双向电泳技术在蛋白质组学研究中的应用

双向电泳技术的原理及应用1. 原理双向电泳技术是一种分离和鉴定蛋白质的常用方法。

它结合了凝胶电泳和电泳移动的优势，可以在同一实验中实现更高的分辨率和更好的分离效果。

双向电泳的原理基于两个关键因素：分子大小和电荷。

在实验中，蛋白质样品首先沿一个方向进行电泳。

由于蛋白质的不同大小和电荷，它们会在凝胶中形成不同的带状图案。

然后，凝胶会旋转90度，使蛋白质在垂直方向上进行电泳。

这样一来，蛋白质会在另一个方向上发生分离。

双向电泳的核心是双向凝胶，其结构类似于二维网络。

在第一个方向上，凝胶中的蛋白质会形成一维图案，而在第二个方向上，蛋白质会形成另一维图案。

通过对这两个图案的分析，可以得到更为准确的蛋白质信息。

2. 应用2.1 蛋白质分离和纯化双向电泳技术在蛋白质分离和纯化中有着广泛的应用。

由于双向电泳可以提供更高的分辨率，可以分离和鉴定更多的蛋白质。

这在研究蛋白质结构和功能以及疾病诊断中具有重要意义。

2.2 蛋白质组学研究双向电泳技术在蛋白质组学研究中发挥着重要作用。

通过双向电泳，可以分离出复杂样品中的蛋白质，并获得其质量和电荷信息。

这些信息可以用于鉴定蛋白质和研究其功能。

2.3 药物研发双向电泳技术在药物研发中也有广泛的应用。

通过双向电泳，可以分离和鉴定药物的靶点，进一步了解药物与蛋白质的相互作用机制。

这对于药物设计和优化具有重要意义。

2.4 分子生物学研究双向电泳技术在分子生物学研究中有着重要的应用。

通过双向电泳，可以鉴定蛋白质的表达变化，从而了解基因表达调控机制。

这对于研究细胞功能和疾病发生机制具有重要意义。

2.5 环境监测双向电泳技术在环境监测中也有着广泛的应用。

通过双向电泳，可以分离和鉴定环境中的污染物，从而评估环境质量和污染程度。

这对于环境保护和治理具有重要意义。

3. 优缺点3.1 优点•分辨率高：双向电泳可以提供更高的分辨率，可以分离和鉴定更多的蛋白质。

•信息丰富：双向电泳可以获得蛋白质的质量和电荷信息，有助于了解蛋白质的结构和功能。

荧光差异显示双向电泳技术原理双向电泳是一种常用的蛋白质分离技术，通过电场的作用将蛋白质样品分离成不同的带状区域。

而荧光差异显示双向电泳技术则是在双向电泳的基础上，利用荧光染料对蛋白质进行标记，使得分离出的蛋白质带状区域能够以荧光的形式显示出来。

本文将详细介绍荧光差异显示双向电泳技术的原理及其在蛋白质研究中的应用。

荧光差异显示双向电泳技术的原理主要包括样品制备、电泳分离、荧光染色和荧光成像等步骤。

样品制备是荧光差异显示双向电泳的关键步骤之一。

样品制备的目的是将蛋白质从复杂的生物体中提取出来，并使其具备较好的电泳性质。

常见的样品制备方法包括胶束电泳法和硅胶柱层析法等。

胶束电泳法是通过洗涤剂将蛋白质从细胞中溶解出来，形成胶束溶液，再经过离心等步骤得到纯化的蛋白质样品。

硅胶柱层析法则是利用硅胶柱将蛋白质样品分离纯化，去除杂质。

样品制备的关键在于保证蛋白质样品的纯度和完整性，以便后续的电泳分离。

电泳分离是荧光差异显示双向电泳的核心步骤。

电泳分离是通过电场的作用将蛋白质样品分离成不同的带状区域。

由于蛋白质的分子量和电荷差异，蛋白质在电场中会产生不同的迁移速度，从而实现分离。

双向电泳是指在水平方向和垂直方向施加交叉电场，使得蛋白质样品能够同时在两个方向上进行迁移，从而增加了分离效果。

电泳分离的关键在于电场的施加和控制，以及电泳胶的选择和制备。

然后，荧光染色是荧光差异显示双向电泳的重要步骤之一。

荧光染色是通过将蛋白质样品与荧光染料结合，使得分离出的蛋白质能够以荧光的形式显示出来。

常用的荧光染料包括SYPRO Ruby、CyDye和FluorProtein等。

荧光染色的关键在于染料的选择和染色条件的优化，以确保荧光信号的强度和稳定性。

荧光成像是荧光差异显示双向电泳的最后一步。

荧光成像是通过荧光成像仪将荧光信号转化为图像，以便后续的分析和解读。

荧光成像的关键在于成像仪的选择和参数设置，以及荧光信号的采集和处理。

