h t t p ://X B Y Z ．c b pt ．c n k i ．n e t 达,抑制肝纤维化的进展.R e a l Ｇt i m eP C R 和W e s t Ｇe r nb l o t 结果显示,A F 可显著降低肝组织T G F Ｇβ１㊁S MA D ２m R N A 和蛋白的表达水平,从而抑制T G F Ｇβ１/S MA D 信号转导通路的激活,阻断下游细胞因子表达,抑制小鼠肝脏H S C 活化,进而减少细胞外E C M 沉积,逆转早期肝纤维化.参考文献:[１]㊀N a f e e sS ,R a s h i dS ,A l iN ,e t a l ．R u t i n a m e l i o r a t e s c yc l o Ｇp h o s ph a m i d e i n d u c e do x i d a t i v es t r e s sa n di n f l a m m a t i o n i n W i s t a r r a t s :r o l e o fN F ＧκB /MA P K p a t h w a y [J ]．C h e m B i o l I n t e r a c t ,２０１５,２３１:９８Ｇ１０７．[２]㊀赵双双,邵荣光,何红伟．抗肝纤维化的潜在作用靶点[J ]．药学学报,２０１４,４９(１０):１３６５Ｇ１３７１．[３]㊀L i nX ,Z h a n g S ,H u a n g Q ,e t a l ．P r o t e c t i v e ef f e c t o fF u Ｇf a ng ＧL i u ＧY u e ＧQ i n g ,at r a d i t i o n a lChi n e s eh e r b a l f o r m u Ｇl a ,o nC C l ４in d u c e d l i v e r f i b r o s i s i n r a t s [J ]．JE t h n o p h a r Ｇm a c o l ,２０１２,１４２(２):５４８Ｇ５５６．[４]㊀范倩倩,邢磊,乔建斌,等．治疗肝纤维化药物递送系统研究进展[J ]．中国药科大学学报,２０１８,４９(３):２６３Ｇ２７１．[５]㊀吴兰婷,刘文兰．肝纤维化逆转机制的研究进展及治疗概况[J ]．世界华人消化杂志,２０１７,２５(２３):２１２３Ｇ２１３２．[６]㊀G u oC ,X uL ,H eQ ,e t a l ．A n t i Ｇf i b r o t i c e f f e c t s o f p u e r a r Ｇi n o n C C l ４Ｇi n d u c e d h e p a t i c f i b r o s i si n r a t s p o s s i b l y t h r o u g h t h e r e g u l a t i o n o f P P A R Ｇγe x pr e s s i o n a n d i n h i b i Ｇt i o no f P I ３K /A k t p a t h w a y [J ]．F o o d C h e m T o x i c o l ,２０１３,５６:４３６Ｇ４４２．[７]㊀胡烨,张国．肝纤维化的药物治疗研究进展[J ]．实用肝脏病杂志,２０１６,１９(１):８Ｇ１１．[８]㊀P i n z a n iM ,M a c i a s ＧB a r r a g a n J ．U p d a t e o n t h e p a t h o p h ys Ｇi o l o g y o fl i v e rf i b r o s i s [J ]．E x p e r t R e v G a s t r o e n t e r o l H e p a t o l ,２０１０,４(４):４５９Ｇ４７２．[９]㊀J i a n g Y ,W a n g C ,L iY Y ,e t a l ．M i s t l e t o ea l k a l o i df r a c Ｇt i o n s a l l e v i a t e s c a r b o n t e t r a c h l o r i d e Ｇi n d u c e d l i v e r f i b r o s i st h r o u g h i n h i b i t i o no fh e pa t i cs t e l l a t ec e l la c t i v a t i o nv i a T G F Ｇβ/S m a d i n t e r f e r e n c e [J ]．JE t h n o p h a r m a c o l ,２０１４,１５８:２３０Ｇ２３８．[１０]杨宏昕,白音夫,常亮,等．红花清肝十三味对C C l ４诱导大鼠肝损伤纤维化的作用[J ]．西北药学杂志,２０１８,３３(３):３４９Ｇ３５２．[１１]高天娇,董蕾,史海涛,等．莲子心醇提物抗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的实验研究[J ]．中国中西医结合杂志,２０１４,３４(１２):１４７６Ｇ１４８０．