植物组织培养实验-2013

植物组织培养实验一：培养基的配制学院：风景园林院学号：131001226 姓名：张晟菓一、实验目的1. 掌握植物组织培养实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

2. 掌握培养基的配置方法。

3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法。

二、实验原理鉴于微生物种类及代谢类型的多样性，用于培养微生物的培养基的种类也很多。

培养基的配置的程序有器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，以及培养基的无菌检查等。

此次配制400mL MS培养基。

三、实验材料1.药品：激素：BA 1.0L（200mg/L）NAA 0.2L（200mg/L）母液：MS1（大量元素）20mL——浓缩20倍MS2（微量元素）2mL——浓缩200倍MS3（铁盐）2mL——浓缩200倍；MS4（维生素和氨基酸）2mL——浓缩200倍琼脂：2.2g蔗糖：12g（3%）无菌水2.玻璃器皿：移液管、试管、烧杯、量筒、玻璃棒、培养皿3.仪器设备：电子天平4.其他物品：药匙、滤纸、称量纸、pH计、记号笔、棉花等四、实验步骤1.玻璃器皿清洗：将试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中，用毛刷刷洗，然后用自来水和蒸馏水冲净。

移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。

晾干后备用。

2.量取母液：MS1（20mL），MS2（2mL），MS3（2mL），MS4（2mL）；加激素：BA（1.0mL），NAA（0.2mL）；加蔗糖：12g。

3.加水定容至400mL。

4.搅匀后用pH计、烧碱溶液及硫酸溶液调pH值至5.8。

5.加琼脂2.2g，用电磁炉加热溶解并搅拌5-6分钟，冒泡即可拿出。

6.趁热分装，包扎，贴标签。

五、实验结果培养基配置完成。

植物组织培养实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。

有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。

（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。

营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。

三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。

四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。

六、实验步骤（一）培养基母液的配制表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l）表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml)500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l20 20 20 20 20 10 10 5（注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积）表3.配制母液所需的药品及称取量（注：根据表1与表2计算各物质的称取量）药品名称 nh4no3 kno3 kh2po4 称取量（mg）41250 47500 4250 药品名称 kina2mno4?2h2o cuso4?5h2o 称取量（mg）20.75 6.25 0.625 cacl2?2h2o 11000 cocl2?6h2o 0.625 mgso4?7h2o 9250 肌醇 2000 feso4?4h2o 695 甘氨酸 40 na-edta 932.5 盐酸硫胺素 8 mnso4?7h2o 557.5 盐酸吡哆醇 10 znso4?7h2o 215 烟酸 10 h3bo3 155 （1） ms大量元素母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml存放于冰箱中备用。