荧光差异显示双向电泳技术在蛋白质研究中具有广泛的应用。

¹双向电泳技术原理及其应用刘上峰 傅俊江 综述 李麓芸 审校(中南大学湘雅医学院人类生殖工程研究室,湖南长沙410078)摘要:双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一,本文对其基本原理、分辨率、可重复性、相关数据库、减法分析等作了介绍,并对其今后的发展方向作了展望。

关键词:双向电泳; 蛋白质组; 数据库;减法分析中图分类号:R318133 文献标识码:A 文章编号:100121773(2002)022*******随着后基因组时代的到来,蛋白质组学应运而生。

双向电泳(tw o 2dimensional electrophoresis,22D E)作为蛋白质组研究的三大关键核心技术之一(另二种是质谱技术和计算机图像数据处理与蛋白质组数据库即蛋白质组信息学),仍然是目前分析组份复杂蛋白质分辨率最高的工具,因此日益受到人们的广泛关注。

1 双向电泳的基本原理首先根据蛋白质等电点不同在pH 梯度胶中等电聚焦(isoelec tric f ocusing,IEF)将其分离,然后按照它们的分子量大小在垂直方向或水平方向进行十二烷基磺酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS 2PAG E)第二次分离。

根据第一向等电聚焦条件的不同,可将22DE 分为三种系统:第一种系统是在聚丙烯酰胺凝胶中进行,两性电解质在外加电场作用下形成梯度,该系统称为IS O 2D A L T 。

其主要缺点是pH 梯度不稳定,重复性差,上样量低,不利于不同实验室间进行图谱比较;如果第一向电泳使用丙烯酰胺和Immobilines 共聚,形成具有pH 梯度的凝胶,这种系统称为IPG 2D AL T 系统,该系统pH 梯度稳定,不依赖于外加电场,基本上克服了ISO 2D AL T 的主要缺点,无论是重复性和上样量均优于I SO 2D AL T;第三种是非平衡pH 梯度电泳(nonequilibrium pH gradient electrophoresis,NEPhG E),主要用于分离碱性蛋白质,电泳展开时间相对比较短。

双向电泳技术在植物蛋白质组学研究中的应用摘要从双向电泳的历史、原理、操作步骤及其在植物蛋白质组学研究中的应用等几方面进行综合阐述，最后提出双向电泳技术中存在的一些问题，并展望了其在植物蛋白质组学研究中的未来应用前景。

关键词蛋白质组学；双向电泳技术；植物研究表明遗传信息通过基因携带，但基因结构的相对稳定性、数量的有限性，与生命现象的多变性、复杂性存在明显的差异[1]。

为此，研究认为在所有生物体的细胞、组织、细胞器中，各种代谢反应、生理功能的维持均由各组成部分的表面、内部的蛋白质来完成。

蛋白质组是Wilkin S等在1994年第1次提出的。

1997年蛋白质组的定义被其创造者重申为：“蛋白质组指的是一个基因组所表达的蛋白质。

”2000年人类基因组序列草图的完成标志着“后基因组时代”的到来。

蛋白质组学（proteomics）的概念最终被定义为“一个基因组、或一个细胞、组织在特定的生理和病理条件下表达的所有蛋白质”。

蛋白质组具有特殊性和多样性，其研究的三大核心技术分别是双向电泳技术（two-dimensional gel electrophoresis，2-DE）、生物质谱技术和生物信息学[2-3]。

其中，2-DE作为蛋白质分离的重要手段，是目前唯一可以在一块凝胶上同时分离上万个蛋白质的方法，且分离纯度可达90%以上。

1 双向电泳技术的历史双向电泳技术自诞生以来，一直在不断的发展、改进。

1975年O`Farrell对大肠杆菌、老鼠及几尼猪蛋白质的研究中首次采用了双向电泳技术，称为ISO-DALT（等电点-道尔顿）。

其第一向是将载体两性电解质（CA）添加到丙烯酰胺凝胶中，凝胶聚合后在电场作用下形成连续的pH梯度进行等电聚焦；第二向是聚焦后的凝胶在含有SDS的缓冲液中平衡后，用琼脂糖包埋到垂直板SDS 凝胶的浓缩胶上，形成不连续的SDS梯度凝胶电泳[4]。

