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实验题目：细胞增殖和活力的检测方法一、摘要：细胞增殖是生物体生长和繁殖的基础，当细胞增殖发生异常时往往会导致疾病的发生，比如肿瘤的发生就是细胞增殖失控的结果。
掌握细胞增殖和活力的检测是从事细胞生物学研究的一个重要方面。
针对细胞增殖和活力的检测方法有很多，这些方法除了能用于细胞本身增殖特性的研究、还能应用于药物毒副性检测，生长因子对细胞增殖和活力的影响等。
二、实验原理：〔1〕细胞计数法：最简单直接的方法：传统细胞计数的方法是用血球计数板，原理：将一定量的细胞悬液载入固定体积的玻片夹层中，在显微镜下数出细胞数量，然后换算出原始的细胞悬液浓度。
使用自动化细胞计数器，它通过拍下计数界面照片，利用软件程序设定去识别细胞，实现自动化计数。
好处:这种方法能兼容台盼蓝染色，染上蓝色的细胞视为死细胞，直接观察就能大致判断细胞的活力状态，计数后能定量分析细胞存活率。
缺点:①它的灵敏度低②线性范围太窄，细胞浓度低于 10 万个/ml 则计数不准确。
〔2〕 MTT 法MTT 称为噻唑蓝，是一种黄颜色染料。
定义：MTT 比色法是一种通过检测细胞代谢活性间接反映细胞增殖的方法。
原理：活细胞线粒体里的酶能够将外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，活细胞数量越多，形成的有色沉淀越多，通过测定颜色的深浅也就是吸光值来反映细胞代谢活性的强弱，而细胞代谢活性与细胞数量呈正比，从而反映细胞数量的多少。
缺点： MTT被还原形成的有色沉淀需要溶解后才能比色，检测用时较长，检测结果会受到沉淀溶解效果的影响。
三、实验材料和用品：细胞计数法：待测细胞悬液、细胞计数板、盖玻片、普通光学显微镜、微量移液器及枪头、酒精棉球、吸水纸、台盼蓝染液MTT法：贴壁细胞（A549 肺癌细胞株）酶标仪、酶标板振荡器、超净工作台，倒置显微镜，CO2培养箱、96 孔培养板，EP 管及管架，微量移液器及枪头、5mg/ml MTT 溶液，DMSO 溶液，1640 完全培养液四、实验操作（细胞计数法）：实验过程分为四个环节：（首先）清洁细胞计数板及盖玻片—（然后）镜检计数室—（接着）细胞加样—（最后）细胞计数具体操作细节如下：1、清洁细胞计数板及盖玻片：用 75%酒精棉球仔细擦拭细胞计数板的计数室区域，接着擦拭盖玻片，放置吸水纸上自然晾干；2、镜检计数室：1）细胞计数板和盖玻片干燥后，将盖玻片覆盖到细胞计数板的计数室部位；2）在显微镜下观察擦拭效果，确定计数室区域已擦拭干净、能清晰看到计数室的大方格及中方格3）直接平行移出计数板，平放在实验台上；3、待测细胞加样：1）将待测细胞悬液混匀后，吸取 10ul 细胞悬液加入 EP 管，然后再吸取10ul台盼蓝染液加入 EP，混匀，染色静置 2 分钟。
全自动化学发光免疫分析仪参数1★非酶参与的管式直接化学发光，性状稳定不受温度及酸碱度影响2★测试速度单机≥600个测试/小时3★单机一次可装载≥300个样本4支持急诊优先，可自定义急诊位5具有自动重测功能6激发底物在实验过程中可随时更换7样本区、试剂区带独立供电冷藏系统8★单机一次可装载≥42种试剂9无线自动识别技术高速读取试剂盒全部信息10★校准品内置，无需另购11取样采用一次性TIP吸头12自动液面探测、凝块探测、气泡探测、碰撞探测13★单机一次可装载≥570个TIP吸头14★单杯设计，单机一次可装载≥2900个反应杯15智能化装载方式，支持连续装载，实时数量显示全自动血液体液细胞分析仪参数1、检测方法及原理：血液分析采用半导体激光法、鞘流电阻抗法、荧光染色法和流式细胞技术原理，CRP检测采用胶乳增强免疫散射比浊法。
2、报告参数≥37个，三维散点图≥3个。
★3、单机检测速度：CBC＋DIFF＋NRBC＞100个样本/小时；CBC＋DIFF＋NRBC＋CRP≥100样本/小时。
★4、进样方式及用血量：静脉血和末梢全血均可自动批量进样或手动进样；末梢全血检测CD+CRP用血量≤37μl，预稀释模式CD+CRP用血量≤20μl。
★5、配置自动进样器，自动进样器内轨标配回退功能，并可同时选配开放进样或封闭进样装置。
