当前位置：文档之家 › 猪内源性逆转录病毒的分子研究进展

猪内源性逆转录病毒的分子研究进展

  • 格式：docx
  • 大小：28.04 KB
  • 文档页数：2

下载文档原格式

  / 2

合集下载

专题13 基因工程-2024年高考生物一模试题分类汇编(广东专用)(原卷版)

专题13 基因工程-2024年高考生物一模试题分类汇编(广东专用)(原卷版)

专题13 基因工程（基础题+提升题+创新题三位一体）1.（2024届·广东深圳·一模）基因工程的发展离不开理论的突破和技术的创新。

下列科学研究体现了基因工程正式问世的是（）A．艾弗里等人通过肺炎链球菌的体外转化实验证明DNA可以转移B．沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出自我复制假说C．科学家利用质粒构建重组DNA载体并导入受体细胞中成功表达D．科学家发现了多种限制性内切核酸酶、DNA连接酶和逆转录酶2.（2024届·广东汕头·一模）下列选项中相关“反应”与“反应条件”不一致的是（）A．A B．3.（2024届·广东江门·一模）在构建基因表达载体时，传统方法常受限于限制酶识别序列。

科研人员研发了新的DNA重组方法: In-Fusion技术。

该技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶处理，使同源序列形成黏性末端，最终形成的重组质粒会在受体细胞内形成完整的重组序列。

主要操作过程如图示。

下列叙述错误的是（）A．推测In-Fusion酶的作用是识别同源序列、形成黏性末端、连接磷酸二酯键B．载体A端和B端的序列不同，可防止目的基因与质粒反向连接及自身环化C．形成重组质粒时，如果温度远高于50℃，黏性末端的碱基不容易互补配对D．该技术无需识别特定切割位点，需识别目的基因与线性质粒任意同源序列4.（2024届·广东汕头·一模）镉（Cd）是重金属污染物，具有极强毒性。

烟草作为重要的经济作物，在生长过程中容易富集Cd，Cd通过烟气进入人体，长期积累可能会引发疾病。

N1NRAMP3是定位于液泡膜参与Cd转运的蛋白，研究人员以普通烟草为材料，通过转基因技术研究NINRAMP基因的功能，为研究烟草在Cd胁迫中的适应机制提供理论基础。

