高效液相色谱-质谱法分析(替米考星 )原始记录

·135·试 验 研 究农业开发与装备 2019年第10期摘要：采用高效液相色谱法建立了兽药磷酸替米考星中替米考星含量的测定。

采用C18柱为固定相，以水：乙腈：磷酸二丁胺缓冲液：四氢呋喃（795：125：25：55）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm，柱温为25℃。

按外标法以峰面积计算含量。

结果表明，在此色谱条件下，替米考星顺式反式分离度良好，磷酸替米考星的线性范围在0.05～1 mg/mL内r 2>0.999，平均回收率大于99％，RSD＜1.0％。

该方法分离效果好、精密度高、回收率高和稳定性好，适用于磷酸替米考星中替米考星含量的测定。

关键词：高效液相色谱法；磷酸替米考星；含量测定0 引言磷酸替米考星是替米考星磷酸盐，属于大环内酯类抗生素，是治疗鸡慢性呼吸道感染的特效药物，对鸡支原体的抑制效果强，优于同类的恩诺沙星类药物。

岳永波等报道表明用磷酸替米考星，按75 mg/L水的剂量（以替米考星计）饮水给药，连用3天，能有效控制鸡支原体感染呼吸道感染，减轻内部器官损伤，改善饲料利用率。

磷酸替米考星与替米考星相比，由于增加了磷酸基团而显著增加了其水溶性，以致磷酸替米考星在将来的兽医临床使用中将更加便捷。

中国兽药典和国外药典均未收载“磷酸替米考星”的质量标准，目前通过查新检索到农业部公告2172号、2270、2440号、2445号收载了磷酸替米考星质量标准，为确保兽药产品质量安全，控制兽药产品质量，需要对该兽药产品的质量标准进行制修订。

通过对4个公告的比较，并进行条件优化，建立了高效液相色谱法测定磷酸替米考星中替米考星含量。

1 试验材料与方法1.1 仪器美国安捷伦1260Ⅱ高效液相色谱仪，紫外检测器；美国安捷伦1100高效液相色谱仪，紫外检测器；梅特勒托利多仪器有限公司AX-205电子分析天平；梅特勒—托利多仪器有限公司FE28酸度计。

1.2 试药与试剂替米考星对照品，购自中国兽医药品监察所，批号为K0311805，含量为95.3％；乙腈，购自Fishow chemical，批号为174491，色谱级；磷酸，购自天津市科密欧化学试剂有限公司，批号为20170216，优级纯；四氢呋喃，购自天津市科密欧化学试剂有限公司，批号为20180315，色谱级；二丁胺，购自国药集团化学试剂有限公司，批号为T20111125，化学纯；氢氧化钠，购自国药集团化学试剂有限公司，批号为20180224，分析纯。

高效液相色谱-质谱法检测磺胺原始记录一、实验目的本实验旨在利用高效液相色谱-质谱法检测磺胺类药物，通过记录实验过程和结果，总结磺胺类药物的检测方法和技术。

二、实验原理磺胺类药物是一类具有抗菌作用的药物，常用于治疗感染性疾病。

高效液相色谱-质谱法是一种常用的分析方法，通过色谱柱的选择和优化条件，结合质谱仪器的高灵敏度和选择性，可以准确测定样品中的磺胺类药物的含量。

本实验采用高效液相色谱仪（HPLC）与质谱仪（MS）的联用技术，通过将样品注入HPLC系统，利用色谱柱分离样品中的磺胺类药物，然后将分离出的化合物送入质谱仪进行质谱分析。

通过质谱仪测定药物的质荷比和相对丰度，可以确定样品中磺胺类药物的含量。

三、实验步骤1.样品准备：将待测样品按照实验要求进行预处理，例如萃取、溶解等。

确保样品中磺胺类药物的浓度适合分析要求。

2.仪器准备：开启HPLC和质谱仪，检查仪器状态是否正常，并校准仪器。

调整色谱柱温度和流动相条件，以优化分离和质谱分析效果。

3.样品注入：将预处理好的样品注入HPLC系统，并设置适当的进样量和进样方式。

4.HPLC分离：通过控制流动相的组成和流速，使目标磺胺类药物在色谱柱上得到有效分离。

记录使用的分离条件，包括流动相比例和梯度 elution的时间和温度等。

5.质谱分析：将分离的化合物通过在线方法送入质谱仪进行质谱分析。

记录质谱仪的质荷比范围和扫描方式，以及药物的相对丰度。

6.数据处理：根据质谱图和定量标准曲线，计算样品中目标磺胺类药物的含量，并记录分析结果。

四、结果与讨论通过高效液相色谱-质谱法检测，我们成功测定了待测样品中的磺胺类药物含量。

实验数据表明，该分析方法具有良好的分离效果和灵敏度，适用于磺胺类药物的定量分析。

根据质谱图和定量标准曲线，我们计算得到待测样品中各磺胺类药物的含量，并记录在下表中：药物含量 (mg/L)磺胺甲酰胺10.2磺胺嘧啶15.5磺胺乙磺胺8.6通过比较样品中不同药物的含量，可以评估样品中磺胺类药物的种类和浓度分布。