高效液相色谱法测定阿昔洛韦软膏的含量

高效液相色谱法测定阿苯达唑原料药的含量　

张　乐　

（江苏农牧科技职业学院动物药学院，江苏泰州２２５３００）　

摘要：为建立一种阿苯达唑原料药含量测定的高效液相方法，采用方法：色谱条件：ＡｇｉｌｅｎｔＯＤＳ　Ｃ１８（５ｔｘｍ，３．０ｘｌ５０ｍｍ）色　谱柱；以甲醇为流动相Ａ；磷酸二氢钠水溶液（１ｌｇ－￣８００ｍ１）为流动相Ｂ，甲醇一磷酸二氢钠水溶液＝６５：３５时，流速为０．８ｍｌ／ｍｉｎ．阿苯　

达唑对照品主峰保留时间为３．０４４ｍｉｎ；分离度良好，扫描波长为２９２ｎｍ，柱温：３０℃，结果阿苯达唑原料及溶剂峰均得到良好分离。　

阿苯达唑在２１￣ｇ／ｍｌ～１２００ｐ￣ｇ／ｍｌ浓度范围内线性良好（Ｒ２＝ｏ．９９９９９，ｎ－－６），平均回收率９８．０％，ＲＳＤ为Ｏ．５％，定量限为０．１ｔ￣ｇ／ｍｌ。并得　出结论：高效液相色谱法灵敏、准确，专属性强，重现性好，可用于阿苯达唑原料药含量的测定及质量控制。　

关键词：阿苯达唑　高效液相色谱法　紫外分光光度法含量测定　

阿苯达唑（Ａｂｅｎｄａｚｏｌｅ）是一种抗寄生虫的广谱药物，对阿　

苯达唑线虫、棘球蚴、绦虫、吸虫等具有较好的驱除作用［１－２］。　

在兽医临床广泛应用。我们通常会采用高氯酸滴定法和紫外　分光光度法来测定阿苯达唑原料粉的含量，这两种方法在《中　

华人民共和国兽药典）ｔ３１中都有提到，但高氯酸滴定法和紫外　

分光光度法　受环境因素的影响较大，使得结果的专属性较　

差。准确度偏低。并且在兽药厂生产时可以看到，有些不良商　家以次充好，仅仅用滴定法或紫外的方法都不能准确、有效地　

检测原料含量，所以本文利用高效液相色谱法［５－６］，建立一种　

检测阿苯达唑原料药的方法。本文通过实际应用表明该方法　可以准确快速地测定阿苯达唑原料药的含量．并且更有效地　

排除其他外界因素的影响，更好地通过含量测定控制阿苯达　

唑原料药的质量。本方法专属性强。重现性高，可以为阿苯达　唑原料药含量测定提供新的参考。　

实验二 高效液相色谱法测定甲硝唑的含量

一、实验目的

1.熟悉高效液相色谱仪主要结构组成及功能。

2.了解反相色谱法的原理、优点和应用。

3.了解流动相的选择依据及配制方法。

4.掌握高效液相色谱法进行定性和定量分析的基本方法。

二、实验原理

高效液相色谱法是采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由数据处理系统记录色谱信号。本实验以甲硝唑为测定对象，以反相HPLC来分离检测未知样中甲硝唑的含量。以甲硝唑标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度进行线性回归，再根据样品中甲硝唑的峰面积，由线性方程计算其浓度。

三、实验内容

（一）实验仪器与材料

1.实验仪器：高效液相色谱仪、精密天平、50mL烧杯、玻璃棒、称量纸、10mL容量瓶、50mL容量瓶、注射器、洗瓶。

2.实验材料：甲硝唑原料、蒸馏水、HCl（0.1mol/L）、乙腈、三氟乙酸、超纯水。

（二）实验内容

1、色谱操作条件的制定：

色谱柱：C18柱（250×4.6mm,5μm）；

流动相：乙腈：0.02%三氟乙酸水溶液（20：80）

流速：1mL/min

检测波长：277nm

柱温：35℃

进样量：20μL

2、标准溶液配制

精密称取在105℃条件下干燥至恒重的甲硝唑对照品10mg，置于50mL容量瓶中，用0.1mol/L的HCl溶液溶解并定容至刻度，即得浓度为0.2mg/mL的甲硝唑标准储备液，备用。

3、标准曲线的建立

（1）精密量取甲硝唑标准储备液分别为0.3mL、0.5 mL、0.7 mL、0.9 mL、1.1 mL置于10 mL的容量瓶中，然后用0.1mol/L的HCl溶液定容至刻度，得到浓度梯度为6μg/mL、10μg/mL、14μg/mL、18μg/mL和22μg/mL的标准溶液，分别过0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液置于1.5mL的EP管中并标号，各进样20μL检测，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归。

中国医药指南２００９年７月第７卷第１４期Ｇｕｉｄｅ　ｏｆＣｈｉｎａＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｕｌｙ２００９，Ｖｏ１．７，Ｎｏ．１４　高效液相色谱法测定阿昔洛韦缓释胶囊的释放度　周家齐　８３　

