化妆品微生物挑战试验

微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。

细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。

霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。

实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。

细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。

4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。

称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。

然后充分混匀, 置于28℃下。

在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。

按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。

此实验用以评判防腐剂的有效与否。

评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。

符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。

微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。

细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。

霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。

实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。

细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。

4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。

称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。

然后充分混匀, 置于28℃下。

在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。

按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。

此实验用以评判防腐剂的有效与否。

评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。

符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。

化妆品原料微生物检验标准一、细菌总数1.目的：评估化妆品原料的细菌污染程度，反映化妆品生产过程中的卫生状况。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行细菌总数的测定。

3.判定标准：细菌总数小于或等于1000 CFU/g（CFU/ml）为合格，超过此标准为不合格。

二、霉菌和酵母菌总数1.目的：评估化妆品原料的霉菌和酵母菌污染程度，反映原料的卫生状况。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行霉菌和酵母菌总数的测定。

3.判定标准：霉菌和酵母菌总数小于或等于100 CFU/g（CFU/ml）为合格，超过此标准为不合格。

三、耐热大肠菌群1.目的：检测化妆品原料中是否存在耐热大肠菌群，反映原料的卫生状况。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行耐热大肠菌群的测定。

3.判定标准：未检出耐热大肠菌群为合格，检出耐热大肠菌群为不合格。

四、金黄色葡萄球菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在金黄色葡萄球菌，预防感染性疾病的发生。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行金黄色葡萄球菌的测定。

3.判定标准：未检出金黄色葡萄球菌为合格，检出金黄色葡萄球菌为不合格。

五、铜绿假单胞菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在铜绿假单胞菌，预防感染性疾病的发生。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行铜绿假单胞菌的测定。

3.判定标准：未检出铜绿假单胞菌为合格，检出铜绿假单胞菌为不合格。

六、沙门氏菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在沙门氏菌，预防感染性疾病的发生。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行沙门氏菌的测定。

3.判定标准：未检出沙门氏菌为合格，检出沙门氏菌为不合格。

七、志贺氏菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在志贺氏菌，预防感染性疾病的发生。

2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行志贺氏菌的测定。

3.判定标准：未检出志贺氏菌为合格，检出志贺氏菌为不合格。

八、大肠埃希氏菌O157:H71.目的：检测化妆品原料中是否存在大肠埃希氏菌O157:H7，预防感染性疾病的发生。

防腐挑战性实验规程一、目的本方法及标准摘自欧盟标准BP2002 XVIC EFFICAIY OF ANTIMICROBIAL PRESERVATION,测定化妆品抵抗微生物的能力。

二、材料及工具1.待检样品600g（实际操作中常用300g以节约样品）；2.电子秤1台、不锈钢勺子、200ml烧杯、10ml试管、150ml三角烧瓶、酒精灯1盏、1ml移液枪（100～1000μL）、1ml移液枪枪尖、灭菌培养皿、0.85%灭菌生理盐水；3.适量普通营养琼脂培养基、虎红培养基；4.金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠艾希氏菌、黑曲霉、白色念珠霉菌的菌种各1支，其菌种传代次数<5代。

三、步骤1.标准悬液的配制1%硫酸9.9ml与1%氯化钡0.1ml，混合后配制成的悬液浓度为3×108cfu/ml，此悬液再做3倍稀释。

2.细菌菌悬液的配制将已培养好的活性菌种，用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀。

用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释，浊度和标准悬液的浊度（3×108cfu/ml）相同为止；此时的稀释菌液再做3倍稀释，即为所需的1×108cfu/ml的菌悬液，做细菌总数确定细菌数。

3.霉菌菌悬液的配制将已培养好的活性菌种，用灭菌的生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀；用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作依次的10倍稀释，每次的稀释用血球计数板计数，必须5个中格的霉菌总数在190～210，落在此范围内的菌悬液为我们所需的1×108cfu/ml的霉菌菌悬液，做霉菌总数确定霉菌数。

4.分别称取待测样品100g，倒入5个烧杯中，分别标记大、金、绿、黑、白及日期。

5.分别在5个烧杯中，对应加入1ml浓度为1×107～1×108cfu/ml的细菌菌悬液及霉菌菌悬液，用干净的无菌勺子搅拌均匀后盖上保鲜膜，细菌在32.5±2.5℃的培养箱中培养，霉菌在22.5±2.5℃的培养箱中培养。