[１２]W a n g L ,C h e n g D ,W a n g H ,e t a l ．T h eh e p a t o pr o t e c t i v e a n d a n t i f i b r o t i c e f f e c t s o f S a u r u r u s c h i n e n s i s a ga i n s t c a r Ｇb o nt e t r ac h l o r id ei n d u ce dh e pa t i cf ib r o s i si nr a t s [J ]．J E t h n o ph a r m a c o l ,２００９,１２６(３):４８７Ｇ４９１．[１３]邓莉,申宝德,刘园,等．复方鳖甲软肝片减方对C C l ４诱导大鼠肝纤维化的影响及机制研究[J ]．中草药,２０１８,４９(６):１３７１Ｇ１３７８．[１４]梁洁,张蓓,刘佳宝,等．常山酮对大鼠肝纤维化的影响及其机制[J ]．中草药,２０１３,４４(２３):３３５２Ｇ３３５８．[１５]杨宏昕,白音夫,米裕青,等．蒙古山萝卜酸对实验性肝纤维化大鼠MM P Ｇ１㊁T I M P Ｇ１㊁T G F Ｇβ１和P D G F 表达的影响[J ]．西北药学杂志,２０１７,３２(４):４７７Ｇ４８０．[１６]黄红,康毅,黄旭平,等．荔枝核总黄酮对大鼠肝纤维化S m a d ３㊁S m a d ４及T I M P Ｇ１信号表达的影响[J ]．世界华人消化杂志,２０１６,２４(２):１７６Ｇ１８６．[１７]谢君,谢晓芳,代良萍,等．肝苏颗粒对四氯化碳致肝纤维化大鼠肝功能和病理损伤的影响[J ]．中国实验方剂学杂志,２０１７,２３(８):１１７Ｇ１２３．[１８]H w a n g YJ ,L e eEJ ,K i m H R ,e t a l ．I n v i t r o a n t i o x i d a n t a n da n t i c a n c e r e f f e c t s o f s o l v e n t f r a c t i o n s f r o m P r u n e l l a v u l ga r i s v a r ．l i l a c i n a ．[J ]．B M C C o m p l e m e n t A l t e r n M e d ,２０１３,１３:３１０．[１９]沈楠,黄晓东,李治伟,等．萱草花总黄酮改善C C l ４致大鼠肝纤维化的作用[J ]．药学学报,２０１５,５０(５):５４７Ｇ５５１．[２０]O l s e nA L ,B l o o m e rSA ,C h a nEP ,e t a l ．H e pa t i cs t e l Ｇl a t e c e l l s r e q u i r eas t i f f e n v i r o n m e n t f o rm yo f i b r o b l a s t i c d i f f e r e n t i a t i o n [J ]．A m J P h y s i o l G a s t r o i n t e s t L i v e r P h ys i o l ,２０１１,３０１(１):G １１０ＧG １１８．(收稿日期:２０１９Ｇ０３Ｇ１２)基金项目:山东省自然科学基金项目(编号:２０１６Z R A ０８００５);山东省中医药科技发展计划项目(编号:２０１５Ｇ４４３);济宁市中医药科技项目计划(编号:Z Y Y ２０１５０１８)作者简介:李绍波,男,主治医师∗通信作者:王盟,男,在读博士研究生,主管药师柿叶总黄酮对急性肝损伤小鼠肝组织的保护作用李绍波１,刘雪梅１,毕倩宇２,王㊀盟２,３∗(１．济宁市传染病医院,济宁㊀２７２０００;２．山东中医药大学,济南㊀２５０３００;３．济宁市第一人民医院,济宁㊀２７２０００)摘要:目的㊀探讨柿叶总黄酮(P L F )对四氯化碳(C C l ４)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法㊀采用C C l ４肝损伤模型,测定小鼠血清中谷丙转氨酶(A L T )和谷草转氨酶(A S T )的含量及肝组织中超氧化物歧化酶(S O D )㊁脂质过氧化物丙二醛(M D A )㊁还原型谷胱甘肽(G S H )和肿瘤坏死因子Ｇα(T N F Ｇα)的含量,H E 染色观察肝脏组织病理形态学的改变.结果㊀P L F 高㊁中㊁低剂量组均能降低肝损伤小鼠A L T 和A S T 的含量,提高肝组织S O D 和G S H 含量,降低M D A 和T N F Ｇα含量,并能改善肝组织的病理损伤程度.结论㊀P L F 对C C l ４所致的小鼠肝损伤有较好的保护作用,其作用机制可能与提高小鼠的抗脂质氧化能力有关.关键词:柿叶总黄酮;急性肝损伤;四氯化碳D O I :１０．３９６９/j．i s s n ．１００４Ｇ２４０７．２０２０．０１．