生化分析仪常用分析方法—课件

格式：pptx
大小：967.46 KB
文档页数：54

下载文档原格式

《生化分析仪》课件

02
微型化生化分析仪将适用于特殊环境，如野外、战场等，满足
特殊需求。
微型化仪器在家庭医疗中的应用
03
随着家庭医疗的发展，微型化生化分析仪将进入家庭，方便个
人进行自我检测。
多功能化
01
02
03
检测项目多样化
生化分析仪将能够检测更多的生物化学指标，满足更广泛的医疗需求。
多合一检测
生化分析仪将实现多合一检测，即一次检测多个指标，提高检测效率。
对样本需求量大
为了获得更准确的检测结果，生化分析仪通常需要较大的样本量，这对一些稀有样本来说是个挑战。
对环境要求高
生化分析仪对环境的要求较高，需要恒温、恒湿的环境才能保证其正常运行，增加了维护成本。
06
生化分析仪的未来发展趋势
智能化
自动化检测
生化分析仪将实现更高程度的自动化，减少人工操作，提高检测效率和准确性。
生化分析仪的发展历程
总结词
生化分析仪经历了从手工操作到自动化、智能化的发展过程。
详细描述
最初，生化分析需要手工操作，效率低下且误差较大。随着科技的不断进步，生化分析仪逐渐实现了自动化和智能化，大大提高了检测效率和准确性。现代生化分析仪集成了计算机技术、光学技术、电化学技术等多种高科技手段，具有自动进样、自动检测、自动清洗等功能，且能够实现快速、准确的检测结果输出。未来，生化分析仪将继续朝着更高精度、更高效率、更智能化的方向发展，为人类的健康和科技进步做出更大的贡献。
跨学科应用
生化分析仪不仅限于医学领域，还将拓展到环境监测、食品安全等领域，实现跨学科应用。
THANKS
感谢您的观看
详细描述
生化分析仪通过测量酶促反应过程中产物浓度的变化，推算出酶的活性或底物浓度。酶促反应具有特定的动力学特征，通过监测反应速率或产物生成速率，可以计算出酶的活性或底物浓度。

临床全自动生化分析仪培训课件

临床全自动生化分析仪
7
样品架的优点
①随着样品架移动及样品的被检测，可不断追加已放置样品杯或采血试管的样品架；
②通过样品架的移动能将样品传送到另一个分析模块（analysis die-block）甚至另一台分析仪上再进行分析。
临床全自动生化分析仪
8
（二）试剂室和试剂瓶
转盘式试剂室（reagent chamber）：内装放置试剂瓶的转盘，一般可放置20种以上具有一定形状的塑料试剂瓶，大型分析仪可放置 30～45种试剂瓶。
临床全自动生化分析仪
25
前分光和后分光方式
光栅分光有前分光和后分光两种方式，光源首先经过单色器分光，然后透射到比色溶液的方式为前分光。目前以后分光方式为多见，其优点是单色器中没有转动部分，双波长在同一时刻检测，因而提高了检测的精度和速度。
临床全自动生化分析仪
26
后分光方式
光源先透过比色杯中的反应液再照射到光栅上，经色散后所有固定单色光同时通过各自的光纤传输到对应的检测器，微处理器按该分析项目的分析参数，
Байду номын сангаас
临床全自动生化分析仪
34
样品前处理系统
能独立工作，由样品投入部、离心分离部、开栓部、在线分注部、非在线分注部、贴条码部、盖栓部、样品分注收存部、样品接收部等模块构成前处理系统，每一模块既是系统的部分，又是独立的单元，可根据不同需要选择使用，具有灵活性和扩展性。
也可通过样品输送部分与样品分析系统连接，组成类似工业领域的生产流水线，从而实现了从采血到报告的实验室的全自动化。
临床全自动生化分析仪
13
（四）取样和加试剂装置
1．取样装置（sampling assembly）：由取样针、取样臂、取样管路、取样注射器