化妆品防腐挑战评价标准
化妆品防腐挑战评价标准主要涉及以下几个方面：
1. 防腐效能试验：这是评价化妆品防腐性能的关键环节。

通过在化妆品样品中加入微生物（如细菌、酵母和霉菌等），观察防腐剂对微生物的生长和繁殖的抑制效果。

常用的方法有一次加菌法和多次加菌法等。

2. 挑战性试验：这是模拟化妆品在生产、储存和使用过程中可能遇到的微生物污染情况。

通过在样品中加入定量已知菌种，定期检测微生物的数量变化，以评估防腐剂的防腐效果。

3. 评价标准：化妆品防腐挑战评价标准通常包括微生物数量、防腐剂浓度、试验周期等指标。

例如，在挑战性试验中，如果样品在特定时间内（如第7天、第14天和第28天）的微生物数量均控制在一定范围内，说明防腐剂的防腐效果较好。

4. 参考国际标准：在评价化妆品防腐挑战时，可以参考国际通用的标准和方法，如欧盟和美国的相关法规和指南。

同时，对于防腐体系相同且配方近似的产品，可以参考已有的实验数据和资料进行评价。

5. 实验周期：化妆品防腐挑战试验的周期通常至少为33天，以确保在试验过程中充分评估防腐剂的性能。

化妆品防腐挑战评价标准主要关注防腐效能试验、挑战性试验、评价指标、国际标准和实验周期等方面，以确保化妆品在生产、储存和使用过程中具备可靠的防腐性能。

化妆品中的微生物检测技术的研究现代社会，化妆品成为女性生活中必不可少的一部分。

然而，随着化妆品使用者不断增加，对化妆品质量和安全性的需求也越来越高。

其中，微生物检测技术在化妆品质量控制中起着重要的作用。

本文将探讨化妆品中的微生物检测技术的研究进展，并展望其在未来的应用前景。

一、化妆品中微生物检测技术的重要性化妆品作为直接接触皮肤的产品，其安全性和卫生品质至关重要。

因此，对化妆品中微生物的检测是不可或缺的。

微生物可引起多种问题，如过敏反应、感染和其他皮肤疾病。

通过微生物检测，可以及时发现和消灭潜在的污染源，确保用户安全使用化妆品。

二、化妆品中微生物检测技术的研究现状当前，化妆品中微生物检测技术已有多种方法。

常用的方法包括传统培养方法、分子生物学方法和基于纳米技术的检测方法。

1. 传统培养方法传统培养方法是最早应用于微生物检测的技术之一。

通过将化妆品样品分别接种于不同培养基上，培养一段时间后观察菌落的形成情况，并进一步鉴定细菌和真菌的种类。

该方法简单易行，但需要较长时间，且无法检测不易培养的微生物。

2. 分子生物学方法分子生物学方法通过检测微生物的DNA或RNA，能够快速准确地进行微生物鉴定。

其中，聚合酶链反应（PCR）和荧光原位杂交（FISH）是常见的分子生物学方法。

这些方法操作简便，灵敏度和特异性高，但需要一定的实验设备和技术。

3. 基于纳米技术的检测方法基于纳米技术的检测方法可以实现对微生物的实时检测。

纳米传感器可以通过检测微生物释放的挥发性有机物或特定分子来识别微生物的存在。

这种方法具有高效、高灵敏度的优势，但目前仍处于研究阶段。

三、化妆品中微生物检测技术的未来展望随着科学技术的不断发展，化妆品中微生物检测技术也在不断更新和完善。

未来，该领域可能出现以下趋势和应用：1. 提高检测速度和精确度目前微生物检测技术中的一大挑战是提高检测速度和精确度。

随着新技术的应用，如基于纳米技术的检测方法，预计未来的技术将更加高效和准确。

化妆品防腐效能评价方法操作指南化妆品防腐效能评价比较常用的方法是微生物挑战性实验。

其基本原理是：将一定量的微生物加入到化妆品中，每隔一定时间检测微生物增减的数量，以此来判断防腐剂的防腐效能。

通过该方法既可以评价防腐剂的效能，又能在安全剂量内确定化妆品使用的防腐剂的最低浓度。

微生物挑战性实验可采用单一培养或混合培养方式。

单一培养即分别接种每种实验菌株的菌悬液于测试化妆品中，在接种后的一定时间内对化妆品进行平板计数（APC），以此判断防腐剂的防腐效能。

混合培养为将几种细菌或真菌的混合液接种于化妆品中，在接种后一定时间内，测定化妆品的APC，以此判断防腐效能。

可根据实际情况选择培养方式挑战性实验测试菌株的选用原则为：尽量覆盖革兰氏阳性、阴性细菌，酵母菌和霉菌至少各一种，并且对各防腐剂抵抗性较高，能代表化妆品中可能污染的微生物对防腐剂的抵抗性的菌株。