０１７中图分类号:R ９６５㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:１００４Ｇ２４０７(２０２０)０１Ｇ００７２Ｇ０５２７西北药学杂志㊀２０２０年１月㊀第３５卷㊀第１期P r o t e c t i v e e f f e c t o f p e r s i m m o n l e a f t o t a l f l a v o n o i d s o na c u t e l i v e r i n j u r y i nm i c e L I S h a o b o１,L I U X u e m e i１,B IQ i a n y u２,WA N G M e n g２,３∗(１．J i n i n g I n f e c t i o u sD i s e a s eH o s p i t a l,J i n i n g２７２０００,C h i n a;２．S h a n d o n gU n i v e r s i t y o fT r a d i t i o n a l C h i n e s eM e d i c i n e,J iᶄn a n２５０３００,C h i n a;３．J i n i n g N o．１P e o p l eᶄsH o s p i t a l,J i n i n g２７２０００,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e p r o t e c t i v e e f f e c t o f p e r s i m m o n l e a f t o t a l f l a v o n o i d s(P L F)o na c u t e l i v e r i n j u r y i n d u c e db y c a r b o n t e t r a c h l o r i d e(C C l４)i nm i c e．M e t h o d s C a r b o n t e t r a c h l o r i d em o d e l o f l i v e r i n j u r y w a s u s e d t o d e t e r m i n e t h e a c t i v i t i e s o f a l aＧn i n e a m i n o t r a n s f e r a s e(A L T)a n da s p a r t a t ea m i n o t r a n s f e r a s e(A S T)i ns e r u m o f m i c e,t h ec o n t e n t so fs u p e r o x i d ed i s m u t a s e (S O D),l i p i d p e r o x i d em a l o n d i a l d e h y d e(M D A),g l u t a t h i o n e(G S H)a n d t u m o r n e c r o s i s f a c t o rＧα(T N FＧα)i n l i v e r t i s s u e s,a n d t h e p a t h o l o g i c a l c h a n g e s o f l i v e r t i s s u e sw e r e o b s e r v e d b y H Es t a i n i n g．R e s u l t s T h e P L F i n h i g h,m i d d l e a n d l o wd o s e g r o u p s c o u l d d eＧc r e a s e t h e a c t i v i t y o fA L Ta n dA S T,i n c r e a s e t h e a c t i v i t y o f S O Da n dG S H,d e c r e a s e t h e c o n t e n t o fM D Aa n dT N FＧα,a n d i m p r o v e t h e p a t h o l o g i c a l d a m a g e d e g r e e o f l i v e r t i s s u e i nm i c ew i t h l i v e r i n j u r y．C o n c l u s i o n P L Fh a v e a p r o t e c t i v e e f f e c t o n l i v e r i n j u r y i nＧd u c e db y C C l４i nm i c e,a n d i t sm e c h a n i s m m a y b e r e l a t e d t o i m p r o v i n g t h e a n t iＧl i p i do x i d a t i o na b i l i t y o fm i c e．K e y w o r d s:p e r s i m m o n l e a f t o t a l f l a v o n o i d s;a c u t e l i v e r i n j u r y;c a r b o n t e t r a c h l o r i d e㊀㊀柿树[１]是我国重要的经济树种之一,广泛分布于南北各地,资源丰富,柿叶入药始载于«滇南本草»,而后的«本草再新»记载用于 治咳嗽吐血,止渴生津 .