★6、末梢血自动批量检测模式支持以下功能：自动扫码进样、自动混匀、异常标本自动回退复检；自动混匀功能可适配主流末梢血采血管。
7、预稀释模式也能进行白细胞五分类、有核红细胞和CRP 检测，有急诊插入功能。
8、具有全自动体液（含胸水、腹水、脑脊液和浆膜液等体液）细胞计数和对体液中的白细胞进行分类的功能；具有通过高荧光体液细胞参数对肿瘤细胞进行提示功能。
9、使用荧光染料和半导体激光检测WBC五分类，并具有有核红细胞检测功能，并能自动进行对白细胞计数的校正。
10、具有低值白细胞检测功能，如遇白细胞低值时自动增加计数颗粒数量来保证检测结果的准确性，无需二次折返检测。
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2. 细胞大小直方图Cellometer®软件可以获得细胞大小直方图用于鉴别样本中不同的细胞类型或者监测细胞培养过程中细胞大小的改变。
PBMC培养所得在细胞大小直方图中显示两个细胞群。
一个细胞群被设置检测DC细胞的浓度，而另一个细胞群被设置检测更小的细胞。
SF9细胞被病毒感染后细胞显著变大。
绿色所示为有效计数细胞绿色显示活细胞，红色为死细胞3. 细胞簇分析功能针对一些成簇的细胞，Cellometer®软件可以准确区分并精确计数。
血液科实验室常用仪器与设备介绍血液科实验室是医院中不可或缺的重要部门，负责进行各种与血液相关的检验与分析。
为了提高工作效率和准确性，血液科实验室常使用各种专业的仪器与设备。
本文将介绍几种常用的血液科实验室仪器和设备，以及它们的功能和应用。
一、全自动血细胞分析仪全自动血细胞分析仪是血液科实验室中最常见的仪器之一。
它能够对血液中的各种细胞进行计数、分类和测量。
该仪器使用光学原理，通过激光照射血液样本，测量细胞的大小、形状和数量，并根据数据生成血液细胞分布图。
全自动血细胞分析仪具有高效、快速、准确的特点，可以极大地提高血液检测的效率。
二、血凝分析仪血凝分析仪主要用于血液凝固功能的检测。
它通过检测血浆中的凝血因子和凝血酶原时间等参数，评估患者的凝血功能状态。
血凝分析仪广泛应用于血液科实验室中的血栓疾病诊断、抗凝治疗监测等方面。
它的自动化程度高，操作简便，结果准确可靠。
三、电解质分析仪电解质分析仪主要用于血液中电解质和酸碱平衡的检测。
它能够同时测量血液中的钠、钾、氯等离子浓度，并根据测量结果分析患者的酸碱平衡状态。
电解质分析仪具有高度的自动化程度和准确性，对于血液电解质异常的检测和诊断具有重要意义。
四、血气分析仪血气分析仪是血液科实验室的重要设备之一。
它能够快速测量血液中的氧、二氧化碳、酸碱平衡等指标，评估患者的氧合功能和酸碱平衡状态。
血气分析仪操作简便、快速，可以提供实时的血气分析结果，对于急重症监测与治疗具有重要意义。
五、华仪华仪是一种用于血清离心的设备，主要用于分离血液中的血清和红细胞。
血清是血液中含有丰富生物标志物的液体，通过对血清的分离和分析，可以获取患者的生化信息。
华仪操作简单，用途广泛，是血液科实验室中不可或缺的重要设备之一。
六、离心机离心机是血液科实验室中的常见设备，主要用于血液样本和试剂的离心分离。
通过离心，可以使液体分层，从而方便进行样本的取样和分析。
离心机操作简单，适用于各种离心工作，成为血液科实验室中常用的通用设备。
细胞计数方法细胞计数是生物学和医学领域中非常重要的实验技术，它可以帮助科研人员了解细胞的数量、生长状态和活力等重要信息。
在实验室中，有多种方法可以用来进行细胞计数，每种方法都有其特点和适用范围。
本文将介绍常见的几种细胞计数方法及其优缺点，以帮助读者选择合适的方法进行细胞计数。
显微镜计数法是最常见的细胞计数方法之一。
它通过将待计数的细胞悬浮液置于载玻片上，利用显微镜在统一的视野范围内计数细胞数量。
这种方法简单直观，不需要复杂的设备，但需要有一定的操作经验和耐心。
此外，由于显微镜计数法对操作者的要求较高，容易出现人为误差，因此在进行细胞计数时需要谨慎操作，尽量避免出现计数偏差。
自动计数仪是近年来发展起来的一种高效、准确的细胞计数方法。
它利用先进的光学技术和图像分析算法，可以快速、精准地完成大量细胞的计数工作。
相比显微镜计数法，自动计数仪具有计数速度快、结果准确、操作简便等优点。
然而，自动计数仪的价格较昂贵，对于一些实验室来说可能不太实际。
