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18角度激光光散射仪凝胶色谱操作规程1、开机前准备：水：屈臣氏蒸馏水，有机溶剂：色谱纯。
缓冲盐溶液：配置完成后过2层0.22um滤膜。
流动相需准备充足。
2、系统平衡：根据需要选择凝胶柱以及需要连接的检测器。
开启脱气机，泵、柱温箱、检测器以及电脑开关。
点击quick start pump进行流速设置，点击ASTRA进行实验方法设置。
提前一天将流速调至试验所需流速进行系统平衡，其中注意流动相过渡问题，待检测器冲平后可进行进样分析。
3、进样：第一针建议标准样品归一化处理，用于激光18角度校正，建议进样前进行该处理。
多糖需用3-5mg/mL分子量为五万以下的右旋糖酐进行激光，蛋白质以2-4mg/mL的BSA作为归一化样品。
所以样品离心后取上层清液过0.45um滤膜。
手动进样器扳至load状态进行进样，一般需进3-5倍进样环体积以清洗进样环，点击软件中运行后将进样器扳至Inject状态进行数据采集。
4、数据分析：数据采集后需进行定基线、峰等数据处理，依据实验需要提前实验数据。
所有数据可以通过图表中邮件中edit进行数据导出。
5、关机：色谱柱和系统清洗-流动相冲洗2-3个小时，根据流动相性质选择合适溶剂过渡，如缓冲盐流动相冲洗后需用万分之二叠代钠清洗一晚上后换20%甲醇冲洗足够时间后，进行色谱柱保存，关闭仪器电源。
实验完成后做好登记工作。
6、注意事项：粘度检测器内部管理非常细，耐压性差，仪器开机后配有自动保护功能，故而使用粘度检测器时需先开机后启动泵。
进样后需用进样针清洗接头对进样器进行清洗。
仪器配置：1）18角度激光检测器：DAWN HELEOS 103 - 109 Da, 分子尺寸10-500nm ,激光波长：658nm ；2）粘度检测器：ViscoStar II 1-3mL/min；4 - 60℃温度可调；池体积：33 μL/ bridge arm 必须在线测试，连接GPC；3）RI检测器：Optilab rEX绝对折光指数范围（RIU）：1.2 - 1.8；4）柱温箱，脱气机等。
激光光散射技术lls原理
激光光散射技术(LLS)的原理是利用激光束照射水溶液样品，并测量散射光强度随时间或角度的变化规律，以获得样品的信息。
当激光束照射到水溶液样品时，会与样品中的粒子发生相互作用，散射光强度的变化反映了样品中粒子的不同特征，如粒子的尺寸、形状、浓度和相互作用等。
通过测量这些特征，可以深入了解样品的结构和性质，并进行相应的分析和应用。
在实际应用中，激光光散射技术常用于研究蛋白质、大分子聚合物、胶体粒子等颗粒的性质，可以提供粒径分布、形貌、溶液浓度等方面的信息。
此外，该技术还可以用于研究颗粒之间的相互作用和动力学过程，对于化学反应动力学、流体力学、生物医学等领域的研究具有重要意义。
以上内容仅供参考，建议查阅关于激光光散射技术的专业书籍或咨询相关专家以获取更全面准确的信息。
sec-mals原理SEC-MALS（Size Exclusion Chromatography with Multi-AngleLight Scattering）是一种结合尺寸排阻色谱和多角度光散射的分析方法，主要用于分析溶液中的高分子量生物大分子，如蛋白质、多肽、DNA、RNA 等。
SEC-MALS通过测量溶液中生物大分子的光散射强度及其粒径随时间的变化，从而获得样品的分子量、大小和构象等重要信息。
SEC（Size Exclusion Chromatography）是一种基于分子大小的色谱法，常用于高分子量分析。
此方法是基于溶液中生物大分子通过固相填料时的不同分子大小进而被分离出来的原理。
填料一般是由多孔性纳米级固体颗粒构成，形成了一个漏斗状的色谱柱。
溶液中的大分子无法进入填料孔隙，因此会以较快的速度通过色谱柱，而小分子能够进入填料孔隙，因此会以较慢的速度通过色谱柱。
通过对不同时间点的样品进行收集，可以得到不同大小的分子。
