 迹 进 行 检 验 ， 又 获 得 ４名 不 同 男 性 Ｓ ＴＲ分型 。对 Ｔ恤 上 检 出男 性 Ｓ ＴＲ分 型 的血 迹 部 位 进行 涂片染 色检 验 ， 显 微镜 下检见 精子 。 案 例 ２ 某 年 ５月 ， 某市 一 休 闲店 发 内生 ｌ 起 卖 淫 女被 杀案 ， 中心现场见多处滴状血 ， 提 取 ＤＮＡ 检
同一车辆 。
验， 在其 中 １处滴 状血 上检 出 １ 名男 性 Ｓ ＴＲ分 型 ， 与 犯 罪嫌 疑人 不 同 ， 因与 现 场 血 迹 分 析不 符 ， 笔 者对 该 处 滴状 血迹 补充进 行精斑 检验 呈 阳性反应 。
案例 ３ 某 年 １ ０月 ， 某宾 馆一房 间 内发生 １起强
总之要结合客观规律与实际情况 ， 综合分析符合
点 和差异 点 的数量 和质量 。对 于符 合 特征 ， 注 意分 析
其 特异性 程度 ； 对于差异特征， 注 意 分 析其 伪 装 的可 能 。如果 涉案 车辆 和嫌 疑车辆 存在 足 够 的符合 特 征 ，
符合特征 的价值充分反映了同一辆车 的特点 ； 同时没
关键 词 ： 混 合 斑 ；Ｓ ＴＲ分 型 ； 优 势扩增； ＤＮＡ检 验 中图分类号 ： Ｄ Ｆ ７ ９ ５ ． ２ 文 献标 识 码 ： Ｂ
文章 编 号 ： １ ０ ０ ８ — ３ ６ ５ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ — ０ ０ ６ ８ 一 Ｏ ｌ
型蔓堇 Ｑ 生筮 翅
证 。种 属认 定 还 可 以作 为 否 定 的依 据 ， 排 除嫌 疑 车 辆 。车牌 号码是 从 外 观 上 确 定 车 辆 身份 最 有 力 的个 体特 征 。但在 大量 的案件 中 ， 由于拍 摄 角度 或 者像 素 低等 原 因 ， 无法 从视 频 中获知 车牌 号 码 。依 据 其 它特 征对 嫌疑 车辆进 行 检验鉴 定便 成 了不 可避 免 的途 径 。 在种 属认 定 同 一 的 基 础 上 ， 可 以 检 验 车 辆 外 部 的 损
同一车辆 。
验， 在其 中 １处滴 状血 上检 出 １ 名男 性 Ｓ ＴＲ分 型 ， 与 犯 罪嫌 疑人 不 同 ， 因与 现 场 血 迹 分 析不 符 ， 笔 者对 该 处 滴状 血迹 补充进 行精斑 检验 呈 阳性反应 。
案例 ３ 某 年 １ ０月 ， 某宾 馆一房 间 内发生 １起强
总之要结合客观规律与实际情况 ， 综合分析符合
点 和差异 点 的数量 和质量 。对 于符 合 特征 ， 注 意分 析
其 特异性 程度 ； 对于差异特征， 注 意 分 析其 伪 装 的可 能 。如果 涉案 车辆 和嫌 疑车辆 存在 足 够 的符合 特 征 ，
符合特征 的价值充分反映了同一辆车 的特点 ； 同时没
关键 词 ： 混 合 斑 ；Ｓ ＴＲ分 型 ； 优 势扩增； ＤＮＡ检 验 中图分类号 ： Ｄ Ｆ ７ ９ ５ ． ２ 文 献标 识 码 ： Ｂ
文章 编 号 ： １ ０ ０ ８ — ３ ６ ５ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ — ０ ０ ６ ８ 一 Ｏ ｌ
型蔓堇 Ｑ 生筮 翅
证 。种 属认 定 还 可 以作 为 否 定 的依 据 ， 排 除嫌 疑 车 辆 。车牌 号码是 从 外 观 上 确 定 车 辆 身份 最 有 力 的个 体特 征 。但在 大量 的案件 中 ， 由于拍 摄 角度 或 者像 素 低等 原 因 ， 无法 从视 频 中获知 车牌 号 码 。依 据 其 它特 征对 嫌疑 车辆进 行 检验鉴 定便 成 了不 可避 免 的途 径 。 在种 属认 定 同 一 的 基 础 上 ， 可 以 检 验 车 辆 外 部 的 损
