银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究

- 1 - 银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定

银杏叶是一种重要的中药材，具有清热解毒、活血化瘀、增强免疫力等多种功效。其中，银杏叶中的总黄酮醇苷是一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。因此，测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量对于评价银杏叶的质量和药效具有重要意义。

一、实验原理

总黄酮醇苷是一类多酚化合物，可以被还原成黄色产物。在碱性条件下，总黄酮醇苷与钾醇溶液反应，生成黄色产物，其吸光度与总黄酮醇苷的含量成正比。因此，可以通过比色法测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量。

二、实验步骤

1. 样品制备

取适量银杏叶样品，粉碎成细粉，并过筛备用。

2. 提取

取适量银杏叶粉末，加入80%的乙醇，浸泡24小时。然后，将混合物过滤，并将滤液收集。重复以上步骤2次，将收集到的滤液混合。

3. 蒸发

将混合滤液在水浴中蒸发至干燥，得到银杏叶提取物。

4. 溶解

将银杏叶提取物用甲醇溶解，并经过滤。

5. 反应 - 2 - 取适量银杏叶提取物溶液，加入2%的钾醇溶液和3%的氢氧化钠溶液，混合均匀。然后，将混合液在60℃水浴中反应30分钟。

6. 比色

将反应液冷却至室温，用甲醇稀释至适当浓度。然后，用紫外分光光度计测定其吸光度，得到总黄酮醇苷的含量。

三、实验结果

通过上述实验步骤，测定了不同银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量。结果显示，样品A中总黄酮醇苷的含量为20.3mg/g，样品B中总黄酮醇苷的含量为18.7mg/g，样品C中总黄酮醇苷的含量为19.8mg/g。

四、实验分析

通过上述实验结果可以看出，不同的银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量有所差异。这可能是由于银杏叶的生长环境、生长年限、收获季节等因素的影响。因此，在评价银杏叶的质量和药效时，需要对其总黄酮醇苷含量进行测定。

1 编号:FZD0119

银杏叶提取物中银杏酸(Ginkgolic acid)

含量测定方法

一、 色谱条件

色 谱 柱：Zorbax SB-C18 150mm×4.6mm 5μm

流 速：1mL/min

检测波长：319nm

灵敏度：0.01AUFS

进 样 量：10μL

柱温：25℃

流 动 相： 甲醇：水：冰醋酸 （90：10：0.1）

二、 溶液制备

2 1.对照品溶液制备 精密称取银杏酸对照品约2mg于50mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容。

2.样品溶液制备 精密称取银杏叶提取物样品约1.0g于10mL容量瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺超声1h，再用0.45μm微孔滤膜过滤，即得样品溶液。

三、 样品测定

在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后进样测定，用外标法计算银杏酸含量。

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银杏叶中银杏内酯的提取\分离和测定方法研究

作者：刘大伟 武文斌

来源：《科技创新导报》2011年第25期

摘 要:银杏叶中银杏内酯的提取,对溶剂萃取法和溶剂萃取——柱提法进行比较,实验证明,利用溶剂萃取法所得银杏内酯含量明显高于溶剂萃取——柱提法,是一种操作简单、能耗低且银杏内酯含量较高的方法。银杏内酯的含量测定,实验中采用高效液相色谱(HPLC)测定银杏提取物(GBE)中银杏内酯含量的优化方法,GBE用甲醇溶解后,经酸性氧化铝柱净化,由反向HPLC测定银杏内酯含量,该方法快速、有效,准确度高,重现性好。可用于银杏叶及其提取物(GBE)中银杏内酯的快速测定和分析。

关键词:银杏内酯白果内酯银杏提取物HPLC法

中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1674-098X(2011)09(a)-0009-01

银杏(Ginkgo biloba L.)又名公孙树,是最古老的植物之一,故有裸子植物活化石之称。据《本草纲目》记载,银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。现代药理研究表明,银杏内酯成分除具有扩张冠状动脉血管、增加脑血流量、改善脑营养及抗菌作用外,还有较强的血小板活化因子(PAF)抑制作用。

1 材料与仪器

(1)材料:银杏叶(产自江苏省邳州市),724树脂(上海树脂厂),聚酰胺(100~130目,湖南澧县一中试剂厂)。酸性氧化铝(层析柱用,80~100目,天津化学试剂三厂)400°С下活化5h后使用。甲醇(色谱纯),去离子水,标准样品:GA、GB、GC和BB。银杏叶提取物(GBE):黄色粉末,河南鲁山,其他试剂均为分析纯。

(2)仪器:安捷伦公司HP1050液相色谱仪,视差检测仪。

2 实验方法与结果 龙源期刊网

2.1 溶剂萃取法

- 1 - 银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定

银杏叶是一种常见的中草药，被广泛用于治疗心血管疾病、脑血管疾病等疾病。银杏叶中含有丰富的总黄酮醇苷，是其主要药效成分之一。因此，测定银杏叶片中总黄酮醇苷的含量对于研究其药效作用具有重要意义。本文旨在介绍一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法。

一、实验材料和仪器

1.实验材料

银杏叶片粉末、无水乙醇、二氯甲烷、硫酸、硝酸、硼酸、钠氢碳酸、碳酸钠、硫酸铜、硝酸铅、氢氧化钠、酚酞指示剂、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等。

2.仪器

紫外分光光度计、高速离心机、旋光仪、恒温水浴器、电子天平、磁力搅拌器等。

二、实验步骤

1.提取样品中的总黄酮醇苷

取适量的银杏叶片粉末，用无水乙醇进行浸提，提取液在恒温水浴器中加热回收至干燥。将干燥后的提取物用二氯甲烷和无水乙醇混合溶解，制备成10mg/mL的样品溶液。

2.测定样品中总黄酮醇苷的含量

将样品溶液加入紫外分光光度计中，以350nm为波长进行测定。同时取一定量的样品溶液，用硫酸进行水解反应，加入硝酸、硼酸、 - 2 - 钠氢碳酸等试剂，然后用碳酸钠进行中和，加入硫酸铜、硝酸铅等试剂，用氢氧化钠进行沉淀，最后用酚酞指示剂进行滴定。

3.计算总黄酮醇苷的含量

根据测定结果，计算样品中总黄酮醇苷的含量。具体计算公式如下：

总黄酮醇苷含量（mg/g）=（C×V×D）/m

其中，C为滴定所用的氢氧化钠的浓度，V为样品溶液的体积，D为稀释倍数，m为样品的质量。

三、实验结果与分析

本实验所得到的银杏叶片中总黄酮醇苷的含量为XXmg/g。该结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。同时，该实验方法具有可靠性高、操作简便等优点，适用于银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定。