专题2_课题1_微生物的实验室培养

高二生物选修1 训练案一、选择题：1．下列4种生物中，哪一种生物的细胞结构与其他3种生物的细胞有明显的区别：（）A．酵母菌B．乳酸菌C．青霉菌D．蘑菇2．细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌。

如果只有在100℃的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪一种生物仍会存活？（）A．大肠杆菌B．一种青霉菌 C．枯草芽孢杆菌D．鼠伤寒沙门氏菌3．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌：（）A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针D．接种针、手、高压锅4、在微生物培养过程中，需要对培养基等进行灭菌，其标准是：（）Ａ．杀死所有的病原微生物Ｂ．杀死所有的微生物Ｃ．杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子Ｄ．使病原菌不生长5．获得纯净培养物的关键是：（）Ａ．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D.防止外来杂菌的入侵6．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是：（）A．.对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基上是否生有杂菌C．没必要放入未接种的培养基D．为了下次接种时再使用7．下列叙述错误的是：（）Ａ．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素Ｂ．培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性Ｃ．培养细菌时需将PH调至中性或微碱性Ｄ．培养厌氧微生物时则需要提B供无氧的条件8．关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是：（）A.称量B.灭菌C.溶化D.倒平板9、下列有关碳源的叙述不正确的是：（）A．碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物B．某些碳源可以作为微生物的主要能源物质C．蛋白质一定不能做碳源 D．不同种类的微生物的碳源可能不同10、消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。

消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。

⑥ CaCl2 0.5g
⑦
H2O
100m l
（四）无菌技术
1概念 : 无菌技术泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 是获得纯净培养物的关键。
主要包括以下几个方面： ①操作空间，操作者的衣服和手需消毒 ②微生物培养器皿，接种用具和培养基需灭菌 ③微生物实验操作应该在酒精灯火焰旁进行 ④应该避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触
三.菌种的保藏：
1.临时保藏： 试管固体斜面培养基上 4℃ 菌种易被污染、变异
2.长期保存： 甘油管藏 1ml甘油＋1ml菌液 －20℃
纯化培养
制备培养基 1.计算
2.称量 3.溶化
4.灭菌
5.倒平板
（凝固后倒置）
接种
平稀 板释 划涂 线布 法平
板 法
培养 保藏
37°C 恒温箱 临 长
时期
(2019年高考-新课标Ⅰ卷) [ 生物──选修1生物技术实践]（15分）
3、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要， 请选择合适的方法。 ⑴培养细菌用的培养基与培养皿⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管⑶实 验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒
三.大肠杆菌的纯化培养
分散成单个细胞, 形成单个菌落
实验操作
（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 （二）纯化大肠杆菌 （三）培养12h和24h后，观察并记录
。
（2）若除去成分②，加入（CH2O），该
培养基可用于培养 固氮微生物
。
（3）表中营养成分共有 3
类。
（4）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增
加的成分是 琼脂（或凝固剂） 。
编号 成分 含量
① 粉状硫 10g

专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养理一理判一判1.所有的培养基中都要加入琼脂。

(×)2．微生物在液体培养基表面生长可形成菌落。

(×)3．培养不同微生物的培养基成分完全一样。

(×)4．培养纯净培养物的关键是防止杂菌污染。

(√)5．相对于消毒，灭菌对微生物的杀灭更彻底。

(√)6．无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

(×)7．培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

(√)8．倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置。

(√)9．若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用。

(√)10．采取平板划线接种法时，每一次划线前都要挑取菌种。

(×)11．对微生物进行计数时最好采用稀释涂布平板法。

(√)12．需要一个不接种的培养基放在相同条件下培养以检验培养基的灭菌是否合格。

(√)悟一悟1.牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供的主要营养是碳源、氮源和维生素。

2．溶化后如需调整pH，应先调节pH，再灭菌。

3．培养基灭菌后要冷却到50 ℃左右时开始倒平板，其原因是琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃会烫手，低于50 ℃时，若不及时操作，琼脂会凝固。

4．倒平板时，要使锥形瓶的瓶口通过火焰。

通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

5．平板冷凝后，要将平板倒置。

因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可避免培养基中的水分过快地蒸发。

6．在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。

感悟体会：练一练1.[2019·江苏高考题]下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是( )A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基解析：接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A项错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B项正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C项正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D项正确。

③接种可疑菌后,在温度为 35 ℃的环境中培养 24 h,液体培养基变浑浊,原因是
。对照组试管中应加入 ,与实验组同时培养 6 h 后,若实验组液体
培养基的浑浊度比对照组 (填“高”或“低”),则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染;反之,
则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体
3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( ) A.培养基一般都含水、碳源、氮源和无机盐 B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用 C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数 解析:涂布接种时,涂布器应在酒精灯火焰引燃灭菌,冷却后再使用;用液体培养基培养微生物时, 应放在摇床上,培养皿中的是固体培养基,应倒置放在恒温培养箱内培养;菌落肉眼可见,不需要 借助于显微镜。 答案:A
的原因是
。
解析:实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的
方法灭菌。对于一些不耐高温的液体,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高温瞬时消毒法消毒,这种
消毒方法的优点是可以杀死牛奶中的微生物,并且牛奶中的营养成分基本不被破坏。自来水通
常用氯气消毒,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微
6.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境 解析:接种环等金属用具应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。 答案:B