血清乳酸脱氢酶同工酶测定

乳酸脱氢酶LDH检测在临床的应用摘要：目的：关键词：【中图分类号】r446.19【文献标识码】b【文章编号】1672-3783（2012）10-0161-01乳酸脱氢酶英文名称： ldh正常范围：血清 100～300u/l；尿 560～2050u/l；脑脊液含量为血清的1/10。

检查介绍：乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。

乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内，其中以肾脏含量较高，乳酸脱氢酶是能催化乳酸脱氢生成丙酮酸的酶。

几乎存在于所有组织中。

同功酶有五种形式，即ldh-1（h4）、ldh-2（h3m）、ldh-3（h2m2）、ldh-4（hm3）及ldh-5（m4），可用电泳方法将其分离。

ldh同功酶的分布有明显的组织特异性，所以可以根据其组织特异性来协用诊断疾病。

正常人血清中ldh2>ldh1。

如有心肌酶释放入血则ldh1>ldh2，利用此指标可以观察诊断心肌疾病。

临床意义：（1）急性心肌梗塞发作后，早期血清中ldh1和ldh2活性均升高，但ldh1增高更早，更明显，导致ldh1/ldh2的比值升高。

（2）肝炎、急性肝细胞损伤及骨骼肌损伤时ldh5都会升高。

（3）患活动性风湿性心脏病、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血、肾坏死等病ldh1也可升高。

（4）恶性病变时ldh3常增高。

血清乳酸脱氢酶（ldh）同工酶测定及意义人组织中的乳酸脱氢酶（ldh）用电泳法可以分离出5种同工酶区带，根据其电泳迁移率的快慢，依次命名为ldh1，ldh2，ldh3，ldh4，ldh5。

不同组织的乳酸脱氢酶同工酶分布不同，存在明显的组织特异性，人心肌、肾和红细胞中以ldh1和ldh2最多，骨骼肌和肝中以ldh4和ldh5最多，而肺、脾、胰、甲状腺、肾上腺和淋巴结等组织中以ldh3最多。

后来从睾丸和精子中发现了ldhx，其电泳迁移率介于ldh4和ldh5之间。

ldh是由h（心肌型）和m（骨骼肌型）两类亚基组成，分别形成ldh1（h4）、ldh2（h3m）、ldh3（h2m2）、ldh4（hm3）、ldh5（m4）。

乳酸脱氢酶(ldh)正常值范围
乳酸脱氢酶是观察心肌疾病、肝胆疾病等的重要指标之一，正常值范围是109-245U/L。

如果乳酸脱氢酶数值偏高，则需要警惕肝脏疾病、心脏疾病等，及时去医院咨询进行进一步检查确定数值增高的病因，数值偏低则不需要过度担心。

乳酸脱氢酶是催化乳酸和丙酮相互转化的同工酶，存在于肝脏、心脏、肾脏中。

乳酸脱氢酶偏低有可能是因为内分泌失调或者由过于劳累、睡眠不好、心情不好等原因引起，乳酸脱氢酶偏低一般不是很严重，经过调理即可恢复。

但是如果出现乳酸脱氢酶偏高就要引起重视了，常见原因如下：
1、乙肝患者血清中乳酸脱氢酶含量就会出现增高，这
是由肝细胞受损引起的。

2、肌营养不良的患者血清中可以观察到偏高的乳酸脱
氢酶。

3、肝脏疾病、肺部疾病、心脏疾病、肾脏疾病等都可
能会引起乳酸脱氢酶偏高。

血清乳酸脱氢酶LDH测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，LDHNADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活力成正比。

L-乳酸 + NAD+丙酮酸 + NADH + H+3 标本：3.1 病人准备：无特殊。

3.2 类型：血清或EDTA血浆。

3.3 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<2%。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司LDH试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成氯化钾 190mmol/L 试剂1（R1）乳酸62.5mmol/LTris缓冲液 100mmol/L试剂2（R2）NAD+ 30mmol/L Tris缓冲液 100mmol/L 4.1.2试剂准备试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。