这种双向电泳蛋白质由于上样量低，溶解性较差，可能会造成负性部分碱性蛋白丢失。

双向电泳的原理及应用1. 原理双向电泳是一种重要的分析技术，常用于蛋白质分离与分析。

其原理基于电泳的基本原理，即物质在电场中受到电荷、质量和形状等因素的共同作用，从而在电场中发生运动。

双向电泳通过对样品进行两个方向的电场应用，实现更高分辨率和更好的分离效果。

在双向电泳中，通常使用一种特殊的电泳胶介质，如聚丙烯酰胺凝胶。

这种凝胶具有较低的电导率，在电场作用下可以形成均匀的凝胶基质。

样品中的蛋白质等分子在凝胶中进行移动，并且根据其电荷、大小和形状等特性，会在凝胶中形成不同的运动带。

双向电泳分为两个步骤：水平电泳和垂直电泳。

在水平电泳过程中，样品在水平方向上进行迁移，此时电场垂直于凝胶表面。

水平电泳的主要目的是将样品在水平方向上分离。

在水平电泳完成后，凝胶需要旋转90度，以改变电场的方向。

然后进行垂直电泳，在垂直方向上进行迁移实现更好的分离效果。

2. 应用双向电泳在生化研究、蛋白质分析和疾病诊断等领域有着广泛的应用。

以下是双向电泳的几个主要应用：2.1 蛋白质分离与分析双向电泳被广泛用于蛋白质的分离与分析。

由于双向电泳具有更高的分辨率和更好的分离效果，因此可以更准确地分离出复杂的蛋白质混合物。

通过双向电泳，可以确定蛋白质的分子量、等电点和表达量等参数，从而有助于对蛋白质的功能和调控机制进行研究。

2.2 蛋白质组学研究蛋白质组学是研究生物体内所有蛋白质的组成、结构、功能和相互作用等的科学研究领域。

双向电泳作为蛋白质组学研究中的一种重要技术，可以用于发现新的蛋白质、识别蛋白质变异以及研究蛋白质表达与疾病之间的关系。

2.3 差异蛋白质的筛选差异蛋白质是指在不同生物状态或疾病状态下表达差异显著的蛋白质。

双向电泳技术可以用于筛选并分离出差异蛋白质，通过比较不同样品中的蛋白质模式，可以挖掘出与特定生物过程、疾病发生和进展相关联的差异蛋白质。

2.4 新药研发与药物安全性评价双向电泳技术可以应用于新药研发以及药物安全性评价等领域。

双向电泳的原理和应用1. 原理双向电泳（Bidirectional Electrophoresis）是一种常用的电泳技术，可以有效分离和分析复杂样品中的蛋白质和核酸。