SEC相比其他色谱方法，具有样品制备简单、溶液稳定性好、分离速度快等优点。
MALS（Multi-Angle Light Scattering）是一种光散射原理。
当光通过样品中的粒子时，会发生散射现象。
根据散射光的角度和强度变化，可以获得样品中粒子的分子量和分子大小信息。
MALS主要使用的是小角散射（小于5°）和多角散射（5°到90°），这样可以实现对不同粒径粒子的散射信息的检测和分析。
MALS能够克服传统方法中分子大小对测量结果的影响，具有高精确度和高灵敏度的优点。
SEC-MALS结合了SEC和MALS两种原理的优点。
在SEC-MALS实验中，样品首先通过SEC色谱柱进行分离。
然后，在样品通过柱后，使用多角度光散射检测器对溶液中的生物大分子进行测量。
MALS检测器会收集被分离的样品，并且在不同角度下测量其散射光的强度变化。
通过使用与色谱柱联接的在线MALS检测器，可以实现对流动溶液中生物大分子的连续监测。
dls测试方法DLS测试方法引言：DLS（Dynamic Light Scattering）是一种常用的测试方法，用于研究微粒、聚合物、蛋白质等在溶液中的粒子大小和分布情况。
本文将介绍DLS测试方法的原理、仪器设备以及实验步骤，并探讨其应用领域和优缺点。
一、DLS测试原理DLS技术基于布朗运动原理，通过分析散射光的强度和频率分布，推断溶液中粒子的大小和分布情况。
当激光束照射到溶液中的微粒时，微粒会发生布朗运动，并引起散射光的频率变化。
通过测量散射光的强度和频率分布，可以得到微粒的尺寸分布曲线，即动态光散射曲线。
二、DLS仪器设备DLS测试仪主要由激光器、光学系统、散射探测器和计算机控制系统等组成。
激光器产生单色激光束，光学系统将激光束聚焦到待测试溶液上，散射光通过散射探测器接收并转换为电信号，计算机控制系统用于采集、处理和分析散射光信号，最终得到粒子大小和分布的结果。
三、DLS实验步骤1. 准备样品：将待测试的溶液制备好，确保样品中没有明显的颗粒物质或杂质。
2. 调试仪器：打开DLS测试仪，进行仪器的校准和调试，确保各项参数正常。
3. 设置实验条件：根据样品的特性和要求，设置合适的温度、浓度、pH值等实验条件。
4. 进行测试：将样品注入到测试池中，并将测试池放置在DLS测试仪中。
启动测试程序，开始进行测试。
5. 数据分析：测试完成后，通过计算机控制系统对采集到的散射光信号进行处理和分析，得到粒子大小和分布的结果。
6. 结果解读：根据实验结果，解读样品的粒子大小和分布情况，分析样品的特性和性质。
四、DLS测试的应用领域1. 生物医学：DLS技术可以用于研究蛋白质、抗体、病毒等生物大分子的粒子大小和稳定性，对于药物传输、疫苗开发等具有重要意义。
2. 材料科学：DLS技术可以用于研究纳米颗粒、胶体溶液等材料的粒子大小和分布，对于材料的合成和性能优化具有指导意义。
3. 环境监测：DLS技术可以用于研究水、空气等环境中的微粒和悬浮物的大小和浓度，对于环境污染的监测和评估具有重要作用。
静态光散射法测分子量解释说明以及概述1. 引言1.1 概述在化学和材料科学领域，准确测定分子量对于了解物质性质和反应机理至关重要。
静态光散射法作为一种常用的分子量测定方法，在近年来得到了广泛的应用和研究。
本文将对静态光散射法的原理、应用以及优缺点进行解释说明，并概述了使用该方法测定分子量的通用流程。
1.2 文章结构本文共分为五个部分，每个部分都有一个特定的目标。
第一部分为引言，主要介绍文章的背景、目的以及组织结构。
第二部分详细解释说明了静态光散射法在测定分子量中的原理、应用以及优缺点。
第三部分概述了静态光散射法测定分子量所涉及的对象与样品制备、分析仪器和实验条件设置，以及数据处理与结果解读的流程。
第四部分则描述了实验设计与结果分析，包括详细步骤描述、结果展示与数据分析，以及结果讨论与验证。
最后一部分是结论与展望，总结了主要结论并提出了进一步研究的方向。
1.3 目的本文的目的是系统地介绍静态光散射法在测定分子量中的原理、应用、优缺点以及实验过程。
