各种曲霉的菌落

一、实验目的1. 了解曲霉菌的基本特征及其生长条件。

2. 掌握曲霉菌的分离、纯化和培养方法。

3. 分析曲霉菌在不同环境条件下的生长情况。

二、实验原理曲霉菌（Aspergillus）是一种广泛分布于自然界中的丝状真菌，属于子囊菌亚门。

曲霉菌具有丰富的种类，其中许多种类在食品、制药和生物技术等领域具有重要作用。

本实验旨在通过观察曲霉菌的形态特征和生长情况，了解其生长条件，为后续研究提供基础。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 曲霉菌菌种- 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基- 水浴锅- 灭菌锅- 显微镜- 纱布- 烧杯- 量筒- 移液管- 灭菌器2. 实验仪器：- 灭菌操作台- 高压蒸汽灭菌器- 紫外线消毒灯- 电子天平四、实验方法1. 曲霉菌的分离与纯化（1）取一小块曲霉菌菌种，用无菌镊子将其接种于PDA培养基平板中央。

（2）将平板置于28℃恒温培养箱中培养3-5天，待菌落长成后，用无菌接种环挑取单菌落，接种于新的PDA培养基平板上。

（3）重复步骤（2）2-3次，直至获得纯化的曲霉菌菌种。

2. 曲霉菌的培养与观察（1）将纯化的曲霉菌菌种接种于PDA培养基平板中央，置于28℃恒温培养箱中培养。

（2）定期观察曲霉菌的生长情况，记录菌落形态、颜色、质地等特征。

（3）利用显微镜观察曲霉菌的菌丝、分生孢子梗、分生孢子等形态特征。

3. 曲霉菌在不同环境条件下的生长情况（1）将纯化的曲霉菌菌种分别接种于不同温度（10℃、20℃、30℃、40℃）的PDA培养基平板中央。

（2）将平板置于恒温培养箱中培养，观察并记录曲霉菌在不同温度下的生长情况。

（3）重复步骤（1）和（2），分别改变培养基的湿度、pH值等条件，观察曲霉菌的生长情况。

五、实验结果与分析1. 曲霉菌的形态特征曲霉菌菌落呈放射状扩展，表面光滑，质地紧密，初期白色，后期逐渐变为灰白色或棕色。

菌丝细长，有隔膜，分生孢子梗直立，顶端产生分生孢子。

2. 曲霉菌在不同温度下的生长情况在28℃恒温条件下，曲霉菌生长旺盛，菌落直径可达5-7cm。

1.菌种特点：米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快，10d直径达5~6cm，质地疏松，初白色、黄色，后变为褐色至淡绿褐色。

背面无色。

分生孢子头放射状，一直径150~300μm，也有少数为疏松柱状。

分生孢子梗2mm左右。

近顶囊处直径可达12~25μm，壁薄，粗糙。

顶囊近球形或烧瓶形，通常40~50μm。

上覆小梗，小梗一般为单层，12~15μm，偶尔有双层，也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。

分生孢子幼时洋梨形或卵圆形，长大后多变为球形或近球形，一般4.5μm，粗糙或近于光滑。

（半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种）。

菌落生长较快，质地疏松。

初呈白色、黄色，后转黄褐色至淡绿褐色，背面无色，分布甚广，主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。

是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。

也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。

会引起粮食等工农业产品霉变。

米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。

米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。

米曲霉米曲霉米曲霉是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。

在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业，并已被安全地应用了1000多年。

米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。

米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵的条件，这将有助于提高食品酿造业的生产效率和产品质量。

米曲霉用途一、米曲霉简介米曲霉属半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，从梗孢科，曲霉属真菌中的一个常见种。

米曲霉是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。

米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。

米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵的条件，这将有助于提高食品酿造业的生产效率和产品质量。

二、米曲霉的结构米曲霉菌落生长快，10d直径达5~6cm，质地疏松，初白色、黄色，后变为褐色至淡绿褐色。

背面无色。

分生孢子头放射状，一直径150~300μm，也有少数为疏松柱状。

分生孢子梗2mm左右。

近顶囊处直径可达12~25μm，壁薄，粗糙。

顶囊近球形或烧瓶形，通常40~50μm。

小梗一般为单层，12~15μm，偶尔有双层，也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。

分生孢子幼时洋梨形或卵圆形，老后大多变为球形或近球形，一般4.5μm，粗糙或近于光滑。

分生孢子梗长约2mm，近顶囊处直径达12~25μm，壁薄而精糙。

顶囊近球形或烧瓶形，直径40~50μm，上覆单层小梗。

分生孢子幼时洋梨形或随圆形，成熟后为球形或近球形，直径4.5~7.0μm，表面粗糙或近于光滑。

分生孢子头直径150~300μm。

菌落生长较快，质地疏松。

初呈白色、黄色，后转黄褐色至淡绿褐色，背面无色，分布甚广，主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。

