吉大2020年9月课程考试《生物制药学》离线作业考核试题及答案
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吉大20春学期《生物制药学》在线作业二-0003
试卷总分:100 得分:100
一、单选题(共15 道试题,共60 分)
1.我国已批准上市的基因工程药物和疫苗中适应症为类风湿的是()
A.γ-干扰素
B.红细胞生成素
C.重组链激酶
D.碱性成纤维细胞
答案:A
2.l-DNA 体外包装的上下限是天然l-DNA 长度的()
A.25 - 50 %
B.50 - 100 %
C.75 - 100 %
D.75 - 105 %
答案:D
3.下列膜分离技术不是以压力差为推动力的是()
A.微滤
B.渗析
C.超滤
D.反渗透
答案:B
4.关于非水相介质中的酶反应的表述,错误的是()
A.有利于疏水性底物的反应
B.可控制底物专一性
C.可防止由水引起的副反应
D.反应体系中不需要任何含量水分的存在
答案:D
5.不属于碳源的是()
A.甘油
B.乳糖
C.甘露糖
D.蛋白胨
答案:D
6.下列哪个体系属于高聚物/高聚物体系?()
A.聚乙二醇/葡聚糖
B.聚乙二醇/磷酸钾
C.硫酸葡聚糖钠盐/甲基纤维素
D.羧甲基葡聚糖钠盐/羧甲基纤维素钠盐
答案:A。
2019-2020学年第二学期期末考试《生物药剂与药物动力学》大作业作业要求:大作业要求学生手写完成,提供手写文档的清晰扫描图片,并将图片添加到word文档内,最终wod文档上传平台,不允许学生提交其他格式文件(如JPG,RAR等非word文档格式),如有雷同、抄袭成绩按不及格处理。
一名词解释题 (共10题,总分值30分 )1. 生物利用度(3 分)生物利用度是指制剂中药物被吸收进入人体循环的速度与程度。
生物利用度是反映所给药物进入人体循环的药量比例,它描述口服药物由胃肠道吸收,及经过肝脏而到达体循环血液中的药量占口服剂量的百分比。
2. 统计学模型(3 分)指以概率论为基础,采用数学统计方法建立的模型。
3. 肾清除率(3 分)单位时间内肾血浆中某物质的浓度与尿中该物质浓度的比值4. 膜脂(3 分)是指包围在细胞表面的一层极薄的膜,主要由膜脂和膜蛋白所组成。
质膜的基本作用是维护细胞内微环境的相对稳定,并参与同外界环境进行物质交换、能量和信息传递。
5. 药物治疗指数(3 分)等于半数致死量与半数有效量之比,用来估计药物的安全性,此数值越大越好。
6. 吸收(3 分)食物经过消化后,通过消化道粘膜,进入血液和淋巴循环的过程,称为吸收7. 消除(3 分)消除是指药物的生物转化和排泄的总称。
8. 二阶矩(3 分)二阶矩是随机变量平方的期望,以此可以类推高阶的矩9. 蓄积(3 分)有机体长期接触某污染物质,若吸收超过排泄及其代谢转化,则会出现污染物质在体内逐增的现象,称为生物蓄积。
10. 剂型因素(3 分)药物剂型因素和药效之间的关系,这里所指的剂型不仅是指片剂、注射剂、软膏剂等剂型概念,还包括跟剂型有关的各种因素,如药物的理化性质(粒径、晶型、溶解度、溶解速度、化学稳定性等)、制剂处方(原料、辅料、附加剂的性质及用量)、制备工艺(操作条件)以及处方中药物配伍及体内相互作用等。
二计算题 (共2题,总分值30分 )11. 某患者以每小时150mg的速度静脉滴注利多卡因,已知:t1/2=1.9h,V=100 L,问C ss是多少?滴注经历10 h血药浓度是多少?若要使稳态血药浓度达到3μg/ml,静脉滴注速度应为多少? (15 分)12. 某药口服吸收后在体内呈一室分布,其血药浓度如下表和下图所示,试求该药的有关动力学参数。
生物制药考试试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 生物制药中常用的基因工程菌是()。
A. 大肠杆菌B. 酵母菌C. 乳酸菌D. 枯草杆菌答案:A2. 以下哪种技术不属于基因工程技术范畴()。
A. DNA重组技术B. 细胞融合技术C. 基因克隆技术D. 微生物发酵技术答案:D3. 以下哪种药物是通过基因工程技术生产的()。
A. 胰岛素B. 阿司匹林C. 吗啡D. 维生素C答案:A4. 生物制药中常用的动物细胞培养技术是()。
A. 悬浮培养B. 贴壁培养C. 微囊培养D. 以上都是答案:D5. 以下哪种细胞器是蛋白质合成的主要场所()。