柿叶含黄酮㊁鞣质㊁树脂和香豆精类化合物等多种物质,其中柿叶总黄酮(P L F)为主要有效成分.现代研究表明,柿叶具有清热解毒㊁生津止渴㊁润肺强心㊁增强免疫功能和抗氧化损伤等药理作用[２Ｇ３].有关P L F对急性肝损伤的研究鲜有报道.本实验通过四氯化碳(C C l４)腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型,探讨P L F对实验性肝损伤的保护作用及机制,为防治肝损伤提供实验依据.１㊀仪器与材料１．１㊀仪器㊀B SＧ４５０型全自动生化分析仪(深圳迈瑞生物医疗有限公司);恒温水浴锅(一恒科学仪器有限公司);台式高速冷冻离心机(美国S i g m a公司);R TＧ６１００型酶标仪(深圳雷社生命科学有限公司).１．２㊀试药㊀柿叶总黄酮(课题组自制);联苯双酯片(通化长青药业股份有限公司);四氯化碳(南京化学试剂公司);超氧化物歧化酶(S O D)㊁丙二醛(M D A)㊁一氧化氮(N O)和还原型谷胱甘肽(G S H)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所);肿瘤坏死因子Ｇα(T N FＧα)检测试剂盒(武汉博士德生物有限公司).１．３㊀动物㊀S P F级健康昆明种小鼠５０只,雌雄各半,体质量为１８~２２g,泰邦科技生物有限公司提供(动物合格证号:２００３００１１).饲养条件:清洁级动物房喂养,室温２５ħ,相对湿度４０％,通风㊁光照良好,采用标准饲料喂养.雌雄分笼饲养,每笼５只,自由饮水.２㊀方法２．１㊀P L F的提取㊀取干燥柿叶适量,按照１ʒ６的比例,用体积分数为７０％的乙醇回流提取３次,收集合并提取液,减压浓缩后用石油醚萃取３次,除去叶绿素,弃去石油醚相,剩余水相用乙酸乙酯萃取３次,弃去水相,剩余乙酸乙酯相减压浓缩,挥干成粉末状,得P L F,以芦丁为标准对照,测得P L F的含量为４１ ２１％[４].２．２㊀动物分组与给药㊀按照随机数字表法,将小鼠分为空白对照组㊁模型组㊁P L F低剂量组(７．５g k g－１)㊁P L F中剂量组(１５g k g－１)和P L F高剂量组(３０g k g－１),每组１０只.各组均灌胃给药,空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水,每日给药１次,连续给药７d,每日称定小鼠体质量.２．３㊀肝损伤模型的建立㊀末次给药２h后,空白对照组小鼠腹腔注射花生油溶液,模型组和P L F高㊁中㊁低剂量组小鼠腹腔注射１m L L－１的C C l４花生油溶液,注射量均为每１０g体质量０．２m L,建立急性肝损伤模型,造模期间禁食不禁水.造模６h后,称定小鼠体质量,摘眼球取血,以３０００r m i n－１离心５m i n,取血清用于生化指标检测;处死小鼠后,分离其肝脏,取右叶的肝脏组织,用４０g L－１多聚甲醛固定,用于肝脏形态学的观察[５].另取一部分肝脏组织匀浆,用于检测S O D㊁M D A和G S H的含量.２．４㊀小鼠肝脏指数的计算㊀实验期间,每日观察实验小鼠精神状态㊁活动状况㊁进食和饮水量等.每日称定小鼠体质量,绘制变化曲线.称定每只实验小鼠处死前的体质量,分别取出肝脏,再次称定,并计算肝指数[６].计算公式:肝指数＝肝脏质量ː小鼠体质量ˑ１００％.２．５㊀小鼠相关指标的检测㊀利用相应的试剂盒说明书要求分别检测小鼠血清中的谷丙转氨酶(A L T)和谷草转氨酶(A S T)含量,检测肝组织中的S O D㊁M D A㊁G S H和T N FＧα的含量.２．６㊀肝脏组织的形态与病理学观察㊀取出肝脏后,肉眼观察小鼠肝脏的形态与颜色.用１００g L－１甲醛固定肝脏组织,常规石蜡包埋,制作病理切片,H E 常规染色,光镜下观察肝脏组织的病理学变化.２．７㊀统计学分析㊀采用S P S S１６．０统计软件进行分３７西北药学杂志㊀２０２０年１月㊀第３５卷㊀第１期h t t p://X B Y Z．c b p t．c n k i．n e t析,数据以xʃs表示,进行正态性检验和方差齐性分析;组间比较采用单因素方差分析.３㊀结果３．１㊀P L F对小鼠活动状态的影响㊀实验期间,空白对照组和P L F高㊁中剂量组小鼠活动状态良好,进食良好;P L F低剂量组和模型组小鼠出现轻度食欲不振㊁精神萎靡等症状.３．２㊀P L F对肝损伤小鼠体质量和肝指数的影响㊀见图１和表１.由图１可知,５组小鼠的体质量随着时间的增加呈增长趋势.由表１可知,与空白对照组比较,其余４组小鼠的肝指数均增大,差异有统计学意义(P＜０．０５);与模型组比较,P L F高㊁中㊁低给药组肝指数呈下降趋势,差异有统计学意义(P＜０．０５).图１㊀小鼠体质量变化F i g．１C h a n g e s o f b o d y m a s s i nm i c e３．３㊀P L F对肝损伤小鼠血清A L T和A S T含量的影响㊀见表２.由表２可知,与空白对照组比较,其余４组小鼠血清中A L T和A S T含量均呈升高趋势,差异有统计学意义(P＜０ ０５);与模型组比较,P L F高㊁中㊁低３个剂量组均能降低肝损伤小鼠血清中A L T和A S T的含量,差异有统计学意义(P＜０．