此外，对于特殊形态的细胞，自动计数仪的适用性也有一定限制。
另外，流式细胞仪也是一种常用的细胞计数方法。
它通过将待计数的细胞悬浮液注入流式细胞仪中，利用流式细胞仪的激光技术和多通道检测系统，可以实现对细胞数量、大小、形态等多个参数的快速检测和计数。
流式细胞仪计数方法具有高通量、高精度、多参数分析等优点，适用于对大批量细胞进行快速计数和分析。
然而，流式细胞仪的价格昂贵，对于一般实验室来说可能不太实际，而且操作也需要一定的专业技能。
除了上述几种常见的细胞计数方法外，还有一些其他方法，如电阻计数法、比色计数法等。
每种方法都有其适用的场景和特点，科研人员在选择细胞计数方法时需要根据实际需求和条件进行综合考虑。
总的来说，细胞计数是生物学和医学研究中不可或缺的一部分，选择合适的计数方法可以帮助科研人员更好地进行实验和研究工作。
在进行细胞计数时，需要根据实际情况选择合适的方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保结果的准确性和可靠性。
PBMC 细胞的精确计数和活性分析一、 PBMC 细胞计数的现状 1. 目前， 绝大多数的科研工作者仍在使用血球计数板在 显微镜下进行手工计数 PBMCs； 2. 但是显微镜下由于白细胞和红细胞大小非常接近， 不 能完全区分白细胞和红细胞； 3. 通过红细胞的双凹形形态鉴别红细胞， 需要经验丰富 的操作者，且不停地调焦来鉴别；可想而知要把每个红 细胞鉴别出来，要耗费多长的时间，需要多强的工作量。
PBMC 样本的差异性大 由于个体的差异（如正常人和病人）和人工分离提取的差异，红细胞和血小板污染的程度差异性非 常大，因此我们经常看到分离后的 PBMC 样本千差万别，这也大大增加了在同一条件下，简单快速 准确计数 PBMC 的难度和检测 PBMC 活性的难度。
二、 PBMC 精确计数或活力分析的重要性 PBMC（外周血单个核细胞）是免疫学功能研究中最常用的细胞模型，如细胞增殖、细胞毒性、细 胞因子分泌等。
如在癌症免疫治疗领域中，需从病人全血中分离出 PBMC，分离的 PBMC 进一步扩增或进行不同的 功能检测。
激活扩增后的细胞再回输到病人体内进行细胞治疗。
在整个流程中，从分离到检测，到 培养，到回输等过程，细胞浓度和细胞活力都是必须监测的参数。
密度梯度分离液是从外周血、骨髓，及脐血分离单个核细胞最常用的方法。
但是不可避免的，分离 后的细胞中，会有残存的红细胞及血小板混合在单个核细胞中。
残存的红细胞和血小板的多少，与 个体的差异，以及分离的效果相关；但是不管分离的技术多高超，经验多丰富，都不可避免会存在 红细胞和血小板的污染。
PBMC 实验的特征 1. 随着时间的延长，细胞质量下降； 2. 临床试验相关的样品量很大； 3. 细胞样品不纯，分离之路依赖病人样本和操作者 如何精确、快速、简便计数 PBMC 以及精确分析 PBMC 活力，是免疫学研究以及免疫治疗领域至关 重要的步骤。
1. 使用血球计数板在显微镜下进行手工计数 PBMC，即耗时耗人力，更不能达到精确计数的目的。
细胞计数
当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
1.将血球计数板及盖片用擦试干净，并将盖片盖在计数板上；
2.将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间；
3.静置3分钟；
4.镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的,然后按下式计算：
细胞数/ml＝4大格细胞总数/4×稀释倍数×104
注意：镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团占10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
细胞计数板
细胞活力测定
在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。
复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。
用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。
