分子生物学实验室仪器操作简介
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实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作一、验室的常规仪器、设备(一)温度控制系统:1. 冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、—20℃、—80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
—20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0—10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.2.液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等,要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液氮罐(—196℃)具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点.3.培养箱:37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用来维持培养液的酸度(pH值).37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。
4。
水浴锅:用于保温。
25—100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温.25-100℃水浴箱用于常规试验。
5。
烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要温度低些.用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42—45℃的烤箱中进行烘干。
(二)水的净化装置:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高。
1。
蒸馏水皿:单蒸水常难以满足实验要求。
双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。
多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质,不能完全除去水中溶解的气体杂质(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ)).2. 离子交换器:去离子水—用离子交换法制取的水,称去离子水。
去离子效果好,但不能除去水中的非离子型杂质,其中常含有微量的有机物(树脂等)。
3.超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环.用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组 DNA提取实验七 DNA的定量实验八 PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十 DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
第1篇一、引言分子杂交仪是一种用于分子生物学实验的高精密仪器,主要用于DNA、RNA等生物大分子的检测、分离和定量分析。
以下是分子杂交仪的操作规程,旨在确保实验的准确性和安全性。
二、操作前准备1. 确认仪器状态:检查分子杂交仪是否处于正常工作状态,包括电源、冷却系统、加热系统等。
2. 清洁工作台:确保实验台面干净、整洁,避免交叉污染。
3. 配制试剂:按照实验需求,配制相应的试剂,包括杂交缓冲液、标记探针、待测样本等。
4. 检查设备:检查分子杂交仪的各个部件是否完好,如电极、杂交管、密封盖等。
三、操作步骤1. 打开分子杂交仪电源,预热30分钟。
2. 将杂交管放入分子杂交仪,确保密封盖密封良好。
3. 设置杂交参数:根据实验需求,设置杂交温度、杂交时间、洗脱温度、洗脱时间等参数。
4. 加载样本:将配制好的标记探针和待测样本加入杂交管,按照实验要求进行混合。
5. 开始杂交:按下“开始”按钮,分子杂交仪开始进行杂交操作。
6. 洗脱:杂交完成后,按照设定参数进行洗脱操作。
7. 重复洗涤:根据实验需求,对杂交管进行重复洗涤,以去除未结合的探针。
8. 确认结果:通过分子杂交仪的检测系统,观察杂交结果,如信号强度、对比度等。
9. 关闭仪器:完成实验后,关闭分子杂交仪电源,取出杂交管。
四、注意事项1. 严格遵守操作规程,确保实验结果的准确性。
2. 操作过程中,注意避免交叉污染,使用无菌操作。
3. 试剂和样本应按照实验要求进行配制,确保实验材料的纯度。
4. 在操作过程中,密切观察分子杂交仪的运行状态,如温度、压力等。
5. 实验结束后,对分子杂交仪进行清洁、消毒,以备下次使用。
五、实验记录1. 记录实验时间、温度、时间等参数。
2. 记录实验结果,包括信号强度、对比度等。
3. 对实验过程中出现的问题进行记录,以便分析原因和改进实验。
通过以上操作规程,可以有效保证分子杂交仪实验的准确性和安全性。
在实际操作过程中,应根据实验需求调整参数,以达到最佳实验效果。
分子生物学实验室常用仪器设备简介实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介实验目的:1了解分子生物学实验室的常用仪器设备的类型及用途。
2 掌握常用仪器设备的正确操作方法。
实验原理:分子生物学实验室常用仪器设备是顺利完成各项分子生物学实验的保障。
若不会或错误地使用设备,不仅会使实验结果错误,还会给他人带来不便,有些还会带来经济损失。
因此,正确使用操作仪器设备应是每位学生必须首先学会的技能。
实验室主要仪器:微量移液器、低温离心机、PCR仪、电泳仪、恒温气浴摇床、超净工作台、灭菌锅实验内容及操作步骤:微量移液器:微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数。
移液器常见的四种规格分别是:0.5~10μl(读数窗显示0.5~10.0,每转1档为0.1μl);10~100μl(读数窗显示10.0~100, 每转1档为1μl);20~200μl(读数窗显示20~200, 每转1档1μl);100~1000μl(读数窗显示100~1000, 每转1档为5μl).量液的操作步骤:1.将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头)2.将微量移液器按钮轻轻压至第一停点;3.垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液样面下几毫米,千万不要将吸嘴直接插到液体底部;4.缓慢、平稳地松开控制按钮,吸上样液。
否则液体进入吸嘴太快,导致液体倒吸入移液器内部,或吸入体积减少;5.等一秒钟后将吸嘴提离液面6.平稳地把按钮压到第一停点,再把按钮压至第二停点以排出剩余液体;7.提起微量移液器,然后按吸嘴弹2.量液操作注意问题:1.未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2.一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏。
3.不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。
4.不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5. 移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。
分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴来靠:用作对温度和震荡频率存有较低建议的细菌培养,蒸煮,杂交,生化反应及酶和非政府研究等。
2、超净工作台:用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机:用作拆分提纯dna和蛋白质等,例如基因片段的拆分,蛋白酶的结晶和废旧等。
4、微量移液管:是连续可调的,计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
有多种规格:①0.5-10μl②10-100μl③20-200μl④100-1000μl。
5、电泳仪:用作确认大分子物质的分子量以及鉴别物种亲缘关系的仪器。
6、pcr仪:用于目的基因的扩增,是一对寡糖核苷酸引物结合到正负dna链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列dna片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、杀菌锅:用作细菌和细胞培养及核酸等有关实验采用的试剂,器皿及实验用具的严苛杀菌。
三、实验仪器恒温气浴来靠、无尘室工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、杀菌锅、pcr仪、电泳仪。
四、实验步骤(一)、恒温气浴必须穿着的采用:1、样品瓶稳固放进弹簧缠中2、接通电源开关,仪器进入准备状态3、参数设定,(设定温度、时间、转速等参数)4、按启动键仪器已经开始工作,按暂停键可以暂停纸盒的转动;5、按电源键,显示屏表明消失,关闭电源总开关(二)、无尘室工作台的采用1、使用工作台时,先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面,然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源,提前30分钟打开紫外灯照射消毒,处理净化工作区内工作台表面积辛苦的微生物,15分钟后,停用紫外灯,打开送风机。
3、工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后,清理工作台面,收集各废弃物,关闭风机及照明开关,用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
5、最后打开工作台紫外灯,反射消毒30分钟后,停用紫外灯,阻断电源。
(三)、低温台式高速离心机的采用1、把离心机放置于平面桌或平面台上,目测使之平衡,用手轻摇一下离心机,检查离心机是否放置平衡。