DNA实验室检验规范
法庭科学DNA实验室检验规范【GA-T383—2002】1 范围本标准规定了法庭科学DNA实验室检验应遵守的基本要求。
本标准适用于所有从事法庭科学检验的DNA实验室.2 定义本标准采用下列定义。
2.1 前期检验prior examinationDNA检验前进行的预试验和确证试验。
2.2 有机溶剂法organic extraction of DNA通过酚－氯仿混合物萃取DNA溶液中的蛋白质类有机物质,而保留DNA于水相溶液中的提取方法。
2.3 Chelex法Chelex extraction of DNA利用Chelex能有效地去除非核酸有机物的性能而提取DNA的方法。
2。
4 硅珠法silicon bead test在硫氰酸胍条件下，利用二氧化硅微粒特异捕获有机质溶液中的DNA分子的性能提取DNA的方法.2.5 CTAB法cetyltrimethylammonium bromide method利用非离子型去污剂十六烷基三甲基溴化胺（CTAB）具有破坏植物细胞壁和细胞膜及硬组织，并能与DNA形成复合物的能力，通过抽提使DNA与蛋白质及多糖类物质有效分离而达到提取高纯度DNA 的目的.2.6 聚合酶链反应polymerase chain reaction—PCR一个酶促的特定DNA片段扩增过程。
3 案件受理3.1刑事案件的送检人员需提供公、检、法、司，以及保卫部门的盖有公章的鉴定委托书或公函，并出示本人的工作证。
民事案件的送检人员需提供委托单位或个人的委托书,并出示本人的身份证明。
3.2 送检人员需填写送检登记表,详细填写送检单位、送检人姓名、送检日期、简要案情、送检检材名称及特征、有无作过鉴定、原鉴定单位及原鉴定结论、鉴定要求等。
3.3 接案人员在了解案情和鉴定要求后，逐一确认检材，并对检材进行编号，有条件的照相固定，最后在送检登记表上签名.3.4 检验人员从接案人员手中受理检材时，应详细了解案情和鉴定要求，逐一核对检材后，在送检登记表上签名。
第十五章混合斑检验
实际操作前，应进行涂片检查，根据精子和阴道上皮 细胞的比例，对消化时间、温度、试剂的浓度等进行适当的调整 提取方法选择----采用有机溶剂的方法比较好。 酚-氯仿能够去掉混合斑中的精浆蛋白，阴道分泌液、细菌 污染严重的的,用有机溶剂提取后,用5%clekex100提1次。
Y染色体DNA分析：
1 男性特有，Y-STR检测不受女性成分的干扰，不需 分离精液成分和阴道液成分，两者比例为1/100--2000时 仍可正确检出精子DNA，避免了两步消化过程，及操作过 程中精子DNA的损失，提高了检出阳性率。 2 精子细胞比体细胞更稳定，保存25年的阴道式子YSTR获得成功 3 轮奸案----可以推测犯罪嫌疑人的数目。
第二节 精液与阴道液混合斑
混合斑的确证:检测精液成分及阴道成分确定
(一)精斑的确证：利用精斑的确证试验
细胞学方法-----精子的检出 免疫学方法-----精斑确证最好试剂----抗P30血清 生化学方法-----LDH-X
(二)阴道液的确证：
细胞学检查 ：阴道上皮细胞（复层鳞状上皮细胞） HE染色：大而扁平、形态不规则、胞浆红染 嗜碘试验：斑痕沉淀涂片，干燥后+2滴Lugo’s碘液 ---2~3min镜检呈红褐色或深黄褐色， （口腔上皮细胞不染色） 阴道肽酶测定：（VP） 是一种催化肽键水解的酶 仅存在女性生殖道分泌液中，与年龄、性活动、 月经周期无关。 方法：淀粉凝胶电泳 L-缬氨酸-L-亮氨酸 注意：阳性检出率只有64%，故阴性结果不能否 定阴道液存在。检出期限为7个月。
混合斑中精液成分的个人识别
