Agilent-1260中文版1

Agilent 1260/6120液质联用-单四级杆质谱操作规程一、目的建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。

二、应用范围所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。

三、使用标准Agilent LCMS 化学工作站标准操作培训中文版四、责任人分析部负责制作规程；分析部主管审核；研发部总监批准；研发部分析人员和操作人员负责执行五、概述：A、工作原理LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。

色谱信号由色谱工作站进行记录处理。

B、仪器的主要组成部分Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB共12 页，第 2 页起草人：审核人：批准人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修订号批准日期执行日期六、操作规程：6.1. 开机6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为0.56-0.69Mpa。

6.1.2 准备LC流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室的废气排到实验室外部。

6.1.3 打开计算机，并依次打开LC各模块电源及质谱电源，等待各模块自检完成(各模块右上角指示灯为黄色或者无色，质谱有“嘟”一声声音) 。

6.1.4双击桌面图标，进入化学工作站。

颜色位置无色黄色绿色红色蓝色灰色模块右上角状态灯未开电源或者模块准备就绪模块未准备就绪正在进样分析模块出错；所有模块红色，仪器有漏液——工作站图形颜色—模块未准备就绪模块准备就绪出错或者不能联机正在进样分析此模块没启用共12 页，第 3 页起草人：审核人：批准人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修订号批准日期执行日期6.2. 调谐开始抽真空之后至少要等4个小时或更长时间才能进行调谐或操作LC/MSD。

安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项1、配制流动相，水相置于棕色玻璃瓶中，有机相置于相应无色玻璃瓶中。

水相和有机相必须过滤，滤膜选用0.45有机系滤膜（尼龙）。

注意：过夜的流动相必须重新过滤。

2、流动相过滤后，置超声仪中超声20min。

3、将已超声的流动相轻轻换上，动作不要太剧烈，会产生气泡，注意不要把有机相和水相换反了（A是有机相，B是水相）。

4、将色谱柱接上，注意：流动相的流动方向必须和色谱柱上的箭头方向一致。

5、打开计算机电源、显示器开关，并输入密码。

6、依次从上往下打开液相色谱仪上的所有开关。

7、打开液相色谱在线工作站（online），输入密码。

8、打开的液相工作站上分为四个小部分，依次为进样器、泵、柱温箱及检测器。

在第二个部分设置流动相的体积及溶剂瓶的总体积。

9、脱气：旋开purge阀开关，右击泵部分，选择“method”，选择B相100%，流速1ml/min，选择确定；右击泵部分，选择“control”，选择pump“on”，10秒后，调节流速为3ml/min，10秒后，调节流速5ml/min，开始水相脱气3min，水相脱气结束后，将流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下调。

然后开始有机相脱气，步骤同上，注意流速不可一下子从1ml/min调到5ml/min，需慢慢调节。

流动相脱气结束后，旋紧purge阀开关。

10、建立样品的色谱方法：设置进样体积，选择洗针进样，注明洗针位置；设置流动相比例、流速及梯度洗脱条件，序列进样时设置样品运行时间和后运行时间；打开柱温箱，设置柱温；打开紫外检测灯，设置检测波长。

全部设置好后，保存方法，不要覆盖别人的方法。

11、谱图保存路径的设置：View—preferences—data path（第二个选项）—remove旧的文件夹，add自己的文件夹。

再打开Sequence—Sequence parameter—选择Data path为自己的文件夹即可。

Agilent1260⾼效液相⾊谱仪操作规程1、⽬的确保Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪的正确使⽤及管理。

2、范围研发分析中⼼实验室Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪。

3、责任仪器使⽤者对本标准的实施负责。

4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机，进⼊Windows 画⾯。

4.1.2⾃下⽽上打开1260LC各模块电源，待各模块⾃检完成后，双击电脑桌⾯上LC1260-1(Online)图标，化学⼯作站⾃动与1260LC通讯，进⼊⼯作站画⾯。

4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项，也可单击⼯作站画⾯左下⾓【Method and Run control】项，进⼊⽅法和运⾏控制窗⼝。

4.2 安装⾊谱柱正确安装实验所需的⾊谱柱，注意⾊谱柱流速箭头⽅向，试验过程中需检查是否存在漏液。

4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒⼊相应的溶剂瓶中，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】，在参数设置处输⼊各溶剂瓶（A、B、C、D）内溶液实际体积和停泵体积，单击【OK】键，即可。

