下载文档原格式
第一章组织学绪论1、组织学（histology）:研究机体微细结构及其相关功能的科学。
2、组织（tissue）：由细胞和细胞外基质构成。
人体有四大组织——上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。
3、石蜡切片术（paraffin sectioning）：是一种常见的组织玻片的制作方法。
其步骤为：取材和固定→脱水和包埋→切片和染色→封片4、组织化学术（histochemistry）：为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理或技术，在组织切片中定性、定位地显示某种物质的技术。
第二章上皮组织1、上皮组织（epithelial tissue）：由密集排列的上皮细胞和极少量细胞间质构成的动物的基本组织，被覆在机体体表，或衬于机体内中空器官的腔面，以及体腔腔面。
依功能和结构的特点可将上皮组织分为被覆上皮、腺上皮。
2、极性（polarity）：细胞的不同表面在结构与功能上有明显的差异。
3、被覆上皮（covering epithelium）：覆盖在机体内外表面或中空性器官腔面的上皮组织。
4、腺上皮（glandular）：以分泌功能为主的上皮组织。
5、内皮（endothelium）分布在心、血管和淋巴管腔面的单层扁平上皮。
6、间皮（mesothelium）分布在胸膜、腹膜、心包膜表面的单层扁平上皮。
7、杯状细胞（goblet）形似酒杯，底部狭窄，含深染的核，顶部膨大，充满分泌颗粒。
8、腺（gland）以腺上皮为主的器官。
7、外分泌腺（exocrine gland）分泌物可经导管到达体表或器官体腔的腺体。
8、内分泌腺（endocrine gland）分泌物进入血液的腺体。
9、腺泡（acinus）：泡状腺、管泡状腺分泌部。
10、浆液性细胞（serous cell）：核为圆形，位于细胞偏基底部，基底胞质呈强嗜碱性染色，顶部胞质含许多嗜酸性的分泌颗粒，称酶原颗粒。
11、黏液性细胞（mucous cell）：核扁圆形，居细胞基底部；除在核周的少量胞质嗜碱性外，大部分胞质几乎不着色，成泡沫或空泡状。
组织学与胚胎学重点归纳第一章组织学绪论本章重点：1、掌握:组织学、石蜡切片术、光镜结构、嗜酸性、嗜碱性、HE染色法和超微结构的概念2、了解：常用的研究方法一、组织学的内容和意义1、组织学概念：研究正常人体的微细结构及其相关功能的科学2、组织学研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子。
3、组织(1)构成：细胞群和细胞外基质(2)类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织二、组织学技术简介1、光镜技术石蜡切片术：取材、固定、脱水、包埋、切片（5 ～10 µm 厚）、染色、封片苏木精- 伊红染色法（HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色嗜酸性：组织细胞中的结构与酸性染料亲和力强者称为嗜酸性.嗜碱性：组织细胞中的结构与碱性染料亲和力强者称为嗜碱性.光镜结构：光学显微镜下观察到的组织细胞结构2、电镜技术超微结构:电子显微镜下观察的组织细胞的结构.