凝聚胺介质交叉配血试验操作规程

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管，1支标明“主侧”；另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴；“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

凝聚胺发交叉配血操作程序1、目的建立凝聚胺交叉配血操作规程，确保凝聚胺交叉配血试验操作的准确性和规范性。

2、适用范围适用于凝聚胺交叉配血的全过程3、试剂3.1厂家：珠海贝索生物技术有限公司3.2产品有限期：24个月3.3试剂名称：LIM低离子溶液、Polybren凝聚胺溶液及Resuspending悬浮液。

3.4实际规格：LIM低离子溶液130ml/支、Polybren凝聚胺溶液20ml/支Resuspending悬浮液20ml/支3.5试剂稳定性：试剂未开启：2-8℃避光保存，稳定至包装盒上的效期二年。

3.5试剂开启后请注明日期并签名，效期6个月。

4、质控操作按照《输血相容性检测室内质控操作程序》执行，质控通过后填写《血库IQC 检测反应记录单》5、检测原理凝聚胺试验希先利用低离子溶液促进红细胞抗原和血清（血浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间免疫性凝集，让已发生抗体反应的红细胞的间距缩短，更能引起反应的抗体和别的红细胞产生反应二形成免疫性凝集，有凝聚胺引起的非特异性凝集反应可被后加入的悬浮液所中和二离散，如发生免疫性反应凝集就不会散开，为阳性反应（+）；如果未发生免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应（-）。

6、标本处理6.1核对信息，将检查申请单信息与样本条码信息进行核对，信息一致方可进行下述操作。

6.2标本收集EDTA-K2抗凝血2ml 标本出现溶血、乳糜血，为不合格样品，不能用于检测6.3标本制备6.3.1EDTA抗凝血2ml,离心3000g/3min,分理出血球与血浆待用。

6.3.2制备5％红细胞悬液，取50ul血球+1000ul0.9％生理盐水。

7、操作步骤7.1取洁净试管两支，分别标注主、次侧。

主侧管加受血者血清100ul,加供血者5％红细胞悬液50ul；次侧管加供血者血清50ul加受血者5％红细胞悬液50ul 7.2各加LIM0.65ml,混合均匀后再各加Polybren容易2滴，并混合均匀。

交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1，洁净试管，离心机，显微镜。

2，0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3，凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

*2 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

*3 复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

*4 阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4，抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1．凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2．有效期内可使用。

3．抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1．抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2．2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1．取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

临床交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

凝聚胺法交叉配血标准操作规程1.目的规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。

2.原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后加入悬浮液（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

3.试剂由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。

3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。

3.3 Resuspending溶液2×20 ml4.仪器4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司4.3 OLYMPUS显微镜：日本5.操作步骤及结果判断按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。

以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。

5.1取洁净小试管2支,分别标明主、次侧管。

5.2于主侧管中加入受血者血浆2滴和供血者3-5%红细胞悬液1滴,次侧管中加入供血者血浆2滴和受血者3-5%红细胞悬液1滴, 轻轻混匀离心1000r/分钟, 仔细观察有无凝集,无凝集则可进行下一步骤,若有凝集则查找原因。

交叉配血操作规程凝聚胺法交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进行混合，通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。

