高效液相色谱法测定复方阿司匹林中有效成分

高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量本文采用高效液相色谱法（HPLC-VWD）对阿司匹林肠溶片中成分阿司匹林进行测定，对方法的系统适用性试验、特异性试验、精密度试验、检测限、定量限、线性关系和线性范围考察、重复性试验、准确度试验（加样回收试验）进行验证，证实本方法确实可靠。

本方法可测定浓度在0.999862mg/mL-0.01999724 mg/mL间的阿司匹林，检测下限可达0.1ug/mL。

标签：阿司匹林;HPLC-VWD;方法验证阿司匹林肠溶片的质量标准中，监测阿司匹林肠溶片中的阿司匹林含量是一项重要指标[1]。

本文采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中的阿司匹林，分别对系统适用性试验、特异性试验、精密度试验、检测限、定量限、线性关系和线性范围考察、重复性试验、准确度试验（加样回收试验）进行验证[2]。

一、仪器与材料1.1 样品阿司匹林肠溶片（25mg）市售样品。

1.2 仪器及试药高效液相色谱仪：Thermo Fisher Ultimate 3000（VWD检测器）。

超声仪：上海科导SK7210LHC超声仪，35KHz。

色谱柱：Welch Xtimate C18（5um，150×4.6mm）。

0.45um有机性样品滤膜。

天平：赛多利斯电子天平（BSA224S-CW）（100g，0.01mg;220g，0.1g）;梅特勒-托利多电子天平（MX5）（3g，0.001mg）。

试剂：甲醇，色谱级，德国默克，I866432 601。

乙腈：色谱纯，德国默克，JA050820。

四氢呋喃，色谱纯，德国默克，I826801615。

冰醋酸，分析纯，国药集团化学试剂有限公司，20140326。

水，为GB/T6682中规定的一级水。

阿司匹林，中国食品药品检定研究院，批号：100113-201405，纯度：99.8%。

水杨酸，中国食品药品检定研究院，批号：100106-201104，纯度：99.9%。

高效液相色谱法测定阿司匹林片的含量
一、目的
1.熟悉HPLC法测定的原理及操作。

2.掌握外标法测定阿司匹林片含量。

二、仪器与试药
1.仪器
美国PE型高效液相色谱仪Mettler AL204电子天平
容量瓶规格：50mL、100mL 刻度移液管规格：5mL
漏斗定量滤纸（直径10cm）
超声仪
2.试药
阿司匹林片规格：0.3g 阿司匹林对照品冰醋酸
氢氧化钾色谱甲醇超纯水
三、实验内容
1.色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰醋酸（50：50）为流动相；流速为每分钟约1.0mL；检测波长280nm。

理论板数按阿莫西林峰计算应不低于1500。

2.对照溶液配制：取阿莫西林对照品适量，精密称定后，加1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并定量稀释制成每1mL中含50μg的溶液
3.样品测定：精密称取细粉适量（约相当于阿司匹林细粉0.05g），置50mL量瓶中，加1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液3mL,置50 mL量瓶中，加1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，取续滤液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照溶液同法测定。

按外标法以峰面积计算出样品中阿司匹林（C9H8O4）的含量。

本品含阿莫西林（C9H8O4）应为标示量的93.0%～107.0%。

四、注意事项：
1.高效液相色谱仪严格按照仪器操作规程操作。

2.小心进样操作，以免进样失败或损坏进样器。

五、思考题
高效液相色谱仪操作的注意事项有哪些？
六、参考文献
《中国药典》2010年版二部，285，化学工业出版社。

高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量-药学论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——阿司匹林肠溶片为非甾体类抗炎药，临床可用于抗血栓，也可用于治疗不稳定性心绞痛，是《国家基本药物目录》列入的品种。

本文采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，该方法简单，快速，重现性好，回收率高，可用于该制剂的质量控制。

1 仪器与试药1.1 仪器：大连依利特P230 型高效液相色谱仪；UV230+紫外可见检测器；手动进样器；超声仪（型号KQ5200E，功率200W，频率40KHz）；电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，0.0001g）。

1.2 试药：阿司匹林对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100113）；阿司匹林肠溶片（亚宝药业太原制药有限公司，批号：131210；石家庄康力药业有限公司，批号：121037；神威药业集团有限公司，批号：1306072），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱为Hypersil ODS2 柱（250mm4.6mm，5m）；流动相：甲醇∶0.5%乙酸溶液（37∶63）；流速：0.8mlmin-1；柱温：25∶；检测波长：267nm；理论板数按阿司匹林计不得少于3000。

2.2 溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取一定量阿司匹林对照品，置100ml 量瓶中，加1%醋酸甲醇溶解并定容制成100gml-1的对照品溶液。

供试品溶液的制备：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）约0.03g，精密称定，置100ml 量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。

阴性样品溶液的制备：按处方比例取辅料制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。

2.3 专属性实验：在2.1色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10L，注入液相色谱仪，记录色谱图。