第二章上皮组织本章要点：掌握：上皮组织的特点及分类；被覆上皮的分类，各类的分布及功能(掌握)熟悉：腺上皮和腺的概念，外分泌腺的一般结构；细胞表面的特化结构的功能意义了解：细胞表面的特化结构的结构特点一、概述：（一）上皮组织的特点1、上皮组织由大量排列紧密的上皮细胞和少量的细胞外基质组成2、上皮细胞具有明显的极性（游离面、基底面和侧面）3、基底面附着于基膜4、上皮组织内大多无血管5、上皮组织内有丰富的感觉神经末梢（二）分类与功能分类：1、被覆上皮－分布于体表，体内管、腔、囊的内表面2、腺上皮－构成腺体功能：保护、吸收、分泌、排泄二、被覆上皮1、单层扁平上皮又称单层鳞状上皮特点：表面光滑，利于液体流动，减少器官间磨擦分布：内皮：心血管、淋巴管内表面间皮：心包膜、胸膜、腹膜其它：肺泡、肾小囊2、单层立方上皮特点：细胞呈立方形（侧面观）或多角形（表面观），核圆居中分布：甲状腺滤泡、肾小管3、单层柱状上皮特点：细胞呈柱状（侧面观）或多角形（表面观），核长圆形、位于基底部分布：胃、肠、胆囊、子宫等4、假复层纤毛柱状上皮特点：由柱状细胞、梭形细胞、锥形细胞和杯状细胞构成，核位置参差不齐；细胞基底部均附着于基膜；基膜明显分布：呼吸道5、复层扁平上皮又称复层鳞状上皮特点：表层细胞呈扁平状；中层细胞呈梭形或多角形；基底细胞矮柱状，有增殖能力；基底面凹凸不平分布：皮肤表皮－角化口腔、食管和肛管－未角化6、变移上皮特点：细胞为多层，细胞形状和层数因器官功能状态不同而异分布：肾盏、肾盂、输尿管、膀胱三、腺上皮和腺腺上皮:由腺细胞组成的以分泌功能为主的上皮腺:以腺上皮为主构成的器官腺的分类:(1)外分泌腺:分泌物经导管排至体表或器官腔内，如汗腺、唾液腺(2)内分泌腺:无导管，分泌物释入血液，如甲状腺外分泌腺由分泌部和导管两部分组成四、细胞表面的特化结构游离面—微绒毛、纤毛侧面—紧密连接、黏合带、桥粒、缝隙连接基底面—基膜、质膜内褶、半桥粒1、微绒毛：上皮细胞游离面伸出的微细指状突起功能；增加细胞表面积，有利于细胞的吸收2、纤毛：上皮细胞游离面伸出的粗而长的突起；具有节律性定向摆动的功能3、紧密连接：紧密连接又称闭锁小带，位于细胞侧面顶端。
第1章组织学绪论名词解释：组织学，组织，四大基本组织，超微结构组织学的学习方法，组织学的研究技术：1光镜技术（细节），2电子显微镜技术（细节），3组织化学术（分类），4放射自显影技术，5图像分析术，6细胞培养术和组织工程重点掌握内容：1四大基本组织，2HE染色的基本原理第3章上皮组织名词解释：上皮组织，微绒毛，纤毛，紧密连接，半桥粒，缝隙连接，基膜，质膜内褶，连接复合体，腺上皮，内皮上皮组织的分类以及功能：1被覆上皮特点、上皮类型、主要分布、功能，2腺上皮的分类，外分泌部的一般结构（导管部，分泌部：腺泡类型），3上皮组织的特殊结构的特点以及功能游离面（微绒毛、纤毛、糖衣）、紧侧面（密连接、中间链接、桥粒，缝隙连接）、基底面（基膜、质膜内褶、半桥粒）重点掌握内容：1.上皮组织的一般特点，2.被覆上皮的分类依据及类型，3.上皮特殊结构的名称与功能。