A. 线粒体B. 核糖体C. 高尔基体D. 内质网答案:B6. 以下哪种技术不属于蛋白质工程技术()。
A. 蛋白质定点突变B. 蛋白质重组C. 蛋白质修饰D. 基因克隆答案:D7. 生物制药中常用的动物细胞是()。
A. 肌肉细胞B. 神经细胞C. 脂肪细胞D. 杂交瘤细胞答案:D8. 以下哪种方法不是生物制药中常用的分离纯化技术()。
A. 离心B. 过滤C. 沉淀D. 蒸馏答案:D9. 以下哪种药物是通过细胞工程技术生产的()。
A. 干扰素B. 抗生素C. 激素答案:A10. 以下哪种技术是用于检测蛋白质表达量的()。
A. Western blotB. PCRC. ELISAD. DNA测序答案:A二、多项选择题(每题3分,共15分)11. 生物制药中常用的基因工程菌包括()。
A. 大肠杆菌B. 酿酒酵母C. 枯草杆菌答案:A, B, C, D12. 以下哪些是生物制药中常用的动物细胞培养基()。
A. DMEMB. RPMI 1640C. 胎牛血清D. 胰酶答案:A, B, C13. 以下哪些是生物制药中常用的分离纯化技术()。
A. 层析技术B. 电泳技术C. 超滤技术D. 离心技术答案:A, B, C, D14. 以下哪些是生物制药中常用的检测技术()。
(单选题)1: 影响药物分布的因素不包括
A: 体内循环的影响
B: 血管透过性的影
C: 药物与血浆蛋白结合力的影响
D: 药物与组织亲和力的影响
E: 药物制备工艺的影响
正确答案: E
(单选题)2: 生物体内进行药物代谢的最主要的部位是()。
A: 血液
B: 肾脏
C: 肝脏
D: 唾液
正确答案: C
(单选题)3: 生物药剂学的吸收、分布和排泄的过程没有药物分子结构的改变,被称为()A: 体内过程
B: 转运
C: 转化
D: 处置
正确答案: B
(单选题)4: 生物体内进行药物代谢的主要酶系是()
A: 肝微粒体代谢酶
B: 乙酰胆碱酯酶
C: 琥珀胆碱酯酶
D: 单胺氧化酶
正确答案: A
(单选题)5: 溶出度的测定方法中错误的是
A: 溶剂需经脱气处理
B: 加热使溶剂温度保持在37℃±0.5℃
C: 调整转速使其稳定。
D: 开始计时,至45min时,在规定取样点吸取溶液适量,
E: 经不大于1.0μm微孔滤膜滤过,
正确答案: E
(单选题)6: 药物的排泄途径有()
A: 肾
B: 胆汁
C: 唾液
D: 以上都有可能
正确答案: D。
【奥鹏】-[吉林大学]吉大20春学期《生物制药学》在线作业二试卷总分:100 得分:100第1题,超滤膜截留的主要是()A、悬浮物颗粒B、一价离子C、胶体和生物大分子D、溶质正确答案:C第2题,下列不属于酶类的是()A、链激酶B、葡激酶C、心钠素D、组织型纤维蛋白溶酶原激活剂正确答案:C第3题,促红细胞生长素( EPO )基因能在大肠杆菌中表达,但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素,这是因为()A、人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定B、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活C、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感D、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化正确答案:D第4题,T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起,其底物的关键基团是()A、2' -OH 和 5' -PB、2' -OH 和 3' -PC、3' -OH 和 2' -PD、3' -OH 和 5' -P正确答案:D第5题,下列哪种物质可以用作固定化酶交联的试剂?()A、乙醇B、乙酸C、戊二醛D、乙酸乙酯正确答案:C第6题,某一重组质粒(7.5 kb)的载体部分有2个SmaI酶切位点。