其原理是基于物质在电场中的带电性质和不同分子的迁移速度差异。

双向电泳采用两个电场分别作用于样品，一个在水平方向，另一个在垂直方向。

这两个电场的方向相反，使得样品分子在两个方向上均受到电场力的作用。

在水平方向上，电场力使得样品分子在凝胶中做两个方向的扩散；在垂直方向上，电荷的作用力使得样品分子沿凝胶向电极方向迁移。

通过双向电泳，样品分子在水平和垂直方向上的运动会发生偏移，从而实现蛋白质和核酸的分离。

根据分子的大小、形状和电荷等特性，不同的分子在双向电泳中会有不同的迁移速度，从而形成不同的带状图案。

这些图案可以被进一步分析和检测。

2. 应用双向电泳在生物科学研究和生物医学应用中具有广泛的应用，主要体现在以下几个方面：2.1 蛋白质分析双向电泳是蛋白质分析的一种重要方法。

通过双向电泳，可以将混合蛋白质样品进行分离，从而得到各自独立的蛋白质条带。

根据蛋白质条带的位置和数量可以推测样品中不同蛋白质的类型和相对含量。

这对于研究蛋白质的功能和相互作用非常有帮助。

2.2 新药开发双向电泳可以用于筛选和分析药物作用的靶向蛋白质。

通过比较药物处理前后的双向电泳图案，可以确定哪些蛋白质与药物有关。

这对于新药的开发和评估起到了重要的作用。

2.3 基因分析双向电泳也可以用于基因分析。

通过将DNA样品置于双向电泳中，可以将DNA的不同片段分离和检测。

这对于研究基因的结构、功能和突变等起到了关键作用。

2.4 生物标记物检测在临床诊断中，双向电泳可以用于检测特定蛋白质标记物，如肿瘤标志物。

通过分析血液或组织中的蛋白质条带，可以辅助诊断和评估疾病的发展和治疗效果。

结论双向电泳以其独特的分离原理和广泛的应用领域，在生物科学研究和生物医学领域发挥着越来越重要的作用。

它在蛋白质分析、新药开发、基因分析和生物标记物检测等方面具有广阔的应用前景。

双向电泳法双向电泳法（Bidimensional Electrophoresis，2-DE）是一种常用的蛋白质分离技术，可以同时分析样品中上千种蛋白质。

本文将详细介绍双向电泳法的原理、步骤和应用。

原理双向电泳法结合了等电聚焦（IEF）和SDS-PAGE两种技术，通过两个维度的分离将复杂的蛋白质混合物分解为一系列单独的斑点。

在第一维度中，根据蛋白质的等电点（pI）进行分离；在第二维度中，根据蛋白质的分子量进行分离。

通过将这两个维度的分离结果叠加，可以获得高分辨率的蛋白质图谱。

双向电泳法的关键步骤如下：1.等电聚焦（IEF）：在第一维度中，使用等电聚焦技术将样品中的蛋白质按照其等电点进行分离。

等电聚焦是一种基于蛋白质在电场中向氧化物离子（OH-）或氢离子（H+）方向移动的分离方法。

在等电聚焦过程中，蛋白质会在pH梯度中向其等电点迁移，直到净电荷为零。

通过控制pH梯度和应用的电压，可以将蛋白质在等电聚焦过程中分离开。

2.SDS-PAGE分离：在第二维度中，将第一维度的等电聚焦凝胶与SDS-PAGE凝胶垂直叠加。

在SDS-PAGE凝胶中，蛋白质通过聚丙烯酰胺凝胶的孔隙随着电场的作用向阳极迁移。

由于SDS（十二烷基硫酸钠）的存在，蛋白质在SDS-PAGE凝胶中的迁移速度与其分子量成反比。

因此，蛋白质在SDS-PAGE 凝胶中会根据其分子量进行分离。

3.染色和分析：经过双向电泳分离后，凝胶可以通过染色方法显示出一系列斑点，每个斑点代表一个蛋白质。

常用的染色方法包括银染法、荧光染色、贵金属染色等。

对于银染法，它在灵敏度和线性范围上具有优势。

染色后可以使用成像设备捕捉图像并进行定量分析。

通过对斑点的比较和定量，可以识别不同样品之间的差异和变化。

步骤双向电泳法的步骤如下：1.样品制备：将待分析的生物样品（如细胞提取物）进行蛋白质提取，并使得蛋白质在石蜡中可溶解。

常用的方法包括总蛋白提取、亲和层析、激光捕获等。

2.等电聚焦（IEF）：将蛋白质样品与具有连续pH梯度的凝胶进行接触。

(4)c. 图像分析及数据处理(3)经活检及病理证实，有 12 条为扩张型心肌病特有的蛋白。

(6)RA 和 OA ：类风湿关节炎 (RA) 是一种常见的慢性炎性关节疾病，本病侵犯多个关节，主要累及手足小关节，病情迁延反复，主要的病理变化为关节滑膜的慢性炎症，细胞侵润，血管翳形成，软骨及骨组织侵蚀，导致关节结构的破坏，功能丧失。

而骨性关节炎 (OA) 其基本病理改变为多种致病因素引起的进行性关节软骨变性，破坏及丧失，关节软骨及软骨下骨边缘骨赘形成，由此引起一系列的关节症状和体征。

有研究者对滑膜细胞进行原代培养，应用流式细胞仪鉴定滑膜细胞类型，提取蛋白进行双向电泳分离，比较 RA 与 OA 成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-Like Syno-viocytes ， FLS) 蛋白酪氨酸磷酸化状态的差异，结果显示： RAFLS 蛋白酪氨酸磷酸化较 OAFLS 明显增多，其中以相对分子质量 42 × 10 3 ~95 × 10 3 间蛋白酪氨酸磷酸化位点居多，对其结果进行灰度扫描， RAFLS 灰度扫描值为 4227672 ± 8947 ，OAFLS 为 663480 ± 7962 ， RAFLS 的灰度扫描值约为 OAFLS 的 6.5倍，两者具有非常显著性差异 (T= 2.820 ， P<0.01) 。

