知识点一
知识点二
(2)单克隆抗体制备过程中的两次筛选 第一次筛选:B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经诱导剂处理后,会出现多种细胞, 如B—B细胞、瘤—瘤细胞、B—瘤细胞、B淋巴细胞、骨髓瘤细胞等,因 而要用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞(即B—瘤细胞)。用特定的培养基 筛选,未融合的和融合的具有同种核的细胞死亡,只有杂交细胞才能生长。 第二次筛选:B淋巴细胞有多种,与骨髓瘤细胞融合后产生多种杂交瘤细 胞,因而需要对杂交瘤细胞作进一步的筛选。通常用“有限稀释法”,将杂交 瘤细胞稀释,用多孔培养板培养,使每孔中的细胞不超过一个,培养增殖后, 检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,以确定是不是所需要的杂交瘤细胞。 (3)杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质,不仅具有B淋巴细胞产生特异性抗 体的能力,还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力,从而可以 克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点,大量生产单克隆抗体知。识点一 知识点二
杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被腺嘌呤
阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖;鼠骨
髓瘤细胞中尽管只有D途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中
混合,加入聚乙二醇促融,获得杂交细胞。
方法:
。
原理:
。
知识点一
知识点二
答案:(1)获得能产生相应抗体的B淋巴细胞 (2)既能迅速大量增殖,又能产生特定抗体 (3)动物血清 (4)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (5)杂交瘤细胞 能产生特定抗体的杂交瘤细胞 (6)培养液中加入腺嘌呤,收集增殖的细胞 人的淋巴细胞及其自身融合 的细胞一般不分裂增殖,在培养液中加入腺嘌呤后,D合成途径被阻断,仅有 D合成途径的骨髓瘤细胞及其自身融合的细胞不能增殖,但人的淋巴细胞 和骨髓瘤细胞融合后形成的杂交细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成 DNA而增殖