用SmaI酶切后凝胶电泳上出现4条长度不同的条带,其长度总和与已知数据吻合,该重组质粒中插入的外源DNA 片段上的SmaI酶切位点共有()A、5 个B、4 个C、3 个D、2 个正确答案:D第7题,下列四个 DNA 片段中含有回文结构的是()A、GAAACTGCTTTGACB、GAAACTGGAAACTGC、GAAACTGGTCAAAGD、GAAACTGCAGTTTC正确答案:D第8题,l-DNA 体外包装的上下限是天然l-DNA 长度的()A、25 - 50 %B、50 - 100 %C、75 - 100 %D、75 - 105 %正确答案:D第9题,下列哪种物质对头孢菌素C的生物合成具有诱导作用?()A、缬氨酸B、苯乙酸C、苯乙酰胺D、L-甲硫氨酸正确答案:D第10题,分子杂交的化学原理是形成()A、离子键B、疏水键C、配位键D、氢键正确答案:D第11题,鸟枪法克隆目的基因的战略适用于()A、原核细菌B、酵母菌C、丝状真菌D、植物正确答案:A第12题,下列膜分离技术不是以压力差为推动力的是()A、微滤B、渗析C、超滤D、反渗透正确答案:B第13题,cDNA法获得目的基因的优点是()A、成功率高B、不含内含子C、操作简便D、表达产物可以分泌正确答案:B第14题,我国已批准上市的基因工程药物和疫苗中适应症为类风湿的是()A、γ-干扰素B、红细胞生成素C、重组链激酶D、碱性成纤维细胞正确答案:A第15题,下列哪种试剂是用于去除发酵液中的Fe2+?()A、草酸B、三聚磷酸钠C、黄血盐D、海藻酸钠正确答案:C第16题,表达用的酵母宿主菌株应具备哪些要求()A、菌体生长力强B、菌体内源蛋白酶要弱C、菌株性能稳定D、分泌能力强正确答案:A,B,C,D第17题,基因工程药物按生理功能和用途可以分为哪几类?()A、治疗药物B、预防药物C、检验药物D、诊断药物正确答案:A,B,D第18题,若某质粒带有 lacZ 标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入()A、葡萄糖B、蔗糖C、5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)D、异丙基巯基-b-半乳糖苷(IPTG)正确答案:C,D第19题,线粒体的超微结构上可分为()A、外膜B、内膜C、膜间隙D、基质正确答案:A,B,C,D第20题,基因工程菌的培养方式()A、补料分批培养B、连续培养C、透析培养D、固定化培养正确答案:A,B,C,D第21题,在医药和食品工业中多采用聚丙烯酸类阴离子絮凝剂作为絮凝剂。
1.论述马斯洛需要层次理论的主要观点及评价。
答案:马斯洛的动机需要层次论认为动机归纳为五大类,即生理的需要、安全的需要、归属与爱的需要、尊重的需要和自我实现的需要。
生理的需要是人类生存的最基本、最原始的本能需要。
安全的需要是生理需要的延伸,在生理需要得到满足后就产生安全需要。
归属与爱的需要是指感情与归属上的需要,体现了人有明确的社要是引发动机的内在条件,诱因是引发动机的外在条件。
2.论述赫茨伯格的双因素理论内容以及对双因素理论的借鉴。
答案:1)影响人的工作动机的种种因素分为两类,能够使员工感到满意的因素叫激励因素,会使员工感到不满意的因素称为保健因素。
2)激励因素包括成就感、得到认可、工作本身的挑战性和趣味性、责任感、个人的成长与发展﹔没有激励因素会让员工没有满意﹔有激励因素会让员工满意。
满意的对立面是没有满意。
3)保健因素大多属于工作之外的因素,包括公司的政策、监督、人事关系、工作条件、薪金等。
有保健因素会让员工没有不满意,没有保健因素会让员工不满意。
不满意的对立面是没有不满意。
4)激励因素是以人对工作本身的要求为核心的,只有激励因素的满足,才能激发起人的积极性。
5)双因素理论就针对员工需要来激励员工进行了更深入的分析,提出要调动和保持员工的积极性,必须首先具备必要的保健因素,防止员工不满情绪的产生,更要针对激励因素,努力创造条件,使员工在激励因素方面得到满足。
3.组织行为(名词解释)答案:是指组织的个体、群体或组织本身从组织的角度出发,对内源性或外源性的刺激所作出的反应。
4.首因效应(名词解释)答案:由美国心理学家洛钦斯首先提出的,也叫首次效应、优先效应或第一印象效应,指交往双方形成的第一次印象对今后交往关系的影响,也即是“先入为主”带来的效果。
5.需要(名词解释)答案:是指人体组织系统中的一种缺乏、不平衡的状态。
6.群体(名词解释)答案:群体与个体相对,是个体的共同体。
不同个体按某种特征结合在一起,进行共同活动、相互交往,就形成了群体。
2020吉大网络教育生物制药学题目解答(说明:前面是题目,后面几页是解答部分)一论述题1. 发酵工程内容主要包括哪些方面?2. 酶的固定化过程中使用的载体需符合如下条件。
3. 发酵过程的溶氧浓度的控制。