应取受害人和犯罪嫌疑人的血液、唾液检材做参比样本 已婚的被害人，须提取其丈夫的血样和唾液样同时检测 传统的血型标记在混合斑个体识别鉴定具有实用价值，主 要有两类方法： 一类是对比推断法：简单易行，信息量有限 另一类是检测精液与阴道液的特有遗传标记成分
Y染色体DNA分析：
1 男性特有，Y-STR检测不受女性成分的干扰，不需 分离精液成分和阴道液成分，两者比例为1/100--2000时 仍可正确检出精子DNA，避免了两步消化过程，及操作过 程中精子DNA的损失，提高了检出阳性率。 2 精子细胞比体细胞更稳定，保存25年的阴道式子YSTR获得成功 3 轮奸案----可以推测犯罪嫌疑人的数目。
第二节 精液与阴道液混合斑
混合斑的确证:检测精液成分及阴道成分确定
(一)精斑的确证：利用精斑的确证试验
细胞学方法-----精子的检出 免疫学方法-----精斑确证最好试剂----抗P30血清 生化学方法-----LDH-X
(二)阴道液的确证：
细胞学检查 ：阴道上皮细胞（复层鳞状上皮细胞） HE染色：大而扁平、形态不规则、胞浆红染 嗜碘试验：斑痕沉淀涂片，干燥后+2滴Lugo’s碘液 ---2~3min镜检呈红褐色或深黄褐色， （口腔上皮细胞不染色） 阴道肽酶测定：（VP） 是一种催化肽键水解的酶 仅存在女性生殖道分泌液中，与年龄、性活动、 月经周期无关。 方法：淀粉凝胶电泳 L-缬氨酸-L-亮氨酸 注意：阳性检出率只有64%，故阴性结果不能否 定阴道液存在。检出期限为7个月。
混合斑中精液成分的个人识别
应取受害人和犯罪嫌疑人的血液、唾液检材做参比样本 已婚的被害人，须提取其丈夫的血样和唾液样同时检测 传统的血型标记在混合斑个体识别鉴定具有实用价值，主 要有两类方法： 一类是对比推断法：简单易行，信息量有限 另一类是检测精液与阴道液的特有遗传标记成分
道路热拌沥青混合料面层检验规范
道路热拌沥青混合料面层检验规范主控项目1、沥青混合料面层压实度，对城市快速路、主干路不应小于96%；对次干路及以下道路不应小于95%。
检查数量：每1000m2测1点。
检验方法：查试验记录（马歇尔击实试件密度，试验室标准密度）。
2、面层厚度应符合设计规定，允许偏差为+10~-5mm。
检查数量：每1000m2测1点。
检验方法：钻孔或刨挖，用钢尺量。
3、弯沉值，不应大于设计规定。
检查数量：每车道、每20m，测1点。
检验方法：弯沉仪检测。
一般项目3表面应平整、坚实，接缝紧密，无枯焦；不应有明显轮迹、推挤裂缝、脱落、烂边、油斑、掉渣等现象，不得污染其他构筑物。
面层与路缘石、平石及其他构筑物应接顺，不得有积水现象。
检查数量：全数检查。
检验方法：观察。
4热拌沥青混合料面层允许偏差应符合规定。
9.4检验标准9.4.1沥青贯入式面层质量检验应符合下列规定：主控项目1沥青、乳化沥青、集料、嵌缝料的质量应符合设计及本规范的有关规定。
检查数量：按不同材料进场批次，每批次1次。
检验方法：查出厂合格证及进场复检报告。
2压实度不应小于95%。
检查数量：每1000m2抽检1点。
检验方法：灌砂法、灌水法、蜡封法。
3弯沉值，不得大于设计规定。
检查数量：按设计规定。
检验方法：每车道、每20m，测1点。
4面层厚度应符合设计规定，允许偏差为一5~+15mm。
检查数量：每1000m2抽检1点。
检验方法：钻孔或创坑，用钢尺量。
一般项目5表面应平整、坚实、石料嵌锁稳定、无明显高低差；嵌缝料、沥青应撒布均匀，无花白、积油，漏浇、浮料等现象，且不应污染其他构筑物。
检查数量：全数检查。
检验方法：观察。
6沥青贯入式面层允许偏差应符合规定。
精斑鉴定试纸如何检测精斑
精斑鉴定试纸如何检测精斑【操作步骤】1、检材筛选精液是睾丸生成精子和精囊、前列腺和尿道球腺分泌液的混合物，具有特殊的气味，因附着物不同形态也不同。
