【CN109568418A】一种栀子提取物的制备方法及其应用【专利】

( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910055708 .X
(22)申请日 2019 .01 .22
(71)申请人 黑龙江八一农垦大学 地址 163000 黑龙江省大庆市高新技术开 发区新风路5号
(72)发明人 崔一喆 王秋菊
(74)专利代理机构 大庆禹奥专利事务所 23208 代理人 朱士文 杨晓梅
权利要求书1页 说明书5页 附图1页
CN 109568418 A
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权 利 要 求 书
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1 .一种栀子提取物的制备方法，其特征在于，具体步骤如下： 步骤一、选取新鲜的 栀子100g ，浸泡30min ，加入水 ，所述栀子与水的重量比 为1 ：6 ，于80 ℃条件下超声2次，每次30min； 步骤二、将步骤一得到的滤液合并，离心取上清液，所述离心的转速为3000 r/min； 步骤三、将步骤二得到的上清液在50℃温度下减压旋转浓缩到100mL得到原液，相对浓 度为1g/ml； 步骤四、将步骤三得到的原液在100℃下蒸煮20min，在4℃下保存。 2 .权利要求1所述的栀子提取物在抑制肠黏膜损伤中的应用。 3 .根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的肠黏膜损伤为LPS诱导型肠黏膜损 伤。
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ห้องสมุดไป่ตู้
说 明 书
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一种栀子提取物的制备方法及其应用
技术领域 [0001] 本发明属于植物提取物领域，特别涉及一种栀子提取物的制备方法及其应用。
背景技术 [0002] 肠道在消化和吸收营养、平衡微生物、保护免疫功能方面起着关键作用，并且起到 了抵抗有害病原体和抗原的屏障作用。脂多糖(LPS/内毒素)是革兰氏阴性菌外膜的主要成 分 ，是肠粘膜损伤的常见诱因。LPS诱导的 细胞因子释放导致肠粘膜损伤的 病理生理紊乱。 许多细胞信号的激活都与LPS有关。LPS不仅触发免疫应答，而且激活巨噬细胞、内皮细胞、 上皮细胞和免疫细胞中的促凋亡信号。尽管人们对肠粘膜损伤的病理生理学有了越来越多 的了解，但是其在诱导细胞因子表达和激活/募集肠粘膜损伤中的免疫调节机制仍不清楚。 [0003] 栀子属茜草科常绿乔木，在中国多处栽培。它生长在许多温带地区，具有芳香的白 蔷薇属植物。不仅作为天然黄色染料使用，还具有多种生物活性。如抗糖尿病、抗炎、抗抑 郁、抗氧化以 及改 善睡眠 质量。然而 ，关于栀子水提物的 研究 报道并不多。一些研究 表明 栀 子苷抑制脂多糖诱导的细胞凋亡。目前尚不清楚口服栀子水提物是否对肠粘膜损伤有保护 作用。本实验研究了栀子水提物对LPS诱导的小鼠实验性肠粘膜损伤的保护作用。
(51)Int .Cl . A61K 36/744(2006 .01) A61P 1/00(2006 .01)
(10)申请公布号 CN 109568418 A (43)申请公布日 2019.04.05
( 54 )发明 名称 一种栀子提取物的制备方法及其应用
( 57 )摘要 本发明涉及一种栀子提取物的制备方法。本
附图说明 [0010] 图1是镜下各组小鼠十二指肠黏膜组织HE染色(×100刻度: 50μm)；
其中，a .对照组；b . LPS 模型组；c .栀子水提物低剂量组；d .栀子水提物中剂量组；e . 栀子水提物高剂量组。
发明还涉及上述栀子提取物在肠粘膜损伤中的 应用。本发明的有益效果是通过建立栀子水提物 模型 ，分 别注射LPS ，之 后测定细胞因子浓度 ，十 二指肠抗氧化指标并在光学显微镜下观察组织 病理学情况，结果表明 ，栀子水提物能显著抑制 LPS诱导的TNF-α、IL-6和IL-1的产生。栀子水提 物通过上调总抗氧化能力( T-AOC )、总超氧化物 歧化酶( T-SOD )和谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-PX ) 的活性 ，从而发挥抗炎 和抗氧化作 用。栀子水提 物对肠黏膜损伤有较好的抑制作用，是肠黏膜损 伤的一种有潜力的保护剂剂。
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说 明 书
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依赖性。4、栀子高中低剂量组总抗氧化能力（T-AOC）含量明显高于LPS模型组，差异显著。栀 子高中低剂量组十二指肠组织中总超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）的表达明显增加，有显著性差异。说明栀子水提物（GD）具有保护肠上皮细胞免受氧自由 基损伤的作用。
发明内容 [0004] 本发明的第一目的是提供一种栀子提取物的制备方法。 [0005] 本发明的第二目的是提供上述栀子提取物在抑制肠粘膜损伤中的应用。 [0006] 本发明通过以下技术方案来实现：
一、一种栀子提取物的制备方法，具体步骤如下： 步骤一、选取新鲜的栀子100g，浸泡30min，加入水，所述栀子与水的重量比为1：6，于80 ℃条件下超声2次，每次30min； 步骤二、将步骤一得到的滤液合并，离心取上清液，所述离心的转速为3000 r/min； 步骤三、将步骤二得到的上清液在50℃温度下减压旋转浓缩到100mL得到原液，相对浓 度为1g/ml； 步骤四、将步骤三得到的原液在100℃下蒸煮20min，在4℃下保存。 [0007] 二、上述栀子提取物在抑制肠黏膜损伤中的应用。 [0008] 具体的，所述的肠黏膜损伤为LPS诱导型肠黏膜损伤。 [0009] 采 用上述技术方案的积极效果 ：1、栀子水提物降 低了血清中 肿瘤坏死因子-α (TNF)-α、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-8（IL-8）的浓度，表明 栀子水提物在减少肠粘膜炎症方面是有益的 ，且白 细胞介素-2（IL-2）水平与细胞免疫功能 呈正 相关 ，说明 栀子水提物能提高 细胞的免疫防 御和免疫修复能 力。2、栀子水提物可显著 调节小鼠 十二指肠组织中促炎因子与抗炎因子的失衡 ，降 低局部免疫反应状态 ，减轻粘膜 炎症损伤，这可能是治疗肠粘膜损伤的机制之一。3、栀子水提物增加了十二指肠绒毛/窝的 比 例和绒毛高度 ，并降 低了窝深 ，说明栀子水提物对小鼠 肠粘膜损伤有抑制作用，且呈剂量