生化分析仪基本原理与结构PPT课件

.
23
图1-8
.
24
3．反应管反应管固定在由微型马达带动的链式传
送带上，步进式向前移动。步进速度乘以反应终点位号，即为总反应时间，可依反应时间选择适宜步进速度。
4．加热浴可控温于250C、370C、500C，由传送链带
动反应管至恒温槽中保温。
5检测器
为光电比色计（或分光光度计）。待反应完成后，进行检测。如图1-9
连续流动式自动生化分析仪
.
6
图1-1单通道连续流动式生化分析仪的结构示意图
.
7
在微机控制下，通过比例泵将标本和试剂吸到连续的管道之中，在一定的温度下，在管道内完成混合、去除干扰物、保温反应、比色测定、信号放大及运算处理，最后将结果显示并打印出来。因为这种检测分析是一个样品接着一个样品在连续流动状态下进行的，故称之为连续流动式分析仪。
2．比例泵（称量泵）
.
9
图1-2
.
10
是一种蠕动泵，执行两个功能，即提供能使样品在仪器内进行运动的压力和向流经塑料管的液体注入空气。它的作用是代替手工操作时的各种吸管。样品的用量和各种试剂的用量以及管道气泡的多少均由比例泵决定，其结构和作用原理如图1-2所示。
比例泵主要由弹簧、压板、塑料管和转轴组成。转轴由电机带动，几个转轴之间有链条相连，转轴沿固定轨道循环转动，反复从富有弹性的硅胶输液管道上挤压滚过，从而推动管内的液体向前运动。
连续流动式自动生化分析仪连续流动式自动生化分析仪图图1111单通道连续流动式生化分析仪单通道连续流动式生化分析仪的结构示意图的结构示意图在微机控制下通过比例泵将标本和试剂吸到在微机控制下通过比例泵将标本和试剂吸到连续的管道之中在一定的温度下在管道内连续的管道之中在一定的温度下在管道内完成混合去除干扰物保温反应比色测定完成混合去除干扰物保温反应比色测定信号放大及运算处理最后将结果显示并打印信号放大及运算处理最后将结果显示并打印出来

生化分析仪检测原理课件ppt1

讨论：
mber-Beer定律的适用条件（前提）: ➢ 入射光为单色光 ➢ 溶液是均匀，无散射溶液 2.该定律适用于固体、液体和气体样品 3.在同一波长下，各组分吸光度具有加和性，如果
溶液中同时存在两种或两种以上的吸光性物质 ,则测得的该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物质吸光度的总和，即：
(
A/min=[(A2-A1 )-(空白)]/(t2-t1)
吸例：某病人的尿液AMY检测结果为0U/L
各检测参数间存在大小、比例、逻辑关系
光例：某病人在测定心肌酶谱时，其CK:246U/L、CK-MB:286U/L，标本无溶血等因素影响,其结果中CK-MB﹥CK
吸光系数法又称绝对法，是直接利用朗伯-比尔定律的数学表达式A＝Kbc进行计算的定量分析方法。
机械化的仪器设备模仿
度一点终点法——在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时，选择一个时间点测定吸光度值。
）样本空白标准曲线法——最经典方法
K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光波长、溶液温度和溶剂性质等，与溶液浓度大小和液层厚度无关。
配置标准溶液系列 → 分别测定 A → 得C~A曲线
检验人员要增强对报告审核的责任心
双波长法
双波长测定优点：
①消除噪音干扰 ②减少杂散光影响 ③减少样品本身光吸收的干扰
固定时间法
指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点，这两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度，利用这两点吸光度差值计算结果。如：苦味酸法测肌酐
(
吸光度）
●
·
A
2
●
A
1
T
计算公式：
C=(A2-A1)*K
酶促反应曲线
连续监测法

生化分析仪方法学

了解生化分析仪基本参数的原理，有利于仪器、试剂的正确使用，有助于正确分析和处理测定数据。

但是，配套系统的原装分析参数不宜更改；采用非仪器配套的试剂及校准品体系时，参数修改要慎重，对于不同仪器、不同类型的反应分析程序，所显示的人机对话分析参数信息有所不同。

一、反应监测时间对于终点法来说，读取反应达到平衡时的吸光度计算样品中待测物的浓度。

对于连续监测法来说，要注意观察反应进程曲线，从而确定反应的预孵育期，延迟时间、连续监测的时段。

对于一级或伪一级反应来说，连续监测的时间是一级反应的动态期的吸光度；对于基于零级反应的酶催化活性浓度速率法测定，连续监测的是零级线性反应期的吸光度。

对于连续监测法来说，动态反应期的时间越长，越适用于临床应用，对于以酶为工具的代谢物酶促动力测定法，要增加动态反应期，即延长反应达到平衡的时间，可在反应体系中加入竞争性抑制剂，这样还可以提高测定的线性范围，对于酶催化活性浓度连续监测法来说，一定要注意线性反应时间，有的酶，例如，以硫代丁酰胆碱为底物的血清假性胆碱酯酶速率测定法，线性反应时间只有90秒。