植物组织培养实验报告植物组织培养是一种现代生物技术，主要是通过外界条件控制细胞的生长和分化，培养所需要的组织，从而通过细胞分裂和分化，实现植物的再生和繁殖。

为了更好地了解这项技术的原理和流程，我在实验室进行了一次植物组织培养实验。

实验材料在实验中，我们使用的植物为萝卜。

实验所需的其他材料包括无菌操作板、橡胶塞、手套、无菌皮层剪刀、烧杯、暗反应箱、培养基、灭菌器等。

实验过程首先，我们要进行实验前的准备工作。

将培养基溶解，加入适当的药物，将其灭菌，倒在Petri 瓶中。

之后，我们需要准备植物材料，将其清洗干净后，切下需要的组织。

注意，每次切下组织后，都要更换一次手套，以防止污染。

接着，我们需要将组织放在实验室内的无菌操作板上，用无菌皮层剪刀将其切开，取出其中的小块，并将其植入到培养基中。

然后，我们将瓶子封上橡胶塞，并将其放入暗反应箱中。

在其中进行恒温培养。

实验结果在培养7天后，我们观察到萝卜的种子开始破裂，开叶，并在切口处呈现出叶绿素的色泽，显示出组织细胞开始生长。

在培养15天后，种子植物的生长速度加快，茎和叶子均出现，并开始向四周地扩散生长。

在培养30天后，种子植物已经长成一株大小适中、青翠健康、叶面丰富的植株。

结论通过实验，我们了解到了植物组织培养的原理和方法，发现该实验技术所需的环境条件较为苛刻，需要进行多次细致的操作，才算得上成功。

同时，该技术具有非常广泛的应用价值，可以为植物育种和研究提供新的途径，促进了植物科技的发展。

总之，通过本次实验，我对植物组织培养技术有了更深入的了解，掌握了更多的实验技能，同时也提高了我在生命科学方面的实验操作能力。

植物组织培养实验报告植物组织培养是一种重要的生物技术手段，通过对植物细胞和组织进行离体培养，可以实现植物再生、遗传改良、病毒检测等多种目的。

本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作方法，以及培养条件对植物再生的影响。

首先，我们选择了小麦离体子叶和茎段作为实验材料，进行了消毒处理和植物组织培养基的配制。

消毒处理是植物组织培养的关键步骤之一，它能有效杀灭外源微生物，保证培养组织的纯净性。

接着，我们将消毒后的植物材料转移到含有植物生长调节剂的培养基上，进行培养。

在培养的过程中，我们注意观察培养组织的生长情况，记录下不同处理条件下植物再生的效果。

实验结果表明，植物组织培养的成功与否受到多种因素的影响，包括植物材料的选择、培养基的成分、光照和温度等环境条件。

在本次实验中，我们发现小麦离体子叶的再生能力较强，而茎段的再生效果较差。

此外，培养基中生长调节剂的种类和浓度也对植物再生有显著影响，适当的生长调节剂可以促进再生过程，而过高或过低的浓度则会抑制再生。

综合实验结果，我们得出了一些结论和建议，首先，选择适宜的植物材料对于植物组织培养至关重要，不同植物材料的再生能力存在差异，需要根据具体情况进行选择；其次，培养基的配制需要根据具体植物材料和培养目的进行调整，合适的生长调节剂浓度可以提高再生效率；最后，培养条件的控制也是影响植物组织培养效果的重要因素，包括光照、温度、湿度等，都需要进行合理的调节。

总之，植物组织培养是一项复杂而有趣的实验技术，通过不断的实践和探索，我们可以更好地理解其中的原理和规律，为植物育种和生物工程领域的研究提供重要的技术支持。

希望本次实验结果能对相关领域的研究工作有所启发，也希望能为植物组织培养技术的进一步完善贡献一份力量。

植物组织培养的实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。

有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。

（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。

营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。

三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。

四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、MS培养基、蒸馏水、NaOH、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。

植物组织培养实验植物组织培养实验是一项基于植物生物学的研究技术，它通过在适当的培养基中培育植物细胞、组织和器官，以研究植物生长、发育、代谢和遗传等方面问题。

植物组织培养技术一般涉及的基本步骤包括组织取样、表皮消毒、培养基制备、筛选培养物、培养、观察和数据记录等。

组织取样组织取样是植物组织培养的第一步，选择的组织应为获得感兴趣细胞或器官的基础。

通常情况下，植物种子、叶片、幼茎、根、芽、花和果实等都可以用于组织取样。

在选择组织前需要确定所研究的问题，如要研究种子发育过程，则选择发育中的种子进行取样；若要研究茎的生长过程，就选择茎的新生部位作为实验对象。

表皮消毒表皮消毒是将取得的植物组织中的微生物去除的过程。

微生物会影响组织培养发展，这会导致发生不必要的变异和甚至失败。

表皮消毒的方法有多种，其中最常用的方法是使用双氧水和75%酒精按一定方法进行消毒。

消毒之后，将组织再次用无菌水清洗，以去除残留的双氧水和酒精。

培养基制备培养基是培养组织的营养来源，可以根据不同实验设计的要求选择制备。

基本培养基配方包括营养盐和植物激素，营养盐提供必要的营养物质，而植物激素则起着促进细胞分裂和分化的作用。

例如，包含各种氨基酸、维生素和能量来源的MS基础培养基是最常用的培养基之一。

筛选培养物筛选培养物是将合适的组织细胞挑选出来放置在培养基中培育，防止其过多发生变异或者对人体等方面的危害。

在筛选培养物时，需要注意细胞数量和形态。

对于数量较多的细胞和组织，应采用无菌手术刀进行分离和挑选；而对于较小的器官如芽或根的小茎，可利用移液管或显微镜完成挑选。

培养和观察在选择出适合的培养物之后，需要将其放置在外界充分汲取空气和养分的环境中培养。

养分和水分需要在适宜的时间内追加，以适应发育的需要。

特别是对于更高级的组织器官如花，生长的要求更高，需要精心细致的培育过程。

同时还需要及时观察器官的生长和整体形态，以便对培养过程进行调整和升级。

数据记录数据记录是组织培养实验最后一个步骤，它的目的是为了明确整个实验过程中的变化和优化。

一、实验简介实验名称：植物组织培养实验目的：通过植物组织培养技术，了解植物细胞生长、分化和再生的过程，掌握组培技术的操作方法，并应用于植物繁殖和遗传改良。

二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性，通过特定的培养基和外界条件，使植物组织在体外进行生长、分化和再生，最终形成完整的植株。

