分子生物学常用培养基配方
- 格式：doc
- 大小：32.50 KB
- 文档页数：6
下载文档原格式
合集下载
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境，其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一，其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下：-琼脂：15g-蔗糖：10g-牛肉膏粉：3g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化镁：0.5g-氯化钾：0.2g-高锰酸钾：0.0001g-蛋白胨：3g-酵母提取物：3g- 菜子油：0.5ml- 蒸馏水：1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基，其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下：-牛肉膏粉：3g-蛋白胨：5g-葡萄糖：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：2g-氯化镁：0.5g- 蒸馏水：1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基，其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下：-紫砂：15g-蔗糖：30g-蛋白胨：2g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基，其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下：-麦芽粉：10g-蔗糖：30g-蛋白胨：5g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g- 蒸馏水：1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基，其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下：-铁蛋白：10g-蔗糖：10g-蛋白胨：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：1g-氯化钙：0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良，以提高微生物的生长和培养效果。
同时，在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作，以避免试验的污染和杂质的干扰。
培养基的配方
培养基的配方培养基是一个特殊的化学组合物，它提供了生命体的生长和繁殖所需的营养物和环境。
培养基的配方需要考虑生长物种的生态和代谢需求，因此在制备不同类型的培养基时，需要考虑多个因素，例如酸碱度、离子浓度、碳源和氮源等。
以下是一些常见的培养基及其配方：1. Luria-Bertani（LB）培养基常用于大肠杆菌等细菌的生长。
- 水：1升- 蛋白胨：10克- 酵母浸出物：5克- 氯化钠：10克2. 玉米粉蔗糖琼脂培养基（MSA）用于分离和鉴定溶血性金黄色葡萄球菌。
- 水：1升- 葡萄糖：1克- 蛋白胨：2.5克- 氯化钠：5克- 琼脂：13.5克- 鲜红色表面指示剂：0.025克3. 营养琼脂培养基用于多种细菌和真菌的生长。
- 水：1升- 蛋白胨：5克- 酵母浸出物：1克- 葡萄糖：10克- 氯化钠：5克- 磷酸二氢钾：2.5克- 琼脂：15克4. 大肠杆菌液体培养基（LB Broth）与LB培养基类似，但用于液体培养。
- 水：1升- 酵母浸出物：5克- 氯化钠：10克5. 洁净液体培养基（tryptic soy broth）普遍用于微生物学实验。
- 水：1升- 蛋白胨酶胨水解物：17克- 大豆胨酸盐：3克- 氯化钠：5克- 氯化钾：2.5克- 磷酸氢二钠：2.5克- 琼脂：3克以上是一些常见的培养基配方。
每种培养基的配方都有特定的应用和优点，为微生物学研究和应用提供了广泛的选择。
当然，在不同实验条件下，可能需要微调培养基的成分和比例，以获得最佳的生长和生物学特性。
102种培养基配方
1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。
2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。
制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。
3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。
4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。
制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。
5．培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。
6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。
盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。
7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。
常用培养基配制
150 mM
Na3citrate x H2O
88.2 g
15 mM
H2O
至800 ml
1M HCl调节pH值至7.0