０５).表１㊀各组小鼠肝指数比较T a b．１C o m p a r i s o no f l i v e r i n d e x i nm i c e组别体质量/g肝指数/％空白对照组２１．３６ʃ１．９０４．１４ʃ０．１１模型组２２．０６ʃ１．２０５．３９ʃ０．１０∗P L F低剂量组２３．３９ʃ１．６８５．２３ʃ０．０６∗＃P L F中剂量组２２．２６ʃ２．０４４．９１ʃ０．１８∗＃P L F高剂量组２２．２１ʃ１．１１４．５９ʃ０．１５∗＃㊀注:与空白对照组比较∗P＜０．０５;与模型组比较＃P＜０ ０５.表２㊀小鼠血清中A S T和A L T含量比较T a b．２C o m p a r i s o no fA S Ta n dA L Tl e v e l s i nm o u s e s e r u m 组别剂量/g k g－１A L T/U L－１A S T/U L－１空白对照组３５．２１ʃ９．３２５８．４５ʃ１２．４７模型组１５７．５８ʃ１５．７４∗１１５．６７ʃ２１．５８∗P L F低剂量组㊀㊀７．５１２０．５８ʃ１９．６８∗＃１０１．８９ʃ１７．４７∗＃P L F中剂量组１５１０５．６５ʃ１７．３６∗＃９２．４７ʃ１５．２４∗＃P L F高剂量组３０９０．７８ʃ１４．３６∗＃８７．５８ʃ１３．６９∗＃㊀注:与空白对照组比较∗P＜０．０５;与模型组比较＃P＜０ ０５.３．４㊀P L F对肝损伤小鼠肝组织中S O D㊁M D A㊁G S H 和T N FＧα含量的影响㊀见表３.由表３可知,与空白对照组比较,模型组小鼠肝组织中S O D和G S H含量均下降,差异有统计学意义(P＜０．０５).与模型组比较,P L F高㊁中㊁低剂量组S O D和G S H含量均增加,差异有统计学意义(P＜０．０５);与空白对照组比较,模型组M D A和T N FＧα含量均增加,差异有统计学意义(P＜０．０５).与模型组比较,P L F高㊁中㊁低剂量组M D A和T N FＧα含量均减少,差异有统计学意义(P＜０．０５).表３㊀小鼠肝组织中S O D㊁M D A㊁G S H和T N FＧα含量比较T a b．３C o m p a r i s o no f S O D,M D A,G S Ha n dT N FＧαi nm o u s e l i v e r t i s s u e组别S O D/U m g p r o t－１M D A/n m o l L－１G S H/n m o l L－１T N FＧα/n g－１空白对照组３６５．２１ʃ１９．６５２９．３２ʃ５．２４３８０．８７ʃ２１．３２０．１３ʃ０．０２模型组１４５．２５ʃ１５．５８∗８５．６５ʃ１１．６５１３２．５４ʃ１４．６５∗０．９５ʃ０．０３P L F低剂量组２０４．７８ʃ１８．６９∗＃５７．６５ʃ８．６７＃１７５．３２ʃ１８．９６∗＃０．６４ʃ０．０３＃P L F中剂量组２１４．７４ʃ２０．２５∗＃５０．３２ʃ６．５４＃１７３．６９ʃ１７．８７∗＃０．４２ʃ０．０４＃P L F高剂量组２４７．５４ʃ２１．２５∗＃４２．８７ʃ７．６９＃２６０．４５ʃ１９．３６∗＃０．３７ʃ０．０２＃㊀注:与空白对照组比较∗P＜０．０５;与模型组比较＃P＜０．０５.３．５㊀P L F对肝损伤小鼠肝脏组织的影响㊀见图２.由图２可知,空白对照组小鼠的肝脏呈鲜亮色,表面较光滑;模型组小鼠肝脏呈暗红色,表面有小部分的坏死灶;P L F给药组小鼠的肝脏形态和颜色与空白对照组基本一致,与模型组相比均有一定程度的改善,其中P L F高剂量组的肝脏恢复程度最好.空白对照组肝小叶的结构完整,细胞索排列整齐而有序;模型组肝细胞弥漫性变性水肿,有部分细胞坏死;４７西北药学杂志㊀２０２０年１月㊀第３５卷㊀第１期h t t p://X B Y Z．c b p t．c n k i．n e th t t p ://X B Y Z ．c b pt ．c n k i ．n e t P L F 高㊁中㊁低剂量组与模型组比较,肝细胞变性水肿减轻,肝小叶结构较完整.图２㊀小鼠肝组织病理学变化(ˑ２００)A．空白对照组;B ．模型组;C ．P L F 低剂量组;D．P L F 中剂量组;E ．P L F 高剂量组.F i g ．２H i s t o p a t h o l o g i c a l c h a n ge s o fm o u s e l i v e r (ˑ２００)A．b l a n kc o n t r o l g r o u p ;B ．m o d e l g r o u p ;C ．P L F l o wd o s e g r o u p ;D．P L Fm i d d l e d o s e g r o u p ;E ．P L Fh i g hd o s e g r o u p．４㊀讨论中药柿叶[７],味苦㊁酸㊁涩,性凉,主要功效为清肺止咳㊁凉血止血㊁活血化淤和降血压.现代药理研究表明,柿叶具有扩张血管㊁降血脂㊁降血压㊁抗氧化㊁止血㊁解热抑菌㊁抗癌和增强免疫功能等药理作用.