试剂1 与试剂2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定14天。

4.1.4 变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项试剂中含叠氮钠为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的LDH校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

乳酸脱氢酶1 (Ldh1) 是一种同工酶，主要参与线粒体中乳酸的代谢。

当乳酸脱氢酶1偏高时，可能是由于以下原因：
1.肌肉损伤：肌肉损伤或运动过度会导致肌肉组织中乳酸的增加，乳酸脱氢酶1水
平也会增加。

2.疾病：乳酸脱氢酶1水平偏高可能是肝硬化、心肌病、肺纤维化等疾病的一种表
现。

3.肿瘤：乳酸脱氢酶1偏高可能是肿瘤组织中乳酸代谢异常的结果，也可能是肿瘤
组织破坏导致的。

4.毒性反应：一些药物或化学物质可能会导致肝脏或肌肉组织中乳酸脱氢酶1水平
增高。

5.酒精性肝病：长期酗酒可导致肝细胞损伤，引起肝脏功能障碍，导致乳酸脱氢酶1
水平升高。

6.生活方式因素：抽烟、高脂肪饮食、缺乏运动等生活方式因素也可能导致乳酸脱
氢酶1水平增高。

需要注意的是，乳酸脱氢酶1偏高的原因是多种多样的，需要结合临床症状和其他检查结果进行判断。

血清乳酸脱氢酶及其同工酶联合检测在诊断儿童难治性肺炎支原体肺炎中的应用价值陈　浩（常州市儿童医院重症医学科，江苏　常州　213000）[摘要]目的：探讨并分析血清乳酸脱氢酶（LDH）及其同工酶联合检测在诊断儿童难治性肺炎支原体肺炎（RMPP）中的应用价值。

方法：选取2015年1月至2019年10月常州市儿童医院收治的78例肺炎支原体肺炎（MPP）患儿作为研究对象。

将其中32例RMPP患儿设为观察组，将其中46例非RMPP患儿设为对照组。

对两组患儿血清LDH及其同工酶〔包括乳酸脱氢酶同工酶1（LDH1）、乳酸脱氢酶同工酶2（LDH2）、乳酸脱氢酶同工酶3（LDH3）、乳酸脱氢酶同工酶4（LDH4）和乳酸脱氢酶同工酶5（LDH5）〕的水平均进行检测，然后比较其检测结果。

结果：观察组患儿血清LDH 的水平高于对照组患儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。

观察组患儿血清LDH1、LDH2、LDH4和LDH5的水平均高于对照组患儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。

两组患儿血清LDH3的水平相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

结论：联合检测LDH及其同工酶的水平对诊断儿童RMPP具有一定的参考价值。

[关键词]乳酸脱氢酶；乳酸脱氢酶同工酶；儿童难治性肺炎支原体肺炎[中图分类号]R446 [文献标识码]B [文章编号]2095-7629-（2021）01-0125-02肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）是指由肺炎支原体（mycoplasma pneumonia，MP）感染引起的一种肺炎。

儿童是MPP的高发群体。

难治性肺炎支原体肺炎（refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia，RMPP）是指病程较长（多超过3周）、病情较重（可出现肺外并发症）且使用大环内酯类抗生素进行治疗效果不佳的一类MPP。

目前，国内外关于RMPP的诊断尚未形成统一的标准[1]。

乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程（SOP）一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中乳酸脱氢酶（LDH）的活性。

二、临床意义（一）概述乳酸脱氢酶（LDH），又称L－乳酸－NAD+氧化还原酶，酶编号为EC 1.1.1.27，分子量约为34000道尔顿。

LDH是一种细胞质酶，存在于所有组织细胞中。

由于组织中的LDH 浓度比血浆高约500倍，即使组织的轻微损伤也将导致血清中活性的明显增高，在肝、心肌、骨骼肌和肾中发现高度组织特异性活性的酶。

（二）临床意义乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗死、肝炎、肺梗死、某些恶性肿瘤、白血病等。