4. 利用微生物生产酶制剂的优点。
二名词解释题5. 酶工程:6. 固定化酶:7. 发酵工程:8. 补料分批培养9. 生物技术药物:10. 生物反应器:11. 互补决定区:12. 抗体可变区:13. 酶化学修饰:14. 单链抗体:三简答题15. 简述菌种选育方法。
16. 简述真核基因在大肠杆菌中的表达形式。
17. 简述诱变育种的诱变机制。
18. 简述决定发酵工业的生产水平的三个要素。
19. 用于药物生产的动物细胞包括哪几类?以下为解答答案:一论述题1. 答案:菌种的培养和选育、菌的代谢与调节、培养基灭菌、通气搅拌、溶氧、发酵条件的优化、发酵过程各种参数与动力学、发酵反应器的设计和自动控制、产品的分离纯化和精制等。
2. 答案:(1)固定化过程中不引起酶变性;(2)对酸碱有一定的耐受性;(3)有一定的机械强度;(4)有—定的亲水性及良好的稳定性;(5)有一定的疏松网状结构,颗粒均匀;(6)共价结合时具有可活化基团;(7)有耐受酶和微生物细胞的能力;(8)廉价易得。
3. 答案:在发酵过程中,在已有设备和正常发酵条件下,每种产物发酵的溶氧浓度变化有其规律。
从发酵液中的溶解氧浓度的变化,就可以了解微生物生长代谢是否正常,工艺控制是否合理,发酵液的溶氧浓度是由供氧和需氧两方面决定的。
在供养方面,主要是设法提高氧传递的饿推动力和液面体积氧传递系数的值。
采取适当的措施来提高溶氧浓度,如调节搅拌转速或通气速率来控制供氧。
发酵液的需氧量受菌体浓度、基质的种类和浓度以及培养条件等因素的影响。
以菌体浓度的影响最为明显。
发酵液的摄氧率随菌体浓度增加而按一定比例增加,但氧的传递速率是随菌浓的对数关系减少。
因此可以控制菌的比生长速率比临界值略高的水平,达到最适浓度。
生物制药培训试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 生物制药中常用的细胞培养基通常包含以下哪些成分?A. 氨基酸B. 维生素C. 无机盐D. 所有以上选项答案:D2. 以下哪种技术不是生物制药中常用的基因工程技术?A. DNA重组技术B. 基因克隆技术C. 基因编辑技术D. 纳米技术答案:D3. 在生物制药中,以下哪种细胞类型不适合用于生产重组蛋白?A. 细菌细胞B. 酵母细胞C. 植物细胞D. 人类红细胞答案:D4. 生物制药中,下列哪种动物细胞培养技术是用于生产重组蛋白的?A. 悬浮培养B. 贴壁培养C. 微载体培养D. 所有以上选项答案:D5. 以下哪种生物反应器不适合用于大规模生物制药生产?A. 搅拌罐式生物反应器B. 气升式生物反应器C. 固定床生物反应器D. 微型生物反应器答案:D6. 在生物制药过程中,以下哪种因素不会影响细胞生长和蛋白表达?A. 温度B. pH值C. 氧气供应D. 重力答案:D7. 以下哪种方法不是用于纯化生物制药产品的?A. 色谱法B. 离心法C. 透析法D. 核磁共振答案:D8. 在生物制药中,以下哪种检测方法不适用于蛋白质定量分析?A. 紫外光谱法B. 布拉德福德法C. 考马斯亮蓝法D. 酶联免疫吸附测定(ELISA)答案:A9. 以下哪种病毒载体不适用于基因治疗?A. 腺病毒B. 慢病毒C. 逆转录病毒D. 流感病毒答案:D10. 在生物制药中,以下哪种技术不涉及蛋白质的修饰?A. 糖基化B. 磷酸化C. 甲基化D. 蛋白质折叠答案:D二、多项选择题(每题3分,共15分)11. 生物制药中,以下哪些因素会影响细胞培养的效率?A. 培养基的组成C. 细胞接种密度D. 培养容器的材质答案:A、B、C、D12. 在生物制药中,以下哪些步骤涉及到基因的克隆和表达?A. 目标基因的扩增B. 载体的构建C. 目标基因的转染D. 目标蛋白的纯化答案:A、B、C13. 生物制药中,以下哪些因素会影响蛋白质的稳定性?A. 蛋白质的氨基酸序列B. 蛋白质的三维结构C. 蛋白质的修饰状态答案:A、B、C、D14. 在生物制药中,以下哪些方法可以用于蛋白质的定量分析?A. 紫外光谱法B. 布拉德福德法C. 考马斯亮蓝法D. 酶联免疫吸附测定(ELISA)答案:B、C、D15. 在生物制药中,以下哪些技术可以用于蛋白质的纯化?A. 色谱法B. 离心法C. 透析法D. 电泳法答案:A、B、C、D三、判断题(每题2分,共20分)16. 生物制药中的细胞培养基必须包含血清。
一、论述题(共4道小题,共40分)
1.发酵工程内容主要包括哪些方面?