精斑为精液干燥之后形成的。
精液一般遗留在阴道或避孕套内，受害人的直肠至肛门内，或口腔内。
精斑一般遗留在内裤衣物上、床单被罩等处，或案发现场的地面上或纸巾、避孕套等其他物体表面。
短时期内的精斑或精液有特殊气味，精斑手摸有硬物感。
1.检材处理2.1 处理方式一：剪取适量怀疑含有人精斑的检材或适量怀疑是人精液的检材；（适合可以破坏检材检验）处理方式二：在怀疑含有人精斑或精液的区域滴加适量精斑裂解液，将可疑精斑成分溶解出来，再使用干净的棉签、吸水纸或纸巾吸取，（裂解液一般滴加3-6滴，具体根据检材的大小和吸水程度增减）（适合不可以破坏检材检验）2.2 处理方式一：将剪取的检材或吸附可疑精斑成分的棉签、吸水纸或纸巾放入加液杯中（可用一次性塑料杯等容器代替），滴加裂解液5滴左右，再加入20ml-30ml纯净水或蒸馏水。
用玻璃棒或一次性滴管等搅拌震荡十分钟以上。
（适合案发现场检材保存较好或检材较多）处理方式二：去适量检材放入 1.5ml-2ml离心管中，加入适量纯水。
用泪囊穿刺针搅动检材，加速检材的溶解；或置于振荡器上振荡，浸泡约30分钟。
将此离心管置于高速离心机上，1300转/分钟离心5分钟。
离心后将上清液移入另一1.5ml-2ml离心管中。
（适合案发现场检材保存不好或检材较少）注：如果直接从阴道内用棉签提取可能含有精液成分或提取到液体状态的精液，可直接加纯水震荡，检测。
受害者大腿内侧等身体部位的可疑精斑或精液应妥善提取。
3、检测3.1 打开精斑鉴定试纸盒，取出精斑试纸条，将试纸条上带有MAX粗线标记一端插入检材浸泡液中并计时，或将适量检材浸泡液滴加到试纸条加样区。
或用性吸管吸取或棉签沾适量含有可疑斑痕的溶液，滴在试纸条加样区。
3.2约5分钟后取出试纸条，平放，5-10分钟观察结果。
法医物证学考试题(答案)
法医物证学考试题姓名记分一、选择题（单选）：每题1.5分1.下列哪一项不是人类遗传多态性现象。
（）A.蛋白酶多态性B.糖的多态性C.抗原多态性D.DNA多态性2.有关理想群体的条件中，哪一项是错误的。
（）A.群体无限大B.婚配随机进行C.有自然选择D.没有新的突变E.没有群体的大规模迁移3.下列方法中，哪一种不能确定人类精斑。
( )A.精子找出法B.P30测定C.抗人精环沉试验D.中和法4.下列常见的检验中，哪一种不属于RBC酶型。
（）A.ACPB.PGMC.ESDD.HP5.法医学常见的检材是( )，占80%以上。
A.血痕B.精斑C.唾液D.毛发6.琼脂糖免疫扩散试验中所用琼脂糖浓度为（）A.2%B.0.2%C.20%D.0.05%7.唾液中含有大量水溶性ABH血型物质，常用（）法测定。
A.吸收试验B.中和试验C.解离试验D.淀粉-碘试验8.亲子鉴定最主要依据( )。
A.孟德尔遗传规律B.妊娠期限C.性交能力及生育能力D.当事人的口供9.下列哪项不是免疫扩散试验的优点。
（）A.可估计抗原含量B.适用于混浊检材C.易于保存、拍照D.操作简单、快速10.下列毛发中哪一种多呈S状弯曲或呈螺旋状。
( )A.腋毛B.睫毛C.阴毛D.头发11.人体几乎所有骨骼都有性别差异，但最明显的是（）。
A.颅骨B.下颌骨C.骨盆D.四肢长骨12.精子的HE染色中,哪项正确( )。
A.头为蓝色,尾为红色B.头为红色,尾为蓝色C.头为紫红色,尾为紫蓝色D.头尾均为蓝色13.有关检材的提取方法中，哪种是错误的。
（）A.小件物品整件提取B.体液用纱布提取并烤干C.要带空白对照D.勿用手摸，防止污染14.解离试验中，所用RBC悬液浓度和抗体分别为（）。
A.2-3%，256倍B.1-2%，8倍C.0.2%，256倍D.0.5%，16倍15.抗人精环沉试验中，哪项不对（）。