某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。

目前，常用于心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。

（三）医学决定水平170U／L:此值在参考范围以内，等于或低于此值可排除许多与LDH升高有关的疾病，而考虑其他的诊断。

此值还可作为病人自身的对照，用来与以前或将来的测定值作比较。

300U／L：高于此水平时，应考虑到可能引起LDH升高的各种疾病，如心肌梗塞、肝病变、传染性单核细胞增多症、进行性肌营养不良等。

因此，应作其他各种试验，以作出明确诊断。

血清溶血可使测定值增高，应予以注意。

500U／L：高于此值，常见于巨幼细胞性溶血，急性白血病、慢性粒细胞性白血病、转移癌和肝昏迷等，此时应作其他多种检测来作出正确诊断。

三、检验原理L-乳酸＋NAD+−−LDH丙酮酸＋NADH＋H+−→NADH的生成速率与样品中LDH活性成正比，在340nm波长处，通过连续监测吸光度的上升速率(△A／min)，即可计算出样品中LDH的活性。

四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。

样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。

乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase，简称LDH）是一种关键的酶类分子，在多种生物体中广泛存在并发挥重要的生理功能。

LDH 主要参与乳酸代谢和能量产生过程，催化乳酸氧化为丙酮酸，同时伴随着NADH的还原。

本文将就乳酸脱氢酶的分布及同工酶进行详细介绍。

一、乳酸脱氢酶的分布乳酸脱氢酶在自然界中广泛存在，包括人类、动物、植物以及微生物等。

根据LDH的组成单位和电泳迁移率的差异，可以将其分为五个亚基类型：LDH-1、LDH-2、LDH-3、LDH-4和LDH-5。

不同亚基类型的分布及其在不同组织和生物体中的表达水平有所差异。

1. 人类乳酸脱氢酶的分布人体内乳酸脱氢酶主要分布在肝脏、心肌、骨骼肌、肾脏、红细胞等组织中。

其中，肝脏是乳酸脱氢酶最主要的合成和分泌部位，其含量较高。

心肌是另一个重要的乳酸脱氢酶合成部位，其含量与心脏功能密切相关。

此外，骨骼肌也能合成大量乳酸脱氢酶，用于乳酸代谢和能量产生过程。

2. 动物乳酸脱氢酶的分布动物中乳酸脱氢酶的分布与人类类似，不同组织中的乳酸脱氢酶含量也有所差异。

例如，在猪体内，肝脏、心肌和骨骼肌都是乳酸脱氢酶的重要合成部位。

在小鼠体内，乳酸脱氢酶主要分布在肝脏、心肌和肾脏等组织中。

3. 植物乳酸脱氢酶的分布植物中的乳酸脱氢酶主要存在于叶片、根和果实等组织中。

在光合作用过程中，植物细胞会产生乳酸，而乳酸脱氢酶能够催化乳酸的氧化反应，将其转化为丙酮酸并产生NADH。

4. 微生物乳酸脱氢酶的分布微生物包括细菌、真菌和酵母等，它们广泛存在于自然界中的土壤、水体和空气中。

乳酸脱氢酶是微生物代谢过程中不可或缺的酶类之一。

例如，在乳酸菌中，乳酸脱氢酶能够将乳酸转化为丙酮酸，并产生大量的NADH，用于细胞内其他代谢过程的需要。

二、乳酸脱氢酶的同工酶乳酸脱氢酶在不同生物体和组织中存在多个同工酶，它们具有相似的催化功能，但其结构与电泳迁移率存在差异。

同工酶的存在使得乳酸脱氢酶在不同组织和生物体中能够适应不同的代谢需求。

乳酸脱氢酶同工酶70乳酸脱氢酶同工酶70（LDH-70）是一种重要的酶类，它在生物体内发挥着关键的功能。

本文将深入探讨LDH-70的特性、作用以及在医学和生物工程领域的应用，希望对读者有所启发和指导。

首先，让我们来了解一下LDH-70的特性。

它是乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，简称LDH）家族中的一员，属于同工酶70型。

同工酶是一种在结构上相似但功能上略有不同的酶类，不同的同工酶在不同生理条件下具有不同的表达水平和组织特异性。

LDH-70在细胞的线粒体内发挥作用，是乳酸代谢过程中的关键参与者。

乳酸是一种代谢产物，它的生成主要发生在肌肉细胞和红细胞中。

LDH-70通过将乳酸氧化为丙酮酸，参与细胞能量代谢和酸碱平衡的调节。

此外，LDH-70的产生和活性也与一些疾病状态有关，如心脑血管疾病、肿瘤等。