交叉配血操作主要采用凝聚胺法进行，以下是交叉配血操作规程的详细步骤。

1.准备工作a.配置所需试剂，包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶溶液、配血盘等。

b.通过测定输血者和供血者的血型，确认双方的血型信息，并记录在相关记录表中。

2.标本采集a.采集输血者和供血者的静脉血标本，放入标本管中，避免血样凝固。

b.标本采集的相关操作要符合严格的无菌原则，确保血样的无菌及安全性。

3.标本处理a.将标本管中的静脉血标本置于冰上，在4℃下保存。

b.用溶血酶溶液处理输血者的红细胞，将3滴红细胞加入到每一个配血瓶中，轻轻摇动混合均匀。

4.试剂配置a.将配血盘中的试剂盘取出，配置新鲜的抗血型血清和已知血型标准红细胞。

5.凝胶装配a.打开凝胶洞口，将配血盘的试剂盘放入凝胶洞中。

b.确保试剂盘的位置正确，使试剂液体触及到凝胶洞的底部。

6.样本混合a.取出保存在冰上的输血者和供血者的静脉血标本，放置于试剂盘的对应位置。

b.轻轻旋转试剂盘，使血样和试剂充分混合起来，注意避免搅拌过于激烈。

7.观察凝聚反应a.在一定的时间内，观察配血盘中是否发生凝聚反应。

b.根据凝聚反应的情况，判断输血者和供血者的血型是否兼容。

8.结果判读a.若输血者的红细胞与供血者的血清发生凝聚反应，表示两者的血型不兼容，不适合进行输血。

b.若输血者的红细胞与供血者的血清没有发生凝聚反应，表示两者的血型兼容，可以进行输血。

9.记录和报告a.记录每次交叉配血的操作过程和结果，包括输血者和供血者的血型信息、配血的凝聚反应情况等。

b.报告输血者的血型结果和是否适合进行输血。

交叉配血操作规程凝聚胺法主要是通过观察凝聚反应来判定血型的兼容性，该方法操作简单、结果可靠。

但需要注意的是，交叉配血结果只能作为指导输血的参考依据，还需要综合考虑患者的临床情况和输血指征等因素，确保安全有效地进行输血操作。

一盐水介质交叉配血实验1. 原理盐水介质配血法是目前最经常使用的配血方式，能够发觉临床上最重要的ABO不配合性。

本实验要紧用以检测受血者（献血者）血清（浆）中有无破坏献血者（受血者）红细胞的抗体。

如存在相应的抗体，那么交叉管中将发生凝集或溶血现象，此即为交叉不合，反之那么交叉相合。

2. 操作（单位：滴）混匀，1000~2000rpm×1~2分钟离心，观看结果。

3．结果观看主、次、混合管均无凝集，无溶血现象，示无配血禁忌，继续下一步进行聚凝胺法或抗人球蛋白法。

主、次、混合管均有凝集和/或溶血现象，示有配血禁忌，需进一步核查，寻觅缘故。

主、混合管有凝集和/或溶血现象，示有配血禁忌，需进一步检查，寻觅缘故。

次、混合管有凝集和/或溶血现象，示有部份配血禁忌，需进一步检查，寻觅缘故。

4．注意事项结果观看时，除肉眼观看外，均需显微镜观看。

要注意真、假凝集的辨别。

二凝聚胺实验1.原理：凝聚胺(Polybrene)是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物，具有中和肝素作用：又称肝素灵，溶解后产生许多正电荷，能中和红细胞表面唾液酸所带的负电荷，使红细胞的Zeta电位降低，诱发红细胞产生可逆的非特异性凝聚。

在此进程中，假设有IgG分子已直接与红细胞搭桥，当非特异性的红细胞凝聚消散后，只有由抗原抗体引发的搭桥的特异性凝集仍存在。

反映分三个步骤：．红细胞致敏时期：红细胞在低离子培育基中与相应抗体致敏。

．凝聚时期：聚凝胺使红细胞非特异性地紧密接近，诱发凝聚现象，因此许诺抗体与相应抗原形成桥连。

．再悬时期：再悬液具有中和聚凝胺的作用，使聚凝胺诱发的非特异性凝聚散开，留下抗原抗体反映所致的特异性凝集不能散开，凝集的强度与抗体的浓度、抗原的浓度及反映的导热特性有关。

2、操作步骤：、在盐水法通过的基础上，在主、次管均加入低离子介质4滴，混合后置于室温1分钟。

、在主、次管均加入聚凝胺溶液2滴，混合后，室温15秒。

、3500转/分，离心10秒，完全弃上清液。

凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。

二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。

若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。

五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所)成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。

(二)标本保存：血液样本必须密封，2~8℃保存7天。

(三)用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本。

七、操作程序：(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。

(二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。

(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。

（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。

次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。

各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。

(五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。

(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。

精心整理交叉配血（凝聚胺法）1.原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。

加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2.标本采集：2.1标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。

2.2标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。

3.标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。

4.标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准：细菌污染。

溶血标本，标签不齐全不能作测定。

6.试剂：6.1试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2试剂生产厂家：(台资)珠海贝索生物技术有限公司。