柿叶的主要有效成分是黄酮类化合物,主要有黄芪苷㊁芦丁和檞皮素等.C C l ４是典型的具有肝脏毒性的化合物[８Ｇ１０],被广泛应用于诱发各种肝损伤模型,可引起肝脏腺泡区带状坏死,导致严重的肝损伤.其主要作用机制为导致脂质代谢障碍㊁释放细胞因子和凋亡等.故本实验选用C C l ４作为小鼠肝损伤模型药物.A L T 和A S T 分布于肝脏组织中,是肝细胞损伤的重要指标.正常血清中A L T 和A S T 含量很低,当肝细胞受损时,肝细胞中的A L T 和A S T 漏到外周的血清中,导致血清中A L T 和A S T 含量明显升高[１１Ｇ１４].S O D 是细胞内天然存在的氧自由基的清除酶.G S H 是肝组织中具有灭活氧自由基的一种酶,可阻断体内脂质过氧化进程.M D A 是细胞脂质过氧化反应的主要产物,可导致细胞变性㊁坏死,其在肝脏中的含量可间接反映肝细胞受自由基攻击时脂质过氧化损伤程度[１５Ｇ１９].T N F Ｇα是一种由巨噬细胞和单核细胞产生的单核因子,可以作为肝损伤的主要介质,在肝损伤中起重要作用[２０].因此,S O D ㊁G S H ㊁M D A 和T N F Ｇα可作为肝脏损伤程度的重要指标.本实验通过测定肝损伤小鼠A L T ㊁A S T ㊁S O D ㊁M D A ㊁G S H 和T N F Ｇα含量以及观察肝组织病理情况,考察P L F 对肝损伤小鼠的保护作用.结果表明,P L F 可减轻肝损伤小鼠的肝脏肿大程度,减轻肝脏的变性水肿;降低肝损伤小鼠A L T ㊁A S T ㊁M D A 和T N F Ｇα含量,增加肝损伤小鼠肝组织中S O D 和G S H 含量,从而提高小鼠的抗脂质过氧化能力,减少肝细胞的坏死程度,修复肝细胞损伤.综上所述,P L F 对C C l ４诱导小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与清除小鼠体内的自由基㊁减轻肝细胞脂质过氧化的程度等有关,但具体的作用分子机制及信号通路有待进一步研究.参考文献:[１]㊀覃斐章,林兴,张绪东,等．柿叶黄酮对L ＧN AM E 诱导的高血压大鼠血压的影响[J ]．现代中医药,２００８,２８(３):６１Ｇ６３．[２]㊀郑皓,鲁周民,刘月梅,等．柿叶的药理作用研究进展及开发利用现状[J ]．西北农林科技大学学报:自然科学版,２００７,３５(１２):８１Ｇ８６．[３]㊀周江爆,李耀华,侯小涛,等．广西广柿叶的H P L C 指纹图谱研究[J ]．华西药学杂志,２０１１,２６(６):５８３Ｇ５８４．[４]㊀刘少静,赵旭,张颖,等．柿叶中总黄酮的提取和纯化工艺优化及鲜㊁干柿叶中总黄酮的含量比较[J ]．中国药房,２０１５,２６(２５):３５７２Ｇ３５７５．[５]㊀康辉,李强,王丽．黄芩提取物㊁黄芩苷抗氧化和保肝作用研究[J ]．中医研究,２０１０,２３(４):２７Ｇ３０．[６]㊀郑岳,孙伟,卢坤玲,等．龙葵多糖对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用及其机制[J ]．山东医药,２０１６,５６(８):２３Ｇ２５．[７]㊀周鑫堂,王丽莉,韩璐,等．柿叶化学成分和药理作用研究进展[J ]．中草药,２０１４,４５(２１):３１９５Ｇ３２０３．[８]㊀杨亚军,李庆耀,梁生林,等．车前草总三萜对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用[J ]．中成药,２０１２,３４(１):１４０Ｇ１４２．[９]㊀吴雅茗,唐灵芝,翁乐斌,等．红茶菌对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用[J ]．西北药学杂志,２０１７,３２(２):１７５Ｇ１８０．[１０]韦玲,黄权芳,林兴．满天星染料木黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用及机制[J ]．中国实验方剂学杂志,２０１５,２１(４):１０２Ｇ１０６．[１１]叶超凡,卢任玲,谢军,等．古日古木Ｇ１３对C C l ４致慢性肝损伤小鼠保护作用的研究[J ]．时珍国医国药,２０１６,２７(６):１３６４Ｇ１３６６．[１２]C a iN ,Z h a oX ,J i n g Y ,e t a l ．A u t o p h a g yp r o t e c t s a ga i n s t p a l m i t a t e Ｇi n d u c e d a p o p t o s i s i n h e p a t o c yt e s [J ]．C e l l B i o s Ｇc i ,２０１４,４:２８．５７西北药学杂志㊀２０２０年１月㊀第３５卷㊀第１期[１３]Z h o uBH,Z h a o J,L i u J,e t a l．F l u o r i d eＧi n d u c e d o x i d a t i v e s t r e s s i s i n v o l v e d i n t h em o r p h o l o g i c a l d a m a g e a n dd y sＧf u n c t i o no f l i v e r i n f e m a l em i c e[J]．