第4章固有结缔组织名词解释：结缔组织、疏松结缔组织、组织液、分子筛、组织液、趋化性结缔组织特点、分类（狭义、广义）、来源（一）疏松结缔组织(LCT) 1.特点 2.（1）细胞（成纤维细胞、巨噬细胞、浆细胞、肥大细胞、未分化的间充质细胞、白细胞）（2）纤维（胶原纤维、弹性纤维、网状纤维）（3）基质成分以及功能（二）疏松结缔组织1.分类，2.特点（弹性组织为主）（三）脂肪组织1.分类，2.特点（四）网状组织1.分布、2.分类、3.功能重点掌握内容：1.CT的分类；2.疏松结缔组织的细胞类型；3.成纤维细胞、巨噬细胞、浆细胞光镜（LM）、电镜（EM）结构，肥大细胞的LM结构以及它们的功能；4.LCT纤维的种类以及特点；5.分子筛的结构以及功能问答题：1.被覆上皮根据什么分类？可分为多少种类型？2.上皮游离面、侧面、基地面分别有何特殊结构？有何作用？3.浆液性细胞胞质在HE染色中常嗜什么染色性？为什么？4.何为内分泌部、外分泌部，外分泌部由什么构成？5.试简述成纤维细胞的电镜结构以及功能6.试简述结缔组织的分类7..试简述浆细胞的光镜结构、超微结构以及功能第5章血液和淋巴名词解释：血液，中性粒细胞，血小板，同源细胞群，骨板重点内容：1.红细胞（RBC）的LM、EM的特点，结构和功能；2.网织红细胞（RET）的特点；3.白细胞（WBC）的分类依据和类型；4.五种白细胞的LM结构和功能；5.血小板（PLT）的功能。
第1章组织学绪论一、单项选择题１、以下表述中，下列哪项是错误的？Ａ．组织学的研究内容包括组织、细胞、亚细胞和分子水平Ｂ．细胞是机体的基本结构和功能单位Ｃ．细胞外基质是非细胞的产物，它构成了细胞生活的微环境Ｄ．细胞群和细胞外基质（细胞间质）构成组织Ｅ．多种组织构成器官２、以下对组织学染色的表述中，哪一项是正确的？Ａ．有的生物样品是无色透明，难以在镜下观察，故要对组织切片染色Ｂ．最常用的是酸性苏木精和碱性伊红染色法，简称ＨＥ染色Ｃ．酸性苏木精可将细胞核染为蓝色，碱性伊红可将细胞质染成粉红色Ｄ．碱性苏木精可将细胞质染为红色，酸性伊红可将细胞核染为蓝色Ｅ．碱性苏木精可将细胞核染为蓝色，酸性伊红可将细胞质染成粉红色３、以下表述中，哪一项是错误的？Ａ．组织细胞成分若被碱性染料所染，称为嗜碱性Ｂ．组织细胞成分若被碱性染料所染，称为嗜酸性Ｃ．组织细胞成分若对两种染料均缺乏亲和力，则为嗜中性Ｄ．组织细胞成分若被酸性染料所染，称为嗜酸性Ｅ．组织细胞成分伊红所染呈红色４、对透射电镜样品制备的表述中，哪一项是错误的？Ａ．透射电镜样品制备经过取材、固定、包埋、切片、电子染色等Ｂ．取材要新鲜，一般是经戊二醛、四氧化锇双重固定，石蜡包埋Ｃ．取材要新鲜，一般是经戊二醛、四氧化锇双重固定，树脂包埋Ｄ．用超薄切片机切成超薄切片，用重金属盐醋酸铀、枸橼酸铅进行电子染色Ｅ．电子染色与光镜染色不同，它不产生颜色差别，只产生明暗反差5、被苏木素染色的细胞器是：A．线粒体B．粗面内质网C．滑面内质网D．高尔基复合体E．微体6、关于组织的构成，下列叙述哪项正确？A．细胞和细胞外基质（细胞间质）B．纤维和基质C．细胞和纤维D．细胞外基质（细胞间质）和体液E．细胞和组织液7、酶组织化学的显色原理主要是：A．酶直接显色B．酶底物直接显色C．酶与底物结合而显色D．酶与捕获剂结合后显色E．酶底物的分解产物与捕获剂结合而显色8、显示组织及细胞内多肽和蛋白质的最佳方法是：A．免疫细胞化学术B．同位素示踪术C．PAS反应D．Feulgen反应E．HE染色法9、光镜分辨率约为：A．0.2μmB．0.2nmC．2nmD．2μmE．以上都不是10、关于组织培养术的叙述，下列哪项是错误的？A．取胚胎的某器官原基或器官的一部分进行培养，称器官培养B．对细胞的首次培养，称原代培养C．细胞增殖后，对新增殖的细胞进行的培养，称传代培养D．经长期培养而成的细胞群体，称杂交瘤E．