蔬果中维生素C含量的检测方法

果蔬中维生素c的含量测定实验
果蔬中维生素C的含量是人体健康的关键指标，因此对果蔬中维生素C的测定是非常重要的。

本文将详细介绍果蔬中维生素C的测定实验。

要进行果蔬中维生素C的测定，基本步骤如下：
一、采集样品：新鲜的果蔬-洋葱，例如橙子、番茄、苹果、芒果、橘子等，用量大约25克；
二、剥皮处理：将果蔬材料切片、捣碎成粉末，剔除表皮；
三、加入溶剂：将粉末加入溶剂，搅拌均匀，放入离心管中；
四、超声处理：将离心管放入超声波破碎机中，以一定的时间进行分散处理；
五、进行实验：将处理后的溶液放入滴定管中，滴定金属离子，用负氧化氢酸测定维生素C含量。

本实验只需要简单的实验步骤就可以测定果蔬中维生素C的含量。

不仅耗时短，而且结果准确，且方便测量大批量的样品。

本实验的结果表明，不同果蔬中维生素C的含量是不同的。

比如，橙子含有90～
120mg/100g维生素C，苹果含有更少，只有60mg/100g，而芒果中则含有100～
170mg/100g。

所以，每天摄取含维生素C果蔬多样化，可以提供充足的维生素C，以保持人体健康。

本实验表明，测定果蔬中维生素C的含量是非常重要的，因此，在果蔬中摄取充足的维生素C，是保持健康的一个很好的方式。

实验三果蔬中维生素C的定量测定（紫外法）（4学时）一、实验目的1. 学习用铜离子氧化法测定维生素C（Vc）（紫外法）；2. 了解Vc定量测定的其他方法，如：磷钼酸比色法、碘量法、2,6-二氯酚靛酚滴定法（近年来用全自动电位滴定仪进行电位滴定）、紫外法、2,4-二硝基苯肼测定总抗坏血酸量、高效液相色谱法、毛细管电泳法、荧光法、Flinb近红外分光光度法等。

二、实验原理抗坏血酸在波长243～267nm处有较高的吸收值，但在样品成分比较复杂时，因有强烈的背景吸收而不适宜用紫外法测定其Vc含量。

用碱加热法等处理法都存在试剂较贵、操作复杂、时问长等一系列问题而不能广泛应用。

利用铜离子消除背景误差，能直接测定一些水果蔬菜样品中的Vc含量而不需要进行前处理，操作简单干扰少。

附加说明：在测定Vc的国标方法中，荧光法为测定食物中Vc含量的第一标准方法，2,4-二硝基苯肼法作为第二法。

三、实验器材与试剂实验材料桔子实验器材紫外/可见分光光度计；涡旋混合仪；高速冷冻离心机；榨汁器；电热恒温水浴锅；试管与试管架；胶头器长滴管及移液管；250mL烧杯等。

实验试剂1. 120μg/mL Vc贮液：120mg Vc，加适量蒸馏水溶解，然后用1000毫升容量瓶定容。

存4℃备用。

2. 5μg/mL的铜离子溶液：①先配成1000μg/mL的硫酸铜溶液；②取上述硫酸铜溶液5mL，加入1mol/L的醋酸溶液7mL及1mol/L醋酸钠200mL，用蒸馏水定容。

③5×104mol/L的EDTA溶液：36.5mgEDTA溶于适量蒸馏水，250 mL 馏水定容。

④铜离子-EDTA混合液（6.2×105mol/L）：使用前将上述铜离子溶液和EDTA以4:1（v/v）混合而成（现用现配）。

四、实验步骤1. 标准曲线制作取12支试管（大试管）分成2组，按下表进行操作。

维生素C溶液浓度为120μg/mL。

2. 样品测试取一定量的桔子瓣记录克数。

果蔬维生素C含量测定原理：还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。

还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸，在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。

试剂配制：(1)2％草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000ml(2)0.2 mg/ml抗坏血酸标准溶液：准确称取10 mg抗坏血酸，溶于2％草酸溶液中，定容到50 ml容量瓶中，置冰箱中保存。

(3)2，6-二氯靛酚溶液：称取50 mg2，6-二氯靛酚钠盐，溶于50 ml热水中，冷却后用蒸馏水定容至250 ml容量瓶中。

过滤后，置于棕色药瓶中保存在冰箱内。

步骤1.标准抗坏血酸溶液的标定吸取标准抗坏血酸溶液2 ml，加入5 ml20 g/L的草酸溶液，以2，6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色即为终点。

用同时刚配好的V C标准溶液标定，记录每ml 2，6-二氯靛酚溶液相当于V C的毫克数（mg/ml）。

2.样品的准备及滴定取样品匀浆10.0 g，加入90 ml 2％草酸溶液，定容至100 ml，过滤备用。

用标定过的2，6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色为止，记下染料的用量，重复三遍。

3.维生素C含量计算W=（V0-V1）A*100/MW为100g鲜样样品中含抗坏血酸的毫克数V0为滴定样品所用的染料的ml数。

V1为空白样品所用的染料的ml数。

A为1ml染料溶液相当于维生素C的毫克数（mg/ml）。

M为取样量即样品克数。

第三法2,6-二氯靛酚滴定法17 原理用蓝色的碱性染料2,6-二氯靛酚标准溶液对含L(+)-抗坏血酸的试样酸性浸出液进行氧化还原滴定,2,6-二氯靛酚被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的2,6-二氯靛酚在酸性介质中显浅红色,由2,6-二氯靛酚的消耗量计算样品中L(+)-抗坏血酸的含量。

紫外分光光度计法测定果蔬中维生素c的含量紫外分光光度计法是一种常用的测定果蔬中维生素C含量的方法。

维生素C具有强的紫外吸收性质，在265nm处有最大吸收峰。

通过测定样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度，可以比较它们的维生素C含量。

以下是该方法的详细步骤：一、目的本实验的目的是通过紫外分光光度计法测定果蔬中维生素C的含量，了解其含量变化情况，为科学饮食提供参考。

二、原理维生素C具有强的紫外吸收性质，在265nm处有最大吸收峰。

在实验条件下，一定浓度的维生素C溶液与其吸光度呈线性关系。

通过比较样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度，可以求出样品中维生素C的含量。

三、实验步骤1.标准曲线的制作（1）配制不同浓度的维生素C标准溶液。

分别称取0.05g、0.1g、0.2g、0.3g、0.4g的维生素C，用蒸馏水定容至100mL，得到浓度分别为5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、40mg/mL的溶液。

（2）用1cm石英比色皿分别在紫外分光光度计上测定各标准溶液在265nm处的吸光度。

（3）以维生素C浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

2.样品处理（1）将果蔬样品洗净，晾干表面水分。

（2）将样品切成小块，放入榨汁机中榨汁，收集榨出的汁液。

（3）用纱布过滤，去除汁液中的杂质和果肉颗粒。

（4）将滤液倒入50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

3.测定样品吸光度（1）用移液管准确移取5mL样品溶液于1cm石英比色皿中。

（2）在紫外分光光度计上测定样品溶液在265nm处的吸光度。

4.计算样品中维生素C的含量（1）从标准曲线上查得相应的维生素C浓度（mg/mL）。

（2）计算样品中维生素C的含量（mg/100g），公式如下：维生素C含量 = 查得浓度× 溶液体积× 稀释倍数 / 样品质量其中，溶液体积为50mL，稀释倍数为100（即5mL样品溶液稀释成50mL），样品质量为榨出的果蔬质量。