通过阐述其背后的科学原理和适用性，旨在为读者提供关于静态光散射法这一重要技术的全面了解。
同时，本文还将利用具体实验设计和结果分析来验证该方法的可行性，并提出进一步研究该领域所需考虑的局限性和发展方向。
通过本文的详细阐述和分析，读者能够更好地掌握静态光散射法测量分子量的方法与技巧，从而推动相关领域的研究与应用进展。
2. 静态光散射法测分子量解释说明：静态光散射法是一种常用的测量溶液中聚合物分子质量的方法。
它基于了光在溶液中与分子发生相互作用后的散射现象，通过测量散射光的强度和角度来推算出分子的质量大小。
2.1 静态光散射法的原理：静态光散射法利用了Rayleigh散射现象，当入射光束经过溶液中的分子时，会发生散射现象。
根据Rayleigh-Gans-Debye近似，当入射光波长远大于样品颗粒直径时，在小角度范围内，可以得到强度与所研究分子数目、溶液浓度以及机械特性之间的关系。
测定白蛋白的方法有哪些测定白蛋白的方法多种多样，可以根据具体实验要求和条件选择合适的方法。
下面将介绍几种常见的测定白蛋白的方法。
一、比色法。
比色法是一种常用的测定白蛋白含量的方法。
通过在特定条件下，白蛋白与某些试剂发生显色反应，利用光度计测定溶液的吸光度，从而计算出白蛋白的含量。
常用的试剂有比溴酚蓝、铜离子等。
比色法操作简便，准确性高，是实验室常用的测定方法之一。
二、免疫测定法。
免疫测定法是利用抗体与抗原特异性结合的原理，通过测定免疫反应产物的数量来确定白蛋白的含量。
常用的免疫测定方法有酶联免疫吸附法（ELISA）、放射免疫测定法（RIA）等。
免疫测定法具有高灵敏度、高特异性和高准确性的特点，适用于测定白蛋白含量较低的样品。
三、电泳法。
电泳法是利用蛋白质在电场作用下的迁移速度差异来分离和测定蛋白质的含量。
常用的电泳方法有聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（2D-PAGE）等。
电泳法可以直接观察到蛋白质的分离情况，适用于复杂样品的分析。
四、质谱法。
质谱法是利用质谱仪对蛋白质进行分析和测定的方法。
常用的质谱方法有质谱联用技术（LC-MS）、气相色谱质谱联用技术（GC-MS）等。
质谱法具有高灵敏度和高分辨率的特点，可以用于测定蛋白质的分子量和结构。
五、光散射法。
光散射法是利用蛋白质溶液对光的散射特性来测定蛋白质的含量和分子量的方法。
通过测定散射光的强度和角度来计算蛋白质的含量和分子量。
光散射法操作简便，适用于测定大分子蛋白质的含量。
综上所述，测定白蛋白的方法有比色法、免疫测定法、电泳法、质谱法和光散射法等多种多样。
在实际应用中，可以根据实验要求和条件选择合适的方法进行测定。
希望以上内容对您有所帮助。
第1篇一、实验目的本实验旨在利用动态光散射（Dynamic Light Scattering，DLS）技术测量溶液中纳米颗粒的粒径分布，并分析其粒度特性。
二、实验原理动态光散射技术是一种非侵入性、实时监测溶液中颗粒运动的技术。
当一束激光照射到溶液中的颗粒时，颗粒会散射激光，散射光强随时间的变化与颗粒的粒径和布朗运动有关。
通过分析散射光强的时间自相关函数，可以计算出颗粒的粒径分布。
三、实验仪器与材料1. 仪器：- 动态光散射仪（例如：Nicomp 380）- 激光器（例如：633nm He-Ne激光器）- 光电倍增管- 数字相关器- 数据采集卡- 计算机2. 材料：- 纳米颗粒溶液（例如：聚苯乙烯胶乳）- 纯净水- 容量瓶- 移液器四、实验步骤1. 将纳米颗粒溶液稀释至适当浓度，用移液器移取一定体积的溶液至容量瓶中。
2. 将容量瓶置于动态光散射仪样品池中，确保样品池的温度稳定。
3. 打开动态光散射仪，设置激光波长、散射角度、测量时间等参数。
4. 启动动态光散射仪，记录散射光强随时间的变化数据。
5. 将数据导入计算机，进行自相关函数分析。
6. 利用自相关函数反演算法，计算颗粒的粒径分布。
五、实验结果与分析1. 实验测得的散射光强自相关函数如图1所示。