1.将细胞悬液以0.5ml加入试管中；
2.加入0.5ml0.4%台盼兰染液，染色2-3分钟；
3.死细胞能被台盼兰染上色，镜下可见深兰色的细胞，活细胞不被染色，镜下呈无色透明状。
细胞存活率为：活细胞数÷总细胞数×100％。
注意：活力测定可以和细胞计数合起来进行，但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用。
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Cellometer品牌不仅限于细胞计数、亦可进行细胞活力分析和细胞功能分析。
Cellometer品牌家族：
细胞计数
仪器原理: 通过明场原理进行细胞计数
仪器代表: AUTO T4, AUTO 1000, Mini系列细胞计数仪
应用领域: 细胞系计数的最佳选择
细胞活力
仪器原理: 通过双荧光原理进行细胞活力分析(AO/PI)
仪器代表: AUTO 2000, K2系列细胞活力分析仪
应用领域: 原代细胞的最佳选择
细胞功能
仪器原理: 通过双荧光/双软件原理进行细胞功能分析
仪器代表: VISION CBA, K2系列细胞功能分析仪
应用领域: 细胞凋亡/细胞周期/细胞GFP&RFP阳性率等分析
自动细胞计数(明场) AUTO2000(双荧光) K2(双荧光) X1&X2(单/双荧光) Vsion CBA(双荧光)
细胞系、背景干净细胞的计数、大小、原代细胞计数、活力分析的原代细胞计数和活力分析，酵母、血小板等计数和分析细胞功能分析：凋亡、细胞台盼蓝最佳选择以及细胞功能分析周期、细胞增殖、转染、活力。
Biorad TC20细胞计数器是一种用于快速、精确计算细胞数量和浓度的仪器。
该设备可广泛应用于科研、医学和生物工程领域，帮助用户快速获取关于细胞生长和增殖情况的数据。
以下是关于Biorad TC20细胞计数器的一些重要信息：1. 原理和功能：Biorad TC20细胞计数器采用了先进的成像技术和计算算法，能够在短时间内对细胞进行快速、精准的计数和分析。
其独特的成像系统和智能分析软件可以自动识别和计数细胞，无需使用昂贵的显微镜设备和复杂的人工计数步骤。
用户只需将样品放入仪器，选择相应的参数，即可轻松获得所需的细胞数量和浓度数据。
2. 使用优势：Biorad TC20细胞计数器具有以下几个明显的使用优势：- 高效快速：仪器能够在几分钟内完成细胞计数和分析过程，大大节省了实验时间和人力成本。
- 精准可靠：成像系统和算法能够准确识别和计数细胞，数据准确性高，可信度强。
- 灵活易用：操作简单易上手，不需要复杂的预处理步骤和专业技能，适用于各种细胞类型和实验需求。
- 多样化功能：除了常规计数功能外，还具有细胞大小、形态、健康程度等多项衍生分析功能，满足用户的多样化需求。
3. 应用范围：Biorad TC20细胞计数器可以被广泛应用于以下领域和实验场景：- 细胞培养和增殖实验：用于监测和评估细胞培养过程中的细胞生长和增殖情况，帮助用户掌握细胞培养的状态和动态。
- 细胞治疗研究：用于评估治疗药物对细胞增殖和存活的影响，为细胞治疗研究提供关键数据支持。
- 癌细胞检测：用于快速检测和计数肿瘤组织或液体中的肿瘤细胞，辅助癌症诊断和治疗监测。
4. 售后服务与支持：Biorad TC20细胞计数器作为一种高端科学仪器，提供完善的售后服务和技术支持。
用户在购物后可享受培训、安装调试、维护保养、用户指南和上线技术支持等服务，保障用户设备的正常使用和长期运行。
5. 总结：Biorad TC20细胞计数器是一款功能强大、性能稳定、操作简便的细胞计数仪器，具有广泛的应用前景和市场需求。
细胞计数仪的选择细胞生物学研究中的一些常规操作只是整个项目中微不足道但又非常重要的一步。
这些常规操作简单没有技术内涵，却消耗了研究者大量时间与体力，且结果也不能得到保证。
其中使用血球计数板在显微镜下进行手动细胞计数首当其冲。
手工计数不仅浪费了研究者大部分的时间，繁冗无聊的计数过程往往让人头晕眼花，影响了研究者的积极性，有种大材小用的感觉。
不少研究者提起细胞计数都频频摇头，不仅费时费力，枯燥无味，又没有成就感。
同时，手工计数的主观性强，造成计数结果的可靠性大大打折，重复性差。