是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。

也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。

会引起粮食等工农业产品霉变。

二、米曲霉的用途在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业，并已被安全地应用了1000多年。

米曲霉基因组的破译，也为研究由曲霉属真菌引起的曲霉病提供了线索。

几种曲霉的形态特征常见曲霉困鉴定：菌落：菌落生长速度，表面质地、颜色、形态和气味等。

其中颜色是曲霉菌分类 的依据之一② 分生抱子头：分生抱子头的形状、颜色和大小。

分生抱子头由顶囊、瓶梗、梗 基和分生抱子链组成，为曲霉的特征性结构③ 分生抱子梗或分生抱子柄：注意分生抱子梗的长短、颜色、表面粗糙或光滑、 是否有隔等1、烟曲霉困在SDA 培养基上菌落生长快，棉花 样，开始为白色，2~3天后转为绿 色， 数日后变为深绿色，呈粉末 状。

分生抱子头的顶囊烧瓶状，小 梗单层，排列成 木栅状，布满顶囊 表面3/4，顶端有链形分生抱子，分生抱子球形，有小棘， 绿色烟曲霉菌菌落2、黄曲霉菌④ 具有性生殖的曲霉能产生闭囊壳：为封闭式的薄壁子囊果，含子囊和子囊抱子; ⑤足细胞，也为曲霉的特征性结构。

曲霉菌的结构在SDA培养基上菌落生长快，黄色，表面粉末状。

分生抱子头顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层长，布满顶囊表面，呈放射状排列，黄色，顶端有链形抱子黄曲霉菌菌落黄曲霉菌分生抱子头3、土曲霉困在SDA培养基上菌落生长快，小，圆形，淡褐色或褐色。

分生抱子头的顶囊半球形，小梗双层，第一层短，第二层长，呈放射状排列，分布顶囊表面2/3，顶端有链形抱子土曲霉菌落F列图片为分生抱子头4、黑曲霉困在SDA培养基上菌落生长快，表面黑色，粉末状。

分生抱子头的顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层粗大，第二层短小，呈放射状排列，布满整个顶囊，黑色，顶端有链形抱子黑曲霉菌洛黑曲霉分生抱子头5、杂色曲霉困在SDA培养基上菌落生长慢，菌落圆形紧密，绒毛状，羊毛状，颜色有数环，从青绿到红绿。

分生抱子头的顶囊近球形，小梗双层，第一层长，第二层短, 呈放射状排列，布满顶囊4/5 ,顶端有链形抱子杂色曲霉菌菌落杂色曲霉菌分生抱子头下图为杂色曲霉菌分生抱子头电镜。