对于连续监测法来说，在监测期至少应读4个点(3个△A)。

多数全自动生化分析仪可以在整个测定反应周期连续监测(如HITACHI 7170常规测定周期10分钟、监测34点，OLYMPUS AU 600固定周期8分15秒、监测27点)，但反应监测时间是指该时间内的测定读数要用于结果计算。

它的设置与加样点、加试剂点( 包括R1、R2……)、监测时间(读数点)、读数间隔时间及试剂样品比例等有关，要结合方法学，兼顾权衡。

1．反应时间(Reaction Time) 指仪器的一个分析周期中，试剂和样品混合最末一点测定读数时间。

它对终点法尤其重要，是终点法的瓶颈。

有的仪器多个反应时间可选 L如Hl¡ªTACHI 7170)，须预先选定。

多数仪器10分钟左右，这对试剂提出了较高要求。

《生化分析仪资料》课件

生化分析仪的分类
光度法
通过测量光的吸收、透射、散射等特性来分析样品中的化学成分。
电化学法
利用电流、电势等电化学参数来分析样品中的物质含量。
色谱法
通过分离样品中的化学成分，再进行定量分析。
质谱法
利用质谱仪分析样品中的化学成分，常用于有机物分析。
生化分析仪的应用
临床生化分析
生化分析仪在临床诊断中用于检测血液、尿液等样品中的生化指标，帮助医生做出准确的诊断。
1 定期清洗、校准
为了保证仪器的准确性和稳定性，需要定期进行清洗、校准。
2 注意使用环境
生化分析仪对使用环境要求较高，需要避免灰尘、湿气等对仪器的影响。
3 做好样品预处理
样品预处理是保证生化分析结果准确的重要步骤，需要注意操作规范。
生化分析仪常见故障及处理
1
数据不准确
处理方法：检查样品处理是否正确。
2
仪器噪声大
处理方法：检查设备连接是否稳定。
3
仪器出现故障提示
处理方法：检查仪器是否需要校准。
生化分析仪未来发展趋势
生化分析仪未来的发展将与人工智能结合，实现更智能化的数据分析和结果预测。同时，生化分析仪也会趋向便携化和高通量化，满足不同场景下的需求。
《生化分析仪资料》PPT 课件
生化分析仪是一种用于分析生物体内化学成分的仪器，通过光、电、热、化学等方法测量样品中的物质含量。本课件将带您深入了解生化分析仪的原理、分类、应用以及选购指南等内容。
什么是生化分析仪
生化分析仪是一种用于分析生物体内化学成分的仪器，借助光、电、热、化学等方法测量样品中的物质含量。它在医学、生物科学、环境监测等领域起着重要作用。
基因测序

贝克曼全自动生化分析仪的应用课件

01
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
02
03
生物制品检测
贝克曼全自动生化分析仪可用于检测生物制品的质量和纯度，确保制品的安全性和有效性。
基因表达研究
通过检测基因表达相关的生化指标，研究基因的功能和调控机制。
药物筛选
利用贝克曼全自动生化分析仪对大量化合物进行筛选，寻找具有潜在治疗作用的候选药物。
03
贝克曼全自动生化分析仪的操作流程
贝克曼全自动生化分析仪的应用课件
• 贝克曼全自动生化分析仪简介 • 贝克曼全自动生化分析仪的应用范围 • 贝克曼全自动生化分析仪的操作流程 • 贝克曼全自动生化分析仪的维护与保养 • 贝克曼全自动生化分析仪的常见问题及解决方案 • 贝克曼全自动生化分析仪的发展趋势与未来展望
01
贝克曼全自动生化分析仪简介
科研应用
基础研究
贝克曼全自动生化分析仪可用于研究生物体内各种生化反应的机制，为疾病治疗和药物研发提供理论支持。
临床试验
在临床试验中，使用贝克曼全自动生化分析仪可以对受试者的生化指标进行精确检测，为试验结果提供可靠依据。
毒理学研究
通过检测实验动物的生化指标，评估药物或物质的毒副作用。
生物技术应用
高效率
贝克曼全自动生化分析仪可同时进行多个样本的检测，大大提高了检测效率，缩短了检测
时间。
准确性
该设备采用先进的检测技术，确保了检测结果的准确性，减少了人为误差。
可靠性
贝克曼全自动生化分析仪具有稳定的性能和长寿命，减少了维修和保养的频率和成本。
灵活性
该设备可根据不同需求进行定制和升级，满足不同医疗机构
工作原理
样本处理
贝克曼全自动生化分析仪通过自动加样系统将样本加入到反应杯中，然后进行加试剂、搅拌、孵