该技术广泛应用于植物繁殖、遗传改良、基因工程等领域。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：植物外植体（如叶片、茎段、愈伤组织等）培养基（MS培养基、改良MS培养基等）诱导培养基（1/2MS培养基、添加生长调节剂的培养基等）细菌培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）灭菌剂（如75%酒精、1%次氯酸钠溶液）其他：超净工作台、接种针、酒精灯、移液器、培养皿、培养箱等2. 实验仪器：电子天平高压蒸汽灭菌器移液器超净工作台培养箱显微镜四、实验步骤1. 材料预处理：选择健康、无病虫害的植物材料，用流水冲洗干净。

将外植体浸泡在1%次氯酸钠溶液中消毒5-10分钟，然后用无菌水冲洗3-5次。

将消毒后的外植体用无菌滤纸吸干水分。

2. 培养基制备：称取适量的培养基粉末，加入少量蒸馏水溶解。

将溶解后的培养基过滤除菌，加入适量的琼脂和生长调节剂。

将培养基倒入培养皿中，待凝固后备用。

3. 外植体接种：在超净工作台中，用无菌接种针将外植体接种到培养基上。

每个外植体接种3-5个，确保接种密度适宜。

4. 培养与观察：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制适宜的温度、光照和湿度。

定期观察外植体的生长情况，记录愈伤组织形成、芽生长和根生长等过程。

5. 培养基调整与继代培养：当外植体形成愈伤组织或芽生长到一定长度时，可进行培养基调整和继代培养。

将愈伤组织或芽切割成小块，重新接种到新的培养基上。

根据生长情况，适时调整培养基成分和生长调节剂浓度。

五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成：在适宜的培养基和条件下，外植体可形成愈伤组织。

愈伤组织是细胞增殖和分化的基础，是组织培养成功的关键。

植物组织培养实验报告目录1. 引言1.1 研究背景1.2 研究目的1.3 研究意义2. 实验方法2.1 材料准备2.2 实验步骤2.3 实验设计3. 结果与讨论3.1 实验结果3.2 结果分析3.3 结果讨论4. 结论引言研究背景植物组织培养是一种重要的生物技术手段，可用于植物繁殖、种质改良、病毒检测等方面。

通过培养植物的组织和细胞，可以实现对植物特定性状的调控和改善。

研究目的本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作步骤，研究不同培养条件下植物组织生长情况，为植物生物技术的研究提供参考。

研究意义植物组织培养技术可以加快新品种选育的速度，提高植物的遗传改良效率，对于传统育种技术的完善和植物种质资源的保存具有重要意义。

实验方法材料准备- 植物组织样品- 培养基- 生长室- 培养瓶- 剪刀、消毒酒精等无菌操作工具实验步骤1. 准备培养基，对其进行灭菌处理。

2. 取样品进行无菌处理，切取植物组织。

3. 将植物组织置于培养基上，放入生长室进行培养。

4. 定期观察植物组织的生长情况，记录数据。

5. 根据实验设计，对不同处理组进行相应操作。

实验设计本实验设计了对照组和不同处理组，比较不同处理条件对植物组织生长的影响，以验证植物组织培养的有效性。

结果与讨论实验结果经过一段时间的培养，观察到植物组织在培养基上出现生长现象，不同处理组的生长情况有所不同。

结果分析通过对实验结果的分析，可以得出不同培养条件下植物组织生长的规律性，为进一步研究提供了重要依据。

结果讨论在讨论部分，对实验结果进行解释和归纳，总结出植物组织培养的特点和应用前景，为相关研究领域提供参考和启示。

结论植物组织培养是一种重要的生物技术手段，可以在植物繁殖、种质改良等领域发挥重要作用。

本实验结果表明，植物组织培养具有可行性和有效性，对于植物生物技术的发展和应用具有重要意义。

一、实验背景植物组织培养技术是一种在无菌条件下，将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块，通过人工方法在特制的培养基上进行培养，使其逐渐发育成完整植物体的技术。