6.3试剂组成：试剂 1.低离子介质(LowLonicMedium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-25度贮存，有效期为2年。

试剂2.凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。

试剂3.重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。

试剂4.8.5％生理盐水。

7.仪器：7.1血型血清离心机：80-2型离心机江苏金坛市大地自动仪器厂7.2离心机：江苏金坛市大地自动仪器厂7.3电热恒温水箱：江苏金坛市医疗器械厂精心整理精心整理7.4显微镜：XSZ-H3(中国）8.操作步骤及结果判断：8.1供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。

加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。

主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。

凝聚胺法交叉配血操作规程一．【预期用途】本产品作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。

二．【检验原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后，加入悬浮液（Resuspending），Resuspending 具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

三．【主要组成成分】试剂由低离子溶液（Low Ionic Medium）、凝聚胺溶液（Polybrene Reagent）、悬浮液（Resuspending）组成。

注：一般情况在有效期内不同批号试剂盒中的各组份可以互换使用，但不推荐此做法。

四．【储存条件及有效期】2℃～25℃保存，有效期2年。

未开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为2年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。

生产日期及有效期信息见标签。

五．【样本要求】1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3％～5％的红细胞悬液。

（如取分离血清后底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5％红细胞悬液）2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。

交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。

2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。

(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。

(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。

(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

凝聚胺交叉配血操作流程
凝聚胺交叉配血是一种重要的辅助性医学操作，它可以帮助医生和护士在紧急情况下，迅速、准确地给患者配血，保证患者得到优质的治疗。

本文将结合流程图，着重介绍凝聚胺交叉配血操作的基本流程。

自动交叉配血系统通常由凝聚胺交叉配血设备和血液实验室材
料组成，它可以完成一次全自动的交叉配血操作。

第一步是将血液实验室的样本置于设备上，将凝聚胺置入设备中。

耐普森凝聚胺具有双向交叉作用，能够将血液样本混合、交叉混合，达到所需的组成比例。

第二步是进行配血，将混合的血液样本注入接收者的血液管中，使血液按照所需的比例分配，从而使接收者得到最佳的治疗效果。

第三步是处理凝聚胺，经过操作后，凝聚胺被收集，然后经过处理处理，分解凝聚胺质粒，使其保持有效的状态，为下一次的操作做好准备。

第四步是清洗设备，在每次操作完成后，应当及时清洗设备，以确保本次操作在下一次使用时可用。

整个凝聚胺交叉配血操作不仅确保了患者得到优质的治疗，而且操作流程简单、安全，为医护人员提供了大量便利。

凝聚胺交叉配血操作提醒我们，要提高护理质量，做到安全、准确、快速，在每一个环节都要做到严谨慎重。

采用凝聚胺交叉配血的护理工作应该被视为一项重要的护理任务，必须认真对待，以保护患
者的生命安全。

总之，凝聚胺交叉配血是一项重要的护理操作，它不仅能够给患者提供优质的治疗，还可以保证医护人员的安全，为他们提供一个安全、可靠的治疗环境。

通过规范操作，准确按照操作规程，凝聚胺交叉配血操作可以确保操作的安全性和准确性，保护患者的安全和健康。

交叉配血操纵规程（凝集胺法）之袁州冬雪创作一．目标规范交叉配血试验操纵；包管临床用血的平安性和有效性.二．适用范围适用于临床配血标本.三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需资料和设备资料：凝集胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本.设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操纵步调1.凝集胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液.（2）取试管3支，标识表记标帜主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀.（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验成果.（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合平均，室温孵育1min.（5）每管各加2滴凝集胺溶液，混匀后静置15s.（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干.（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝固，如无凝固，必须重复步调（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察成果.（9）成果断定如凝离合开，则为凝集胺引起的非特异性凝固，判为阴性成果，配血相合；如凝集不散开，则为抗原抗体连系的特异性反应，判为阳性成果，配血不相合，如肉眼观察凝固强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝固.成果断定要求在1min内完成，最长不要超出3min，因为弱凝固的阳性成果，超出1min可以变成阴性.六．注意事项1.配血技术①惯例配血技术：选择的技术不但要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽量多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检.今朝认为盐水法交叉配血是输血前检查必不成少的试验，首先采取盐水法停止交叉配血，再采取可以检出IgG类抗体的方法停止交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于处理无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合.2.主侧交叉配血不相合的原因①患者或供者ABO血型定型不正确，或二者的ABO血型不配合；②患者血清中存在同种抗体，与供者红细胞上的相应抗原起反应；③患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞中的相应抗原起反应；④供者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白阳性；⑤患者血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝固，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性（用盐水添加试验来处理）；⑥试验系统被污染.3.次侧交叉配血不相合的原因①供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体；②患者与供者的ABO血型不相合；③患者红细胞已经包被了抗体，直接抗球蛋白试验阳性.。

