02生物工艺学第二章工业微生物菌种选育、制备与保藏1.0
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工业微生物菌种的选育、保藏与培养自然环境中的微生物是混杂生长的,要想得到生产某一目的产物的野生菌株,就需要采取一定的方法将它们分离出来。
菌株分离(separation)就是将混杂着各种微生物的样品按照实际需要和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对它们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程。
菌株分离和筛选是获得目的菌种的两个重要环节。
菌株的分离要根据生产实际需要、目的代谢产物的性质、可能产生所需目的产物的微生物种类、微生物的分布、理化特性及生活环境等,设计选择性高的分离方法,才能快速地从环境或混杂了多种微生物样品中获得所需菌种。
筛选方法也很重要,在设计筛选方案时有两点必须注意,即所采用方法的选择性和灵敏度。
微生物细胞内含物及其周围的培养基成分非常复杂,目标产物往往又含量极低。
因此,需要建立灵敏度高、快速、专一性强的检测方法。
菌种收集和筛选途径:(1)向菌种保藏机构索取有关的菌株,从中筛选所需菌株。
(2)由自然界采集样品,如土壤、水、动植物体等,从中进行分离筛选。
(3)从一些发酵制品中分离目的菌株,如从酱油中分离蛋白酶产生菌,从酒醪中分离淀粉酶或糖化酶的产生菌等。
该类发酵制品经过长期的自然选择,具有悠久的历史,从这些传统产品中容易筛选到理想的菌株。
发酵工业对菌种的要求如下:①能在廉价原料制成的培养基上生长,且生成目的产物产量高、易于回收;②生长较快,发酵周期短;③培养条件易于控制;④抗噬菌体及杂菌污染的能力强;⑤菌种不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定;⑥对放大设备的适应性强;⑦菌种不是病原菌,不产生任何有害的生物活性物质和毒素。
菌种筛选主要步骤:调查研究及查阅充分的资料筛选↓↓设计实验方案初筛(1株1瓶)↓确定采集样品的生态环境↓采样复筛(1株3~5瓶)↓确定特定的增殖条件↓结合初步工艺条件摸索增殖培养再复筛(1株3~5瓶)↓确定特殊的选择培养基及可能的↓↓定性或半定量快速检出法3~5株平板分离↓↓单株纯种分离原种斜面↓生产性能试验及毒性试验↓确定发酵培养基础条件菌种鉴定一、菌种的分离筛选一)样品采集与预处理总的原则是:样品的来源越广泛,获得新菌种的可能性越大。
第二章微生物菌种选育(笔记类)第二章工业微生物基础●知识要点和教学要求1)、了解微生物的特点2)、了解常见的工业微生物3)、掌握工业微生物菌种的分离和选育4)、掌握工业微生物菌种的改良5)、掌握工业微生物菌种的保藏6)、掌握工业微生物菌种的扩大培养●能力培养要求通过本章节的学习,学生能掌握工业微生物菌种的分离和选育、改良和保藏方法,以及菌种扩大培养的基本工艺。
●教案内容2.1微生物的特点(1)种类多,分布广目前已发现的微生物在10万种以上。
不同种类的微生物具有不同的代谢方式,能分解各式各样的有机物质和无机物质,当前国内外积极利用微生物来防治公害,分解三废中许多毒性强、结构复杂的物质。
另一方面,不同微生物在生化过程中积累不同的代谢产物,所以发酵工业上常利用各种微生物来生产各种产品,如酒类、酒精、丙酮丁醇、抗生素、酶制剂、有机酸、氨基酸、核酸、维生素、菌体蛋白、医药产品和化工产品等到。
(2)高面积-体积比,代谢能力强(3)生长迅速,繁殖快(4)适应性强,容易培养(5)易变性2.2常见的工业微生物广义的微生物包括病毒、立克次氏体、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、单细胞藻类、原生动物和支原体等。
在发酵工业中经常遇到的是细菌、放线菌、酵母菌、霉菌及危害、放线菌生长的噬菌体。
微生物工业的范围微生物工业越来越深地同国民经济各部门发生关系,涉及的范围十分广泛,而且越来越大,大致可分为下列14类:(1)酿酒工业(啤酒、葡萄酒、白酒等)(2)食品工业(酱、酱油、食醋、腐乳、面包、酸乳等)(3)有机溶剂发酵工业(酒精、丙酮、丁醇等)(4)抗生素发酵工业(青霉素、链霉素、土霉素等)(5)酶制剂发酵工业(柠檬酸、葡萄糖酸等)(6)酶制剂发酵工业(淀粉酶、蛋白酶等)(7)氨基酸发酵工业(谷氨酸、赖氨酸等)(8)核苷酸类物质发酵工业肌苷酸、肌苷等)(9)维生素发酵工业(维生素B2、维生素B12等)(10)生理活性物质发酵工业(激素、赤霉素等)(11)微生物菌体蛋白发酵工业(酵母、单细胞蛋白等)(12)微生物环境净化工业(利用微生物处理废水、污水等)(13)生物能工业(沼气、纤维素等天然原料发酵生产酒精、乙烯等能源物质)(14)微生物冶金工业(利用微生物探矿、冶金、石油脱硫等)2.3工业微生物菌种的分离和选育微生物菌种的分离从自然界分离新菌种一般包括以下几个步骤;采样、增殖培养、纯种分离和性能测定等几个步骤。
02生物工艺学第二章工业微生物菌种选育、制备与保藏1微生物菌种选育,制备与保藏国家十一五规划教材《生物工艺学》(邱树毅主编)配套课件微生物菌种选育,制备与保藏目第一章第二章第三章第四章第五章第六章第七章第八章第九章第十章录绪论工业微生物菌种选育、制备与保藏工业培养基及其设计生物工艺过程中的无菌技术生物反应动力学发酵过程原理生物反应器及生物工艺过程的放大生物反应过程参数检测与控制生物产品分离及纯化技术生物产品工艺学及应用共66页第2页目录微生物菌种选育,制备与保藏第二章工业微生物菌种选育、制备与保藏2.1 工业生产常用微生物菌种及特性2.1.1细菌2.1.2放线菌2.1.3酵母菌2.1.4霉菌2.2.1自然育种2.2.2诱变育种 2.2.3杂交育种 2.2.4基因工程育种2.2 工业微生物菌种选育2.3工业微生物菌种制备2.3.1优良种子应具备的条件2.3.2种子制备的过程2.3.3种子质量的控制2.4工业微生物菌种复壮与保藏2.4.1工业微生物菌种复壮2.4.2工业微生物菌种保藏共66页第3页目录微生物菌种选育,制备与保藏2.1 工业生产常用微生物菌种及特性2.1.1细菌共66页第4页目录微生物菌种选育,制备与保藏共66页第5页目录微生物菌种选育,制备与保藏2.1.1 细菌醋酸菌显微形态醋酸菌不生芽孢、革兰氏阴性,好气,分两个菌群。
一个菌群只将乙醇氧化生成醋酸,醋酸是最终产品,同时它能将葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,一般称之为醋单胞菌(Acetomonas)或葡萄糖杆菌(Gluconobacter)。
另一群醋酸菌不仅能将乙醇氧化为醋酸,而且能将产生的醋酸进一步氧化生成二氧化碳和水,这一类菌就叫醋酸杆菌。
共66页第6页目录微生物菌种选育,制备与保藏假单胞菌假单胞菌能发酵产生维生素B12、丙氨酸、葡萄糖酸、色素、α-酮基葡萄糖酸、果胶酶、一些抗生素及其他产品,也能进行类固醇(甾体)的转化,有些菌株可利用烃类生产菌体蛋白(SCP)。