本实验旨在让学生了解植物组织培养的基本原理，掌握实验操作技能，培养学生的创新意识和实践能力。

二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理及应用。

2. 掌握植物组织培养实验的操作步骤。

3. 培养学生的创新意识和实践能力。

三、实验材料与仪器1. 材料：植物茎段、叶片、茎尖等；培养基；植物激素；消毒剂等。

2. 仪器：无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液器、解剖刀、镊子、滤纸等。

四、实验步骤1. 准备实验材料：选取健康的植物茎段、叶片或茎尖，去除杂质，清洗干净。

2. 消毒：将实验材料用70%酒精浸泡30秒，再用无菌水清洗，用消毒剂处理1-2分钟。

3. 切割材料：用解剖刀将消毒后的实验材料切割成适当大小的小块。

5. 培养：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制温度、光照等条件，进行培养。

6. 观察与记录：定期观察植物组织的生长状况，记录实验现象。

五、实验注意事项1. 实验过程中需严格无菌操作，避免污染。

2. 切割材料时要注意刀片的消毒和更换。

3. 培养过程中要定期观察，调整培养条件。

4. 实验结果可能存在差异，要注重数据分析与讨论。

教案编写仅供参考，具体实验操作请根据实际情况进行调整。

祝实验成功！六、实验拓展1. 探索不同植物激素对植物组织培养的影响。

2. 尝试用植物组织培养技术繁殖难生根或珍贵植物。

3. 研究植物组织培养在基因工程中的应用。

七、实验报告要求1. 描述实验材料、仪器和实验步骤。

2. 记录实验现象和结果。

3. 分析实验结果，探讨可能的原因。

4. 提出实验中存在的问题及改进措施。

八、实验评价1. 评价学生对植物组织培养原理的理解。

2. 评价学生对实验操作的熟练程度。

3. 评价学生对实验现象的观察与分析能力。

4. 评价学生在实验过程中的团队合作精神。

植物组织培养实验报告一、实验目的通过植物组织培养的实验，了解植物组织培养的基本原理和操作技术，进一步加深对植物生长发育过程的理解。

二、实验过程1、材料准备：细菌清洁大气箱、琼脂、化学药剂、手套、移液管、离心管、耗材、显微镜等。

2、实验步骤：1）将无性系别品种叶片、幼茎和根部按照不同的方式处理，如用药物浸泡和切成小块备用。

2）选用适合无菌培养的营养基质，如MS培养基、B5培养基、WPM培养基等，加入琼脂并调整pH值至5.8。

3）将处理过的植物组织放入含有培养基的离心管中，并密封后在细菌清洁大气箱内进行培养。

4）观察培养物的生长情况，记录培养物的数量、形态及生长周期等指标，以得出结论。

5）实验完成后，清洗实验器材，消毒措施要做到位，以防止污染环境和传染病菌。

三、实验结果1、不同植物组织的培养结果：对叶片、幼茎和根部不同组织进行组织培养后，叶片的成活率最高，幼茎次之，根部最低，一定比例药物处理的组织培养效果要更好。

2、不同营养基质的培养效果：不同种类的营养基质对于组织培养效果有较大的影响。

在MS培养基中，叶片和幼茎的生长速度较快，根系生长周期更长；在B5培养基中，叶片和幼茎的生成周期较长，根系生长速度更快；在WPM培养基中，叶片和幼茎的生长效果较好，根系生长速度和周期一般。