4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运⾏，并设置清洗时间，每隔5min清洗0.1min。

4.4 脱⽓逆时针旋开Purge阀，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运⾏。

设置“solvents”⼀栏中相应参数，将试验中所⽤到的管道逐⼀脱⽓，直⾄管内（由溶剂瓶到泵⼊⼝）⽆⽓泡为⽌所需时间，3ml/min冲洗⼤约需5min～10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵，顺时针旋紧Purge阀。

安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。

该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。

二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。

2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。

3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。

三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。

2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。

3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。

四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。

2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。

3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。

4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。

5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。

五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。

2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。

3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。

六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。

2. 设置合适的流速和梯度梯度。

3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。

七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。

2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。

3. 导出分析结果并保存。

八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。

2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。

3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。

九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。

2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。

3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。

通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。

Agilent1260液相色谱仪器操作规程一.生产厂家：美国Agilent二.到货日期：2011年1月三.附件：电脑、打印机四.使用范围：用于三聚氰胺，维生素A、D、E,β-胡萝卜素，牛磺酸，山梨酸、苯甲酸，乳糖、蔗糖等的检测五.工作环境：温度15℃~30℃，湿度20%~80%六.操作步骤:1.开机前准备：1.1.打开仪器室的空调。

1.2.配制流动相（按国标）,准备好蒸馏水、乙腈和甲醇。

2.开机：2.1.打开1260液相色谱仪器的进样器、泵、柱温箱和检测器的电源。

2.2.打开计算机。

2.3.打开“仪器1联机”图标，各模块完成自检。

2.4.点击“打开”图标，进入化学工作站。

3.设置运行模块和方法3.1.进样器（自动进样器）3.1.1.设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，按照国标，检测不同物质，设定不同的进样量。

反相：最大进样量为100ul，抽取速度一般设定200ul/min。

正相：最大进样量为500ul，抽取速度一般设定200~500ul/min。

3.1.2.设置进样器停止时间，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，如标样的出峰时间为7分钟，停止时间可以设置为8分钟以上。

3.2.泵（四元泵或单泵）3.2.1.泵的流速：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，按照国标要求，如设置1.00ml/min。

3.2.2.如果是四元泵，可选择溶剂瓶，输入需要使用的各溶液的比例，如B 蒸馏水90%，C乙腈10%，点击“确认”。

3.2.3.在“泵”的模块中点击鼠标右键，点击“控制”，选择“泵”（打开），确认。

3.2.4. 设置泵停止时间：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与进样器一致/无限制”。

3.2.5. 压力限值：最小值一般设0bar，最大值一般设100bar。

3.3.柱温箱3.3.1.设置柱温箱的温度：在“柱温箱”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，左边按照国标要求可设置，比如35度，一般右边设置同左边。

1260液相色谱仪操作规程
一． 仪器的操作
1.开机：电脑→液相→工作站图标
2.新建方法（或调用已有方法）
3.设置参数：
自动进样器:进样量、标准进样/洗针进样（洗针位） 泵:流速→溶剂比例（等度/梯度）→采集时间→打开泵 柱温箱:温度→打开柱温箱
检测器:波长→打开紫外灯
4.等待系统平衡：（打开系统）→系统就绪→基线平
5.设置单针进样：
操作者→子目录→前缀/计数器→样品位置→运行方法 6.设置序列进样：
序列参数：操作者→子目录→前缀/计数器
序列表：样品瓶→方法名称→进样次数→（数据文件）→运行序列
7.冲柱：
10%有机溶剂（甲醇或乙腈）+90%水 20分钟→100%有机有机溶剂（甲醇或乙腈）20分钟
8.关机：
关闭模块→关闭仪器电源→关闭工作站→关闭电脑
二． 数据的分析
1.调用方法
2.调用信号
3.图形优化：
信号选项→范围（时间范围、响应范围）
4.积分优化：
积分事件→积分开/关→斜率灵敏度、峰宽→最小峰面积、最小峰高→保存退出
5.校正：
新建校正表→化合物→含量→确定
6.报告：
设定报告→定量结果（百分比法/外表法）→报告类型
（简短报告/性能报告）→色谱尺寸（时间80，响应20）→预览报告→打印
7.保存方法：方法另存为
三． 仪器的维护
1.泵 :
过滤白头、被动阀、泵杆和密封圈
2.脱气机 ：
冲洗、保存在有机相、交替使用AD路
3.自动进样器 ：
洗针进样、更换针、更换针座、更换密封垫
4.检测器：
更换氘灯、流通池
5.溶剂：需要抽滤
6.样品：需要过滤。