不同操作者之间的计数结果一致性差，无可比性，导致实验结果往往不能重现。
现在社会是个快速发展的社会，自动化代替手工的社会，速度和效率是社会关注的重点。
全自动细胞计数分析仪也是顺应时代的要求，应广大研究者和科学领域的需求上市的。
全自动细胞计数分析仪摆脱了手工计数细胞的苦差和烦恼。
同时结果更加准确客观，操作快速简便，重复性好，尤其为我们节省了宝贵的时间，使研究者把更多的精力放在更重要的工作上。
目前，市面上也出现了多种品牌自动细胞计数仪，有基于细胞图像的，也有基于coulter 原理的，但是主要目的就是将人工从繁冗无聊的手工计数中解放出来，排除操作者的主观性。
小编认为细胞计数仪的选择应遵循几点：1.要考虑细胞计数仪的性价比：如果您的目的只是代替手工计数，节省操作者的时间，操作简便，完全没有必要花几十万买一台仅能进行细胞计数的仪器，花大钱办小事。
2.要考虑细胞计数仪的稳定性和重复性：如果您对细胞计数的准确性和重复性要求高，那仪器的高性能和稳定性是首要考虑因素，仪器的硬件以及配套软件的稳定都要考虑，不能一味的追求低价格。
3.要考虑根据细胞类型选择适合的型号：如果您的样本是原代细胞，背景复杂，红细胞和血小板污染严重，你又希望快速精确计数有核细胞且进行精确细胞活力分析，计数结果的准确性直接影响后续实验的成功和重现性。
那么这时就不要吝啬你的钱，双荧光细胞计数&活力分析仪将是您值得花血本来装备的。
贝克曼Z2全自动细胞分析计数仪详细介绍:全自动系统操作简易,数据准确-使用便捷,只需输入要分析的颗粒直径范围,分析就能在数秒内完成.具有校正系统,保证每次测量可靠.多种数据显示-数据可以以数量或浓度形式显示结果，对于稀释的样品，只需输入稀释因子，仪器自动显示原样本的浓度，同时分析细胞数目及大小分布。
测定快速- 提供各种浓度细胞的计数和测量，每个标本检测只需10秒钟。
安全设置- 为方便用户更换试剂、处理废液及简化连接安装过程，贝克曼库尔特特别为Z2设计了Z PAK试剂包及专用感应装置。
使用Z PAK试剂包可避免用户在更换试剂时，溢出电解液而造成环境污染和试剂浪费。
废液被收集在完全密封包装的环境，既避免了操作者与废液接触，又防止了对环境造成生物污染。
Z2全自动细胞分析计数仪应用：应用领域：- 可应用于生物学和医学的各个研究和生产领域，包括各种细胞的分离、培养及质量控制、生殖研究、环境研究、各种细胞的毒理研究、酵母的发酵监控等应用类型：- 可应用于分析骨髓细胞、基因组与蛋白组的细胞、片层体、肌细胞、药物细胞滋养层、血小板、精子、组织培养、组织工程、白细胞、红细胞、体液、酵母、培养细胞、浮游生物、藻类、海洋生物、植物细胞、细菌、原生生物、干细胞等。
Z2全自动细胞分析计数仪参数：分析范围：1μm to 120μm直径定量分析：100μL, 500μL, 1000μL耗电量：少于55W样品浓度/范围：256:1 (容积)，6.3:1 (直径)电源要求：100-120 VAC±10% 50/60 Hz220-240 VAC±10% 50/60 Hz仪器体积：高：46cm (18”)宽：27cm (10.6”) without keypad深：36cm (14”)重量：13.6kg (30lb)型号：Z1 (Single) 单域值型Z2 (Dual) 双域值型Z2 分布型标准数据显示：数目及浓度(数目/毫升)Z2专配Accucomp软件：细胞或颗粒的数目和大小分布功能输出报告：数目列表—计数与浓度、平均体积、数据列表和图形——计数、浓度和分布分布统计数据：平均值、中值、峰值以及标准偏差贝克曼库尔特Vi-CELL XR细胞存活率分析计数器Vi-CELL XR细胞存活率分析仪细胞活性分析仪参数及特点：功能：测定细胞存活率、总细胞数、存活细胞数、总细胞浓度、存活细胞浓度、细胞的直径及分布、细胞的平均直径、细胞圆度及分布、细胞平均圆度、细胞的生长速度、细胞倍增时间、细胞生长曲线，进行实时细胞凋亡检测、细胞周期检测分析范围：细胞存活率：0%-100%，细胞尺寸：5-70µm / 2-70µm，细胞直径：2mm-70mm；可测细胞浓度范围：50,000-10,000,000个细胞/mL (XR型)应用原理技术：台盼蓝染色排除法，CCD成像技术测量项目：- 总细胞数/总细胞浓度- 存活细胞数/存活细胞浓度- 细胞存活率- 细胞的直径及分布/细胞的平均直径- 细胞圆度及分布/细胞平均圆度- 细胞的增殖速度- 细胞倍增时间技术特点：- 细胞存活率分析计数器能全自动快速准确的进行细胞存活率分析，实时检测细胞密度与活率，令细胞周期及细胞凋亡过程一目了然。