C h e m o s p h e r e,２０１５,１３９:５０４Ｇ５１１．[１４]杨宏昕,白音夫,常亮,等．红花清肝十三味对C C１４诱导大鼠肝损伤纤维化的作用[J]．西北药学杂志,２０１８,３３(３):３４９Ｇ３５２．[１５]黄秀曼,杜钢军,孙婷,等．过山蕨总黄酮对肝损伤的保护作用[J]．中草药,２０１２,４３(１２):２４５８Ｇ２４６３．[１６]赵文惠,曾诚,秦冬梅．维药昆仑雪菊多糖对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的预防作用及机制研究[J]．中国药房,２０１７,２８(３１):４４０７Ｇ４４１１．[１７]韩光顺,梁华益,韦家河,等．茴香提取液对小鼠酒精性肝损伤的保护作用[J]．现代预防医学,２０１７,４４(１８):３３１６Ｇ３３２０．[１８]王昱．油橄榄叶提取物对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用[J]．四川动物,２０１７,３６(５):５５７Ｇ５６２．[１９]张丽,饶雅琪,曾金祥,等．藏药长毛风毛菊对C C l４致小鼠急性肝损伤的保护作用与机制研究[J]．江西中医药,２０１７,４８(１１):７３Ｇ７６．[２０]肖日传,罗光明,张风波,等．桅子根醇提物C C l４致小鼠急性肝损伤的保护作用[J]．中药药理与临床,２０１７,３３(３):１１４Ｇ１１７．(收稿日期:２０１９Ｇ０２Ｇ２０)紫檀芪延缓糖尿病肾病发展的作用及机制安喆妮,董裴燕,于㊀倩(湖南省儿童医院药学部,长沙㊀４１０００７)摘要:目的㊀研究紫檀芪对链脲佐菌素(S T Z)诱导的糖尿病肾病(D N)进展的延缓作用及可能机制.方法㊀将C５７B L/６J小鼠(n ＝５０)随机分为对照组㊁模型组㊁低剂量药物组(２０m g k g－１)㊁中剂量药物组(４０m g k g－１)和高剂量药物组(８０m g k g－１),每组１０只.对照组和模型组灌胃５g L－１羧甲基纤维素钠,高㊁中㊁低剂量药物组小鼠灌胃相应剂量的紫檀芪１２周.测定２４h蛋白尿,检测血液中血糖㊁血肌酐和血尿素氮水平,检测肾脏组织中炎症因子白介素Ｇ６(I LＧ６)和单核细胞趋化蛋白Ｇ１(M C PＧ１)的表达,H E染色和P A S染色检测肾脏组织的病理改变情况,W e s t e r nb l o t法测定肾脏组织中沉默信息调节因子１(S I R T１)蛋白的表达.结果㊀紫檀芪可延缓S T Z诱导的１型D N的进展,降低血肌酐和血尿素氮的水平.紫檀芪对血糖及２４h尿蛋白无影响.紫檀芪可降低肾脏组织中炎症因子I LＧ６和M C PＧ１的表达.H E染色和P A S染色发现,紫檀芪能降低糖尿病小鼠肾小球体积和基底膜厚度,还能增加糖尿病小鼠肾脏组织中S I R T１蛋白的表达.结论㊀紫檀芪可延缓１型D N的发展,其机制与其调节S I R T１的表达有关.关键词:紫檀芪;糖尿病肾病;沉默信息调节因子１D O I:１０．３９６９/j．i s s n．１００４Ｇ２４０７．２０２０．０１．０１８中图分类号:R９６５㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:１００４Ｇ２４０７(２０２０)０１Ｇ００７６Ｇ０４T h e r o l e o f p t e r o s t i l b e n ed e l a y i n g t h ed e v e l o p m e n t o f d i a b e t i cn e p h r o p a t h y a n d i t s m e c h a n i s mA NZ h e n i,D O N GP e i y a n,Y U Q i a n(D e p a r t m e n t o fP h a r m a c o l o g y,H uᶄn a nC h i l d r e nᶄsH o s p i t a l,C h a n g s h a４１０００７,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t a n dm e c h a n i s mo f p t e r o s t i l b e n e o n s t r e p t o z o t o c i n(S T Z)Ｇi n d u c e dd i a b e t i c n e p h r o p a t h y (D N)．M e t h o d s C５７B L/６Jm i c e(n＝５０)w e r e d i v i d e d i n t o５g r o u p s(n＝１０p e r g r o u p):c o n t r o l g r o u p,m o d e l g r o u p,p t e r o s t i l b e n e l o w d o s e g r o u p(２０m g k g－１),p t e r o s t i l b e n e m i d d l ed o s e g r o u p(４０m g k g－１)a n d p t e r o s t i l b e n eh i g h d o s e g r o u p(８０m g k g－１)．