A.抗人精效价为1万倍B.抗人精加于浸出液之上C.做空白、已知对照D.黑色背景斜光下观察16.有关ACP，哪项正确（）。
应用EZ-tape胶带分离提取混合斑精细胞
退 、 ｌ２神 经根 轻度损 害 等 ， 析认 为 ， 目前 遗 留 骶 ～ 分 其
的不 良后 果 主要 系 其 自身所 患 脊髓 栓 系综 合 征 的临 床 表现 ， 本次骶 管 灌注治 疗在 一定 程度 上使 其 症状 显 现 或加 重 ， 为诱 发 因素 ， 与度拟 为 １ ％。 参 ５
（ 收稿 日期 ：０ ２ ０ —１ ） ２ １ — ２ ３
［】 匡金 枝 ， 同钢 ， 巍 ， ．Ｄ Ａ 自动 化 检 案 及 其 规 范 程 ２ 聂 朱 等 Ｎ 序 的 研 究 与 应 用 【］公 安 部 物 证 鉴 定 中心 ．法 医遗 传 学 Ｃ， ／
但就 现有 材料 分析 ， 尚无 证据 证 明某 职工 医 院在
（ 上接第 １３页） ３
参考文献 ：
［］郑 秀芬．法 医 Ｄ Ａ分析 ［ ． 京 ： １ Ｎ Ｍ］ 北 中国人 民公安 大学 出
版 社 ， ０ ２：７． ２０ ４
文 选 ．北 京 ： 众 出版 社 ，０ ８ ２ — ２ 群 ２ ０ ：０ ２ ．
年 龄增 长 ， 柱 、 脊 脊髓发 育及 腰部 前 屈活 动增 多 ， 神经
系统 损 害 多 进 行 性 加 重 ， 相 应 症 状 亦 呈 进 行 性 加 其
重 ， 一旦 出现症 状 多不可 逆转 ， 以恢 复正 常 ， 且 难 虽经
院对 张 某实 施 骶 管灌 注 治疗 与其 自身原 有 疾 病 共 同 作用 所致 ， 二者 的参 与度 各拟 为 ５ ％。经 多家 医 院治 ０ 疗 后 ， 张某 仍 遗 留脐 下 ８ ｍ 范 围 内皮 肤 刺 痛 觉 减 现 ｃ
法 医 学 杂 志 ２ １ ０ ２年
４月 第 ２ 卷 第 ２期 ８
・
１ ３・ ３
第十五章 精斑检验
第十五章 精液斑检验
NSMC XDD
1
精液（斑）检验是法医学鉴定实践中的一项重 要内容，与血痕检验占有同等重要地位，特别是 对有关性犯罪或有性犯罪嫌疑的案件，以及对死 亡性质不明的女尸检查，精液（斑）的检验尤为 重要。 精液（斑）的法医学鉴定，可为判断案件性质、 划定侦查范围、认定或排除犯罪嫌疑人提供重要 线索。在亲子鉴定或其它有关性功能鉴定中，有 时需对新鲜精液进行检验。
7
凝固酶（精囊腺）5min内凝固成较冻状 中性蛋白酶及纤溶酶（前列腺）20-30min内液化成稀薄 半流动体
精子产生过程
8
精斑检验的目的：
为案件侦查和审理提供线索和证据。
需解决的问题：
斑痕是否为精斑？若是精斑，确定精斑的个体来源。
精斑检验程序：
肉眼检验→预试验→确证试验→个人识别
9
第二节 精液斑的肉眼检查
12
尸体 上的 精斑
13
强奸杀人现场遗留纸团
14
紫外辅助检查：
原理： 精斑中的黄素在紫外线下呈银白色荧光，斑痕边缘呈浅紫蓝色 特点：
对检材无污损、无破坏，不影响进一步检验 特异性差（干扰物：阴道液、尿液、唾液、某些色素染料）
作用：仅能为进一步检验提供可疑部位 结果分析：
阳性仅表明可能是精斑，阴性不能轻易否定精斑
液）等也可形成类似结晶。同时，精液斑受到尿 液、血液等污染时，则不出现阳性反应。 结晶试验灵敏度低、特异性差，仅作为指向实验。
28
过碘胆碱 29
30
苦味酸结晶试验
原理：
精素分解产物与苦味酸生成精素苦味酸结晶
（青黄色有折光的十字、柱、星形结晶）
特点： 动物精液一般不出现阳性。
31
NSMC XDD
1
精液（斑）检验是法医学鉴定实践中的一项重 要内容，与血痕检验占有同等重要地位，特别是 对有关性犯罪或有性犯罪嫌疑的案件，以及对死 亡性质不明的女尸检查，精液（斑）的检验尤为 重要。 精液（斑）的法医学鉴定，可为判断案件性质、 划定侦查范围、认定或排除犯罪嫌疑人提供重要 线索。在亲子鉴定或其它有关性功能鉴定中，有 时需对新鲜精液进行检验。
