酸性蛋白酶

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关于泡盛曲霉生成酸性蛋白酶调节问题的研究

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

对于微生物细胞所分泌的酶的形成物的调节，可按负反馈原理进行。曾发现在培养基中则含有这些酶类，如黄曲霉(Aspergillusoryzae)的a一淀粉酶。随后又确定，用同样的方法，又发现在酵母机体中对所分泌的日一果糖普酶(转化酶)的形成物具有调节作用。根据这种调节机理可以阐明许多特性，其结论是:这种调节原理应进一步加以扩展。本文提供这样的结果，即可断定，当培养基中含有蛋白酶时，对Aspergillusawan:。ri所分泌的蛋白酶的形成物，存在着调节作用。关于这点早已有所报导。

试验是用AspergilluSawamori78一2的培养物进行的。这一菌株是由C.A.卡诺凡洛夫(C.A.KoH。:a二oB)和T.B.沙霍夫(T.B.山。xoB)分离而得的。所产生的蛋白酶(np0Tea3a，阮酶)，实际上是一种酸性蛋白酶，其能大量地产生这种酶。

霉菌培养在1升中含有如下成分的培养基质中，其配方为:磷酸二氢钾一5克，硫酸镁一20毫克，硫酸锌一20毫克，硫酸铁一20DOC格式论文，方便您的复制修改删减

毫克，黑麦粉提出液(在200毫升水中加入20毫克麦粉，在温度+2“c的条件下经17小时，然后经离心分离而制得)，PHS。6，应当指出:在培养基的条件中，特别重要的是蛋白质的含量，为此，在研究工作中特别要选择这样的方法，即使其保证在无抑制的条件下大量地形成蛋白酶，而蛋白酶则由蛋白分解物而合成。菌种培养在麦芽汁一琼脂培养基上，系用胞子悬浮液进行接种。培养物放置在摇床上(温度26OC)，在通气的条件下培养一昼夜。

对培养液和菌丝体中的蛋白酶活性进行了测定。后者与玻璃粉一道研磨2分钟，并在室温下浸泡一小时。测定活性系按研究诱发变异方面的M.阿恩沙(M.AHCOH)的方法、T.B.沙霍夫和C.A.卡诺凡洛夫的方法而进行的。其利用溶解在PHI.9的盐酸甘油缓冲液中的公牛血红蛋白(BH:二达FeMoT二。6oH)而作为培养基质的。反应过的混合物PH2.3。其在适当的基质浓度和控制地加入两倍体积的5%三氯乙酸的条件下，按初速状态进行反应。活性是按1克菌丝体中所形成的酪氨酸(Topo3oH)的数量(按毫克计)而表示的。

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酸性蛋白酶检测

酸性蛋白酶（Acidic proteinase）是在酸性环境下作用于蛋白质肽键的一类蛋白酶，可将蛋白质水解为氨基酸、多肽以及游离氨基酸。酸性蛋白酶的最适PH从2左右到4左右，能在低pH条件下有效水解蛋白质，广泛应用于酒精发酵、食品加工、酿造、 饲料添加、皮革加工等领域。

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第六节 酸性蛋白酶生产工艺

07040642 47 李继江

1 蛋白酶、蛋白类酶、酸性蛋白酶

1.1 蛋白酶的定义

蛋白酶是催化肽键水解的一类酶，它可迅速水解蛋白质为胨、肽类，广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。同时大多数微生物蛋白酶都是胞外酶。

1.2 微生物蛋白酶分类

微生物蛋白酶按其作用的最适pH可分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶三类。

碱性蛋白酶为透明褐色液体，能与水混溶，最适温度50~60℃，最适pH8.5。

中性蛋白酶为金属酶，褐色颗粒或液体，易溶于水，最适温度45~55℃，最适pH5.5~7.5。

酸性蛋白酶为近乎白色至浅黄色无定型粉末或液体，易溶于水，最适温度45℃，最适pH2.5。

1.3 蛋白类酶

蛋白类酶主要是指由蛋白质组成的酶（P酶）；而主要由核糖核酸组成的酶称为核酸类酶（R酶）。

蛋白类酶分为氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶（或称连接酶）。

1.4 酶的生产方法

酶的生产方法主要有：提取分离法、生物合成法、化学合成法。

酶的微生物合成法主要有：液体深层发酵、固体培养发酵、固定化细胞培养、固定化原生质发酵。

酸性蛋白酶用微生物发酵法生产，采用液体深层发酵。

液体深层发酵是指液体培养基在发酵罐中灭菌冷却后，接入产酶细胞，一定条件下发酵，适用于微生物细胞、动植物细胞的培养。具有机械化程度高、技术管理严格、酶产率高、质量稳定，产品回收率高的特点，是目前酶发酵的主要方式。