在医学领域，LDH-70被广泛用作一种生化标志物，用于评估细胞损伤、诊断疾病和监测疗效。

例如，心肌梗死时，心肌细胞受损，LDH-70会释放入血液中，因此可以通过检测血清中LDH-70的水平来确定心肌梗死的存在和严重程度。

此外，LDH-70的活性和浓度也与肿瘤的发生和治疗反应有关，因此可作为肿瘤标志物来进行诊断和疗效评估。

此外，LDH-70在生物工程领域也有着广泛的应用。

它的酶学性质以及对乳酸代谢的调控作用使得LDH-70成为乳酸生产的重要工具。

乳酸是一种广泛应用于食品、医药和化妆品等领域的化学品，而且其可持续生产也被认为是一种环保和可再生的选择。

通过改造LDH-70的基因，提高其活性和稳定性，可以提高乳酸的产量和纯度。

此外，还可以通过优化酶反应条件、培养基配方等手段来进一步提高乳酸的生产效率。

综上所述，LDH-70作为一种重要的同工酶，在生物体内发挥着重要的功能。

它参与乳酸代谢过程，具有调控能量代谢和酸碱平衡的作用。

在医学领域，LDH-70被广泛应用于疾病的诊断和监测，特别是心肌梗死和肿瘤的评估。

常用血清酶和同工酶测定的临床意义1.连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）2.连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性3.连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）4.连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）5.连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP）6.连续监测法测定血清中谷氨酰基转移酶（GGT）7.淀粉酶（AMY）测定8.比色法测定酸性磷酸酶（ACP）连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体。

正常人体中有三种同工酶，即CK-BB（CK1）、CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。

CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。

CK需要镁离子激活。

1.原理酶偶联反应测定CK活性浓度。

在340nm监测NAD（P）H的生成量，可计算出CK的活性浓度。

2.生理变异年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。

CK含量和肌肉运动密切相关。

3.参考值男性38～174U/L（37℃）；女性26～140U/L（37℃）。

4.临床意义升高：（1）心肌梗死。

心肌梗死发生后2～4h此酶即开始升高，12～48h达最高峰值，可高达正常上限的10～12倍，在2～4天降至正常水平。

（2）病毒性心肌炎。

（3）肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。

（4）脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素。

降低：甲亢，长久卧床者总CK（主要为CK-MM）可下降。

5.CK同工酶检测原理及临床意义CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体，正常人体中有三种同工酶：在细胞线粒体内还有另一种CK同工酶，称为CK-Mt。

（1）检测方法：琼脂糖凝胶电泳法CK 同工酶免疫特性和电泳迁移率各不相同。

在电泳时，CK-BB 迁移最快，走在阳极白蛋白区；CK-MB 居中，位于α2和β球蛋白区；CK-MM 最慢，位于阴极γ-球蛋白区；CK-Mt 迁移率最低，位于CK-MM 之后。

实验八乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的琼脂糖凝胶电泳一、实验目的了解琼脂糖凝胶电泳的方法和原理，学会分离LDH同工酶的方法。

二、原理同工酶是指能够催化相同的化学反应，但酶分子的结构理化特性乃至免疫学性质不同的一组酶，同工酶这种差异是由于酶蛋白的编码基因不同或基因相同但转录、翻译或后加工有别所造成的。