可根据化妆品的性质，生产、使用环境等增加菌株。

一般较常用的菌株为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉等。

检测时间：一般为在样品中加入微生物时，以及第1、7、14、21、28天检测化妆品中的菌落数。

判定标准：推荐采用《欧洲药典》的结果评定标准，即细菌于第7天时菌落总数下降99.9%，至第28天时无增长；真菌于第14天下降99.0%，至28天时无增长，判断为防腐效果良好。

对于能够保证化妆品产品微生物质量合格，且在使用过程中不存在二次污染的化妆品可以不进行微生物挑战性实验。

化妆品防腐效能评价方法1.定义微生物挑战性实验：将一定量的微生物加入到化妆品中，每隔一定时间检测微生物增减的数量，以此来判断防腐剂的防腐效能的实验方法。

2仪器设备2.1 生物安全柜2.2 高压蒸汽灭菌器2.3 冰箱2.4 恒温培养箱2.5 均质器2.6 旋涡振荡器2.7天平2.8 灭菌培养皿2.9 灭菌试管2.10灭菌刻度吸管2.11 灭菌试剂瓶2.12 玻璃珠3.试剂和培养基3.1 生理盐水3.2 含0.05%吐温80的生理盐水3.3 改良的LETHEEN 肉汤3.4水解大豆琼脂培养基（TSA培养基）3.5马铃薯葡萄糖培养基（PDA）3.6萨布罗右旋糖琼脂培养基(SDA)4.实验菌株4.1细菌：金黄色葡萄球菌A TCC6538，大肠杆菌A TCC8739，铜绿色假单胞菌ATCC9027。

1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1 化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2 微生物挑战性实验4. 2. 1 受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。

细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。

霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。

实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于 37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。

细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108 个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。

4. 2. 2 一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。

称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。

然后充分混匀, 置于28℃下。

在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g 企业名称杭州国光旅游用品有限公司 Hangzhou Guoguang Touring Commodity Co.,Ltd. 文件编号 SSOP-04 版本/修改号 1.0 文件名称微生物挑战性试验操作规范 Standard Operation Procedure for Hygiene Standard 生效日期 2010/7/1 页 次 第1页 共6页 编写 审核 批 准样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。

1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。

细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。

霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。

实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。

细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108 个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。

4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。

称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。

然后充分混匀, 置于28℃下。

在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。

按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。

此实验用以评判防腐剂的有效与否。

评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。

符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。

1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1 化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2 微生物挑战性实验4. 2. 1 受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。

细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。

霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。

实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于 37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。

细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108 个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。

4. 2. 2 一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。

称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。

然后充分混匀, 置于28℃下。

在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g 企业名称杭州国光旅游用品有限公司 Hangzhou Guoguang Touring Commodity Co.,Ltd. 文件编号 SSOP-04 版本/修改号 1.0 文件名称微生物挑战性试验操作规范 Standard Operation Procedure for Hygiene Standard 生效日期 2010/7/1 页 次 第1页 共6页 编写 审核 批 准样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。

目地新产品防腐效果地测试范围公司新产品参考：材料与方法. 化妆品中常用地防腐体系[ ]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等. 微生物挑战性实验. . 受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供.细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌.霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉. b5E2R 。

实验前，将各菌种接种于合适地培养基中, 于 ℃( 细菌) 或℃( 霉菌) 下培养.细菌培养在天后, 霉菌培养在 天后，挑选适量菌落于灭菌地生理盐水中，制成一定浓度地混合细菌( × 个) 或混合霉菌悬液( ×个 ) , 置于℃贮放备用.p1Ean 。

. . 一次加菌地 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果地方法.称取各受试样品, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为×个细菌和 ×个霉菌.然后充分混匀, 置于℃下.在接菌地、、、 和天取样分析: 准确称取样品, 加到含有玻璃小珠地灭菌锥形瓶内, 加入灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为∶稀释液；然后再用灭菌企业名称杭州国光旅游用品有限公司 . 文件编号 版本修改号 文件名称微生物挑战性试验操作规范 生效日期 页 次 第1页 共页 编写 审核 批 准生理盐水按倍依次稀释.按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是℃下～，霉菌培养为℃下～天.此实验用以评判防腐剂地有效与否.评判标准为: 当每克样品中一次接菌( ×细菌和×霉菌) 后, 在第天存活菌量减少至不高于起始浓度地. , 以后逐渐减少, 在天为 .符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试).DXDiT。