7
凝固酶（精囊腺）5min内凝固成较冻状 中性蛋白酶及纤溶酶（前列腺）20-30min内液化成稀薄 半流动体
精子产生过程
8
精斑检验的目的：
为案件侦查和审理提供线索和证据。
需解决的问题：
斑痕是否为精斑？若是精斑，确定精斑的个体来源。
精斑检验程序：
肉眼检验→预试验→确证试验→个人识别
9
第二节 精液斑的肉眼检查
12
尸体 上的 精斑
13
强奸杀人现场遗留纸团
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紫外辅助检查：
原理： 精斑中的黄素在紫外线下呈银白色荧光，斑痕边缘呈浅紫蓝色 特点：
对检材无污损、无破坏，不影响进一步检验 特异性差（干扰物：阴道液、尿液、唾液、某些色素染料）
作用：仅能为进一步检验提供可疑部位 结果分析：
阳性仅表明可能是精斑，阴性不能轻易否定精斑
液）等也可形成类似结晶。同时，精液斑受到尿 液、血液等污染时，则不出现阳性反应。 结晶试验灵敏度低、特异性差，仅作为指向实验。
28
过碘胆碱 29
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苦味酸结晶试验
原理：
精素分解产物与苦味酸生成精素苦味酸结晶
（青黄色有折光的十字、柱、星形结晶）
特点： 动物精液一般不出现阳性。
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三、可能有混合斑的检材
（一）性犯罪案件检材，包括阴道拭子、内裤、
卫生纸、床单、外生殖器拭子及其他各类物
品，这类检材多含有精子及阴道上皮细胞，
属男、女个体成分的混合物； （二）多人受伤的现场血迹，凶器、当事人身 上或衣物上的血痕，多为混合血痕；
(三）咬痕拭子含有咬者的口腔上皮细胞和被咬 者的皮肤细胞； （四）指甲垢，含有本人和被抓者的细胞；
2.阴道肽酶测定
肽酶（Peptidase）催化肽键水解的酶，阴 道肽酶（vaginal peptidase,Vp）能水解L缬氨酰基-L-亮氨酸及其他二肽底物.
仅存在于女性生殖道分泌液中，包括输卵管 和子宫内膜分泌液、子宫颈管粘液及阴道粘膜分 泌液中，与年龄、性活动及月经周期无关。
阴道肽酶测定：
用淀粉凝胶电泳检测，近正极有一条Vp蓝 紫色谱带。 Vp检测阳性率64％ ，阴性不能否定阴道 液存在。 在阴道液斑中，Vp的检出期限为7个月。 Vp不存在于血液及其他人体液中，月 经血及精液等均不影响其检出。
（1）阴道上皮细胞：大而扁平、形态不规则、胞 浆红染，有的为己完全角化无核。 （2）若同时查见精子，为阴道分泌液与精液的混 合斑。
可根据嗜碘试验将富含糖原的阴道上皮细胞与口腔 粘膜上皮细胞相鉴别。
嗜碘试验
斑痕沉淀物涂片干燥，加1~2滴Lugol’s碘 液 ，或将玻片翻转盖在盛有Lugol’s碘液的小 皿上，2~3min后镜检。 阴道上皮细胞被碘染成红褐色或深黄褐色， 口腔粘膜细胞不着色。 注意：男性尿道口上皮细胞也呈碘染色法阳性，故 在检查阴茎上有无阴道上皮细胞附着时需慎重。
笫一步消化的上清液提取阴道上皮细胞DNA
第二步消化的上清液提取精子的DNA
实际操作中并非每次都能保证理想地分离精
子和阴道上皮细胞。如果现场混合斑中阴道
上皮细胞数量远大于精子时，常会造成消化
不完全，分离到的精子细胞DNA仍然是混合
物；有时过度消化又可能消化掉一部分精子， 导致精子DNA的损失和减少。
际检案中往住采用复合扩增，检测多个Y-STR基因座，
提高鉴别能力。
三、混合斑中阴道液成分的个人识别
