“血小板卫星”现象
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在输液的同一臂侧抽血。
这样不仅使血容量发生改变,而且输液中的成分直接影响检测的结果,如血糖、肾功异常增高、二氧化碳结合力降低等,这种情况在实际工作中并不少见。
⑤抽错标本,主要发生在住院病人,是由于医务人员的责任心不强所致。
这种情况在实际工作中也会发生,这是一个很危险的因数,而又不容易被实验室人员所发现。
3 血液的孵育①孵育的方式,常推荐的是恒温水浴法,该法不仅可以加快血液的凝固,还可以保持一定的湿度,使血液中的成分含量不会发生较大的变化;而恒温孵箱孵育法,可以加快血液的凝固,但它同时使血液中的一部分水份蒸发导致结果偏高,尤其是临界值的指标。
建议各实验室统一使用恒温水浴法。
②孵育的时间,未加抗凝剂的血液需要孵育30~60m in 才能析出血清,而在实际工作中往往未达到所要求的时间。
致使血清分离不完全,部分凝血因子散落其中,形成血清凝块,堵塞仪器的管道,影响测定结果。
4 血清的离心分离血清的离心条件是1500~2000rp m 10~15m in,血浆的离心条件是2000~2500rp m 10~15m in 。
而有的实验室往往未达到离心时间的要求,致使血清(浆)分离不完全,在其中存在一些微粒成分,除了影响检测结果外,还有可能堵塞仪器的管道,致使仪器无法正常工作。
5 标本的移取在大多基层实验室,由于仪器的原因,往往无法将离心的标本直接测定,需要人工移取血清(浆)标本。
在移取的过程中,有些实验室人员一个吸头多用,造成交叉污染影响测定结果;有的甚至加错标本,造成结果完全错误。
这些都是要引起大家所重视的。
此外有的实验室同时使用血清与血浆来作生化项目的测定,虽然对一些指标没有显著的差异,但两者的介质却存在差异,血浆中的一些微粒对测定项目的比色有干扰。
因此在选择标本前要先做对照实验,结果没有差异后再慎重选用。
综上所述,影响血标本准备的因数很多,需要医务人员尤其是基层的同志要全面了解影响的各个环节,规范自己的操作,保证血液标本的质量,才能得到一个准确的结果。
1、血浆:于血液中加入抗凝剂,阻止血液凝固,经离心后分离出的上层液体即为血浆。
血清:是血液离体凝固后分离出来的液体。
血浆与血清的区别:离体血液凝固后的血清纤维蛋白原与一些凝血因子失去活性。
2、常用添加剂的主要用途与特点3、良好血涂片的“标准”①血膜至少长25mm,至玻片两侧边缘的距离约为5mm。
②血膜边缘要比玻片边缘窄,且边缘光滑,适用于油镜检查。
③血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布,末端呈方形或羽毛状。
④血膜末端无粒状、划线或裂隙。
⑤在镜检区域内,白细胞形态应无人为异常改变。
⑥无人为污染。
4、瑞氏染色法细胞受色原理:1物理吸附与化学亲和作用2PH的影响3甲醇的作用4甘油的作用5、技术误差:由于操作不规范或使用器材不准确造成的误差称为技术误差。
这类误差通过主观努力可以避免或显著减小,属系统误差。
固有误差(inherent error):包括计数域误差、计数室误差和吸管误差。
6、7、生理性变化红细胞数量受到许多生理因素影响,但与相同年龄、性别人群的参考区间相比,一般在±20%以内。
红细胞生理性变化与临床意义8、病理性变化:病理性减少:按病因不同可将贫血分为3大类。
此外,药物也可引起贫血。
1)红细胞生成减少:①骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血、急性造血功能停滞等。
②造血物质缺乏或利用障碍,如肾性贫血、缺铁性贫血(铁缺乏)、铁粒幼细胞贫血(铁利用障碍)、巨幼细胞贫血(叶酸、维生素B12缺乏性DNA合成障碍)等。
2)红细胞破坏过多3)红细胞丢失(失血):如急性、慢性失血性贫血。
9、原理HiCN法检测原理:血红蛋白(硫化血红蛋白除外)中的亚铁离子(Fe2+)被高铁氰化钾氧化为高铁离子(Fe3+),血红蛋白转化成高铁血红蛋白(Hi)。
Hi与氰化钾(KCN)中的氰离子反应生成HiCN。