用单细胞培养而建成的某种纯细胞群体，称细胞株11、关于冷冻蚀刻复型术的叙述，下列哪项是错误的？A．组织块用液氮快速冷冻B．在低温下用钢刀将样品劈开C．在凹凸不平的断裂面上喷镀合金膜和炭膜D．用次氯酸等将组织腐蚀掉E．将凹凸不平的金属复型膜压平后置于电镜下观察12、电子显微镜术的染色剂通常用：A．苏木精和伊红B．异硫氰酸和吖啶橙C．醋酸铀和柠檬酸铅D．生物素和卵白素E．苏丹和油红13、关于扫描电镜术的叙述,下列哪项是错误的?A．用于观察组织表面的立体结构B．组织不需要固定C．要将组织置于真空镀膜仪内干燥D．在标本表面喷镀碳膜和合金膜E．可在荧光屏上扫描成像14、下列那种方法可用石蜡包埋切片作为实验材料？A．冷冻割断术B．流式细胞术C．细胞融合术D．免疫细胞化学术E．细胞培养术15、对细胞内某种酶进行定量分析，宜选用下列那种方法？A．扫描电镜术B．原位杂交术C．HE染色法D．显微分光光度定量术E．细胞培养术16．光镜下观察组织石蜡包埋切片厚度一般是A.100umB.50umC.5-10umD.1um左右E.0.1-0.5um17．透射电镜下观察的组织切片厚度一般是A.50-80nmB.5-10nmC.1-2nmD.100-500nmE.1um左右18．观察体外培养细胞首选的显微镜是A.一般光镜B.倒置相差显微镜C.相差显微镜D.暗视野显微镜E.偏光显微镜19．PAS反应是检测组织内的A.核酸B.脂类C.蛋白水解酶D.糖类E.抗原20．光镜组织切片和电镜组织切片A.均为超薄切片B.均用化学染料染色C.均可制冷冻切片D.均为固定组织E.均可摄彩色照片21．扫描电镜是主要用于观察A.生物膜内部结构B.细胞器的内部结构C.组织和细胞的表面结构D.细胞内的多糖E.细胞核内的结构22．组织的分类是根据A.细胞的数量和密度B.细胞排列的型式C.细胞的代谢特点D.细胞外基质的组成E.以上均不对23．扫描电镜术不同于透射电镜术的一点是A.组织勿需固定B.勿需制备超薄切片C.是以激光扫描标本D.不在荧光屏上显像E.可观察活细胞24、不属于冷冻切片的特点是：A．用树脂快速包埋B．组织块可不固定C．制片较迅速D．细胞内酶活性保存较好E．可制厚0.1μm的切片25、HE染色细胞呈强嗜酸性，细胞内不可能丰富的是：A．线粒体B．粗面内质网C．溶酶体D．滑面内质网E．粘原颗粒26、欲原位检测细胞中某基因在转录水平的表达变化，可采用：A．组织培养术B．石蜡切片C．冷冻切片D．原位杂交术E．免疫组化术27、欲原位检测细胞中某基因翻译水平的表达变化，可采用：A．组织培养术B．石蜡切片C．冷冻切片D．原位杂交术E．免疫组化术28．透射电镜术中的组织块和组织切片A.组织块大小与光镜术的相近B.组织块用戊二醛,四氧化锇等固定C.组织块石蜡包埋D.切片用染料染色E.切片置在玻片上于电镜下观察兰亭序永和九年，岁在癸丑，暮春之初，会于会稽山阴之兰亭，修禊事也。
第1章组织学绪论一、选择题(一)A型题1。
不属于人体基本组织得就是Ａ、上皮组织B、结缔组织C、脂肪组织Ｄ、肌组织E、神经组织２.下列关于组织得构成得叙述哪项就是正确得?A、细胞与无定形基质B、细胞与细胞外基质C、细胞与组织液Ｄ、基质与纤维Ｅ、基质、纤维与组织液3.组织学中最常用得制片技术就是A、石蜡切片B、火棉胶切片C、冰冻切片Ｄ、涂片Ｅ、铺片4.涂片一般适用于A、上皮组织B、骨组织Ｃ、肌组织D、神经组织E、血液５.冰冻切片A、就是将组织块冷冻后用普通切片机进行切片得技术B、最常用于骨组织C、主要应用于血液D、能较好地保存酶得活性E、能较好地保存微细结构６。