H2O
至1升
20X SSPE
/升
终1 X浓度
NaCl
175.3 g
150 mM
NaH2PO4xH2O
27.6 g
10 mM
Na2EDTA
7.4 g
10 mM
H2O
至800 ml
10 M NaOH调节pH值至7.4
/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
寡聚腺苷酸
oligo(dT)
寡聚脱氧胸苷酸
OMP
乳清苷(一磷)酸
Pi
无机磷酸
PAAG
聚丙烯酰胺凝胶
PAGE
聚丙烯酰胺凝胶电泳
PBS
磷酸盐缓冲液
PCR
聚合酶链式反应
PEI
聚乙烯亚胺
PEG
聚乙二醇
PIPES
哌嗪-1,4-二乙磺酸
PNK
多聚核苷激酶
pNPP
对硝基苯磷酸
poly(A)
多聚腺苷酸
poly(A)+
Na3citrate x H2O
88.2 g
15 mM
H2O
至800 ml
1M HCl调节pH值至7.0
H2O
至1升
20X SSPE
/升
终1 X浓度
NaCl
175.3 g
150 mM
NaH2PO4xH2O
27.6 g
10 mM
Na2EDTA
7.4 g
10 mM
H2O
至800 ml
10 M NaOH调节pH值至7.4
/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
寡聚腺苷酸
oligo(dT)
寡聚脱氧胸苷酸
OMP
乳清苷(一磷)酸
Pi
无机磷酸
PAAG
聚丙烯酰胺凝胶
PAGE
聚丙烯酰胺凝胶电泳
PBS
磷酸盐缓冲液
PCR
聚合酶链式反应
PEI
聚乙烯亚胺
PEG
聚乙二醇
PIPES
哌嗪-1,4-二乙磺酸
PNK
多聚核苷激酶
pNPP
对硝基苯磷酸
poly(A)
多聚腺苷酸
poly(A)+
常用培养基配制
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
限制-修饰
rRNA
核糖体核糖核酸
RT
逆转录
RT-PCR
逆转录聚合酶链式反应
SAM
S-腺苷蛋氨酸
SAP
虾碱性磷酸酶
SDA
链置换扩增
/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
0.1% (w/v)
H2O
至1升
稀释溶液的pH至8.3
5X Tris-三(羟甲基)甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液
/升
终1 X浓度
限制-修饰
rRNA
核糖体核糖核酸
RT
逆转录
RT-PCR
逆转录聚合酶链式反应
SAM
S-腺苷蛋氨酸
SAP
虾碱性磷酸酶
SDA
链置换扩增
/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
0.1% (w/v)
H2O
至1升
稀释溶液的pH至8.3
5X Tris-三(羟甲基)甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液
/升
终1 X浓度
70种常用培养基配方
70种常用培养基配方培养基是一种在实验室中用于培养和生长微生物的基质。
根据微生物的不同需求，培养基可以分为许多不同类型。
下面列举了70种常用的培养基配方。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）Tryptone 10 gYeast extract 5 gNaCl10gAgar 15 g加水至1L，调pH至7.0用途：培养大肠杆菌等广泛应用于分子生物学实验。
2. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar）胰蛋白胨4g葡萄糖20g马铃薯提取物200gAgar 15 g加水至1L用途：用于真菌的培养和研究。
3.NIH3T3细胞培养基DMEM培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 500 mL胎牛血清 (Fetal bovine serum) 10%青霉素/链霉素 (Penicillin/Streptomycin) 1%用途：常用于培养和传代小鼠成纤维细胞株。
4. 酵母饼干培养基（Yeast Extract Peptone Dextrose Agar）酵母提取物10g蛋白胨10g葡萄糖20gAgar 15 g加水至1L用途：适用于酵母菌的培养和繁殖。
5. BHIA培养基（Brain Heart Infusion Agar）大脑提取物17.5g胃蛋白胨10g葡萄糖2gAgar 12 gNaCl5g加水至1L用途：常用于培养细菌。
6. M9盐基液（M9 Minimal Medium）Na2HPO46gKH2PO43gNaCl0.5gNH4Cl1g1MMgSO41mL加水至1L用途：适用于大肠杆菌等菌种。
7. SJ培养基（Sabouraud Dextrose Agar）蔗糖40g蛋白胨10gAgar 15 g加水至1L用途：适用于真菌的培养。
8.R2A培养基Dipotassium phosphate 0.3 g Monopotassium phosphate 0.3 gSodium pyruvate 0.3 gSodium glutamate 0.3 gYeast extract 0.5 gPeptone 0.5 gTryptone 0.5 gGlucose 0.5 gAgar 15 g加水至1L用途：适用于环境中的微生物。
146种常用培养基配方
146种常用培养基配方以下是一些常见的培养基配方：1.LB培养基：-牛肉浸液：10g-酵母浸粉：10g-纯化水：1L-加热溶解牛肉浸液和酵母浸粉在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