同工酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组织，甚至同一组织或细胞的不同亚细胞结构中。

人们已发现几百种同工酶。

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase LDH）是人们认识的第一个同工酶。

LDH是糖酉孝解中的一个酶，它催化的反应如下。

COOH COOHHO—C—H+NAD＋C＝O＋NADH＋H+CH3 CH3LDH有五种同工酶，分子量在13万～15万之间，由四个亚基组成。

LDH的亚基有两种类型，一种是心肌型亚基（H型）（B基因），另一种是骨骼肌型亚基（M型）（A基因）。

两类亚基以不同比例可组成五种四聚体。

即LDH1(H4)、LDH2(H3M1)、LDH3(H2M2)、LDH4(H1M3)、LDH5(M4)。

H型亚基与M型亚基的氨基酸组成有差异，前者含酸性氨基酸残基多，故LDH可用电泳的方法进行分离。

本实验用pH8.6的缓冲液，在此条件下电泳，LDH的五种同工酶均净带负电荷，向正极泳动，但LDH1最快，依次减慢，LDH5最慢。

在哺乳动物体内，一般厌氧性组织中，如骨骼肌、肝脏中，LDH5含量高；在非厌氧性组织中，如心、脑中，LDH1含量高。

本实验用琼脂糖凝胶，LDH的五种同工酶在琼脂糖凝胶板上分离后，进行酶促反应，使乳酸脱氢生成NADH，NADH将人工递氢体PMS还原，还原型PMS 最终将NBT还原。

NADH++H++PMS=====NAD++PMSH2PMSH2＋NBT======PMS＋NBTH2NBTH2为蓝色化合物。

三、实验器材（一）、仪器1、电泳仪1、水平电泳槽2、离心机3、玻璃匀浆器5、恒温箱6、微量移液器7、吸量管四、材料与试剂1、小白鼠（成年）2、白瓷盘3、剪子4、镊子5、载玻片6、滤纸7、生理盐水8、0.01mol/l pH7.4磷酸钠缓冲液：取0.01mol/L NaH2PO419ml和0.01mol/L Na2HPO481ml混合即可。

分类 LDH 1 亚基组成 H H H H(H 4 ) LDH 2 H H H M(H 3 M ) LDH 3 H H M M(H 2 M 2 ) LDH 4 H M M M(HM 3 ) LDH 6M M M M(M 4 )醋酸纤维薄膜电泳法分别血清乳酸脱氢酶同工酶【目的】1 ． 把握电泳法分别血清乳酸脱氢酶同工酶的原理与技术。

2 ． 生疏测定血清乳酸脱氢酶同工酶的临床意义。

【原理】体内 LDH 同工酶均由四个亚基组成。

亚基分二种，即 “ H ” 亚基〔多分布于心肌〕与 “ M ” 亚基〔多分布于肌肉〕。

依据亚基不同， LDH 同工酶分为以下五种〔表 3-8 〕。

表 3-8 LDH 同工酶的分类与组成由于 LDH 同工酶的亚基组成不同，在 pH8.6 巴比妥缓冲液中所带电荷不同，通过醋酸纤维薄膜电泳可以将血清样品中的各种 LDH 同工酶彼此分开。

以乳酸钠〔钾〕为基质，在有氧化型辅酶 Ⅰ 存在时， LDH 可是乳酸脱氢生成丙酮酸、使 NAD + 复原为 NADH+H + ， NADH+H + 又将氢传递给吩嗪二甲酯硫酸盐〔 PMS 〕， PMS 再将氢传递给氯化硝基四氮唑蓝〔 NBT) ，使其复原为紫蓝色化合物，因此有 LDH 活性的区带即着紫色，生成颜色深浅与 LDH 活性成正比。

其反响如下：将电泳后的 醋酸纤维薄膜与含有底物乳酸和显色剂的染色液一起保温，便可显示出血清 LDH 同工酶的谱带〔图 3-8 〕。

将各谱带洗脱进展比色分析，即可求得各同功酶的相对百分比。

图 3-8 LDH 同工酶电泳图谱【器材】1．电泳仪2．电泳槽〔用二层滤纸或纱布搭桥〕3．恒温水浴4．分光光度计5．点样器6．白瓷盘7．玻璃板8．镊子【试剂】1． pH8.6 巴比妥电泳缓冲液〔离子强度 0.05 〕巴比妥钠 20.6g ，巴比妥 3.68g ，蒸馏水加至 2 000ml 。