细胞计数及活力测试操作步骤一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。
计数结果以每毫升细胞数表示。
细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。
在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。
复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。
用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。
利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。
二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品：普通显微镜、血球计数板、试管、吸管、酶标仪（或分光光度计）2、试剂：0.4%台盼兰，0.5%四甲基偶氮唑盐（MTT）、酸化异丙醇3、材料：细胞悬液三、操作步骤（一）细胞计数1、将血球计数板及盖片用擦试干净，并将盖片盖在计数板上。
2、将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。
3、静置3分钟。
4、镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按本式计算：细胞数/ml＝4大格细胞总数/4×10000注意：镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团占10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
（二）细胞活力1、将细胞悬液以0.5ml加入试管中。
2、加入0.5ml 0.4%台盼兰染液，染色2一3分钟。
3、吸取少许悬液涂于载玻片上，加上盖片。
4、镜下取几个任意视野分别计死细胞和活细胞数，计细胞活力。
死细胞能被台盼兰染上色，镜下可见深兰色的细胞，活细胞不被染色，镜下呈无色透明状。
活力测定可以和细胞计数合起来进行，但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用。
（三）MTT法测细胞相对数和相对活力1、活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。
其量与细胞数呈正比，也与细胞活力呈正比。
Cellometer K2操作手册一、概述Cellometer K2是一种基于荧光技术的细胞计数仪器，可以快速、准确地测量细胞的数量和活力。
其原理是利用荧光染料与细胞结合后的荧光强度来计算细胞的数量和活力。
本操作手册将详细介绍Cellometer K2的使用方法。
二、操作步骤1.准备样品：将待测细胞样品准备好，确保细胞浓度在可测范围内（1x10e5~1x10e7 cells/ml）。
2.加样：将样品加入到Cellometer K2的样品池中，加入适量荧光染料，确保染料与细胞充分结合。
3.开始测量：在仪器上选择相应的参数，如细胞大小、荧光通道等，然后点击开始测量。
4.数据分析：仪器会自动进行计数和活力分析，并将结果输出到计算机或打印机。
三、注意事项1.在使用Cellometer K2之前，请仔细阅读本操作手册，并确保了解其工作原理和操作方法。
2.请勿在仪器工作过程中打开样品池盖，以免影响测量结果。
3.在使用荧光染料时，请务必戴好防护眼镜和手套，避免直接接触皮肤和眼睛。
4.请勿在潮湿或灰尘较多的环境下使用Cellometer K2，以免影响测量结果。
5.在使用过程中如遇到任何问题，请及时联系厂家或专业维修人员。
四、常见问题及解决方法1.问题：测量结果不准确。
解决方法：检查样品是否在可测范围内，荧光染料是否适量，仪器参数设置是否正确。