1980 年 Hunter 首先发现酪氨酸激酶 (PTK) ，许多生长因子受体都具有 PTK 活性，一半以上的癌基因产物也具有 PTK 活性，他发现酪氨酸磷酸化比例虽小，但却与细胞生长、增殖关系密切，很可能是正常细胞与肿瘤细胞相互转化的关键，癌基因活化后， PTK 活性大大增加。

1992 年，Williams 等研究发现， RA 滑膜细胞中的 PTK 活性远远高于 OA ，这可能是导致 RA 滑膜细胞转化特性而呈持续活化状态的关键，作者推测RAFLS 可能存在原癌基因的活化或突变，或多种生长因子受体的持续激活，从而导致转化细胞的外观表现并伴有 PTK 活性的增高。

蛋白质双向电泳【实验目的】1、学习和掌握蛋白质双向电泳的基本原理和方法。

2、了解双向电泳技术在蛋白质组学研究中的应用。

【实验原理】蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦（Isoelectrofocusing, IEF），根据蛋白质的等电点（pI,isoelectric point）不同进行分离；第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），按蛋白质亚基分子量大小(Mr, relative molecule)进行分离。

经过电荷和分子量两次分离后，可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。

等电聚焦(IEF, isoelectric focusing)是一种特殊的聚丙烯酰胺凝胶电泳，其特点是在凝胶中加入一种两性电解质载体，从而使凝胶在电场中形成连续的pH梯度。

蛋白质是典型的两性电解质分子，它在大于其等电点的pH环境中以阴离子形式向电场的正极移动，在小于其等电点的pH环境中以阳离子形式向负极移动。

这种泳动只有在等于等电点的pH环境中才停止。

如果在一种pH梯度的环境中将含有各种不同等电点的蛋白质混合样品进行电泳，那么在电场作用下，不管这一群混杂的蛋白质分子原始分布如何，各蛋白质分子将按照它们各自的等电点大小在pH梯度相对应的位置进行聚集经过一定时间后，不同的蛋白质组分便分割在不同的区域之中。

这个过程称作等电聚焦，蛋白质聚集的部位蛋白质所带电荷为零，测定此部位的pH值，即可知该蛋白质的等电点。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），主要用于测定蛋白质亚基分子量，SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。

强还原剂（DTT，二硫苏糖醇）则能使半光氨酸残基之间的二硫键段裂。

在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，分子被解聚成它们的多肽链。

解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这就消除了不同分子之间原有电荷的差异。

双向电泳法的名词解释双向电泳法（Two-dimensional gel electrophoresis）是一种常见的蛋白质分离和分析技术。

它结合了等电聚焦电泳（isoelectric focusing，IEF）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE），用于在蛋白质混合物中高分辨率地分离出各种蛋白质成分。