实验十七 Agilent 1260高效液相色谱仪实验操作一、实验目的1．熟悉液相色谱仪的整套装置、工作原理、工作流程；熟练操作和使用液相化学工作站。

2．掌握高效液相色谱仪定性、定量描述未知物含量的实验方法。

3．了解高效液相色谱仪的基本维护与保养细则。

二、实验原理液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106次）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。

根据各组分在色谱图上的保留时间（或保留距离），可直接进行组分的定性；根据各组分峰面积的大小，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定相应组分的含量。

液相色谱仪工作原理图三、仪器与试剂1．仪器Agilent 1260 高效液相色谱系统（包括G4212B型二级管阵列检测器、G1311B 型四元泵、标准自动进样器、液相色谱工作站），电子分析天平，微波消解萃取工作站，超声波清洗器。

2．试剂色谱甲醇、超纯水、99.8% A标准对照品。

3. 色谱条件色谱柱：ZORBAX-SB-C18 色谱柱(150 mm×4.6 mm，5μg )；流动相：甲醇:水= 60:40，流速为1mL/min；检测波长：250 nm，柱温：室温25℃。

四、实验操作内容1．标准溶液配制准确称取一定量的A标准对照品，用甲醇配成一定浓度的对照品溶液。

2. 供试样品溶液的制备准确称取0.5g粉碎均匀的试样( 精确到0.0001g )于萃取罐中，加入超纯水25 mL，在60℃下微波提取30 min，冷却至室温，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液供测定。

安捷伦（agilent1260）高效液相色谱仪操作规程1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。

2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。

3.有关责任：化验室精密仪器室4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容：5.1开机前准备5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。

5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。

5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。

5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。

5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。

5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。

5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。

(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。

)5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。

安捷伦1260液相色谱仪操作规程一、 仪器开机1、更换流动相（水需要超纯水，有机试剂需要色谱纯），其中水需要每次使用时更换，有机试剂长时间不用也需要更换2、开机：打开电脑、打开液相所有模块电源、点击电脑桌面上的工作站联机图标3、打开工作站上的所有电源，待其就绪（所有灯变绿）4、拧开排空阀，四元泵里设置流速5 ml/min，A 100%；3分钟后，设置B 100%；3分钟后设置流速至合适流速，关闭排空阀二、 运行样品1、新建方法或调用已有方法2、设置方法参数四元泵：设置流速、流动相比例、采集时间，若需梯度则设置梯度，确定自动进样器（ALS）：设置进样量，确定柱温箱（TCC）：设置柱子温度，确定紫外检测器(VWD)：设置紫外波长，确定设置好后保存方法3、在线信号中点击“改变”，可添加泵的压力，以及VWD的信号4、等待系统平衡，所有灯变绿，泵的压力稳、VWD的信号稳定（约20分钟）5、进样：（1）单针进样：运行控制—样品信息，设置进样位置，保存路径等后运行方法（2）序列进样：序列—序列参数，编辑保存路径；序列—序列表，编辑序列表，然后运行序列6、待仪器自动停止分析（四元泵中已设置采集时间）或手动点击“停止”图标（四元泵中未设置采集时间）三、 关机1、冲柱流动相中含缓冲盐：先用10%甲醇、90%水冲30分钟，再用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机流动相中不含缓冲盐：用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机2、关机关闭各模块，关闭仪器电源，关闭工作站，关闭电脑四、 数据处理1、调用需要处理的信号2、自动积分，或者手动积分，删除不要的峰3、打印面积百分比结果，记录每个峰的峰面积、保留时间，在excel中用已知浓度（标准样品）的峰面积作工作曲线，得到工作曲线方程4、未知样品的峰面积来算得其浓度。