2.菌落计数培养基：-蛋白胨消化物：5g-酵母浸粉：2.5g-葡萄糖：1g-纯化水：1L-加热溶解蛋白胨消化物、酵母浸粉和葡萄糖在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
3.大肠杆菌选择性培养基：-精制豆粉精：10g-纵剖海藻酸钠：10g-氯化钠：5g-硫酸镁：0.2g-活性炭：1g-纯化水：1L-加热溶解精制豆粉精、纵剖海藻酸钠、氯化钠、硫酸镁和活性炭在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
4.SDA培养基（用于真菌培养）：-磷酸二氢钾：1g-葡萄糖：20g-氯化钠：5g-氯化钠：5g-酵母浸粉：10g-酪蛋白胨：5g-地蜡：20g-纯化水：1L-加热溶解磷酸二氢钾、葡萄糖、氯化钠、酵母浸粉、酪蛋白胨和地蜡在纯化水中，煮沸溶解后，灭菌。
5.霍乱弧菌选择性富营养培养基：-精制海藻剖面：23g-麦芽浸粉：10g-氯化钠：10g-磷酸二氢钠：1.5g-纯化水：1L-加热溶解精制海藻剖面、麦芽浸粉、氯化钠和磷酸二氢钠在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
这只是一些常用的培养基配方的例子，根据不同的微生物需要，还有更多类型的培养基配方可供选择。
每个培养基的配方具体组成和浓度可以根据实验需要进行调整和优化，以获得最佳的培养条件。
同时，配方中的成分应根据实验目的和研究对象的特性进行选择，以确保培养基能够提供必要的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和培养。
分子生物学常用试剂配制表
LB 培养基PBS 缓冲液1x 10x 胰蛋白胨Tryptone 10g/L液体Na2HPO4（8mM/L ）1.14g/L11.36g/L酵母提取物Yeast extract 5g/L Nacl(136mM/L)7.95g/L 79.56g/L氯化钠Nacl10g/L KH2PO4(2mM/L)0.27g/L 2.72g/L 琼脂20g/L固体Kcl(2.6mM/L)0.2g/L 1.94g/L ddWater 至1L 至1LSDS-PAGE 电泳缓冲液5X NaOH 调节pH 至7.4-7.6Tris 15.1g 用前稀释TBS 缓冲液1X 10X甘氨酸94g Tris 2.42g/L 24.2g/L SDS 5g氯化钠Nacl 8g/L 80g/L ddWater 至1L ddWater 至1L 至1LHcl 调节pH 至7.4-7.6WB 湿转转膜液10X 加500ul Tween-20/L 得PBST/TBST Tris 30.3g/用前稀释甘氨酸144g/L细胞破碎缓冲液ddWater 至1L Kcl(300mM)22.37g/L WB 湿转转膜液使用KH2PO4(50mM) 6.81g/L 10X Trans Buffer 100mlEDTA(1mM)0.292g/L 甲醇200ml ddWater 至1L pH8.0ddWater 700ml 10%SDS 50℃加热可促溶解IPTG （1mM/L ）1ul+1ml 菌液SDS 10g IPTG 2.38g10XddWater 至100ml 灭菌ddWater 至10ml稀释10倍后10ul+1ml 菌液10%过硫酸铵APS3周内使用过硫酸铵APS0.2g Amp （50-100ug/ml ）10X1ul+1ml 菌液ddWater 2ml Amp 1g 灭菌ddWater至10ml1.5MTris-Hcl pH 8.8Hcl 调至8.8稀释10倍后10ul+1ml 菌液Tris 18.8g ddWater 至100ml考马斯亮蓝染色液过滤后可循环使用1M Tris-Hcl pH6.8Hcl 调至6.8甲醇500ml Tris 12.12g 乙酸100ml ddWater 至100ml R-250考马斯亮蓝0.5gddWater 至1L考马斯亮蓝脱色液乙醇比例越高脱色越快3705ZZL甲醇/乙醇100-500ml 乙酸50ml ddWater 至1LTAE 50X ELISA 包被液Tris 242g 先溶解再加乙酸后定容Na2CO3 1.59g pH9.6Na2EDTA·2H2O 37.2g NaHCO3 2.93g ddWater 800ml灭菌ddWater 至1L 乙酸57.1ml ddWater 至1L 生理盐水0.9%氯化钠Nacl 9g 灭菌使用SDS 分离胶浓度分离范围ddWater 1L6%50-150kd 8%30-90kd 鲜血培养基10%20-80kd 培养基100ml 约37℃加血12%12-60kd 鲜血5ml 15%10-40kd巧克力培养基同样5%鲜血于≥90℃时加入琼脂糖凝胶琼脂糖1XTAE 1%核酸染料透析袋处理0.2g 20ml 6/8/11孔1ul 2%(W/V)碳酸氢钠+1mmol/L ED TA(pH 8.0)煮沸10min 0.3g 30ml 13孔 1.5ul 0.4g 40ml 18/25孔2ul 0.3g 20ml 1.5%1ul ddWater 清洗0.4g20ml2%1ul1mmol/LEDTA(pH 8.0)煮沸10min包涵体溶解液包涵体洗涤液磷酸钠（20mm ） 3.27g Hcl 调至pH 7.4EDTA （0.5mM ）0.146g Hcl 调至pH8.0氯化钠(300mM)17.53g Nacl （100mM ） 5.844g 咪唑（10mM ）0.68g Tris （50mM ） 6.06g 尿素（8M ）484.8g TritonX-100（1%）10mlddWater 至1L ddWater 至1L 加入后超声10min ，离心20min 0.1M 氯化钙CaCl2感受态用蛋白复性缓冲液CaCl2 1.1g 照紫外灭菌Nacl （100mM ） 5.85g Hcl调至pH8.灭菌ddWater 10mlTris （50mM ） 6.06g甘油（5-10%）50ml枸橼酸钠抗凝剂109mM/LGSH （2mM)0.6gNa3C6H5O7·2H2O 32.05g 灭菌后用，以实际分子量计算用量GSSG(0.2mM)0.1gddWater 至1L 尿素(6/4/2/0M)计算1：9血使用ddWater 至1L尿素6-4-2-0梯度分别1LELISA 终止液（2mM/L ）H2SO43705ZZL浓硫酸（98%）21.7ml酸入水中！ddWater 178.3ml。