复方阿司匹林有效成分的分析报告1 前言复方阿司匹林 (APC)是应用广泛的解热镇痛药，其有效成分为乙酰水杨酸 (阿司匹林)、非那西汀和咖啡因。

乙酰水杨酸易水解，在生产及贮藏期间容易水解成水杨酸。

采用HPLC 将上述各组分分离时，HPLC 中流动相的组成和pH 对组分的滞留和分离影响大，因此需要找出合理的分析方案用高效液相色谱法测定复方阿司匹林中的乙酰水杨酸、非那西汀、咖啡因和水杨酸的含量。

我们对复方阿司匹林有效成分如何测定进行了详细的讨论，讨论的具体内容如下：（1）了解复方阿司匹林①了解复方阿司匹林的有效成分及其分子结构。

②参考与复方阿司匹林的测定方法相关的文献资料。

（2）分析过程①了解高效液相色谱法及其原理并讨论出高效液相色谱法主要类型中最适合对复方阿司匹林有效成分的类型。

②对高效液相色谱法分析条件的确定。

③掌握高效液相色谱法如何进行定性定量分析。

④了解高效液相色谱法的使用范围。

2 复方阿司匹林的有效成分及其分子结构2.1有效成分乙酰水杨酸 (阿司匹林)、非那西汀和咖啡因。

2.2主要成分的分子结构及分子式乙酰水杨酸：C 9H 8O 4 非那西汀：C 10H 13NO 2 咖啡因：C 8H 10N 4O 23 复方阿司匹林的测定方法文献资料综述3.1 几种测定方法介绍容量分析法、紫外分光光度法、酸碱滴定法、高效液相色谱分析法。

例如中国药典[1]中采用容量分析法、赵怀清等[2]用胶束薄层色谱法、罗国安等[3]用PLS－紫外光光度法、左文坚等[4]用区带毛细管电泳法等进行了测试研究。

但我们使用的方法是高效液相色谱法。

3.2 高效液相色谱法的简单介绍高效液相色谱法是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离分析技术。

其流动相为液体。

在经典的液体柱色谱法基础上，引入了气相色谱法的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分析速度快，分离效率高和操作自动化。

它可用来进行液固吸附、液液分配、离子交换和空间排阻色谱分析，应用非常广泛。

临床医药文献电子杂志Electronic Journal of Clinical Medical Literature2019 年 第 6 卷第 30 期2019 Vol.6 No.30169·实验研究·高效液相色谱法测定复方阿司匹林片剂的含量葛炜炜（江苏省南通市中医院，江苏 南通 226000）【摘要】目的 使用高效液相色谱法测定复发阿司匹林片剂中阿司匹林的含量。

方法 仪器选择岛津安捷伦液相色谱仪，色谱柱采用Inertsil ODS-SP ，柱温30℃，进样量10 uL ，流动相采用水-乙腈，流速1.0 mL/min ，波长237 mm 。

结果 浓度在0.01～0.05 mg/mL 范围内的阿司匹林线性关系良好，平均回收率为101.81%，RSD 为0.69%。

结论 高效液相色谱法简单准确，在测定复方阿司匹林片剂中阿司匹林含量时十分适用。

【关键词】高效液相色谱法；复发阿司匹林片；含量测定【中图分类号】R917 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.30.169.01复方阿司匹林片是非那西丁和阿司匹林两种药物的复方制剂，质量比约为1：50（8.4mg ：400mg ），临床药学研究认为[1]复方阿司匹林片的作用大于非那西丁和阿司匹林两种药物单个作用的叠加，在治疗稳定或不稳定心绞痛、急性心肌梗死时有显著疗效，但复方阿司匹林片稳定性较差，配伍较为严重，因此在临床应用并不广泛，采取有效的检测方法对复方阿司匹林片各物质含量进行测定是分析药物稳定性，提高用药合理性的基础前提。