生物化学仪器分析技术课件-06电泳技术

• 通常凝胶的筛孔、透明度和弹性是随着凝
胶浓度的增加而降低的，而机械强度却随
着凝胶浓度的增加而增加。凝胶总浓度(T)
的计算公式如下:
• T＝[(A+B)/M]×100%
• 式中叫代表Acr的重量(g)；B代表交联剂 Bis的重量(g);M代表溶液的体积(mL)。
• 交联度(C)可按下式计算:
•
C=[B /(A+B)]×l00%
• 由于带电颗粒的泳动速度受电场强度影响，使得同一带电颗粒在不同电场中泳动速度是不同的，其泳动情况用迁移率来表示。
• 迁移率是指带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度，可用以下公式表示：
• m=v/E=Q/6πrη
• m：迁移率（cm2/V·s）；v：颗粒泳动速度（cm/s）；E：电场强度（V/cm）；Q：被分离物所带净电荷；η：介质粘度；r：颗粒半径。
电泳基本原理
• 任何带电物质由于其本身的解离作用或表面上吸附其他带电质点，在电场中便会向一定的电极移动。例如，蛋白质分子是由氨基酸组成的，而氨基酸带有可解离的氨基(一NH3＋)和羧基(一COO－)，是典型的两性电解质，在一定的pH条件下，就会解离而带电。带电的性质和多少取决于蛋白质分子的性质和溶液的pH以及离子强度。
• 由上式可见迁移率与球形颗粒半径、介质粘度、颗粒所带净电荷有关。
• 带电颗粒在电场申的泳动速度与本身所带净电荷的数量，颗粒的大小和形状有关。一般说，所带的电荷数量越多，颗粒越小越接近球形，则在电场中泳动速度越快，反之，则越慢。
4．2 影响迁移率的主要因素
• 迁移率是胶体颗粒的物理常数，可用来鉴定蛋白质以及研究它们的某些物化性质，被分离物质迁移率除受其本身性质影响外，还与其他外界因素有关。影响颗粒迁移率的外界因素讨论如下。

《生化分析仪》PPT课件

光学基本知识
• 生化分析仪器是利用光谱分析方法的仪器之一，它主要工作在紫外光和可见光光波谱区内。以仪器的原理看，它基本是由一台比色计或一台分光光度计组成。所以了解一些基本的光学知识。无论对生化分析仪原理的理解和对仪器的维修及计量都十分必要。故这里对光的基础知识做一些简单介绍。
完整版ppt
完整版ppt
6
光的互补
• 若把两种不同的光，接一定的强度比例混合，可以得到“白光”，这两种光叫做互为补色。
• 由于有色物质对光的吸收具有选择性，因此在测定溶液吸光度时，只能用光波中能被有色溶液吸收的一部分光线，即应用特定的单色光进行。至于不被有色溶液吸收的光线，则应设法在未透过有色溶液之前，可达0.001A；重复性好，可达 0.002A；功能齐全，能进行吸光度、浓度以及酶活力的测定；能使用终点法、动力学法和初速度法等方法进行分析；可进行自动、半自动、快速、微量测定等。
完整版ppt
19
要求
• 分析方法多、测试项目多、样品及试剂用量少、准确、快速、微量、耐用等
• 大型生化分析仪均为多通道、全自动型的，可以同时测定 10个以上的项目，且分析项目可以自由选择 .近些年还出现了一种干片式生化分析仪。这种分析仪结构简单、用血量少、标本不必预先处理、直接用全血测量、操作简便快速、结果准确，特别适合儿科、急诊、野外等使用。
完整版ppt
21
生化参数
• 肝功1 白蛋白ALB2 总蛋白TP3 球蛋白GLB4 白蛋白/球蛋白ALB/GLB5 总胆红素T BILI6 直接胆红素D BILI7 间接胆红素I BILI8 谷草转氨酶AST9 谷丙转氨酶ALT10 谷草转氨酶/谷丙转氨酶AST/ALT11 L－r谷氨酰移换酶 GGT12 碱性磷酸酶ALP13 乳酸脱氢酶LDH14 乳酸脱氢酶/谷草转氨酶 LDH/AST15 L—r谷氨酰移换酶/谷草转氨酶GGT/AST16 总胆汁酸TBA17 前白蛋白PALB18 葡萄糖（OXI）GLU