2． pH7.5 磷酸盐缓冲液〔 0.1M 〕磷酸二氢钾 2.16g ，磷酸二氢钠 30.13g ，蒸馏水加至 1 000ml 。

乳酸脱氢酶和ck同工酶偏高的原因乳酸脱氢酶和CK同工酶是人体内两种常见的酶类物质，它们的偏高常常提示着人体内出现了某种异常情况。

本文将围绕乳酸脱氢酶和CK同工酶的偏高情况展开探讨，介绍它们偏高的原因以及与其相关的疾病。

乳酸脱氢酶是一种细胞内的酶类物质，广泛存在于全身各个器官中，其中肝、心、肌肉等组织中含量较高。

当细胞损伤或病理状态出现时，这些酶会通过细胞膜受损处逸出细胞外部，并被释放到血液中。

因此，在临床上，我们可以通过检测血液中乳酸脱氢酶的水平来判断有无某些器官或组织的损伤或病理状态。

导致乳酸脱氢酶偏高的原因很多，以下列举其中的几种：1.肝功能不全：当肝脏受到损伤或疾病时，肝细胞内的乳酸脱氢酶会释放到外部，从而导致血液中的乳酸脱氢酶含量升高。

2.心肌损伤：乳酸脱氢酶含量升高也是心肌梗塞的普遍现象，当心肌细胞受损时，乳酸脱氢酶就会逸出失去膜完整性的心肌细胞中。

3.肌肉损伤：肌肉损伤也是乳酸脱氢酶升高的常见原因。

例如，长时间的运动会导致肌肉中的乳酸脱氢酶逸出。

4.恶性肿瘤：恶性肿瘤也是乳酸脱氢酶含量升高的一个原因，这是由于癌细胞产生乳酸并导致细胞内酶活性增强导致。

二、CK同工酶的偏高CK同工酶是一种酶类蛋白，在人体内广泛存在。

它主要存在于肌肉、心脏和脑组织中，而且都由三种亚基组成。

当肌肉或心脏组织受到损伤时，CK同工酶会逸出到血液中，从而导致血清CK与CK同工酶含量升高。

1.心肌损伤：心肌梗塞可能导致CK和CK同工酶含量的升高，由于心肌细胞受到损伤，因而释放这些酶。

2.肌肉损伤：各种原因导致肌肉受到的损伤（创伤、挫伤、剧烈运动、长时间压迫等），都会导致CK和CK同工酶含量的升高。

3.肝细胞受损：某些条件下，例如肝炎、药物中毒等，肝细胞受到损害时，CK酶类可能会释放到血液中，从而导致CK和CK同工酶含量升高。

总之，虽然乳酸脱氢酶和CK同工酶的含量升高往往提示人体的问题，但同时也要注意到这些酶类的升高并不一定代表有疾病存在，可以再次检查和评估以确定具体的诊断和治疗措施。

乳酸脱氢酶同工酶——醋纤薄膜电泳一、实验目的：1.掌握电泳的一般原理和醋酸纤维薄膜电泳的操作技术。

2.熟悉乳酸脱氢酶同工酶活性测定原理。

3.掌握乳酸脱氢酶同工酶活性测定的临床意义。

二、实验原理：1、基本原理---电荷效应：F=Eq，f=6лrηv。

匀强电场中，F=f，v=Eq/6лrη。

在同一电泳条件下，混合物中不同组分将因其r和q的差异而具有不同的移动速度。

因此，电泳一定的时间（t），就可以互相分离。

通常使用“迁移率”（m）表示不同物质具有不同移动速度的特性。

m=V/E指在单位电场强度下带电颗粒的移动速度。

2、LDH同工酶的分离：LDH同工酶在一般组织中有五个成份，其亚基组成如下表。

LDH各组分pI≤7.5，缓冲液pH=8.6，净电荷为负电荷，向正极泳动。

在醋酸纤维薄膜介质中，各组份向正级移动的速度不同而可以分离，由阳极至阴极分别为：LDH1、LDH2、LDH3、LDH4、LDH5。

3、显色：电泳结束后可用下列酶偶联反应进行显色：以醋酸纤维薄膜为支持物，经电泳使酶蛋白分开后以乳酸钠为基质，以NAD+为受氢体，乳酸氧化成丙酮酸后使NAD+还原，后者又使吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原，PMS·2H再将氢传递给氯化硝基四氮唑蓝（NBT），使其还原为蓝紫色化合物。