HiCN最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。
在特定条件下,HiCN 毫摩尔消光系数为44L/(mmol•cm)。
HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比,根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度。
肝硬化血小板减少的病理生理发生机制肖函;王利【期刊名称】《实用肝脏病杂志》【年(卷),期】2019(022)004【总页数】4页(P462-465)【关键词】肝硬化;血小板减少;发生机制【作者】肖函;王利【作者单位】400010重庆市重庆医科大学附属第一医院血液科;400010重庆市重庆医科大学附属第一医院血液科【正文语种】中文血小板减少是肝硬化并发的最常见血液系统病症。
以往认为肝硬化患者血小板减少主要系门静脉高压脾脏长大、脾脏功能亢进,脾脏巨噬细胞吞噬及脾脏滞留大量血小板所致。
近年新认识的肝硬化血小板减少病理生理机制表明,除了脾脏因素外,其它导致血小板减少的机制应该引起临床医师的关注,了解这些新的理念,有助于调整临床治疗策略。
1 血小板生成的生理过程巨核细胞是从骨髓造血干细胞、原始巨核细胞、幼稚巨核细胞分化而来的细胞,是正常骨髓中一种能生成血小板的成熟细胞,核很大,数量非常少。
成熟的巨核细胞又经历了:①颗粒型巨核细胞:胞核大,胞质丰富,染粉红色,夹杂有蓝色,质内含有大量细小的紫红色颗粒,常聚集成簇,但无血小板形成;②产生血小板型巨核细胞(产板细胞):胞体巨大,有时可达100μm,胞核高度分叶状,胞质呈均匀粉红色,质内充满大小不等的紫红色颗粒或血小板。
胞膜不清晰,多呈伪足状,其内侧及外侧常有血小板的堆集;③裸核型巨核细胞:产板细胞的胞浆解体后,释放出大量血小板,仅剩一裸核。
这些被细胞膜包围的与巨核细胞胞质分离的小块胞质,进入血循环成为血小板。
每个巨核细胞产生约300~4000个血小板。
新生血小板先通过脾脏,约有1/3在此贮存,约2/3在末梢血循环中。
贮存的血小板可与进入循环中的血小板自由交换,以维持血中的正常量。
血小板寿命约7~14天,每天约更新总量的1/10,衰老的血小板大多在脾脏中被清除。
循环中血小板正常值为100~300×109/L。
血小板的生成受血液中的血小板生成素(thrombopoietin,TPO)调节。
临床基础检验技术名词解释1.血清:未抗凝全血经自然凝固或添加促凝剂后分离出来的液体称为血清,用于临床化学与免疫学检测等2.血浆:抗凝全血离心后上清部分为血浆。
3.抗凝:用化学或物理的方法,抑制或除掉血液中某些凝血因子以阻止血液凝固的方法称为抗凝。
4.腺癌:发生于大支气管及段支气管以上的支气管黏膜鳞状化生上皮。
5.鳞癌:常发生于小支气管,尤以周围型肺癌多见。
6.核异质细胞:指细胞核发生异常改变,但细胞质分化正常的细胞,核异质表现为核的大小、形态异常、染色质增多、分布不均、核膜增厚、边界不整齐等。
7.乳糜尿:是由于泌尿系统淋巴管破裂或深部淋巴管阻塞致使乳糜液或淋巴液进入尿液,尿液呈乳白色混浊,称乳糜尿。
8.凝溶蛋白:本周蛋白在pH4.9左右条件下,加热到40-60℃时可发生凝固,温度升至90-100℃时溶解,而温度降低至56℃左右,又可重新凝固,故称凝溶蛋白。
9.晨尿:是指清晨起床后,未进早餐和做运动之前第一次排出的尿液。
10.类白血病反应:是指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。
11.HiCN法:氰化高铁血红蛋白法,是指血红蛋白(SHb除外)中的亚铁离子被高铁氰化钾氧化为高铁离子,血红蛋白转化成高铁血红蛋白(Hi)。
Hi与氰化钾中氰离子反应生成HiCN。
HiCN最大吸收波峰为540nm,吸光度与浓度成正比,根据测得的吸光度值可求得血红蛋白浓度。
12.尿三杯试验:患者一次连续排尿,分别采集前段、中段、末段的尿液,分装于3个尿杯中,多用于泌尿系统出血部位的定位和尿道炎的诊断。
13.卡波环:在嗜多色性或嗜碱性点彩红细胞的胞质中出现的紫红色细线圈结构,有时绕成“8”形。
现认为可能是胞质中脂蛋白变性所致,见于巨幼细胞贫血和铅中毒患者等。