（1）有些案件，需要对混合斑中女性成分作 个人识别。床单上混合斑确定案发现场；
（2）犯罪嫌疑人阴茎龟头拭子或冲洗液中查出 女性基因型，是证明嫌疑人涉案有力证据。
案例
一例强奸幼女案，犯罪嫌疑人诉混合斑是与幼女母亲
第十七章
混合斑检验
教 学 要 求
掌握 确证精液及阴道分泌液混合斑的方法 及个人识别的原则与方法，包括ABO血型、血 清型、酶型及DNA多态性测定。多个个体血液 混合斑鉴定方法，包括ABO血型测定、DNA多 态性检验。 熟悉 混合斑的概念、混合斑的种类及混合 斑检验的意义。
了解
混合斑的血清型与酶型测定
尽可能同时同一条件下检测，进行对比推断。
案例
（1）如某一个嫌疑人强奸一个女子，现场提 取的精液/阴道液混合斑，某一STR基因座DNA 分型结果为3、5、9、10； （2）受害人血液基因型为3、9，则推测精 斑基因型为5、10； （3）若嫌疑人的基因型为5、10，则不能排 除其为作案人。
第二节 精液与阴道液混合斑检验
（三）检测精液特有的成分
1. Y染色体DNA分析
Y-STR是目前混合斑检验中精液个人识别的首选 多态性遗传标记。 Y-STR分析较常染色体STR分析优越之处在于：
① 可确证检材中男性DNA的存在与否，以确定检材 性质。
② 为男性特有。理论上，不需要分离男女成分， 即可获得混合斑中男性成分的遗传标记，与犯罪 嫌疑人直接比对，解释结果更为简单。
是物证检验中最常见的混合斑，常见于性 犯罪案件。 检验的目的主要是检测精液的遗传标记， 确定嫌疑人的基因型；少数要求确定阴道分 泌液的遗传标记，认定受害者。
一、混合斑的确证
(一) 精斑的确证——利用精斑的确证试验 (二) 阴道液斑的确证 1. 细胞学检查 2. 阴道肽酶测定
1.细胞学检查
斑痕浸液离心，沉淀物涂片，HE染色结果：
ABSe,ASe,BSe,OSe,se 无
注：se非分泌型；Se分泌型
注意事项： ⑴ 结合相关案情
⑵ 被害者没有的血型物质可认为来自精斑
⑶ 混合比例影响，注意多处取材。
（二）分离精液和阴道液组分进行检测
进行混合斑DNA分型，关键获得纯净的精子DNA。
1.差异提取法分离精子和阴道上皮细胞DNA
从混合斑中提取精子DNA，目前最常用差异提取法 (differential extraction) ， 或 称 两 步 消 化 法 (two-step lysis)。
混合斑鉴定三类方法比较
对比推断法 检测混合斑遗传标记的所有 分型；简便易行常用，但分析 较复杂，信息量有限 分别进行遗传标记分型， 较可靠 但需分离
分离精液与阴道液 组分
检测精液 特有成分
检测Y染色体遗传标记 较可靠, 但特有的遗传标记有限
（一）对比推断法
1. DNA分型 混合斑个人识别的常规技术：STR基因座分 型技术 对混合斑直接提取DNA进行STR基因座分型， 结果会得到男性案犯和女性受害人的混合分 型图谱，单个基因座的等位基因数目可能超 过3个。 直接与案犯和受害人的参照样本分型结果比 对进行判定。
疑人的衣服或外阴部位检见阴道上皮细胞，确 证存在阴道液(斑) ，检测其遗传标记，如果与
受害者一致，则对认定嫌疑人有重要意义。
在检查嫌疑人时，应用生理盐水冲洗阴茎，收集冲洗
液，沉渣涂片；或用载玻片对包皮腔、阴茎龟状沟作
涂片，检查有无脱落的阴道上皮细胞。 混合斑进行DNA分析时，通常应用二步消化法。用第 一步消化后的上清液提取女性DNA，进行常染色体 STR多态性分析，是目前对阴道分泌液进行个人识别
2．激光捕获显微切激 光 捕 获 显 微 切 割 技 术 ( laser capture
microdissection，LCM) 是一项利用激光在
显微镜下从组织切片中俘获并切割单一类型
细胞群或单个细胞的技术。