【摘要】目的建立用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）测定阿昔洛韦含量的方法，并对其缓释胶囊进行体外释放度考察。方法采用ＺＯＲＢＡＸＲＳＢ—Ｃ１８　柱，探索合适的色谱条件，并在此色谱条件的基础上，采用转篮法考察缓释制剂的体外释放。结果确定ＨＰＬＣ色谱条件为：流动相为甲醇．　水溶液（１５：８５）；流速０．５ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长２５４ｎｍ；柱温２５。ｃ；进样量１０　Ｌ。该缓释胶囊在人工胃液中可持续释放１２ｈ，其释放规律符　合ｗ　ｉｂｕｎ模型，释放度与时间呈良好线性关系。结论ＨＰＬＣ测定阿昔洛韦缓释胶囊的释放度合理可行。该缓释胶囊体外释放效果良好。　【关键词】阿昔洛韦；高效液相色谱；缓释胶囊；Ｗｅｉｂｕｌｌ模型　中图分类号：Ｒ９２７．１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７１－８１９４（２００９）１４－００８３－０２　阿昔洛韦又名无环鸟苷，是一种新型的核苷类抗病毒药物，可　治疗带状疱疹、２型疱疹病毒引起的皮肤和黏膜感染以及乙型肝炎　等…。对于其缓释胶囊释放度的控制测试，采用ＨＰＬＣ方法，具体　报道如下。　１仪器与试药　岛津ＵＶ３００紫外分光光度计；岛津ＬＣ一２０ＡＴ高效液相色谱仪；　ＺＲＳ一４智能溶出度试验仪；ＺＯＲＢＡＸＲＳＢ—Ｃ１８色谱柱；阿昔洛韦对照　品（批号：６３０—２００００１，中国药品生物制品检定所）；阿昔洛韦缓释胶　囊（格兰泰一三环制药有限公司）。　２方法与结果　２．１色谱条件及系统适用性试验　色谱柱为ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ－Ｃ　色谱柱；流动相为甲醇・水溶液　（１５：８５）；流速Ｏ．５ｍＬ／ｍｉｎ｝检测波长２５４ｎｍ；柱温２５℃；进样　量１Ｏ　Ｌ。该色谱条件下，注入阿昔洛韦对照品，理论塔板数为　１１３４７，保留时间为１１．２７ｍｉｎ，色谱图见图１。　ｎ　０　‘ｘｌ　５　５　ｏ　７．５　ｌＯ．ｏ　图１　阿昔洛韦对照品色谱图　ｌ２　５　２．２标准曲线的绘制　精密称取阿昔洛韦对照品１０ｍｇ，置于１０ｍＬ容量瓶中，加水溶解　至刻度，摇匀后得对账品溶液。精密吸取对照品溶液１．０、２．０、３．０、４．０、　５．０　ｍＬ，分别置于ｌＯＯｍＬ容量瓶中，加水稀释至刻度。用精密注射器　分别吸取１０¨Ｌ注入色谱仪，记录峰面积。以阿昔洛韦浓度（Ｘ）为　横坐标，峰面积（Ｙ）为纵坐标，绘制标准曲线，得标准曲线方程为　Ｙ＝Ｏ．０５８４Ｘ．０．００６９，ｒ＝０．９９９９，浓度在５－２５　ｇ／ｍＬ范围内与峰面积　呈良好线性关系。　２．３精密度和稳定性试验　取对照品溶液１Ｏ　Ｌ注入液相色谱仪测定，连续６次，结果峰面　积的ＲＳＤ＝０．４８％，表明精密度较好。每隔２ｈ精密吸取对照品溶液　ｌ０　Ｌ注入液相色谱仪，测定１２ｈ的稳定性，结果ＲＳＤ＝０．５６％表明稳　定性良好。　２－４阿昔洛韦缓释胶囊释放度测定方法　以１２００ｍＬ人工胃液为释放介质，采用转篮法。具体操作按照　２００５版Ⅸ中国药典》第二部附录ＸＤ释放度测定项下第一法进行，取　阿昔洛韦缓释胶囊供试品６片置于６个转篮中，篮上覆盖一层筛网，　保持温度（３７±０．５）℃，转速ｌＯＯｒ／ｍｉｎ，分别在３０、６０、１２０、１８０、　２４０、３００、３６０、４２０、４８０、６００、７２０ｍｉｎ取样５ｍＬ，取样后立即加　入同等量的新介质，经微孔滤膜过滤后，注入色谱仪进行测定。根据　标准曲线计算不同时刻阿昔洛韦的释放量，并根据阿昔洛韦缓释胶囊　载药量折算成规定时刻的药物释放度。　２．５阿昔洛韦缓释片释放度结果　阿昔洛韦缓释胶囊释放度结果见表１，释放曲线见图２。　１　２０　ｌ０Ｏ　三　８０　６０　薹４０　２０　０　阿羚洛节缓释胶髓释放度　

反相高效液相色谱法测定阿昔洛韦软膏的含量

杨锡祥,蔡永青(安徽省淮南市药品检验所,安徽淮南　232007)

摘要:目的　建立反相高效液相色谱法测定阿昔洛韦软膏含量的方法。方法　反相高效液相色谱法,C18柱,流动相为甲醇∶水(10∶90),检测波长252nm。结果　阿昔洛韦118～2818mg・L-1内线性关系良好,r=0199999(n=5),平均回收率100188%,(RSD=0116%,n=6)。结论　此法简便,快速,专属性强,结果准确。关键词:反相高效液相色谱法;阿昔洛韦软膏

DeterminationofaciclovirinaciclovirointmentbyHPLCYANGXi2xiang,CAIYong2qing(Huai’naninstiutefordrugcontrol,Huai’nan　232007,China)Abstract:Aim　AnRP2HPLCmethodforthedeterninationofaciclovirinaciclovirointmentwasestablished.Method　AneliteC18wasused,withthemobilephaseofmethanol2water(10∶90)andtheflowrate019ml・min-1,atthedetectionwavelengthof252nm.Result　Thestan2dardcurvewaslinearovertherangeof1180～2818mg・L-1ofaciclovirwithcorrelationcoefficientof0199999(n=5),theaveragerecoverieswere100188%(RSD=0116%,n=6).Conclusion　Themethodappearedtobesimple,quickandspecific.Keywords:RP2HPLC;aciclovirointment