回答下列问题：(1)从数据库获得NtNRAMP基因的序列，设计引物F和R后利用技术扩增得到NtNRAMP基因的cDNA 片段，测序鉴定。

RNAi技术在转基因猪中的应用研究进展_邹娴

RNAi技术在转基因猪中的应用研究进展_邹娴

克隆猪可以 有 效 抑 制 ＰＥＲＶ 的 复 制。 经 过 ３ 年 的 研 究 探 索 ，Ｓｅｍａａｎ 等 （２０１２）对 其 中 的 几 头 克 隆 猪 不 定 期 的 进 行 检 测 ，并 对 其 中 的 １ 头 猪 进 行 再 克 隆 ，同 时改进了检测方 法。 结 果 表 明，这 些 克 隆 猪 可 以 长 期有效地抑制 ＰＥＲＶ 的复制。ＲＮＡｉ技术首次在猪 这类比较大的动 物 中 成 功 应 用，掀 开 了 ＲＮＡｉ技 术 在生理条件下抑制 猪 病 病 毒 复 制 革 命 性 的 一 页，预 示 ＲＮＡｉ 技 术 在 猪 病 病 毒 防 控 中 应 用 前 景 非 常广阔。 ３．２ ＲＮＡｉ介 导 的 抗 猪 瘟 病 毒 转 基 因 猪 研 究 进 展 猪 瘟 是 由 猪 瘟 病 毒 （ｃｌａｓｓｉｃａｌ ｓｗｉｎｅ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ， ＣＳＦＶ）引起的一种急 性、热 性、高 度 接 触 性 传 染 病， 发 病 率 和 死 亡 率 很 高 ，在 世 界 范 围 内 广 泛 流 行 ，对 养 猪业危害极 大。 王 铁 东 等 （２００９ａ，２００９ｂ）构 建 了 针 对猪瘟病毒的 Ｎｐｒｏ 和 ＮＳ４Ａ 基因的含有２个ｓｈＲ－ ＮＡ 表达序列 的 双 表 达 载 体，以 及 采 用 逆 转 录 病 毒 载体 携 带 针 对 猪 瘟 病 毒 Ｎｐｒｏ 基 因 的 特 异 性 ｓｈＲ－ ＮＡ，通 过 抗 性 筛 选 得 到 多 个 可 以 有 效 抑 制 ＣＳＦＶ 病毒增殖 的 猪 胎 儿 成 纤 维 细 胞 克 隆。Ｌｉ等 （２０１０） 构建了 针 对 猪 瘟 病 毒 的 Ｎｐｒｏ 和 ＮＳ４Ａ 基 因 的 逆 转 录病毒载体各１个，通 过 抗 性 筛 选 得 到 多 个 可 以 长 期稳 定 表 达 ｓｉＲＮＡ 并 能 有 效 抑 制 ＣＳＦＶ 增 殖 的 ＰＫ－１５细胞克隆。这些转基因细胞克隆可用作核 供 体 细 胞 ，通 过 体 细 胞 核 移 植 技 术 构 建 转 基 因 猪 ，并 用 于探索应用 ＲＮＡｉ技 术 进 行 猪 抗 病 育 种 的 可 行 性。 同时，Ｌｉ等（２０１１）以 Ｎｐｒｏ、ＮＳ３和 ＮＳ５Ｂ 基 因 为 靶 基因，构 建 了 单 个 ｓｈＲＮＡ 和 多 个 ｓｈＲＮＡ 表 达 载 体，这些ｓｈＲＮＡｓ由 相 同 或 不 同 的 启 动 子 调 控，在 细 胞 水 平 的 研 究 结 果 表 明，单 个 ｓｈＲＮＡ 和 多 个 ｓｈＲＮＡ 表达载体均能有效抑制 ＣＳＦＶ 的复制，且多 个ｓｈＲＮＡ 表 达 载 体 的 抑 制 效 率 更 强、抑 制 时 间 更 长。这就为组合 ＲＮＡｉ方法应用于防止猪病毒的逃 逸开启了大门，同时 也 为 获 得 稳 定 有 效 的 抗 猪 瘟 病 毒转基因猪奠定了基础。 ３．３ ＲＮＡｉ介 导 的 抑 制 猪 其 他 病 毒 感 染 的 研 究 进 展 口蹄疫（ｆｏｏｔ ａｎｄ ｍｏｕｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ，ＦＭＤ）是 由 口 蹄 疫 病 毒 （ｆｏｏｔ ａｎｄ ｍｏｕｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ，ＦＭＤＶ）引 起的偶蹄动 物 的 一 种 急 性、热 性、高 度 接 触 性 传 染 病。ＦＭＤ 的暴发会造成重大经济损失和政治影 响， 虽然 已 研 制 出 ＦＭＤ 灭 活 疫 苗，但 作 用 效 果 有 限。 Ｐｅｎｇｙａｎ等（２００８）根 据 ＦＭＤＶ ７ 个 血 清 型 的 保 守 区域３Ｄ 和２Ｂ１设计了２个ｓｉＲＮＡ，并构建了载体，

2024届江苏省徐州,南通等市高三下学期高考考前打靶卷生物试题(含答案)

2024届江苏省徐州,南通等市高三下学期高考考前打靶卷生物试题(含答案)

2024年高三年级试题生物一、单项选择题：共14题，每题2分，共28分。

每题只有一个选项最符合题意。

1．下列关于细胞分子组成的叙述，正确的是（）A．多糖的元素组成不一定都是C、H、OB．微量元素Mg参与叶绿素的构成C．血红蛋白的Fe元素存在于氨基酸残基的R基上D．ATP可以为DNA和RNA的合成提供原料和能量2．根据能量的来源不同，主动运输分为下图三种类型。

某些光合细菌存在光驱动泵。

有关叙述正确的是（）A．ATP驱动泵同时具有载体蛋白和ATP水解酶的功能B．协同转运分为同向和反向转运，由ATP直接提供能量C．利用光能的光驱动泵位于细菌叶绿体的类囊体膜上D．葡萄糖进入红细胞的运输靠协同转运蛋白3．下列关于细胞生命历程的叙述，错误的是（）A．端粒酶在人体恶性肿瘤细胞中活性较高B．自由基可能会攻击DNA或蛋白质分子，导致细胞衰老C．在植物和酵母菌里，细胞自噬通过液泡降解自身物质D．若细胞发生癌变，细胞膜上每种蛋白质的含量均减少4．在哺乳动物XX个体中，一条X染色体失活，形成巴氏小体（XY个体中没有巴氏小体），如图所示。