微生物常用的培养基配方
微生物常用的培养基配方1、用于细菌培养——LB(Luria-Bertani)培养基LB培养基分为液体及固体两种形态的培养基，主要在分子生物学中应用。
(1) LB液体培养基，在90mL双蒸馏水中加入：胰蛋白胨1g氯化钠1g酵母提取物0.5g摇动容器直至溶质溶解后，用1当量NaOH调节pH至7.0，再用双蒸馏水定容至100mL。
而后进行高压蒸汽灭菌。
(2) LB固体培养基在100mL液体培养基的基础上，加入1.5g琼脂粉。
2、用于细菌培养——牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏 1.5g蛋白胨5g氯化钠 2.5g水500mL，pH调至7.4~7.6。
3、用于霉菌或酵母菌培养——马铃薯培养基(PDA)马铃薯（去皮）200g蔗糖（葡萄糖）20g水1000mL将马铃薯去皮切成小块放入锅中，加水至1000mL，煮至沸腾后维持20-30min，注意不时用玻璃棒搅拌防止糊底。
用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，弃去滤渣。
取滤液加糖（培养霉菌用加蔗糖，培养酵母菌用加葡萄糖），补充水至1000mL，自然pH。
4、用于V.P.反应和甲基红试验——葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨0.5g葡萄糖0.5g磷酸氢二甲0.2g水100mL，调节pH至7.2~7.4，115℃湿热灭菌20min。
5、用于吲哚实验——蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g水1000mL，调节pH至7.2~7.4，121℃湿热灭菌20min。
6、用于厌氧菌培养——RCM培养基（强化梭菌培养基）酵母粉3g牛肉膏10g蛋白胨10g可溶性淀粉1g葡萄糖5gL-半胱氨酸盐酸盐0.5g氯化钠5g醋酸钠3g琼脂0.5水1000mL，调节pH至6.8±0.1，121℃高压灭菌15min。
各种培养基的配方
各种培养基的配方培养基是科学研究中用于培养和繁殖细胞、组织和微生物的基础性工具。
不同类型的细胞和微生物需要不同的培养基来提供适宜的环境和营养物质。
下面将介绍几种常用的培养基的配方。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）：成分：-蛋白胨：10g-酵母提取物：5g-NaCl：10g-纯水：1L2.硫酸亚铁葡萄糖培养基：成分：-硫酸亚铁：0.2g-葡萄糖：1g-磷酸二氢钠：0.5g-硫酸镁：0.1g-硫酸铵：0.5g-氯化钠：5g-纯水：1L3.TSB培养基（液体肉汤培养基）：成分：-蛋白胨：17g-酵母提取物：3g-NaCl：5g-纯水：1L4.TSB培养基（固体肉汤培养基）：成分：-蛋白胨：30g-酵母提取物：5g-NaCl：5g-琼脂：15g-纯水：1L5.M9盐基培养基：成分：-Na2HPO4：6g-KH2PO4：3g-NaCl：0.5g-NH4Cl：1g-MgSO4：0.1g-纯水：1L6.YPD培养基（酵母精蛋白培养基）：成分：-蛋白胨：10g-酵母提取物：20g-葡萄糖：20g-纯水：1L7. DMEM培养基（Dulbecco's修改Eagle's培养基）：成分：-高糖DMEM：950mL-胎牛血清：50mL- L-谷氨酰胺：2 mmol/L-纯水：1L8.RPMI-1640培养基：成分：-RPMI-1640培养基：950mL-胎牛血清：50mL- L-谷氨酰胺：2 mmol/L-纯水：1L9.MRS培养基（乳酸杆菌选择性培养基）：成分：-蛋白胨：10g-肉汤：10g-葡萄糖：20g-红茶提取物：1g-醋酸钠：5g-硫酸锌：0.5g-纯水：1L10.TSA培养基（肉汤琼脂培养基）：成分：-肉汤：30g-琼脂：15g-纯水：1L这些是常用的一些培养基的配方，不同细胞和微生物所需的培养基配方可能会有所不同。
在实验室中，根据研究的需要，可以根据具体要求对培养基进行调整和改良。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1、Ampicillin□组份浓度100mg/ml Ampicillin（100mg/ml）□配制量50mL□配制方法1. 称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2. 加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。
4. 小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
2、IPTG □组份浓度24mg/mL IPTG（24mg/mL）□配制量50mL□配制方法1. 称量1.2g IPTG置于50mL离心管中。
2. 加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。
4. 小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
3、X- Gal□组份浓度20mg/mL X- Gal（20mg/mL）□配制量50mL□配制方法1. 称取1g X-Gal置于50mL离心管中。