有研究指出[2-3]使用高效液相色谱法能准确测定阿司匹林含量，但采用水-甲醇的流动相体系时阿司匹林和水杨酸分离度不佳，降解严重，检测精密度无法达到要求。

本次研究采取水-乙腈为流动相，建立高效液相色谱法进行检测，结果表明分离度和准确性良好，现详述如下。

1 仪 器1.1 仪器和试剂仪器选择岛津安捷伦液相色谱仪，包括紫外检测器、自动进样器和四元输液泵。

阿司匹林的纯度检测及含量测定阿司匹林，作为一种常见的药物，在医药领域发挥着重要作用。

无论是用于缓解疼痛、退热，还是在心血管疾病的预防和治疗中，其纯度和含量的准确测定都至关重要。

这不仅关系到药物的疗效，还直接影响着患者的健康和安全。

要了解阿司匹林的纯度检测及含量测定，首先得清楚阿司匹林的化学性质。

阿司匹林的化学名称为乙酰水杨酸，其分子结构包含一个乙酰基和一个水杨酸基团。

纯度检测的方法多种多样。

其中，色谱法是一种常用且有效的手段。

高效液相色谱法（HPLC）可以精确地分离和检测阿司匹林中的杂质。

在进行 HPLC 分析时，样品会被注入到色谱柱中，不同的成分会在流动相的带动下以不同的速度通过色谱柱，从而实现分离。

通过与标准品的对比，可以判断样品中是否存在杂质以及杂质的种类和含量。

另一种常用的纯度检测方法是红外光谱法。

阿司匹林具有特定的红外吸收峰，通过对样品红外光谱的分析，可以与标准图谱进行对比，从而判断其纯度。

如果样品的红外光谱与标准图谱存在差异，就可能表明存在杂质。

而对于阿司匹林的含量测定，容量分析法是经典的方法之一。

比如酸碱滴定法，利用阿司匹林分子中的羧基能与碱发生中和反应的性质。

首先将阿司匹林溶解在适当的溶剂中，然后用已知浓度的碱溶液进行滴定，通过消耗碱溶液的体积来计算阿司匹林的含量。

此外，还有紫外分光光度法也常用于阿司匹林的含量测定。

阿司匹林在特定波长下具有一定的吸光度，通过测量样品在该波长下的吸光度，并与标准曲线对比，就可以计算出阿司匹林的含量。

在进行纯度检测和含量测定的实验过程中，有许多需要注意的事项。

首先是样品的处理，要确保样品充分溶解并且不发生分解或变质。

其次，实验所使用的试剂和仪器都需要经过严格的校准和验证，以保证实验结果的准确性。

在实际应用中，阿司匹林的纯度和含量测定对于药品生产企业来说意义重大。

在生产过程中，通过定期对产品进行检测，可以及时发现问题，调整生产工艺，确保产品质量符合标准。

CHINESE COMMUNITY DOCTORS 实验研究中国社区医师2020年第36卷第27期在2010年版《中国药典》阿司匹林类药物均包含了其有效成分含量测定项以及游离水杨酸限量的检查，两者的分析与处理方式一样，但检测波长存在差异，阿司匹林检测波长为276nm，水杨酸为303nm。

药典指出，测定阿司匹林类药物的有效成分含量与游离水杨酸限量时，采用甲醇处理样品易挥发，且易产生误差[1]。

本研究采用高效液相法(HPLC 法)对其有效成分含量与游离水杨酸限量进行测定，探究该方法的检测效果，为临床后期检测提供参考依据。

资料与方法仪器与试药：仪器为LC-2010A 高效液相色谱仪；VIS-7200A 型可见光分度计。

阿司匹林与水杨酸对照物；阿司匹林肠溶片，阿司匹林泡腾片；色谱纯包括甲醇与乙腈；超纯水；分析纯为其余试剂。

方法与结果：①制备溶液：将水杨酸对照品50mg 置于量瓶50mL 中，用1%冰乙酸乙醇溶液溶解定容，获得水杨酸贮备液1mg/mL。

再于量瓶50mL 中倒入贮备液5mL，再次定容，得到0.1mg/mL 的水杨酸工作液。

于量瓶100mL 内置入阿司匹林50mg ，5份，分别置入0、1.5mL、5.0mL、7.5mL、15mL 的水杨酸工作液1mg/mL，再用1%冰乙酸乙醇溶液溶解定容，得到0、0.3%、1.0%、1.5%、3.0%水杨酸的0.5mg/mL 阿司匹林对照液[2-3]。

取试药10片，研磨，并在100mL 烧杯中置入适量，并加上一定量的1%冰乙酸乙醇溶液，经过10min 超声，定量置入的量瓶100mL 中，随后过1%冰乙酸乙醇溶液定容并离心，供试品为离心后的上清液，阿司匹林肠溶片与上述制备方法相同，最终获得阴性对照液。

②色谱条件：Sepax GP-C18柱色谱柱，0.2%磷酸水溶液-乙腈流动相，测定28min，30℃，1.0mL/min 流速，303nm 波长，5μL 进样体积[4-5]。

高效液相色谱法测定复方阿司匹林中有效成分
用超纯水稀至lOOOmL摇匀。

4、液相色谱分离条件：G&色谱柱；流动相：甲醇：1%冰穂酸溶液(50: 50); 流速：1.0
ml/min；检测波长：276 nm；柱温：30°C o
5、标准曲线制作：将浓度分别为25、5()、125、250j.ig/mL阿司匹林标准溶液，进样
2()pL,二次进样，以浓度C(Mg/mL)对应二次测定峰面积平均值A制作工作曲线，并进行回归分析，得回归方程。

6、样品测定：将样品溶液用0.45pm的微孔滤膜过滤，进样20P L,分别进样二次，用回归
方程计算阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量。

五、数据记录及处理
1•数据记录
C(ppm)Ai A2A平均
000
25177165.4171.2
50325.9328.6327.25
125796.9803.1800
250160&11609.91609
c样品672.1665.7668.9
2.标准曲线的绘制:
根据上表数据，以浓度(C)为横坐标，峰面积(A平均)为纵坐标作图，得到标准曲线如下图：
阿司匹林标准曲线
如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合!。