用于光镜观察得石蜡切片厚度一般就是A、1~2μmB、5~１0μmC、5０~80μｍD、5～10 nmE、５0～80 ｎm7。
在还原剂存在时被硝酸银染成黑色得结构具有A、嗜银性Ｂ、亲银性Ｃ、嗜酸性D、嗜碱性E、中性8.普通光镜所能分辨得两点之间得最小距离就是A、０、2 mmB、0、2μmC、0、2ｎmD、２、0μmＥ、2、0 nm９.光镜观察时,低倍镜下结构清楚，但高倍镜下瞧不见或瞧不清楚，其原因常就是A、虹彩未打开B、对光不好C、载玻片太厚D、盖玻片太厚E、切片放反，盖玻片朝下10．观察活细胞得形态与生长时应该用A、荧光显微镜B、普通光学显微镜Ｃ、暗视野显微镜D、倒置相差显微镜Ｅ、电子显微镜1１.荧光显微镜技术中常使用得光源为A、紫外线B、红外线C、荧光Ｄ、激光E、电子束12。
透射电镜得最大分辨率约为A、0、2 mmB、0、２μｍC、0、２ｎｍD、2、0μｍＥ、2、0ｎm１3。
透射电镜术中常用得染色剂就是A、苏木精与伊红B、甲基绿与派若宁C、柠檬酸铅与醋酸铀D、溴乙啶与吖啶橙E、锇酸与油红Ｏ14.对于透射电镜术来说哪一点就是错误得?Ａ、取材要新鲜B、组织块不需要固定Ｃ、需制备超薄切片Ｄ、用重金属染色E、在荧光屏上观察１5．扫描电镜术主要用于观察A、组织与细胞内部得微细结构Ｂ、器官与细胞表面得立体微细结构C、细胞断裂面得微细结构Ｄ、各种细胞器得微细结构E、细胞膜内蛋白质颗粒得分布1６。
PAＳ反应显示得就是组织与细胞内得A、蛋白质Ｂ、脂类C、多糖Ｄ、核糖核酸E、脱氧核糖核酸1７.显示组织与细胞内特殊得多肽或蛋白质时应选用A、H-E染色法B、ＰAS反应Ｃ、孚尔根（Feulｇen)反应Ｄ、免疫组织化学术E、原位杂交术18。
应用放射自显影研究细胞DＮA合成及增殖时，注入体内得物质常就是3Ｈ标记得Ａ、胸腺嘧啶核苷B、亮氨酸C、胆固醇D、抗体E、抗原１９。
在体外长期保存活细胞时应选用Ａ、冷冻干燥B、福尔马林固定C、干冰内保存D、甘油内保存E、液氮内保存２0。
细胞株就是Ａ、原代培养得细胞B、传代培养得细胞Ｃ、长期培养得细胞D、贴壁培养得细胞E、用某种单细胞或细胞克隆培养成得纯细胞群体(二）B型题Ａ、嗜酸性B、嗜碱性Ｃ、异染性Ｄ、嗜银性Ｅ、亲银性2１。
组织结构与碱性染料亲与力强22.组织结构被伊红染成红色23.组织结构与银离子结合且直接使其还原成银颗粒而被染成黑色24。
组织结构被甲苯胺蓝染成紫红色Ａ、石蜡切片B、冰冻切片C、涂片D、铺片E、磨片25。
检测酶活性常用26.观察骨与牙等硬组织常用27.检查液体材料如血液、胸水等常用A、组织化学术Ｂ、原位杂交术C、流式细胞术D、细胞培养术Ｅ、扫描电镜术28。
检测细胞内得ＤNA或mRNA２9。
研究各种理化因子对活细胞得影响30。
对细胞得生物化学与生物物理特性进行快速定量测定(三)Ｘ型题３1.与苏木精亲与力强得结构或化学成分有A、细胞核Ｂ、细胞质Ｃ、细胞膜D、ＤＮＡE、RNA３２．PAＳ反应中使用得试剂就是A、稀盐酸B、过碘酸C、甲醛D、乙二醛E、希夫(Scｈｉff)试剂３3.细胞质嗜碱性常就是因为其中含有丰富得A、粗面内质网B、滑面内质网C、游离核糖体D、溶酶体E、高尔基复合体３4.酶组织化学得特点就是A、属于酶催化其特异性底物得反应Ｂ、直接或间接生成不溶性得有色终产物C、可反映酶在细胞内得定位Ｄ、反应产物越多，表示酶得含量越多E、既可用于光镜研究,也可用于电镜研究35.透射电镜术中通常使用得固定剂有A、甲醛Ｂ、多聚甲醛C、戊二醛D、酒精E、锇酸3６。