交叉配血操作规程（凝聚胺法）一．目的规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。

二．适用范围适用于临床配血标本。

三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需材料和设备材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。

设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤1.凝聚胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。

（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。

（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。

（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。

（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。

（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。

（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。

（9）结果判定如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。

结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min可能变为阴性。

六．注意事项1.配血技术①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。

目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。

交叉配血操作规程[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清：含抗D 血清，氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3 次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3 支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2 滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴，次测管：加入供血者血清（浆）2 滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴，对照管：加入2 滴*4 阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。

交叉配血试验操作规程1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。

2范围：患者的血液标木与供血者标木。

3职责：3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。

3.2血库进行交叉配血试验。

4所用设备与试剂4.1BY-320A 离心机4.2聚凝胺介质试剂5原理：红细胞表而带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM) 降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液, 它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷, 可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Ze恰电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液(Resuspending)‘Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。

6操作将受血者、供血者的标木选择工况3分离血清及血浆待用。

用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次）6.1盐水介质交叉配血试验：6.1.1取小试管2支标记主、次侧。

主侧管：受血者血清（PS） 100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC）6.1.2将上述试管混匀后，放入离心机，选工况16.1.3取出试管，观察上清液是否溶血，如果没有溶血，然后轻轻晃动试管，肉眼观察结果。

6.1.4结果判定：6.1.4.1肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性、配血结果不相合，无凝集为阴性、配血结果相合。

交叉配血操作方法一、支持文件：参见《临床检验》2002年7月第一版二、核对配血标本必须复检患者ABO、Rh血型，将复检结果写入申请单并附签名。

三、交叉配血操作：凝聚胺配血法，具有不规则血型抗体筛选作用。

1、3%--5%红细胞悬液配制：1毫升生理盐水中加30--50微升压积红细胞，混匀（洗涤或不洗涤，盐水介质配血法最好洗涤3次）。

2、取试管两支，标记主、次侧：主侧：病人血清（浆）2滴，加供血者3%--5%血球1滴。

次侧：献血者血清（浆）2滴，加病人3%--5%血球1滴。

3、各加LIM(低离子强度盐溶液)0.6ml,混合均匀.室温静置1分钟。

4、再各加2滴Polbrene Solution(凝聚胺)混合，静置15秒。

5、3400rpm(900g)离心15—30秒或1000r/min离心1分钟，然后把上清液倒掉，使壁管残留大约0.1ml左右的液体。

6、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集。

如无凝集，必须重做。

7、最后加2滴Resuspending(重悬液)，并轻轻混合，观察结果。

如凝集30秒内不散开，则为抗体结合的特异性反应，为配血不相容；如凝集散开，则为Polybrene引起的非特异性的凝集，为配血相容，进一步在显微镜观察有无凝集。

8、交叉配血报告方式：①同型交叉配血：“主、次管交叉配血无凝集、无溶血反应”，②异型交叉配血（不主张）：“主管交叉配血无凝集、无溶血反应；次管交叉配血有凝集、无溶血反应”。

9、将交叉配血结果、ABO血型复定结果、不规则抗体筛选结果等内容逐项填入《第二医院输血记录单》中，此“单”为“交叉配血报告单”，经认真核对无误后与全血或成分血一起发往临床（入病历）。

并将“交叉配血结果”登记在《兴国县第二医院交叉配血结果记录本》上。

10、将交叉配血的“主、次管”、“送检标本(原瓶)”，“血袋剪下的辫子”一同置试管中集中放冰箱(2--8℃)保存7天。

11、凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者，应进行交叉配血试验。