分析与检测. . 重复次加菌地微生物挑战试验此方法参照国际（国际化妆品、香精和洗涤剂协会）推荐地微生物挑战性试验.称取受试样品 , 每隔周加菌一次( 即实验地第、和周) , 每次加细菌量为×～×个样品和霉菌×个～×个样品.在加菌后地天、天和天( 后一次加菌前) 采样分析样品中含菌量, 方法同前.此方法可将受检样品分为三类:RTCrp。

化妆品微生物检验方法化妆品微生物检验方法是保证化妆品质量和安全性的重要环节之一、微生物检验旨在检测化妆品中是否存在致病或有害微生物，并评估其对人体的危害程度。

常用的化妆品微生物检验方法包括总生菌数、霉菌与酵母菌数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌等指标的检测。

首先，样品的制备过程中需要选择适当的培养基和增菌条件。

通常将适量的化妆品样品加入到无菌的苗条瓶或小瓶中，加入适量的培养基并混匀。

对于含有高浓度防腐剂或抗菌剂的化妆品样品，还需要将样品进行稀释以降低防腐剂的作用。

然后，将样品进行摇匀或振荡，以保证样品的均匀分布。

接下来，进行微生物的富集。

一般来说，化妆品样品中的微生物数量较少，因此需要对样品进行富集处理以增加微生物的检出率。

常用的富集方法包括摇床富集法、过滤富集法、以及使用适当的抑菌剂来抑制防腐剂对微生物的影响。

然后，进行微生物的分离。

富集样品后，将样品取一定量均匀涂布在适当的培养基上，并进行培养。

通过分离纯菌的方式，可以获得单一的微生物菌株，从而进行后续的鉴定和计数。

最后，进行微生物菌株的鉴定和计数。

常用的鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、API试纸和分子生物学方法等。

形态学观察是最常用的方法，通过观察菌落的颜色、形状、大小、质地和透明度等特征来初步鉴定细菌的种属。

生理生化特性检测则是通过检测菌落的气味、产酶和耐受性等特征来进一步鉴定菌株。

API试纸是一种常用的微生物鉴定试剂，可以根据菌株对不同化学物质的反应来判断其种属。

分子生物学方法可以根据菌株的基因序列进行鉴定，如16SrRNA基因测序等。

微生物计数则可以通过在适当的培养基上进行菌落计数或数量化培养等方法进行。

综上所述，化妆品微生物检验方法是确保化妆品安全性和质量的重要环节。

通过适当的样品制备、微生物富集、分离和鉴定等步骤，可以准确评估化妆品中的微生物负荷，从而为化妆品行业的发展提供保障。

一种新的化妆品微生物挑战实验方法
范新雨;张太军;程双印;洪胜保;周生
【期刊名称】《香料香精化妆品》
【年(卷),期】2007(000)001
【摘要】针对 USP等法选用单个菌种进行激发实验,工作量大而繁琐、检测费用高、未考虑实际生产环境微生物污染等不足,提出了一套适合国内化妆品企业研发、生产控制的微生物挑战实验方法--混合标准菌和环境菌激发实验方法,并与USP法进行实验比较.结果表明:采用该方法,比USP法更切合实际,既能保证检测结果的客
观性、准确性,又能减少工作量降低检测费用,可作为化妆品企业进行化妆品防腐体
系功效性评价的参考方法.
【总页数】4页(P13-16)
【作者】范新雨;张太军;程双印;洪胜保;周生
【作者单位】广东名臣化妆品有限公司技术开发部,广东汕头,515834;广东名臣化
妆品有限公司技术开发部,广东汕头,515834;广东名臣化妆品有限公司技术开发部,
广东汕头,515834;广东名臣化妆品有限公司品质管理部,广东汕头,515834;广东名
臣化妆品有限公司品质管理部,广东汕头,515834
【正文语种】中文
【中图分类】TQ65
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1.过氧化氢挑战实验：一种新的近似实时检测啤酒风味稳定性的方法 [J], 李勇强（摘译）
2.化妆品微生物挑战试验 [J], 刘树葆;臧跃;杨桂菊
3.用微生物挑战性试验考察一种新型复合防腐剂在化妆品中的防腐效果 [J], 王珊珊;孔秋婵;冯小玲;龚盛昭
4.化妆品微生物挑战性实验的优化 [J], 张太军;陈朝茂;刘迪;李涛;文衍麒
5.用微生物挑战性试验考察化妆品防腐剂效果 [J], 牛振东;江志杰;张光华;孙伟;高春
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