发酵工程是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。
发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯(生物分离工程)等方面。
2.发酵过程的溶氧浓度的控制。
(1)供氧方面:提高氧气溶解的推动力;
(2)需氧方面:控制最适菌体浓度,使需要的溶解氧量小于供给的溶解氧量。
3.酶的固定化过程中使用的载体需符合如下条件。
(1)固定化过程中不引起酶变性:(2)对酸碱有一定的耐受性;(3)有一定的机械强度;(4)有一定的亲水性及良好的稳定性;(5)有一定的疏松网状结构,颗粒均匀;(6)共价结合时具有可活化基团;(7)有耐受酶和微生物细胞的能力;(8)廉价易得。
4.利用微生物生产酶制剂的优点。
优点:1)微生物种类多,酶种丰富,且菌株易诱变、可变。
2)微生物繁殖速度快,生产周期短,生产能力强,产酶量高。
3)易分离提取,特别是胞外酶。
4)原料来源广泛,价格便宜,生产成本低。
5)容易实现大规模机械化,自动化连续化工生产。
6)可利用生物工程新技术,选育新菌种,提高产酶量,增加酶种。
二,名词解释题(共10道小题,共20分)
1.生物技术药物:生物技术药物是指采用DNA重组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。
2.固定化酶:是指在一定的空间范围内起催化作用,并能反复和连续使用的酶。
1.应用微囊化培养法大规模培养动物细胞的优点?
答案:是用一层亲水的半透膜将细胞包围在珠状的微囊里,细胞不能逸出,但小分子物质及营养物质可自由出入半透膜;囊内是种微小培养环境,与液体培养相似,能保护细胞少受损伤,故细胞生长好、密度高。
微囊直径控制在200-400μm为宜。
制备中应注意:温和、快速、不损伤细胞,尽量在液体和生理条件下操作;所用试剂和膜材料对细胞无毒害;膜的孔径可控制,必须使营养物和代谢物自由通过;膜应有足够机械强度抵抗培养中搅拌。
2.应用多孔微载体培养法大规模培养动物细胞的优点?
答案:微载体系统(microcarrier symem
MCS)用于动物细胞大规模培养具有显著的优点:(1)兼具单层培养和悬浮培养的优势,且是均相培养;(2)细胞所处环境均一,放大容易;(3)环境条件(温度、PH、cO2,
P02等)容易测量;(4)具有较高的表面积体积比;(5)培养操作可系统化、自动化,降低了污染发生的机会。
经过二十几年的发展,该技术较中空纤维(hollow fiber)、微囊(microencapsu:
lation)等发展得更为完善和成熟。
目前生产规模已达几千升甚至上万升;而且细
胞培养的密度也很高批式培养可达5~6×10 cells/
ml;灌流培养可达4~10 cells /ml。
3.应用贴壁培养法大规模培养动物细胞的特点?