真菌的个体和菌落形态特征
真菌是一类生物体，它们与植物和动物不同，具有独特的特征和生命周期。

真菌的个体形态通常包括菌丝体和子实体两种形态。

菌丝体是由长长的菌丝组成的，它们通常在土壤、木材等培养基上生长，并形成一个庞大的菌丝体网络。

子实体是真菌的生殖结构，它们通常在菌丝体上形成，包括子囊菌、担子菌、伞菌等。

不同种类的真菌形态各异，但它们都具有以上两种形态中的一种或两种。

真菌的菌落通常是指在培养基上生长的菌丝体网络，菌落的形态和颜色取决于真菌的种类和培养条件。

一些真菌形成有色菌落，如黑曲霉菌落呈黑色，黄曲霉菌落呈黄色。

真菌的菌落形态和颜色可以用于鉴定真菌的种类，也可以用于菌落计数和菌落测定等实验。

在真菌研究中，了解真菌的个体和菌落形态特征是非常重要的，它可以帮助我们更好地了解真菌的生命过程和生态功能。

同时，通过对真菌的形态特征的观察和研究，我们可以更好地鉴定真菌的种类，为真菌分类和应用提供基础。

- 1 -。

曲霉的形态特征
曲霉（Aspergillus）是一种真菌，常见于自然环境中的土壤、
植物、腐木以及生物分解物中。

其形态特征如下：
1. 子实体：曲霉产生的子实体为顶生或侧生的固态菌核，由许多短小的分生孢子（conidia）组成，呈银灰色或淡黄色。

2. 菌丝体：曲霉的菌丝体呈无色或浅色，以立体网状结构排列，有分枝。

菌丝通常为一根或多根，呈现出纵向或斜向生长。

3. 墨盘层：曲霉的墨盘层为菌丝网络中的刺盘状结构，位于固体培养基的上表面。

墨盘层通常呈现黑褐色，但在某些物种中也可能是淡黄色或深棕色。

4. 菌落：曲霉菌落呈直径2-10cm的圆形或不规则形状，表面
平滑或有细纹。

菌落的颜色因不同物种而异，可以是白色、黄色、淡绿色、淡褐色或深绿色等。

5. 分生孢子：曲霉的分生孢子呈椭圆形或卵圆形，一般具有光滑的表面。

颜色通常为无色或浅色，但在某些物种中也可能是深色或有颜色斑点。

需要注意的是，曲霉存在着丰富的物种多样性，不同物种的形态特征会有所差异。

因此，在进行曲霉的形态鉴定时，需要结合其他的形态特征以及分子生物学方法来进行综合分析。

1.菌种特点：米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快，10d直径达5~6cm，质地疏松，初白色、黄色，后变为褐色至淡绿褐色。

背面无色。

分生孢子头放射状，一直径150~300μm，也有少数为疏松柱状。

分生孢子梗2mm左右。

近顶囊处直径可达12~25μm，壁薄，粗糙。

顶囊近球形或烧瓶形，通常40~50μm。

上覆小梗，小梗一般为单层，12~15μm，偶尔有双层，也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。

分生孢子幼时洋梨形或卵圆形，长大后多变为球形或近球形，一般4.5μm，粗糙或近于光滑。

（半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种）。

菌落生长较快，质地疏松。

初呈白色、黄色，后转黄褐色至淡绿褐色，背面无色，分布甚广，主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。

是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。

也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。

会引起粮食等工农业产品霉变。

米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。

米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。

米曲霉米曲霉是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。

在淀粉酶的作用下，将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类，如麦芽糖、葡萄糖等；在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率，广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业，并已被安全地应用了1000多年。

米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。

米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵的条件，这将有助于提高食品酿造业的生产效率和产品质量。

曲霉菌的形态特征
曲霉菌（Aspergillus）是一种真菌，可通过不断生长和分化形成分枝菌丝。

它们是世界上最常见的真菌之一，在大自然中广泛分布。

曲霉菌是革兰氏阳性菌，菌丝呈长柄状，顶端具有特殊的菌柄，轻微地分叉成几个方向，形成黑色、棕色或淡色子囊菌。

曲霉菌的形态特征如下：
1. 菌丝：曲霉菌体壁由无色的菌丝组成，菌丝壁发达，可防止外界环境的进入，保护菌体。

菌丝由单个细胞组成，长1-10微米，直径约1-3微米。

菌丝生长缓慢，但菌落形成后生长迅速。

2. 菌柄：曲霉菌菌柄是其特殊的形态特征之一，菌柄是一根圆柱形的细长结构，在顶端形成菌囊或芽胞。

菌柄长约50-200微米，直径约1-4微米。

3. 菌囊：曲霉菌的菌囊呈圆柱形或八角形，通常由单个菌丝顶端的菌柄形成。

菌囊内部含有芽胞，芽胞会分裂成多个孢子，孢子具有很高的耐受性，可以在干燥的环境中存活很长时间。

4. 孢子：曲霉菌的孢子较小，呈半球形或圆形，颜色多为黄色、绿色或棕色，直径约2-10微米。

每个菌囊内可生成数百个孢子，孢子形成迅速，可在1-2周内形成完整的孢子囊。

5. 菌落：曲霉菌的菌落呈现典型的酵母菌落形态，表面呈白色或灰色，质地柔
软，菌落下部为黄褐或灰黑色。

菌落的形态受到温度、湿度和营养状况等因素的影响。

总之，曲霉菌具有明显的真菌特征，其生长特点、形态特征和生命周期等方面都是学术研究的重点，这些知识不仅在食品工业、医学和环境监测方面具有重要意义，也有助于人们更好地理解生物体的形态和生命活动。

米曲霉——发酵好酱油的关键发酵网米曲霉米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快，10d直径达5~6cm，质地疏松，初白色、黄色，后变为褐色至淡绿褐色。