3、同一营养基质对于不同植物组织的培养效果：同一营养基质对于不同植物组织的生长效果有所差别。

例如在MS培养基中，处理过药物的叶片组织培养效果最优，成活率高，而未处理过的幼茎组织生长速度较快，成活率也较高。

四、实验结论1、植物组织培养技术是一种重要的植物生物技术，可以通过组织培养的方法扩大繁殖种类，为植物栽培和遗传改良提供基础。

2、在植物组织培养中，药物处理和不同营养基质的选取可以影响组织的生长效果，必须根据不同的需要来选择合适的培养方法。

3、在实验操作过程中，要加强对实验器材和环境的消毒措施，以保证实验过程的无菌性，减少实验中的污染和误差，得到更为准确的实验结果。

植物组织培养实验报告
植物组织培养是一种重要的生物技术手段，它可以用来繁殖植物、改良植物品种、研究植物生长发育规律等。

本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作技巧，为进一步的研究和应用提供参考。

首先，我们准备了所需的材料和试剂，包括植物组织培养基、植物激素、无菌
器皿、无菌操作工具等。

然后，我们选择了适合组织培养的植物茎段作为实验材料，进行无菌处理并切割成小段。

接着，将这些茎段置于含有植物激素的培养基中，利用无菌技术将其保存在无菌条件下。

在培养过程中，我们需要注意控制培养基的pH值、温度和光照条件，以及定
期更换培养基，促进植物组织的生长和增殖。

同时，还需要注意观察培养过程中是否有细菌或真菌的污染，及时采取措施消除污染源。

经过一段时间的培养，我们观察到茎段逐渐产生了新的组织，包括愈伤组织、
根系和茎芽等。

这些新生组织可以用来进行植物再生、基因转化等研究，具有重要的应用价值。

通过本次实验，我们初步掌握了植物组织培养的基本原理和操作技巧，对植物
生长发育规律有了更深入的了解。

在今后的研究和实践中，我们将进一步探索植物组织培养的应用前景，为农业生产和生物技术的发展做出贡献。

总之，植物组织培养是一项重要的生物技术，它为植物繁殖、品种改良、基因
转化等研究提供了重要手段。

通过本次实验，我们对植物组织培养有了更深入的认识，相信在未来的研究中能够发挥重要作用。

植物组织培养实验报告实验报告：植物组织培养一、实验目的掌握植物组织培养的实验技术，培养植物组织，研究其生长过程和生理生化特性。

二、实验原理三、实验步骤1.提取组织：从植物器官中提取叶片、茎段等组织。

2.消毒处理：将提取出的组织进行消毒处理，浸泡在含有消毒剂的溶液中，达到杀灭外界微生物的目的。

3.培养基准备：配置适合植物组织培养的培养基，包括基础培养基和添加剂。

4.培养条件：将消毒处理后的组织置于培养基中，放置在恒温恒湿的培养箱中，设置适宜的光照和温度条件。

5.观察记录：观察组织在培养基上的生长情况，记录其形态变化、增殖情况等。

6.提取代表性样本：根据需要，提取生长良好、代表性的样本进行下一步的分析。

四、实验结果经过数天的培养，观察到了组织的形态发生了变化。

最初的组织经过消毒处理后放置在培养基上，经过一段时间的培养，发现组织逐渐增殖。

最初的组织形态变得模糊，开始出现小芽的形成。

随着时间的推移，这些小芽逐渐长大，发展成幼苗，并开始生长根系。

同时，观察到培养基的颜色也发生了变化，由最初的无色逐渐变为淡黄色。

五、实验分析由实验结果可知，植物组织培养可以通过一系列的人工控制，使植物细胞和组织在无菌条件下繁殖和发育。

通过调节培养基的配方、光照和温度等条件，可以控制生长的速度和分化程度。

实验中观察到的小芽和根系的形成表明植物组织在培养基上能够继续分化和增殖，这为后续的植物繁殖和基因改造提供了基础。

六、实验总结本次实验通过植物组织培养的方法，成功地培养出了植物幼苗，并观察到了其生长过程。

通过实验我们了解到了植物组织培养的基本原理和操作技术，并对植物的细胞分化和增殖有了更深入的了解。

植物组织培养作为一种重要的生物技术手段，不仅可以用于植物繁殖和育种，还可以应用于植物基因工程和药物研究等方面。

1.张三，李四，王五.植物组织培养技术的应用[A].植物生长与发育研究进展[C].北京：科学出版社。

2. Liu K，Liu G F.植物组织培养与应用研究进展[J]. 中国园艺科技.八、附录实验操作记录：日期操作内容观察结果XX月XX日提取叶片叶片消毒漂白后变白XX月XX日放置培养基出现小芽的形成.........注意事项：实验过程中需要严格遵守无菌操作规范，保持培养箱的洁净，避免外界微生物的污染。