能够显示DNA 得方法或试剂有A、PAＳ反应Ｂ、孚尔根(Ｆeulgen）反应C、吖啶橙Ｄ、甲基绿Ｅ、派若宁37。
免疫组织化学术中可用于标记抗体得物质有Ａ、荧光物质（如异硫氰酸荧光素FIＴC)B、酶（如辣根过氧化物酶HRP）Ｃ、金属(如胶体金）D、放射性核素（如3H与35S）E、硝酸银38.应用原位杂交术可显示A、基因在染色体上得定位B、细胞内特定得mRＮAＣ、蛋白质得含量D、蛋白质得降解速率Ｅ、基因得转录活性３9.进行体外细胞培养时应注意A、严防微生物污染B、培养液得pＨ与渗透压Ｃ、培养液含适宜得营养D、温度Ｅ、O2与ＣＯ2得浓度4０。
可用于形态学定量分析得仪器有Ａ、透射电子显微镜B、激光共聚焦扫描显微镜C、显微分光光度计D、图像分析仪E、流式细胞仪二、名词解释１。
组织２。
Ｈ-E染色法3．组织化学术4.PAS反应５。
原位杂交术6。
细胞培养术三、问答题1．在进行H-E染色之前,一般还需对所取材得新鲜组织做哪些处理？2．组织结构与细胞对不同染料得结合特性有哪几种?3.与光镜术比较,透射电镜技术得主要特点有哪些?４．说明免疫组织化学技术检测组织与细胞内蛋白质抗原得基本原理与关键技术。
５.常用得形态学定量分析方法有哪几种？简述其原理.附：参考答案一、选择题（一）A型题1、Ｃ2、B3、A4、Ｅ5、D６、B 7、Ａ8、B 9、Ｅ1０、Ｄ1１、A 12、C13、 C １4、B15、B16、C 17、Ｄ18、A 19、Ｅ20、Ｅ(二)B型题21、B ２２、Ａ23、Ｅ24、C 25、Ｂ26、E ２7、C28、B 2９、D ３0、C(三）Ｘ型题３1、ＡDE 32、BE 33、ＡＣ３4、ＡBCE ３5、BCE ３6、BＣD37、ABC 38、ABE 3９、ABCDE ４0、ＢＣDＥ二、名词解释1。
组织就是形态与功能相同或相似得细胞组成得细胞群体,细胞间可有或多或少得细胞间质(或称细胞外基质)。
根据形态结构与功能，人体得组织可分为上皮组织、结缔组织、肌组织与神经组织４种基本类型。
由这些组织按一定得方式有机组合形成器官。
２。
H-Ｅ染色法就是组织学中最常用得染色方法。
染色时使用苏木精与伊红;苏木精就是碱性染料，将细胞核染成蓝紫色；伊红就是酸性染料，将细胞质与细胞外基质中得胶原纤维染成淡红色。
３。
组织化学术就是应用化学反应、物理反应或免疫学反应等原理,在组织、细胞原位检测组织或细胞内化学成分,并对其进行定位、定量及相关功能研究得实验技术。
凡就是组织、细胞内得糖类、脂类、蛋白质、酶类与核酸等都可与相应试剂反应,最后形成有色反应终产物或电子致密物,应用光镜或电镜进行观察。
广义得组织化学术还包括免疫组织化学术、原位杂交术等.4。
PAS反应即过碘酸—Schifｆ反应，就是显示多糖得一种组织化学反应。
其基本原理就是过碘酸将糖分子中得乙二醇基氧化为乙二醛基,后者再与Scｈiff试剂中得亚硫酸品红反应,形成紫红色不溶性反应产物，沉积于多糖存在得部位。
根据反应产物得多少或颜色得深浅（或光密度)可对多糖进行半定量。
5。
原位杂交术就是一种在组织、细胞原位进行核酸分子杂交得技术,用来研究某种基因在染色体上得定位,或编码某种蛋白质得DNA或mＲNA在细胞内得表达。