14.有核红细胞:为幼红细胞,存在于骨髓中;正常成人外周血中不能找到,如出现属病理现象。
15.棒状小体(Auer body):是指白细胞胞质中出现的紫红色细杆状物质,一个或数个,长1-6μm。
血常规检验有哪些误差问题血常规检验为临床中常用的一种诊断、预后评估方式,此方式主要是对血液标本内红细胞、白细胞、血小板等指标展开检测,其可为医师疾病诊疗工作提供有力支持。
但临床实践发现,血液标本检验存在较高的误差发生风险,易影响临床医师对患者病情的判断,致使患者病情延误,损害患者生命健康,引发医患纠纷,使医院形象遭受损害。
因此,提升血常规检验结果精确性尤为重要,只有充分了解血常规检验常见误差,分析误差发生原因,才可针对性拟定预防与控制方案,减少血常规检验误差现象的发生。
一、血常规检验有哪些误差问题(一)白细胞假性升高有核红细胞和红细胞溶血不良为造成白细胞假性升高的重要原因,患有肝病或高血脂症等疾病的患者,其红细胞表面脂质代谢异常,正常浓度的溶血剂无法对红细胞造成彻底破坏,其生成的红细胞碎片具备与淋巴细胞接近的体积,易让检验人员误认为淋巴细胞计数升高,从而被认为是红细胞计数假性降低;对于溶血状况不佳的血液标本,待置换血浆或稀释2倍后可实行精准的白细胞计数测定。
从实质上讲,有核红细胞为未成熟的红细胞,白细胞稀释液难以对其造成破坏,因此在实际检查期间易将其误看作白细胞,从而致使白细胞计数假性升高,鉴于此情形,检验人员可利用XN9000、LH750等新式血液分析仪对有核红细胞进行检测,使用仪器对淋巴细胞分类值和白细胞计数值进行自动校准,或是采取手工形式展开镜检计数,并利用白细胞计数(校正后)=100×白细胞(校正前)/(100+有核红细胞)的公式予以校正。
(二)白细胞假性降低白细胞假性降低状况比较少,此种情形的发生多是由于患有自身免疫性疾病、感染等疾病而造成白细胞聚集。
对血液标本实施温浴处理(37℃;10min),便可将白细胞聚集问题解决,恢复白细胞检验结果。
(三)血小板假性升高血小板是血液中一种最为常见的血细胞,小红细胞、红细胞碎片的存在、白细胞大量碎裂均易造成血小板假性升高。
其中造成红细胞碎裂形成碎片的原因众多,如抽血困难、血液样品储存不合理(温度过高、时间过长等)等,上述原因均会致使血液样品产生溶血问题;而小红细胞出现原因主要为患者机体营养不良,伴随贫血等疾病,红细胞蛋白合成量不足,从而产生直径在6μm以下的小红细胞;而白细胞大量碎裂原因则为患者存在淋巴瘤疾病或重度感染性疾病等疾病,或接受放化疗治疗,从而致使白细胞大量碎裂。
血常规检验常见误差分析作为最基本的血液检查项目之一,血常规能够对红细胞计数、白细胞计数、血小板技术、血红蛋白浓度等血液各指标情况进行分析,从而判断被检测人员是否患有疾病,并对不同类型疾病的诊断、治疗等提供重要参考。
但是可能受到各方面因素的影响,在血常规检验过程中可能会出现各种误差,误差会为检测结果的准确性带来严重影响。
那么在血常规检查中出现了误差应该如何发现,如何纠正呢?1红细胞假性减低在血常规检查工作开展的过程中,可能会受到周围环境的影响,例如在冬季或是北方地区,环境温度较低,这会对检测结果造成一定影响。
具体表现为RBC和HGB的比例失调,MCV、MCH、MCHC异常增高等,让医护人员无法确切了解到患者的具体情况。
这一问题的出现很有可能是由冷凝集导致的,患者血液中含有高效价的冷凝集素,在这种情况下,红细胞等有形成分就会出现聚集。
红细胞的冷凝集多会出现在患有血吸虫病、丝虫病、肝硬化、肝炎支原体感染的患者人群中。
当出现了红细胞假性减低的情况时,也可以采取有效的方式进行纠正,即将检测样品放置在37℃的环境中,培育15-30分钟之后再次进行检测,此时如果被检测人员没有患有疾病,那么检测结果就会恢复正常。
2红细胞假性增高红细胞假性增高发生的主要原因在于,患者体内水分在短时间内加速流失,造成了血液流失。
假性增高可能是暂时的,此时患者会出现不同程度的呕吐、腹泻、剧烈运动后出汗量增加等,或是大面积烧伤、使用利尿剂的人群身体内部水分加快流失,从而引起红细胞假性增高。
除了这方面因素之外,还有会因为吸烟过度、精神紧张、过度肥胖等因素引起,主要对症进行治疗,祛除诱发因素,保持身体内的水分平衡,红细胞假性增高的情况可以得到解决。