答案:贴壁培养(attachment
culture)是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。
生长特性贴壁依赖型细胞在培养时要贴附于培养(瓶)器皿壁上,细胞一经贴壁就迅速铺展,然后开始有丝分裂,
并很快进入对数生长期。
一般数天后就铺满培养表面,并形成致密的细胞单层。
贴壁培养的优点:a、容易更换培养液;细胞紧密黏附于固相表面,可直接倾去旧培养液,清洗后直接加入新培养液。
b、容易采用灌注培养,从而达到提高细胞密度的目的;因细胞固定表面,不需过滤系统。
c、当细胞贴壁于生长基质时,很多细胞将更有效的表达一种产品。
4.体外培养动物细胞的特点。
答案:与体内仍有相似-体外培养的细胞仍存在细胞和细胞、细胞和基质的相互关系,但有不同相对孤立、相对单一失去原有组织结构和细胞形态分化减弱或不显。
一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件:(1)无毒的环境(2)无菌的环境(3)培养液中需加血浆(4)温度与动物体温相近(5)加CO2维持培养液的pH值。
5.上皮型细胞的特点及来源。
答案:上皮型细胞的特点:细胞呈扁平不规则多角形,中央有圆形核,细胞彼此紧密相连成单层膜。
生长时呈膜状移动,处于膜边缘的细胞总与膜相连,很少单独行动。
起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。
上皮型细胞来源于外胚层,内胚层细胞(个别例外),类似体内的上皮细胞,扁平,不规则多角形,中有圆形核。
如皮肤及其衍生物,消化道上皮,肺泡上皮,上皮性肿瘤。
6.改形抗体(名词解释)
答案:指利用基因工程技术,将人抗体可变区(V)中互补性决定区(CDR)AA序列改
换成鼠源单抗CDR序列,重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体
7.离子交换层析(名词解释)
答案:离子交换层析(ion-exchange
chromatography,IEC)是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。
离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。
常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素)和弱碱型的二乙基氨基乙基纤维素(DEAE纤维素)。
前者为阳离子交换剂,后者为阴离子交换剂。
8.接触抑制(名词解释)
答案:接触抑制是将多细胞生物的细胞进行体外培养时,分散贴壁生长的细胞一旦相互汇合接触,即停止移动和生长的现象。
细胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,这种现象就叫做接触抑制。
9.密度抑制(名词解释)
答案:密度抑制,细胞接触汇合成片后,虽发生接触抑制,只要营养充分,细胞仍然能够进行增殖分裂,因此细胞数量仍在增多。
但当细胞密度进一步增大,培养液中营养成分减少,代谢产物增多时,细胞因营养的枯竭和代谢物的影响,则发生密度抑制(Density
Inhibition),导致细胞分裂停止。
10.免疫毒素(名词解释)
答案:免疫毒素,又称生物导弹。
是专门设计用于选择性破坏具有某一特异性标记细胞的一类融合蛋白,通常是由具有高度特异性的单克隆抗体与具有强大杀伤作用的毒素分子通过化学交联构建而形成。
11.悬浮培养(名词解释)
答案:悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。
12.贴壁培养(名词解释)
答案:贴壁培养(monolayer culture)是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。
13.Fab抗体片段(名词解释)
答案:Fab抗体分段是分子IgG(或结构类似的Y蛋白)被木瓜蛋白酶裂解产生的两
个相同片段的任一个。
14.高密度发酵(名词解释)
答案:又称高密度培养。
一般指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养
10倍以上时的生长状态的培养技术。
现代高密度培养技术主要是在用基因工程菌
尤其是大肠埃希氏菌生产多肽类药物的实践中逐步发展起来的。
15.连续发酵(名词解释)
答案:连续发酵是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基,同时以相同速度流出培养液,从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。
16.简述噬菌体抗体库技术的特点。
答案:(1)模拟天然全套抗体库(2)避免使用人工免疫和杂交瘤技术(3)可获得高亲合力的人源化抗体
17.细胞破碎方法包括哪几种?
答案:(1)高速组织捣碎将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。
此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。
(2)玻璃匀浆器匀浆先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。
(3)超声波处理法用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。
对超声波敏感和核酸应慎用。
(4)反复冻融法将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
(5)化学处理法有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。
无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。
18.列举5种物理诱变剂。
答案:物理诱变剂主要有:紫外线,ARTP,X射线,γ-射线,快中子,激光,微波,离子束等。
19.简述色谱技术的种类。
答案:色谱法有许多种类,从不同的角度,有不同的分类方法。
(1)按两相所处的状态分为气液色谱、气固色谱、液固色谱、液液色谱。
(2)按色谱分离过程的机理分为吸附色谱、气液分配色谱、离子交换色谱。
(3)按固定相形式的不同分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱。
(4)按操作形式不同分为冲洗法、顶替法、前沿法。