植物组织培养技术实验指导植物组织培养技术实验指导马铃薯⽣产与加⼯教研室编写⽣化系2013.09⽬录实验实训⼀组培实验室的识别与设计 (3)实验实训⼆组培常⽤设备仪器的使⽤ (4)实验实训三玻璃器⽫及⽤具的洗涤 (6)实验实训四MS培养基母液的配制 (10)实验实训五MS固体培养基的配制与灭菌 (14)实验实训六试管苗的茎段转接（继代培养） (16)实验实训七试管苗叶⽚接种 (18)实验实训⼋茎尖、茎段外植体接种培养 (20)实验实训九外植体叶⽚接种培养 (22)实验实训⼗⽣根培养 (24)实验实训⼗⼀驯化 (25)实验实训⼗⼆微茎尖脱毒培养 (27)实验实训⼗三花器官的培养 (28)实训⼗四胚和种⼦培养 (30)实验实训⼀组培实验室的识别与设计⼀、实训⽬标能够正确识别组培实验室及育苗⼯⼚的基本组成并能叙述其主要功能。

⼆、实训内容通过参观或观看组培实验室和育苗⼯⼚的录像，掌握实验室的基本结构和各区的主要功能。

三、实验器材和试剂准备设计平⾯图所需的铅笔、红蓝记号笔、尺、纸、橡⽪等⽂具⽤品或直接⽤CAD软件进⾏组培实验室和育苗⼯⼚的设计和绘图。

四、实验内容和步骤在教师带领下对组培实验室的各个分区进⾏参观，并讲解其功能或观看录像，然后⾃⼰动⼿设计实验室。

实验实训⼆组培常⽤设备仪器的使⽤⼀、实训⽬标认识植物组织培养必需的仪器、器⽫，掌握⼏种主要设备的使⽤⽅法。

⼆、实训内容植物组织培养必需仪器的使⽤三、实验器材与试剂（⼀）常⽤仪器1.蒸馏⽔器2.⼿提式⾼压消毒锅、⽴式⾼压消毒锅3.天平，包括药物天平、粗天平（1/10）、分析天平（精密度1/10000）4.超净⼯作台5.电热⼲燥箱（烘箱）6.恒温光照培养箱7.电冰箱8.显微镜和解剖镜，包括⼿提式解剖镜、⽴体解剖镜和普通显微镜9.离⼼机（学习、使⽤、操作）（⼆）必要的器⽫、器械1.玻璃器⽫，具体包括试管、三⾓烧瓶（锥形瓶）、培养瓶（罐头瓶）、培养⽫、凹⾯载玻⽚2.盛装器⽫，具体包括试剂瓶、烧杯、计量器⽫、量筒、容量瓶、吸管、移液管3.其他器⽫，具体包括滴瓶、称量瓶、漏⽃、玻璃管、注射器等实验室常⽤器⽫。

名词解释1.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。

2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。

其最大的特征是失去分裂能力。

3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。

其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。

4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。

5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。

6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。

通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。

7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。

8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。

9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。

10.无菌操作：亦称接种。

指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。

由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。

11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。

这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。

实验一植物组织培养实验室的构造和功能一、目的要求：掌握如何组建植物组织培养实验室，熟悉组培中设计的各种仪器设备和器皿用具。

二、仪器与用具超净工作台、空调机、蒸馏水发生器、高压灭菌锅、低温冰箱、普通冰箱、电磁炉、各种电子天平、pH仪器等设备，以及各种试验器皿和器械用具等。

三、方法步骤1.了解组织培养实验室守则以及有关注意事项。

2.掌握仪器设备和器皿用具的名称与用途以及实验室的构造。

3.参观组培实验室的构建情况，包括准备室（化学实验室）、缓冲室、无菌操作室（接种室）和培养室的设计要求，以及内部仪器设备的名称及其作用。

四.实验报告1.将本次实验内容整理成实验报告2.设计一个植物组织培养实验室的组建方案。

实验二 MS培养基母液的配制与保存一、目的要求通过MS培养基母液的配制与保存，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。

二、材料与用具配制MS培养基所需的药品（见附表）。

植物生长调节物质、各类天平、烧杯、容量瓶、蒸馏水、0.1mol/L的NaOH、0.1mol/L的HCl、母液瓶、标签、冰箱等。

三、方法与步骤1.母液的配制(将MS母液配置表画在黑板上，举例讲解母液的配制过程，包括称量、溶解、定容三步，再将班级分为五个组进行配制)2.植物生长调节物质母液的配制①称量：用微量0.001或0.0001的分析天平或由电子天平准确称取生长素（或细胞分裂素）50mg。