如有问题，请进行调整。
2.问题：仪器无法启动。
解决方法：检查电源是否正常，仪器是否有故障。
如有故障，请联系维修人员进行检查和修复。
3.问题：测量速度较慢。
解决方法：检查样品是否在可测范围内，仪器参数设置是否正确。
如有问题，请进行调整。
同时，可以尝试关闭其他不必要的应用程序，以释放更多的系统资源供仪器使用。
五、维护与保养1.定期清洁仪器表面，保持清洁卫生。
2.定期检查仪器内部的零件是否松动或损坏，如有需要请及时更换。
3.按照厂家建议的保养周期进行保养和维护。
全自动细胞计数和活力分析系统：
中标产品必须逐条响应以下技术参数：
1.细胞直径范围：2μm -70μm
2.细胞浓度：5x104-1x107个/毫升
3.细胞存活率：0-100%
4.操作系统：Windows XP
5.具有自动取样装置
6.样品量：≤0.5 ml
7.有精确进样系统
8.分析时间周期（包括自动进样，作样，清洗全过程）：≤2.5 分钟
9.自动聚焦FIREWIRE CCD：≥1394 X 1040
10.可实时采集细胞图像
11.图形具有缩放功能
12.样品抽取及台盼蓝染料混合可变量
13.浓度高低可自动报警，废液过多可自动报警
14.符合21CFR PART 11 准则
15.有生物处理3D，旋转绘图
16.可将多重结果输出至EXCEL 文件
17.用户可自行定义非存活细胞分团选项
18.有提高圆度检测功能，可分离细胞碎片
19.可提供的数据：细胞存活率；总细胞数；存活细胞数；总细胞浓度；存活细胞
浓度；细胞的直径及分布；细胞的平均直径；细胞圆度及分布；细胞平均圆度；
细胞的生长速度；细胞倍增时间；细胞生长曲线
连续波长微孔板分光光度计
中标产品必须逐条响应以下参数：
常规参数
孔板类型：6-,12-,24,48,96和384-孔标准微孔板，大小128mm×86mm，最高0.8英寸。
可选配件：Take3TM微孔板适配器，可进行微量检测、BioCell TM、标准比色杯检测
软件：Gen5软件控制，兼容各种版本，包括中文软件
检测模式：终点法，动力学法，波长扫描发和孔域扫描法
检测性能
波长范围：200-999nm，可选1nm步进
波长准确性：＋/-2nm
波长重复性：＋/-0.2nm
吸收光检测范围：0-4 OD
吸收光分辨率：0.0001
带宽：5nm
OD准确性：0-2 OD：+/-1% +/-0.010 OD
2-2.5OD：+/-3% +/-0.010 OD
重复性：0-2 OD：+/-1% +/-0.005 OD
0-2 OD：+/-3% +/-0.005 OD
线性：0-2 OD：+/-1% +/-0.010 OD
2-2.5 OD: +/-3% +/-0.010 OD
读板速度：96孔≤50秒（标准）；≤40秒（快速）；≤15秒（扫描）
384孔≤170秒（标准）；≤135秒（快速）；≤35秒（扫描）
物理参数
连接：USB串口连接电脑控制
化学兼容性：所有暴露表面均耐受0.5%次氯酸钠、70%乙醇或异丙醇进行消毒
符合条款：EN 61326-1:2006;EN61326-2-6:2006;EN61000-4-2; EN61000-4-3; EN61000-4-4; EN61000-4-5; EN61000-4-6; EN61000-4-11
梯度PCR仪
中标产品必须逐条响应以下技术参数：
1主要技术指标
1.1拥有应用生物系统公司颁发的PCR许可证。
1.2灵活而简单的编程：梯度功能、可调节的速度变化率、时间和温度递增模式、
孵育模式、原位模式、链接功能、暂停功能。
1.3程序升级，通过Internet可更新。
1.4样品容量：96 x 0.2 ml PCR管、>75 x 0.5 ml PCR管或8 x 12 PCR板。
1.5温控范围：4－99℃。
1.6梯度温度范围：30-99℃，温差范围为1～20℃，不仅能够优化退火温度，而
且可以在每个PCR操作步骤中使用梯度功能。
1.7模板均一性：20℃－72℃：±0.4℃。
1.8温控精确度：≤±0.2℃。
1.9温控速率：约3℃/秒（加热），约2℃/秒（冷却）。
1.10程序数目：≥100种。
1.11最大循环数：≥90次。
1.12个人卡：存储10程序。
2保修期：贰年免费保修。
配置：主机一台，个人卡1个。