生化分析仪的原理及常用检测方法

1.连续监测法
• 即零级反应速率法,亦称斜率法在较长反应时间区段内(90-180秒)，每隔一定时间(5~30秒)读取一次吸光度值，至少读取4点，得到3个以上△A，最后算出反应速率△A/min。
Au 106 VTu U/L t u l Vu
1.连续监测法特点
• 与固定时间法相比，属于即时观测，无需停止酶促反应、不需添加其他呈色试剂，且可将多点的测定结果绘图连线，快速、直观查看酶促反应进程，很容易找到呈直线的线性期，检查到是否偏离零级反应。
光吸收曲线
Lamber-Beer定律：分光光度法基本定律
描述物质对某一波长光吸收的强弱与吸光物质的浓度及其液层厚度的关系
Lamber定律：A∝l Beer定律：A ∝C
入射光强度I0 透射光强度I 物体截面为S 厚度为l
Lambert-Beer（朗伯-比尔）定律
• 当一束平行单色光通过均匀的非散射样品时，样品对光的吸光度与样品的浓度及厚度成正比
• • A = kcb A---吸光度 k---吸光系数 c---溶液浓度 b---液层厚度
吸光系数
• 定义：吸光物质在单位浓度及单位厚度时测得的吸光度。 • K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光波长、溶液温度和溶剂性质等，与溶液浓度大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液浓度所采用的单位的不同而异。
Lambert-Beer（朗伯-比尔）定律
• 郎伯-比尔定律表明：当液层厚度固定时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。即：A/C=const • 故：只要测出某种溶液的吸光度，将它与已知浓度的标准溶液吸光度进行比较，就可以算出该溶液的浓度。
生化测定方法
终点法：一点终点法二点终点法速率法：