有关叙述错误的是（）A．来自父本和母本的X染色体都有可能失活形成巴氏小体B．通过巴氏小体检查可以确定胎儿性别和查出性染色体异常的患者C．红绿色盲基因携带者的所有视网膜细胞都是正常的D．巴氏小体的形成能使X染色体上的基因在雌雄个体中有近乎相等的有效剂量的遗传效应5．下列有关变异和育种的叙述正确的是（）A．诱变育种需要处理大量原材料的原因是基因突变具有不定向性B．培育白菜-甘蓝和抗虫棉的过程打破了不同物种间的生殖隔离C．使用秋水仙素处理单倍体幼苗诱导染色体加倍，获得的个体都是纯合体D．杂交育种可将两个亲本的优良性状组合在一起，在F1中一定会出现新类型6．研究表明猪内源性逆转录病毒(PERV)能够将自己的基因整合到猪基因组中，如图是PERV的生活史示意图。

有关叙述正确的是（）A．受体与PERV结合说明细胞膜具有进行细胞间信息交流的功能B．过程①②③④都需要模板、原料、能量和酶C．分别用35S和32P标记PERV的蛋白质和RNA以探究其遗传物质D．过程④需要猪细胞提供核糖体和tRNA等7．在黑暗中生长的植物幼苗通常表现为黄叶，称为黄化苗。

四种小型猪内源性逆转录病毒基因研究

四种小型猪内源性逆转录病毒基因研究

【 要】 目的 探讨西藏小 型猪与人血液流变学指 标间 的变 化规律 。方 法 采集成 年西藏 小型猪 和人的血 摘
液 样 品 ， 别 检 测 其 ＷＢ （ 、 、 切 变率 ）Ｐ Ｈ Ｔ、Ｓ 分 Ｖ高 中 低 、Ｖ、 Ｃ Ｅ Ｒ及 Ｆ 等 ５ 血 液 流 变 学 指 标 。结 果 （ ） 性 西 藏 小 型 ｉ 项 １雄 猪 的 １０－ 、０． 、ｓ１ｌ ＷＢ ５ｓ１３ｓ１５一 、ｓｌ Ｖ值 和 Ｆ 含 量 均 显 著 低 于 雌 性 （ ００ ，Ｐ＜００ ，Ｐ＜ ．５ ＇ ｉ Ｐ＜ ．５ ．ｌ ００ ，Ｐ＜０Ｏ ， ．ｌ Ｐ＜ ．１ ； ０Ｏ ）
８ ２
中 国 比较 医学 杂 志 ２０ 年 １ 第 １ 第 １ ０８ ０月 ８卷 ０期
Ｃ ｉ Ｊ ｏ ｐＭ ｄ ｈｎ ｍ ｅ Ｃ
，
Ｏ ｒｂ ｒ２ ０ Ｖｏ ． ８． ． ０ ｃｏ ｅ ０ ８． １ １ Ｎ０ １
四种 小 型猪 内源 性 逆 转 录 病毒 基 因研 究
李金泽 ， 岳 敏 ， 建 明 ， 玉珏 ， 为 望 张 王 顾
【 关键词 】 小 型猪 ； 内源性逆转 录病毒 ； 猪 拷贝数 ； 半定量 Ｐ Ｒ Ｃ
西 藏小 型猪 与 人血 液 流变 学 指 标 的 比较 分 析
袁 进 ， 清 洪 ， 吴 陈 丽 ， 嘉 宁 ， 为望 张 顾
（ 方 医科 大 学 实 验 动 物 中心 ， 州 ５０ １ ） 南 广 １５ ５
Ｉ 摘要 】 目的 分析五指山小型猪 、 巴马小型猪 和贵州香猪线 粒体 Ｄ Ａ控制 区碱基序列 ， Ｎ 比较研究 不同猪种
的 遗 传标 志 。 方 法 应 用 Ｐ Ｒ技 术 分 别对 这 三 种小 型 猪 的 血 液 总 Ｄ Ａ样 品 中 线 粒 体 Ｄ Ａ Ｄ ｌ ｐ区进 行 扩 增 ， Ｃ Ｎ Ｎ —ｏ ｏ 测