2. 加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
4、LB培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl □配制量1L□配制方法1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中Tryptone 10g；Yeast Extract 5g ；NaCl 10g2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
5、LB/Amp培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone0.5％（W/V）Yeast Extract1％（W/V）NaCl0.1mg/mL Ampicillin□配制量1L□配制方法1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中Tryptone 10gYeast Extract 5gNaCl 10g2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. 加去离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，冷却至室温。
6. 加入1mL Ampicillin（100mg/mL）后均匀混合。
7. 4℃保存。
6、TB培养基□组份浓度1.2％（W/V）Tryptone2.4％（W/V）Yeast Extract0.4％（V/V）Glycerol17mM KH2PO472mM K2HPO4□配制量1L□配制方法1. 配制磷酸盐缓冲液（0.17M KH2PO4，0.72M K2HPO4）100mL。
2.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 12gYeast Extract 24gGlycerol 4mL3. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
4. 加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。
5. 待溶液冷却至60℃以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6. 4℃保存。
7、TB/Apm培养基□组份浓度1.2％（W/V）Tryptone2.4％（W/V）Yeast Extract0.4％（V/V）Glycerol17mM KH2PO472mM K2HPO40.1mg/mL Ampicillin□配制量1L□配制方法1. 配制磷酸盐缓冲液（0.17M KH2PO4，0.72M K2HPO4）100mL。
溶解2.31g KH2PO4和2.54g K2HPO4于90mL的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100mL，高温高压灭菌。
2.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 12gYeast Extract 24gGlycerol 4mL3. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
4. 加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。
5. 待溶液冷却至60℃以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液和1mL Ampicillin （100mg/mL）。
6. 均匀混合后4℃保存。
8、SOB培养基□组份浓度2％（W/V）Tryptone0.5％（W/V）Yeast Extract0.05％（W /V）NaCl2.5mM KCl10mM MgCl2□配制量1L□配制方法1. 配制250mM KCl溶液。
在90mL的去离子水中溶解1.86g KCl后，定容至100mL。
2.配制2M MgCl2溶液。
在90mL的去离子水中溶解19g MgCl2后，定容至100mL，高温高压灭菌。
3.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 20gYeast Extract 5gNaCl 0.5g4. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
5 量取10mL 250 mM KCl溶液，加入到烧杯中。
6. 滴加5N NaOH溶液（约0.2mL），调节pH值至7.0。
7. 加入去离子水将培养基定容至1L。
8. 高温高压灭菌后，4℃保存。
9. 使用前加入5mL灭菌的2M MgCl2溶液。
9、SOC培养基□组份浓度2％（W/V）Tryptone0.5％（W/V）Yeast Extract0.05％（W /V）NaCl2.5mM KCl10mM MgCl220mM 葡萄糖□配制量100mL□配制方法1. 配制1M葡萄糖溶液。
将18g葡萄糖溶于90mL去离子水中，充分溶解后定容至100mL，用0.22μm滤膜过滤除菌。
2.向100mL SOB培养基中加入除菌的1M葡萄糖溶液2mL，均匀混合。
3. 4℃保存。
10、2×YT培养基□组份浓度1.6％（W/V）Tryptone，1％（W/V）Yeast Extract，0.5％（W/V）NaCl□配制量1L□配制方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 16gYeast Extract 10gNaCl 5g2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加1N KOH，调节pH值至7.0。