其原理就是两条单核苷酸链通过碱基互补原则紧密结合,形成稳定得杂交体。
根据这一原理，应用一条碱基序列已知得、并经特定标记(地高辛,生物素,放射性核素等)得核苷酸链作为探针,与细胞内待检DNA片段或ｍRNＡ进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检核酸得分布与含量．6。
细胞培养术就是指利用一定得方法分离与纯化组织中某种细胞,制成单细胞悬液，在适当条件下进行体外培养生长得技术.细胞培养必须在无菌环境下进行，培养液要有适当得营养物质、生长因子、pH、渗透压、O2与CO2浓度、温度等。
细胞培养术不仅可直接研究细胞得行为,如生长、分化、代谢、形态与功能变化,还可研究各种理化因子（如激素、生长因子、药物、毒物、辐射等)对细胞得影响,同时也就是现代分子生物学与重组DNA技术得关键环节。
三、问答题1.①要对取材得新鲜组织进行固定，即使用一定得固定剂使蛋白质凝固,以防止组织自溶，保存组织得原有结构。
②要将组织块包埋在有一定硬度得物质内,以便将软得组织块切成薄片。
组织学中常用石蜡包埋．但在石蜡包埋前,需用酒精等使组织块脱水,再用二甲苯置换组织块中得酒精（透明)。
③用切片机将组织蜡块切成适当厚薄得组织切片，使光线可以透过。
最后进行H—Ｅ染色，使不同得组织、细胞结构具有不同得颜色，便于光镜观察。
2．组织结构对不同染料得结合特性有:①与碱性染料亲与力强、易被染色得称嗜碱性。
②与酸性染料亲与力强、易被染色得称嗜酸性。
③与酸性与碱性染料得亲与力都不强得称中性.④某些结构成分如肥大细胞得胞质颗粒，当用蓝色染料甲苯胺蓝染色时呈紫红色,称为异染性.⑤当用硝酸银染色时,有些组织结构可直接使银离子还原为银颗粒而呈黑色，称为亲银性；而有些组织结构需加入银盐与还原剂才能显色，称为嗜银性。
３.与光镜术比较,透射电镜术得特点有:①以电子发射器发射得电子束代替光线。
②以磁场代替玻璃透镜.③组织取材需快，组织块需新鲜，常用双醛(多聚甲醛与戊二醛）固定，并经锇酸后固定.④由于电子束穿透力弱,组织块需切成超薄切片(50~80 nm）。
⑤用重金属盐(柠檬酸铅与醋酸铀)代替普通化学染料进行电子染色。
⑥在荧光屏或照片上观察结果,以电子密度得高低分辨各种结构。
４.⑴免疫组织化学得基本原理就是应用带有可见标记得特异性抗原—抗体反应,检测组织、细胞中得抗原物质。
⑵其关键技术就是:①抗体得制备:分离纯化人或动物得某种蛋白质,作为抗原注入另一种动物体内,使该动物产生相应得多克隆抗体;或制备单克隆抗体；②抗体得标记:常用得标记物有荧光染料如异硫氰酸荧光素(FITC）、酶类如辣根过氧化物酶(HRＰ)、重金属如胶体金等;④组织或细胞制备：需保存尽量多得组织抗原及其抗原性。
5．常用得形态学定量分析方法有:①显微分光光度测量术,以各种物质分子对光得选择性吸收为基础，在显微镜下对样品中得化学物质进行定量分析。
②形态计量术,运用数学与统计学原理,对组织与细胞进行二维与三维得形态学测量;其中三维立体结构得研究又称体视学；目前多应用图像分析仪进行形态计量研究,方便、快速、准确。
③流式细胞术,其原理就是分离被检细胞，制成悬液,并进行荧光染色或标记，然后使单细胞液流快速通过流式细胞仪得激光照射分析区，被检细胞产生不同得荧光信号并转变为电脉冲,分别输入计算机内贮存,同时显示于示波器屏幕上，即可获得该细胞群体中不同类型细胞得有关数据.。