图1：散射光强自相关函数2. 通过自相关函数反演算法，得到颗粒的粒径分布如图2所示。
图2：颗粒粒径分布由图2可知，纳米颗粒的粒径分布主要集中在100-300nm范围内，平均粒径约为200nm。
六、实验讨论1. 实验结果表明，动态光散射技术可以有效地测量溶液中纳米颗粒的粒径分布，为纳米材料的研究提供了有力的工具。
2. 在实验过程中，需要注意以下因素：- 样品浓度：样品浓度过高会导致颗粒聚集，影响测量结果；样品浓度过低，则信号强度不足，难以进行精确测量。
- 温度：温度对颗粒的布朗运动有显著影响，实验过程中需确保样品池的温度稳定。
- 激光波长：不同波长的激光对颗粒的散射特性不同，选择合适的激光波长可以提高测量精度。
蛋白质浓度测定方法蛋白质是生物体内最重要的基本组成部分之一，它在维持生物体正常功能和结构方面起着重要的作用。
因此，准确测定蛋白质浓度对于许多生物学和生物化学研究非常重要。
目前常用的蛋白质浓度测定方法包括比色法、光散射法、蛋白质标记法和生物分析法。
下面将详细介绍这些方法。
1.比色法比色法是一种简单、快速测定蛋白质浓度的方法。
其中最常用的方法是布拉德福法和Lowry法。
布拉德福法基于显色剂康斯塔蓝G与蛋白质间的相互作用，形成一个蛋白质-康斯塔蓝G复合物，该复合物的吸光度在595 nm处最大。
根据吸光度与蛋白质浓度之间的关系，可以通过比较待测样品与标准曲线的吸光度值来计算样品中的蛋白质浓度。
Lowry法是一种比色酶促反应法，其原理是将含有蛋白质的样品与低浓度的碱式铜离子和富尔氏试剂（Folin-Ciocalteu试剂）作用，产生显色反应。
然后通过测量显色产物的吸光度来计算蛋白质浓度。
2.光散射法光散射法是通过测量蛋白质溶液中散射光的强度来计算蛋白质浓度的一种方法。
该方法根据蛋白质溶液中蛋白质粒子的大小和浓度的关系来进行测定。
常用的光散射仪器有多角度光散射（MALS）仪和动态光散射（DLS）仪。
多角度光散射法可以通过测量来自不同角度的散射光来获得粒子的大小和形状信息，从而计算蛋白质浓度。
动态光散射法通过测量溶液中颗粒的热运动来计算颗粒的尺寸和分布，根据颗粒尺寸和浓度的关系，可以推导出蛋白质的浓度。
3.蛋白质标记法蛋白质标记法是一种通过标记蛋白质而实现测定蛋白质浓度的方法。
常见的蛋白质标记物有生物素、放射性同位素和荧光染料等。
标记方法包括直接标记和间接标记。
直接标记是将标记物直接与蛋白质结合，然后通过测量标记物的信号来计算蛋白质浓度。
间接标记是将标记物与蛋白质反应生成复合物，然后通过测量复合物的信号来计算蛋白质浓度。
4.生物分析法生物分析法是一种利用生物体系来测定蛋白质浓度的方法。
常见的生物分析方法包括酶活测定、荧光素酶报告基因测定和亲和层析法等。
蛋白直径分子量蛋白质是生物体中至关重要的分子，其结构和功能的研究对于深入了解生命现象和疾病机制具有重要意义。
在蛋白质研究中，蛋白直径和分子量是两个关键参数。
本文将介绍蛋白直径与分子量的基本概念、测量方法以及在生物科学中的应用和重要性。
一、蛋白直径与分子量的基本概念蛋白直径是指蛋白质分子在空间中的最大尺寸，通常用纳米（nm）作为单位。
分子量则是指蛋白质分子中所有原子质量的总和，单位为道尔顿（Da）。
这两个参数可以反映蛋白质的结构特征和功能性质。
二、蛋白直径与分子量的测量方法1.光散射法：通过测量蛋白质溶液中的光散射强度，结合斯托克斯-埃雷尔方程，计算出蛋白直径和分子量。
2.动态光散射法：通过测量蛋白质溶液在动态条件下的光散射强度，计算出蛋白直径和分子量。
3.电泳法：利用电场驱动蛋白质分子在凝胶中迁移，根据迁移速度和分子量的关系，计算出蛋白直径和分子量。
4.质谱法：通过对蛋白质进行断裂解离，分析断裂片段的质量，推算出蛋白质的分子量。
三、蛋白直径与分子量的应用领域1.生物化学与分子生物学研究：蛋白直径和分子量对于研究蛋白质结构与功能的关系具有重要意义。
2.药物研发：通过测量药物靶点蛋白的直径和分子量，有助于筛选潜在的药物候选分子。