4. .加水离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压后，4℃保存。
11、Φb×broth培养基□组份浓度2％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，0.5％（W/V）MgSO4•7H2O□配制量1L□配制方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 20gYeast Extract 5gMgSO4•7H2O 5g2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加1N KOH，调节pH值至7.5。
4. .加水离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压后，4℃保存。
12、NZCYM培养基□组份浓度0.5％（W/V）Yeast Extract0.1％（W/V）Casamino Acid1％（W /V）NZ胺0.5％（W /V）NaCl0.2％（W /V）MgSO4•7H2O□配制量1L□配制方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Yeast Extract 5gCasamino Acid 1gNZ胺10gNaCl 5gMgSO4•7H2O 2g2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH溶液（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. .加水离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压后，4℃保存。
13、NZYM培养基□组份浓度0.5％（W/V）Yeast Extract1％（W /V）NZ胺0.5％（W /V）NaCl0.2％（W /V）MgSO4•7H2O□配制方法NZYM培养基除不含Casamino Acid（酪蛋白氨基酸）外，其他成份与NZCYM培养基相同。
14、NZM培养基□组份浓度1％（W /V）NZ胺0.5％（W /V）NaCl0.2％（W /V）MgSO4•7H2O□配制方法NZM培养基除不含Yeast Extract（酵母提取物）外，其他成份与NZYM培养基相同。
15、一般固体培养基的配制□配制方法1. 按照液体培养基配方准备好液体培养基，在高温高压灭菌前，加入下列试剂中的一种。
Agar（琼脂：铺制平板用）15g/LAgar（琼脂：配制顶层琼脂用）7g/LAgarose（琼脂糖：铺制平板用）15 g/LAgarose（琼脂糖：配制顶层琼脂用）7g/L2. 高温高压灭菌后，带上手套取出培养基，摇动容器使琼脂或琼脂糖充分混匀（此时培养基温度很高，小心烫伤）。
3. 待培养基冷却至50～60℃时，加入热不稳定物质（如抗生素），摇动容器充分混匀。
4. .铺制平板（30～35mL培养基/90mm培养皿）。
16、LB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基□组份浓度1％（W /V）Tryptone0.5％（W/V）Yeast Extract1％（W/V）NaCl0.1mg/mL Ampicillin0.5％（W /V）IPTG0.04mg/mL X-Gal1.5％（W /V）Agar□配制量1L□配制方法1. 称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 10gYeast Extract 5gNaCl 10g2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH溶液（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. 加水离子水将培养基定容至1L后，加入15gAgar。
5. 高温高压灭菌后，冷却至60℃左右。
6. 加入1mL Ampicillin（100mg/mL）、1mL IPTG（24mg/mL）、2mL X-Gal（20mg/mL）后均匀混合。
7. 铺制平板（30～35mL培养基/90mm培养基）。
8. 4℃保存平板。
17、TB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基□组份浓度1.2％（W /V）Tryptone2.4％（W/V）Yeast Extract0.4％（W/V）Glycerol17mM KH2PO472mM K2HPO40.1mg/mL Ampicillin0.024mg/mL IPTG0.04mg/mL X-Gal1.5％（W /V）Agar□配制量1L□配制方法1.配制磷酸盐缓冲液（0.17M KH2PO4，0.72M K2HPO4）100mL。
2. 称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 12gYeast Extract 24gGlycerol 4mL3. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
4. 加水离子水将培养基定容至1L后，加入15gAgar。
5. 高温高压灭菌后，冷却至60℃左右。
6. 加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液、1mL Ampicillin（100mg/mL）、1mL IPTG（24mg/mL）、2mL X-Gal（20mg/mL）后均匀混合。
7. 铺制平板（30～35mL培养基/90mm培养基）。
8. 4℃保存平板。