1.5 酸性蛋白酶制剂的性能

1.5.1 酸性蛋白酶的作用机理

酶是一种蛋白质，它是活细胞产生的生物催化剂，生物体的新陈代谢活动都离不开酶的作用。酶的种类很多，酸性蛋白酶是水解酶类的一种，能够在微酸环境下（pH2．5～4．0）水解动植物蛋白质，通过内切和外切作用将蛋白质水解为小肽和氨基酸。

２９卷第１０期　２００７年１０月　西部皮革　ＷＥＳＩ’ＬＥＡＨＴＥＲ　Ｖ０１．２９　Ｎｏ．１０　０ｃｔ．２００７　

酸性蛋白酶ＡＲＳ的应用性能研究　孙静　，董胜选　，陆善泓　．陕西科技大学，陕西西安７１００２１；２．北京泛博科技有限公司，北京１０００００）　摘要：通过测定酶液的活力探讨软化工艺条件对酶活力的影响规律，通过测定毛皮的抗张强度和感　官评价与国外公司的同类软化酶进行对比，详细地研究了酸性蛋白酶ＡＲＳ的应用性能。结果表明较　优的软化工艺参数为：ＡＲＳ酶用量１　ｇ／Ｌ，浴液温度３５℃左右，浴液ｐＨ值为３．５左右，软化时间为ｌ６　ｈ。在软化效果方面ＡＲＳ酶与国外同类酶性能相近，而其性价比高于国外同类产品。　关键词：酸性蛋白酶；毛皮软化；ＡＲＳ酶　中图分类号：ＴＳ５２９．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７１—１６０２（２００７）１０—００１５—０４　Ｓｔｕｄｙ　Ｏｎ　ｔｈｅ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｐｅｒｔｙ　ｏｆ　Ａｃｉｄ　Ｐｒｏｔｅａｓｅ　ＡＲＳ　ＳＵＮ　ＪｉｎｇＩ，ＤＯＮＧ　Ｓｈｅｎｇ－ｘｕａｎ２，ＬＵ　Ｓｈａｎ—ｈｏｎｇ　｛１，Ｓｈａｎｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ＇ａａ　７１００２１，Ｃｈｉｎａ；２．ＦａｎＢｏ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００００，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｃｉｄ　ｐｒｏｔｅａｓｅ　ＡＲＳ　ｉｓ　ａｎ　ｉｄｅａｌ　ｂａｔｉｎｇ　ａｇｅｎｔ　ｔｏ　ｆｕｒ．Ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｐｒｏｐｅｒｔｙ　ｏｆ　ａｃｉｄ　ｐｒｏｔｅａｓｅ　ＡＲＳ　ｉｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｉｎ　ｄｅｔａｉｌ　ｏｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ．Ｉｎ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｙｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｂａｔｉｎｇ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｎ　ｂａｔｉｎｇ　ｐｒｏｐｅｒｔｙ　ｉｓ　ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｖｉｇｏｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｎｚｙｍｅ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｔｉｎｇ　ｉｓ　１　ｇ／Ｌ，ｔｈｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｔｈ　ｉｓ　ａｂｏｕｔ　３５℃．ｔｈｅ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｔｈ　ｉｓ　ａｂｏｕｔ　３．５　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｔｉｎｇ　ｉｓ　１　６　ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｙ　ｏｆ　ＡＲＳ　ｅｎｚｙｍｅ　ｉｓ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ｆｒｏｍ　ｏｔｈｅｒ　ｆｏｒｅｉｇｎ　ｃｏｍｐａｎｉｅｓ，ａｎｄ　ｉｔｓ　ｃｏｓｔ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｉｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｏｔｈｅｒｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ａｃｉｄ　ｐｒｏｔｅａｓｅ；ｆｕｒ　ｂａｔｉｎｇ；ＡＲＳ　ｅｎｚｙｍｅ