在双向电泳法中，第一维度的等电聚焦电泳通过蛋白质的等电点移动来分离它们。

等电聚焦电泳是一种基于蛋白质的等电点（pI）的分离方法。

每种蛋白质都有不同的等电点，即在特定pH下带有零净电荷的点。

通过调整环境的pH值，蛋白质被聚焦在模板上，并在电场的作用下沿着pH递增或递减的梯度进行分离。

第二维度的聚丙烯酰胺凝胶电泳通过分子量大小来分离蛋白质。

聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种基于蛋白质的分子量的分离方法。

在凝胶中，较大的蛋白质相对较慢地通过凝胶网络，而较小的蛋白质相对较快地通过凝胶网络。

通过在凝胶中施加电场，蛋白质被推动并根据其分子量大小移动到不同的位置。

通过将两个维度的分离结果相互对应，双向电泳法可以在一个凝胶上实现高分辨率的蛋白质分离。

这种技术可以用于解析复杂的蛋白质混合物，从而帮助研究者发现和鉴定各种蛋白质，并了解它们在生物学过程中的功能和相互作用。

双向电泳法在生物学研究中具有广泛的应用。

例如，在蛋白质组学研究中，双向电泳法被用于寻找蛋白质组中的生物标志物，这些生物标志物可以作为某种疾病的诊断指标。

此外，双向电泳法还可用于研究细胞的生长、发育和疾病过程中蛋白质表达的变化，以及探索蛋白质相互作用和信号传导网络等方面。

值得注意的是，双向电泳法也存在一些限制和挑战。

由于样品复杂性和蛋白质的动态范围，该技术的动态范围较窄。

此外，蛋白质样品的预处理和凝胶电泳的条件设置等也会影响结果的准确性和可重复性。

因此，在使用双向电泳法进行蛋白质分析时，需要修正和标准化的方法和实验流程。

双向电泳的主要应用双向电泳是一种常用的蛋白质分析技术，具有广泛的应用领域。

本文将介绍双向电泳的主要应用，并探讨其在生物医学研究、生物工程和食品安全等领域的重要性。

双向电泳在生物医学研究中扮演着重要的角色。

通过双向电泳，研究人员可以分析蛋白质样本中的不同成分，并研究它们在疾病发展过程中的变化。

例如，在癌症研究中，双向电泳可以帮助鉴定肿瘤标记物，从而提供早期诊断和治疗的依据。

此外，双向电泳还可以用于研究神经退行性疾病、心血管疾病和代谢性疾病等方面，为疾病的机制研究和新药开发提供重要的支持。

双向电泳在生物工程领域也有广泛的应用。

通过双向电泳，研究人员可以分析蛋白质样本中的不同组分，并研究它们在生物工程过程中的变化。

例如，在生物药物研发中，双向电泳可以用于分析重组蛋白质的纯度和结构，确保产品的质量和安全性。

此外，双向电泳还可以用于研究基因表达调控、蛋白质互作网络和细胞信号传导等方面，为生物工程的优化和创新提供重要的指导。

双向电泳在食品安全领域也发挥着重要的作用。

通过双向电泳，研究人员可以分析食品样品中的蛋白质成分，并检测其中是否存在有害物质或污染物。

例如，在食品质量监测中，双向电泳可以用于鉴定食品中的过敏原或毒素，确保食品的安全性。

此外，双向电泳还可以用于研究食品加工过程中的蛋白质变化和食品中的营养成分，为食品工业的改进和创新提供重要的依据。

双向电泳作为一种重要的蛋白质分析技术，在生物医学研究、生物工程和食品安全等领域具有广泛的应用。

通过双向电泳，研究人员可以深入了解蛋白质样本的组成和变化，为疾病诊断、药物研发、生物工程优化和食品安全监测提供重要的支持。

随着技术的不断发展和创新，相信双向电泳在更多领域中的应用将会得到进一步拓展，为科学研究和社会发展做出更大的贡献。

双向电泳技术在生物医学中的应用现状和应用前景1 双向电泳技术1.1双向电泳技术概述双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）是蛋白分离的黄金标准，由此可以分析生物样品的显著差别，产生的结果用于诊断疾病、发现新的药物靶标和分析潜在的环境和药物的毒性。

双向电泳分离技术利用复杂蛋白混合物中单个组分的电泳迁移，第一向通过电荷的不同分离，另一向通过质量的不同分离。

双向电泳协同质谱技术是正在出现的蛋白组学领域的中心技术。

双向电泳是一种分析从细胞、组织或其他生物样本中提取的蛋白质混合物的有力手段，是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术，其高分辨率、高重复性和兼具微量制备的性能是其他分离方法所无与伦比的。

双向电泳技术、计算机图像分析与大规模数据处理技术以及质谱技术被称为蛋白质组研究的三大基本支撑技术。

可见双向电泳在蛋白质组学研究中的重要性。

就像Fey和Larsen在他们的综述中提到：“尽管人们都想有新技术取代它，可是如果希望对细胞活动有全面的认识，其他技术无法在分辨率和灵敏度上与双向电泳相媲美”。

1.2 双向电泳技术的原理双向电泳技术是蛋白质组学研究的核心技术之一。

它利用了各种蛋白质等电点和分子量的不同来分离复杂蛋白质组分，具有较高的分辨率和灵敏度，目前已成为复杂蛋白质组分检测和分析的最好的生化技术。

IPG - DALT系统双向电泳技术原理简明：首先利用等电聚焦( isoelectric focusing ,IEF) 将蛋白质沿pH 梯度分离至各自等电点(isoelectric point ,pI)，通过电荷分离蛋白质；然后沿垂直的方向以十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( sodium dodecyl sulphate polyacryla -mide gel electrophoresis ,SDS-PAGE)，通过分子量分离蛋白质。

所得蛋白双维排列图中每个点代表样本中一个或数个蛋白质，而蛋白质的等电点、分子量和在样本中的含量也可显现出来。