操作过程：首先在组织切片上覆盖一层透明的膜， 在显微镜下观察该组织切片，选择某一特殊细胞 后，开启脉冲式红外激光束，使膜融化变得粘性 很强，等到冷却后该位置的细胞就被牢固地粘附 在膜上从而分离细胞。 用LCM技术可以收集有限的检材，排除干扰物质， 使一些现有技术无法检测成功的检材也能检测成 功。
提取混合斑DNA前，有必要做常规镜检。 ⑴ 根据精子的多少确定取检材量，精子较多 →1cm2左右的检材；精子偏少→2cm2以上 ⑵ 根据精子和阴道上皮细胞的比例，结合经验 对笫一步消化的时间、温度、试剂的浓度作出 适当的调整。
为消除二步消化法可能分离不纯的影响，一 般都应从混合斑第一步消化后的上清液中提 取阴道上皮细胞的DNA，从第二步消化液中 提取精子细胞的DNA，分别进行DNA分型， 与受害者和犯罪嫌疑人的DNA比对，排除女 性成分的干扰。
③不需用二步消化过程，避免了二次消化对男性DNA造成的损
失，提高检测阳性率。由于Y-STR分型的灵敏度高，即使遇
到无精子或者少精子的混合斑也能进行分型（对混合斑精 液中的上皮细胞及白细胞等进行分型）。
④ Y-STR呈男性伴性遗传，不与其他染色体重组，除突变外，
在父系的所有男性个体中，包括兄弟、父子、叔侄、堂兄 弟和祖孙等都具有相同的Y-STR单倍型，因此可利用父系亲 属的参考样本进行犯罪嫌疑人的排除推测。
混合斑中精液ABO血型的判定 (表一)
混合斑血型 受害人血型 推测精液的血型 se OSe se se OSe ASe se OSe ASe se OSe Ose,se ASe ASe ASe, Ose,se 排除的精液血型 ABSe, ASe, BSe Ose ABSe, ASe, BSe se ABSe, ASe, BSe ABSe, BSe, OSe, se ABSe, BSe, OSe, se ABSe, Bse
⑤可以确定犯罪嫌疑人的人数
对于单拷贝的Y-STR基
因座，每一个体只有一个等位基因；如果在多个YSTR基因座均检测出2个片段，则提示犯罪嫌疑人至少 是2人，这对于轮奸案件的分析很有意义。
精子细胞比体细胞更稳定，对外界环境的抵抗能力 强，有报道对保存25年的阴道拭子进行Y-STR分型获得 成功。
单个Y-STR基因座的遗传差异度多数为0.5～0.7，实
差异提取法
精子细胞核膜蛋白质富含二硫交联结构， 对去污剂及外源性蛋白酶有相当强抵抗作用。 在混合斑检材中加适量TNE缓冲液、SDS和 蛋白酶K，37℃水浴，3h。 去除基质后，离心，上清液含消化的阴道 上皮细胞DNA，沉淀物即为精子。
沉淀物以TNE缓冲液洗涤数次，加适量TNE
缓冲液、SDS、蛋白酶K和DTT(二硫苏糖醇)， 56℃孵育过夜 在DTT的作用下二硫键断裂，精子细胞膜 破裂，即可获取精子的DNA
发生性关系时所留，并控告被人污告。后鉴定证实女性
DNA与幼女的基因型相同，从而认定了该强奸幼女案。
另一例强奸案，女性阴道拭子、内裤上均未检见人精
斑，现场嫌疑人床单上检见人精斑，但嫌疑人一口咬定 该精斑是其以前所留，不承认是该次强奸所留。结果在 床单的混合斑中检出受害者DNA。认定了强奸事实。
有些性犯罪案件，可能检不出精斑，若能在嫌
混合斑中精液ABO血型的判定 (表二）
BSe Se Ose BSe ABSe se OSe ASe BSe ABSe BSe BSe Bse，Ose， se ABSe ABSe ABSe, Bse ABSe, Ase ABSe, ASe, OSe, se ABSe, ASe, OSe, se ABSe, ASe ASe, BSe, OSe, se ASe, BSe, OSe, se ASe, OSe, se BSe, OSe, se
笫一节 混合斑的特点和检验目的
一、概念