②溶解：生长素（如IAA、IBA、NAA、2、4-D）可用少量的0.1mol/LNaOH溶解，细胞分裂素（如KT、ZT、6-BA）可用0.1mol/L的HCl加热溶解。

③定溶：将溶解的植物生长调节物质倒入50ml容量瓶，用水冲洗小烧杯数次，最后加蒸馏水定容至50ml，配制成浓度为1mg/ml的溶液。

3.母液的保存①装瓶：将配好的母液分别倒入瓶中，贴好标签，注明培养基名称、母液号、配制倍数（或浓度）以及配制日期。

②储藏：将母液瓶储放在4℃冰箱内备用。

四、实验报告将本次实验内容整理成实验报告（叙述母液配置过程）。

实验一植物组织培养实验报告一实验目的让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。

二实验原理植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA）的比例，决定了根和芽的分化。

三实验器材（一）试剂乙醇、IAA 或 2 ， 4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ）MS 培养基（二）仪器设备培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等三实验步骤1. 配制培养基（1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。

（2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。

吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。

2. 培养基灭菌将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。

待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌20 min 。

取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。

接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。

《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求：1．通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。

2．通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。

二、材料用具：高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。

三、说明：在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的，总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。

植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。

四、方法和步骤：首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。

此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。

每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。

然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。

带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。

对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1.1个大气压下保持15~20分钟。

植物组织培养实验实验一MS培养基（芽诱导）的配制与茎段培养一、 MS芽诱导培养基的合成（一）、仪器设备电子分析天平（精确称量）、灭菌器（主要为高压灭菌锅）、精密PH试纸、电炉、烧杯（1000ml）；量简（100ml）、移液枪（0.01-1ml）、培养瓶（500ml）、包口塑料及线绳若干，记号笔，培养箱、超净工作台、接种工具。

（二）、试剂（MS）培养基的配制试剂大量元素（母液）；微量元素（母液）铁盐（母液）有机物（母液）琼脂蔗糖激素 IAA BA等；酸碱调解物质 NaOH(0.1N) HCl(0.1N)（三）（MS）培养基的合成(配制1L)1烧杯体积标定------用量简取1000毫升倒入烧杯，用记号笔标出液面位置2化琼脂-----烧杯中加入水约400-600毫升，加琼脂7克，加热溶化3加母液-----大量元素母液50ml，微量元素母液1ml．铁盐母液10m1．有机物母液10ml、4加蔗糖-----30g5加激素（根据培养基的用途，按要求加入本实验中，BA2.0+NAA0.05）6定容---加水至1000刻度线7调PH----5.8(冷却后，用0.1N的NaOH或0.1N的HCl调整Ph至5.8)（四）、培养基的分装将MS培养基的合成搅拌均匀后、分装到三角瓶中，每瓶约30m1．用一层聚丙烯塑料薄膜包上瓶口，用线绳扎口、写上标号（五）培养基灭菌按灭面器使用力法对培养基灭菌、高压保持20分钟，灭菌完毕后取出培养基，放在平台上冷凝。

（六）培养基灭菌后，原则上2~3天后使用（七）母液在不取用时，存放在4℃冰箱中；复习思考题：(1)能不能把所有母液置于一个瓶里当作—种母液用于配制？(2)分析导致固体培养基冷却后不能凝固的原因?(3)为什么新配制的培养基不能即时使用？实验总结：二、茎段的组织培养（一）仪器超净工作台、酒精灯、酒精棉球，酒精消毒瓶、铅笔、火柴、接种工具等：（二）材料新采集的幼嫩的植物（菊花）枝条（三）试剂MS+BA2.0+NAA0.05（诱导培养基）、70%酒精，0.1%升汞消毒液；（四）操作用序（]）材料的制备将菊花的枝条剪成5~6cm长的茎段，用自来水流水冲洗，移到超净工作台上，用70%的酒精浸泡半分钟，再用0.1%的升汞溶液浸泡6分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3~5遍，放在装有无菌纸的培养皿内，水分吸干后在进行接种；(2)接种将枝条原切口处剪掉、露出新切口、然后剪成带一个叶片的茎段插入培养基瓶中，每个三角瓶接种1~2段。