背面无色。

分生孢子头放射状，一直径150~300μm，也有少数为疏松柱状。

分生孢子梗2mm左右。

近顶囊处直径可达12~25μm，壁薄，粗糙。

顶囊近球形或烧瓶形，通常40~50μm。

上覆小梗，小梗一般为单层，12~15μm，偶尔有双层，也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。

分生孢子幼时洋梨形或卵圆形，长大后多变为球形或近球形，一般4.5μm，粗糙或近于光滑。

（半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种）。

菌落生长较快，质地疏松。

初呈白色、黄色，后转黄褐色至淡绿褐色，背面无色，分布甚广，主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。

是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。

也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。

会引起粮食等工农业产品霉变。

米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。

米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。

影响米曲霉系的因素影响米曲霉酶系形成、作用的因素主要有：1．曲料：曲料米曲霉的菌丝由多细胞组成，具有产酶功能，菌丝体在曲料上生长好坏直接关系到其酶系的形成和酶活性的强弱。

酱油制曲过程的实质就是要创造米曲霉生长的最适宜条件，保证米曲霉充分发育繁殖，分泌出酿造酱油所需的各种酶类。

所以制曲原料的选择、处理和配比要严格把关。

曲料要以蛋白质含量较高、碳水化合物适量为原则进行选择配比。

曲料的处理要注意以下几点：1。

粉碎要适度。

颗粒太粗，会减少米曲霉生长繁殖的总面积，降低酶活力；颗粒太细，润水后容易结块，蒸料时会产生夹心，导致制曲通风不畅，不利于米曲霉的生长。

2。

描述曲霉青霉根霉菌落的形态特征
1、曲霉菌丝有隔膜，菌丝体产生大量的分生孢子梗，分生孢子梗顶端膨大成为顶囊，一般呈球形，顶囊表面长满一层或两层辐射状小梗，最上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生孢子，孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色，分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连；
2、青霉菌菌丝与曲霉相似，但无足细胞。

分生孢子梗顶端不膨大，无顶囊，经多次分枝，产生几轮对称或不对称小梗，小梗顶端产生成串的青色分生孢子。

孢子穗形如扫帚；
3、根霉菌菌丝体白色、无隔膜、单细胞，气生性强，在培养基上交织成疏松的絮状菌落，生长迅速，可蔓延覆盖整个表面，根霉与毛霉主要区别在于根霉有假根和匍匐菌丝。

形态特征：大肠杆菌：直径？菌落边缘整齐，圆形，表面有光泽、湿润、光滑、呈灰白色。

金黄色葡萄球菌：直径？菌落厚，边缘整齐，不透明，表面光滑有光泽，圆形凸起。

荨麻青霉：直径？菌落绒状、厚实，中央呈浅灰绿色，反面暗黄色。

曲霉：直径？，结构疏松，绒毛状，边缘生长稀疏，呈白色，中央部分颜色暗绿。

酵母菌：直径？菌落表面光滑、湿润、粘稠，易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，培养时间长表面呈皱纹状，较干燥，颜色变暗。

玫瑰暗黄链霉菌：直径？菌落扁平、圆形、不突起，表面粉末状，边缘有辐射状，质地致密，干燥、不透明，背面略呈浅黄色。

大肠杆菌：画成杆状如下图，只取一小区域画即可枯草芽孢杆菌：画成杆状如下图，只取一小区域画即可金黄色葡萄球菌：画成圆形球状，只取一小区域画即可。

青霉：一部分同学画左图，一部分画右图，不要全一样，长度单位不用标明。

左图最顶端圆圈代表“分生孢子”，下面为“小梗”，再下面最长的一段为“分生孢子梗”右图最顶端圆圈代表“分生孢子”下面为“小梗”，小梗下方为“梗基”最下面一段为“分生孢子梗”曲霉：一部分同学画“1-双层小梗的分生孢子头，左侧图；一部分同学画2-单层小梗的分生孢子头，3,4,5部分不用画出。

最顶端圆圈代表“分生孢子”，接着分别为“次生小梗”、“初生小梗”、如果只有一轮就只标明是“小梗”就行了椭圆形的大的空腔部分为“顶囊”，与顶囊相连的为“分生孢子梗”。

可以抄老师的板书，有人拍照了，只是要加上一段关于油镜的使用a,b（发的那份里有）还有我们的实验报告纸的正面要写成微生物学基础实验报告。

右上角写上学号的后两位。