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

●常用于临床酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐等的测定
（二）固定时间法（fixed-time assay)
①概述 ②计算公式 ③临床应用
①概述
1）固定时间法（fixed-time assay):指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点，此两点既非反应初始吸光度，亦非终点吸光度，即样品和试剂混合后读取延滞期后的吸光度A1和反应一定时间的吸光度A2，这两点的吸光度差值用于计算结果。如图
样品处理系统
样品架和样品盘试剂架和试剂盘加液器：包括定量吸量器和加样针
搅拌器：由电机和搅拌棒组成
检测系统
光路系统：前分光光路、后分光光路分光装置：滤光片和单色器
比色杯：反应杯信号检测器：光电信号转换恒温装置：保持恒温，25℃、30℃、37℃
清洗装置：吸液针、吐液针、擦拭刷经化学反应后随着被测物的消耗吸光度下降。
②分类
分类
一点终点法两点终点法
一点终点法（one point end assay)
1）定义：在反应达到平衡时选择一个测光点的吸光度计算待测物浓度，主要用于单试剂的测定。如图
2）计算公式
Cu=Au×Cs/As=Au×K
2）快速反应干扰物：在样本中含有明显干扰待测物反应的物质时，固定时间法能有效去除这些干扰，提高特异性。某些干扰物比待测物更快与试剂发生反应。
3）慢反应干扰物：一些干扰物在待测物反应完全后才开始发生反应。
②计算公式
C=（A2-A1）×K K为校准系数 K=Cs/As
③临床应用
主要应用于样本中有物质明显干扰待测物反应的情况，如苦味酸法测定肌酐、溴甲酚氯法测定血清白蛋白等
（三）自动生化分析仪检测项目
常包括肝功能、血糖、血脂、肾功能、心肌酶谱、骨代谢、尿蛋白等，例如AST、ALT、 GGT、LDH、TBA、TG、TC、 ALP、GLU、UREA、UA、LDL、 HDL、CK、TP等
三、生化分析仪常用分析方法
常用方法
终点法固定时间法连续监测法比浊法
（一）终点法（end assay)
K=Cs/As
（K为校准系数）
Cu为待测物浓度
Au为待测物终点吸光度值
Cs为标准液（校准品）浓度 As为标准液终点吸光度值
3）临床应用
临床常用于测定总蛋白、白蛋白等的浓度
两点终点法（two point end assay)
1)定义：常应用于具有双试剂的测定项目中，第一试剂（R1）通常只含缓冲液等成分，它与样本一般不起特异性反应，在第二试剂（R2）加入前，选择某一点读取吸光度值A1，它是由样品本身或第一试剂与样品非特异性反应引起，相当于样品空白；加入第二试剂（R2）后经过一段时间反应达终点（平衡）后选择第二个点读取吸光度A2，根据两个吸光度差，计算出待测物浓度。如图
(三）连续监测法（continuous monitoring assay)
①概述 ②计算公式 ③常用分类
两点速率法多点速率法
①概述
1）连续监测法（continuous monitoring assay）：又称速率法（rate assay),是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间— 吸光度曲线的线性期内（如图）4个以上测光点测定吸光度，计算单位时间吸光度变化值 ▲A/min，其大小与被测酶活性成正比。
生化分析仪常用分析方法
一、概述
主要内容
二、检测的基本原理
终点法
三、常用分析方法
固定时间法连续监测法
比浊法
一、概述
（一）
自动生化分析仪是集电子学、光学、计算机技术和各种生物化学分析技术于一体的临床生物化学检测的主要工具
（二）自动生化分析仪基本结构
自动生化分析仪主要由样品处理系统、检测系统和计算机系统组成
样品和试剂的识别样品和试剂的自动吸加、混合及恒温结果计算及打印数据处理
二、检测的基本原理
（一）
自动生化分析仪是根据光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器
（二）
原理：分析仪中的单色器将光源发出的复色光分成单色光，特定波长的单色光通过装有样品溶液的比色杯，光电转换器将透射光转换为电信号后送入信号处理系统进行分析
2）正向连续监测法：指反应吸光度升高的反应 3）负向连续监测法：指反应吸光度降低的反应
②计算公式
酶活性（U/L）=▲A/min×K 代谢物浓度Cu=▲A/min×K 校准K值=（校准品酶活性U/L)s/（校准品▲A/min)s
③常用分类
1）两点速率法：在酶促反应的过程中，观察两个时间点的吸光度变化，用两个吸光度的差值▲A除以时间（分钟），得到每分钟的吸光度，计算酶的活性或浓度。如图
①概述 ②分类
一点终点法两点终点法
①概述
1）终点法（end assay):样本中待测物与试剂发生特定的化学反应生成系统可检测的产物，当反应达到平衡时产物不再增加，吸光度不改变，根据平衡点吸光度的大小即能算出被测物浓度。
2）正向终点法：多数化学反应利用产物在某一波长处具有很强的光吸收，随反应的进行吸光度升高，到终点时吸光度最大。
2）计算公式
Cu=（A2-a×A1）×K
a=(Sv+R1v)/(Sv+R1v+R2 v) K=Cs/As
(因加入R2后总体积不同，需要根据体积进行校正，式中a为体积校正因子，目前全自动生化分析仪均具有自动校正功能，不必手工校正）
3）临床应用
●两点终点法能有效消除样本溶血（hemolysis)、黄疸（icterus)和脂浊（lipo-turbid)等造成的光吸收干扰
2）多点速率法：在酶促反应的过程中，每隔一定时间（2—30秒）监测一次，连续监测多次，求出单位时间内吸光度的变化，计算酶活性或浓度。如图
（四）比浊测定法（turbidimetric assay)
①概述
②分类
化学比浊法免疫比浊法
①概述
1）比浊法（turbidimetric assay):是通过测定微粒性物质对光的散射或透射强度来测定物质的浓度，主要用于测定能形成悬浮体的微粒物质。当光线通过一浑浊溶液时，悬浮的颗粒物质一方面选择性地吸收一部分光能，另一方面向各个方向散射一部分光能，使透过溶液的光强度减弱。