有LDH的条带显蓝紫色，颜色的深浅与酶活性成正比。

三、实验步骤：1.泡膜洗净手，戴乳胶手套，取薄膜，于毛面距一端1.5 cm处用铅笔轻画一直线。

小心将膜浮于巴比妥缓冲液上，待下面湿润后再将膜完全浸入，浸泡。

2.仪器准备检查电源，接好电线（不通电），注意正负极。

加巴比妥缓冲液于电泳槽内，调整水平。

3.点样取出泡好的薄膜，用滤纸吸去多余的缓冲液。

毛面向上，于毛面膜的一端画线处点样，注意点样量适当。

待样品渗入膜内后，将点样面翻转朝向下方，置于电泳槽的支架上，点样端放在负极。

4.电泳点样端负极、毛面向下、薄膜绷直；电压= 140V，时间 50 分钟。

乳酸脱氢酶同⼯酶在临床上的应⽤乳酸脱氢酶同⼯酶在临床上的应⽤陆明旭（⼴西医科⼤学基础医学院⼴西青秀区530021）联系⽅式：152******** 摘要：本⽂通过阅读⼤量的⽂献资料⽽汇总乳酸脱氢酶同⼯酶在临床上的研究成果。

主要介绍了乳酸脱氢酶同⼯酶的性质以及其与各种疾病的诊断，以便乳酸脱氢酶同⼯酶在临床上得到更好的应⽤，更好地为病⼈服务。

关键词：乳酸脱氢没、同⼯酶、应⽤乳酸脱氢酶是糖醉解途径中⼀种重要的酶。

它可逆地催化下述反应：乳酸+辅酶Ⅰ在乳酸脱氢没的催化下可逆⽣成丙酮酸+还原酶Ⅰ1959年Markert（1）发现⽜⼼乳酸脱氢没（LDH）结晶经淀粉胶电泳，可分成五条区带，⾸先提出了“同⼯酶”的概念。

同⼯酶⼀般指在同⼀种属内, 能催化同⼀底物进⾏相同反应⽽分⼦结构和理化性质不同的酶。

⼀、LDH 同⼯酶的分布、组成和性质LDH ⼴泛分布于动物各种组织、植物和微⽣物之中。

⼈体以肾含量最⾼, ⼼肌、⾻骼肌次之, 红细胞的LDH 含量约为正常⼈⾎清的100 倍。

电泳法可将⼈和动物组织LDH 分离成五种同⼯酶。

靠近阳极⼀端的称LDH1 , 靠近阴极⼀端的称LDH5。

其余三种, 从阳极到阴极依次命名为LDH2 、LDH3和LDH 4。

⼈⼼肌、肾和红细胞以LDH1和LDH2 最多, 肝和⾻骼肌以LDH5 和LDH4 最多, 脾、胰、甲状腺、肾上腺和淋巴结等以LDH3最多。

这说明LDH同⼯酶的分布有明显的组织特异性。

LDH 同⼯酶的分⼦量都在140,000 左右,实验证明都是由四个亚单位组成的四聚体（表1）表⼀ LDH同⼯酶的亚单位组成为什么不同组织的LDH同⼯酶谱不同呢？主要是因为A、B两种亚单位的含量不同, ⼈⾻骼肌和肝细胞的A∶B为10∶1, ⽽⼈⼼肌为1∶20，肾为1∶10。

A亚单位和B 亚单位的⽣物合成分别受染⾊体上LDHA和 LDHB基因单位点的控制, 实验证明, ⼈LDHA位点位于第11 号染⾊体上, LDHB位点位于第12号染⾊体上（2）。