在血常规检验过程中,如果血液样品在空气中暴露的时间过长发生了沉淀,或是并没有充分混合均匀,都有可能出现红细胞假性增高的情况。
3白细胞假性减低在血常规检验中,白细胞假性减低的情况罕有发生,当被检测人员血液中出现了这种情况时,多是由免洗系统受损、免疫性疾病、感染性疾病因素引起的。
“血小板卫星现象”对计数的影响
钟国梁
使用EDTA-2K抗凝,少数患者血涂片尾部可以看到簇状聚集的血小板,有时还可以看到血小板粘附于白细胞周围,形成所谓的“血小板卫星”,导致血细胞分析仪计数的血小板偏低。
血小板聚集为团块状血小板在中性粒细胞周围形成卫星现象
EDTA诱导"血小板卫星现象"(platelet satellitism),引起假性血小板减少即EDTA依赖性血小板减少症(PTCP)应该受到广泛重视,临床发生率约为0.09%-0.21%。
由于用EDTA盐(EDTA盐干粉抗凝剂,乙二胺四乙酸)干粉抗凝剂,在作为免疫介导的血液中,可出现的冷抗血小板自身抗体,使血小板互相凝集现象。
这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体,直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa上。
同时,这种与血小板结合的自身抗体Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合,出现卫星现象。
引起血小板聚集出现卫星现象后,在全自动血细胞计数仪上检测时,发生假性血小板计数减少的现象。
原因有以下几点:
1.凝出现问题。
可能是抗凝比例不对,过高会导致卫星现象。
2.放置时间过短,这也是在25分钟之内测试分类不好血小板不稳的重要原因,EDTA抗凝剂与血小板凝血因子反应结合需要时间,这个时间随着温度的升高而缩短,这也就是天气变冷的时候容易出现问题的原因。
3.“血小板卫星现象”的原因还与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关。
只有当EDTA存在的条件下,机体的IgG 或者IgM 抗体可以对血小板的某些表位发生反应。
EDTA可引起血小板糖膜(GP)发生改变,即血小板形态发生变化,由正常的圆盘状变为圆球形,改变了血小板膜表面某种隐匿性抗原构象。
部分病人血浆中存在的某种自身抗体与这种改变构象的抗原结合后的抗原抗体复合物激活了细胞膜中的磷酯酶,使血小板膜水解并释放胶原、凝血酶原等血小板活性物质。
这些血小板活性物质都能不同程度的活化血小板纤维蛋白原受体(FIR-B),促使血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团,导致血小板假性减少。
血小板在体外明显簇集不多见,但一旦发生即可引起血小板减少,发生假性血小板计数减少的现象,这种现象会导致临床增加其他不必要的辅助检查,甚至引起临床误诊、误治。
因而,若对临床上无任何出血症状与体征、出血和凝血时间正常而血细胞分析仪计数出现血小板异常低值时,可进行血涂片做瑞氏染色镜检,观察血小板有无聚集现象,正常血小板分布应该三五成群、散在分布,同时采末梢血用血小板稀释液稀释并充池作血小板手工计数来校正。
对于这种假性血小板减少,这种情况的发生于疾病无特殊的相关性,既可以见于正常人,也可以见于病人。
因此在做血常规时,若血小板计数低时,有可能是血小板聚集成堆或大血小板被血细胞分析仪误计为红细胞,可结合RBC、PLT直方图的相关参数来判断:正常血小板主要集中在2~20fl范围内,通常在2~30fl范围内分析血小板。
由于血小板与血细胞在同一通道内测量,而两者在体积有明显的差异,故仪器设定了特定的阈值,将高于阈值者定于红细胞,反之为血小板。
①大血小板直方图:曲线峰右侧右移,在大于30fl的某一点与横坐标重合,MPV值明显增高。
②聚集的血小板直方图:曲线峰变低,如果标本中血小板以轻度聚集为主,曲线峰右侧抬高呈拖尾状,不与横坐标重合。
此时血小板计数值高低不一,通常与未发生聚集时血小板数有关。
此时应推片镜检观察血小板形态并做血小板人工计数,以免误报结果。