3.生物传感器：利用蛋白直径和分子量的特异性，开发具有高灵敏度和特异性的生物传感器。
4.生物工程：在蛋白质工程中，精确测量蛋白直径和分子量有助于优化蛋白质设计和生产过程。
四、蛋白直径与分子量在生物科学中的重要性1.结构生物学：蛋白直径和分子量是蛋白质结构研究的基础数据，有助于揭示蛋白质的空间构象和功能域。
2.功能研究：蛋白直径和分子量与蛋白质的生物活性、相互作用、定位等生物学功能密切相关。
3.疾病诊断与治疗：蛋白质异常导致的疾病，如肿瘤、炎症等，其蛋白直径和分子量的变化可作为疾病诊断和治疗的生物标志物。
五、提高蛋白直径与分子量测量技术的展望随着生物科学技术的不断发展，蛋白直径和分子量测量技术也在不断进步。
蛋白质分子量测定方法的比较梁永达（复旦大学药学院，上海）摘要：分子量是蛋白质主要的特征参数之一，近年来其测试方法发展十分迅速。
该文概述了目前蛋白质分子量测定中最常用的几种方法，包括粘度法、凝胶过滤层析法、凝胶渗透色谱法、SDS-凝胶电泳法、渗透压法、电喷雾离子化质谱技术、基质辅助激光解吸电离质谱技术、光散射法、超速离心沉降法，并比较了这几种方法的优缺点。
关键词：蛋白质分子量粘度法凝胶过滤层析法凝胶渗透色谱法SDS-凝胶电泳法渗透压法电喷雾离子化质谱技术基质辅助激光解吸电离质谱技术光散射法超速离心沉降法Comparison of the methods of molecular weightdetermination of proteinsLiangYongda(School of Pharmacy in Fudan University, Shanghai)Abstract: Molecular weight is one of the most important characteristic parameters of proteins，which leads the methods to determine protein molecular weight to develope rapidly in recent years. In this paper，the mechanism and application are briefly overviewed for the most widely used technologies including viscosity method, gel filtration chromatography, gel permeation chromatography, SDS-gel electrophoresis, osmotic pressure method, electrospray ionization mass spectrometry, matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry, light scattering, ultracentrifugation sedimentation. Plus, we compare these methods’advantages and disadvantages.Key words:molecular weight determination of proteins, viscosity method, gel filtration chromatography, gel permeation chromatography, SDS-gel electrophoresis, osmotic pressure method, electrospray ionization mass spectrometry, matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry, light scattering, ultracentrifugation sedimentation分子量是蛋白质的主要特征参数之一，当发现一种新的蛋白质时，首先应准确测定其分子量。