T h em i c e i nt h ec o n t r o l g r o u p a n d m o d e l c o n t r o l g r o u p w e r e t r e a t e d w i t h５g L－１C M CＧN a,a n dt h em i c e i nt h e p t e r o s t i l b e n e g r o u p w e r e i n t r a g a s t r i c a l l y a d m i n i s t e r e dw i t h p t e r o s t i l b e n e f o r１２w e e k s．T h e l e v e l so f２４h p r o t e i n u r i a,b l o o d g l uＧc o s e,c r e a t i n i n e a n db l o o du r e an i t r o g e n w e r ed e t e c t e d．T h e l e v e l so f i n t e r l e u k i n６(I LＧ６)a n d m o n o c y t h ec h e m o t a c t i c p r o t e i n１(M C PＧ１)i nk i d n e y t i s s u ew e r e d e t e r m i n e d．T h ek i d n e y h i s t o l o g y w a s d e t e c t e db y H Ea n dP A Ss t a i n i n g．T h e l e v e l o f p r o t e i ne xＧp r e s s i o no f s i l e n t i n f o r m a t i o n r e g u l a t o r１(S I R T１)w a sd e t e c t e db y u s i n g W e s t e r nb l o tm e t h o d．R e s u l t s P t e r o s t i l b e n ed e l a y e d t h e p r o g r e s s i o no f S T ZＧi n d u c e dD N,a n dd e c r e a s e dt h e l e v e l so f c r e a t i n i n ea n db l o o du r e an i t r o g e ni nd i a b e t i c m i c e,c o m p a r e d w i t h m o d e l g r o u p m i c e．P t e r o s t i l b e n eh a dn oe f f e c t o nb l o o d g l u c o s ea n d２４h p r o t e i n u r i a．P t e r o s t i l b e n e r e d u c e dt h ee x p r e s s i o no f i nＧf l a m m a t o r y f a c t o r s I LＧ６a n d M C PＧ１i nk i d n e y t i s s u e s．H Ea n dP A Ss t a i n i n g f o u n dt h a t p t e r o s t i l b e n e r e d u c e d g l o m e r u l a rv o l u m e a n db a s e m e n tm e m b r a n e t h i c k n e s s i nd i a b e t i cm i c e．P t e r o s t i l b e n ew a s a l s oa b l e t o i n c r e a s e t h e e x p r e s s i o no fS I R T１i n t h ek i d n e y t i s s u e o f d i a b e t i cm i c e．C o n c l u s i o n P t e r o s t i l b e n e i n h i b i t s t h e d e v e l o p m e n t o f S T ZＧi n d u c e dD N,a n d i t sm e c h a n i s mi s a s s o c i a t e dw i t h t h e r e g u l a t i o no f S I R T１e x p r e s s i o n．K e y w o r d s:p t e r o s t i l b e n e;d i a b e t i cn e p h r o p a t h y;s i l e n t i n f o r m a t i o n r e g u l a t o r１６７西北药学杂志㊀２０２０年１月㊀第３５卷㊀第１期h t t p://X B Y Z．c b p t．c n k i．n e t。