多基因编辑猪-猴心脏、肝脏、肾脏移植临床前研究初步报道

多基因编辑猪-猴心脏、肝脏、肾脏移植临床前研究初步报道

第１２卷　第１期２０２１年１月Ｖｏｌ．　１２ Ｎｏ．１Ｊａｎ．　２０２１器官移植Ｏｒｇａｎ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ【摘要】　目的　探讨目前国际上基因改造程度最大的基因编辑猪在临床前异种器官移植中的应用前景。

方法　将1只猪内源性逆转录病毒（PERV ）敲除联合3种主要异种抗原基因敲除以及抑制补体活化、调节凝血紊乱、抗炎抗吞噬的9种人源化基因转入猪（PERV-KO/3-KO/9-TG ）作为供体，获取其心脏、肝脏和肾脏，分别移植给3只恒河猴受体，建立猪-猴异种器官移植临床前研究模型。

观察血流重建后各移植物的功能状态并总结受体存活情况；监测移植物的血流动力学情况；比较各器官移植受体的血液学指标变化；观察移植物组织病理学表现。

结果　血流重建后各移植器官颜色红润、质地柔软、血流灌注状态良好。

术后1 d ，移植心脏、肝脏和肾脏均表现为动、静脉血流状态充盈，灌注情况良好。

心脏、肝脏和肾脏移植受体的术后存活时间分别为7 d 、26 d 和1 d 。

心脏移植受体术后1 d 肌酸激酶、肌酸激酶同工酶以及乳酸脱氢酶水平均升高，至术后6 d 逐渐恢复至接近正常水平。

术后7 d 各项指标均急剧升高。

肝脏移植受体术后2 d 天冬氨酸转氨酶水平升高，术后10 d 转氨酶基本恢复正常，但总胆红素持续升高。

术后12 d 天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平均出现升高，至术后15 d 达到高峰。

多基因编辑猪-猴心脏、肝脏、肾脏移植临床前研究初步报道张玄 王琳 张洪涛 杨诏旭 岳树强 杨雁灵 董海龙 陈敏 路志红 程亮 刘金成 俞世强 张更 秦卫军 李纪鹏 魏红江 杨璐菡 周亮 龙恩武 陶开山 窦科峰·论著　实验研究·结构式摘要转入人源化基因培育肝脏移植CRISPR/Cas9基因编辑恒河猴重建猪胚胎hCD46/hCD55/hCD59h β2M/hHLA-E/hCD47hTHBD/hTFPI/hCD39心脏移植基因编辑猪器官和人免疫系统更匹配且不含PERV肾脏移植敲除PERV敲除异种猪抗原基因供体猪PERV-KO GalT-KOβ4GaINT2-KO CMAH-KO体细胞DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2021.01.008基金项目：国家“973计划”项目（2015CB554100）；国家重点研发计划项目（2017YFC1103703）作者单位：710032 西安，空军军医大学西京医院肝胆外科（张玄、王琳、张洪涛、杨诏旭、岳树强、杨雁灵、陶开山、窦科峰），麻醉科（董海龙、陈敏、路志红），心脏大血管外科（程亮、刘金成、俞世强），泌尿外科（张更、秦卫军），实验外科（李纪鹏）；云南农业大学动物医学院（魏红江）；杭州启函生物科技有限公司（杨璐菡）；四川省医学科学院暨四川省人民医院实验动物研究所（周亮、龙恩武）通信作者：陶开山，主任医师，教授，博士研究生导师，Email:**********************；窦科峰，主任医师，教授，博士研究生导师，Email ：***************.cn·５２·第１２卷器官移植肾脏移植受体术后1 d 出现轻微蛋白尿，后因突发严重心律失常死亡。

猪作为异种器官移植供体的研究进展

猪作为异种器官移植供体的研究进展
［ 收稿 日期 】２ ０ —０ —２ ０６ ３ ０
［ 作者 简介 】邹文辉 （９ ２ ）男， １ ６ 一 ， 湖北十堰市人， 教授 ， 副 主要从
３． ＨＡ Ｒ １
・
Ｈ ＡＲ是用 猪 Ｘ Ｔ后 引起 的最严 重 的 问题 ， Ｒ 发 生 的 免疫 学 基 础 是 器 官 移 植 时 自发 产 生 的细 胞 ＨＡ 毒素 异源 反应 抗体 与猪 内皮 细胞 上 的碳水 化合 物 结构 的物 质结 合， 从而 导致 补体 串联 的激 活 ． 它是 人体
内预存的天然抗体及补体介导的抗异种血管内皮细胞的免疫排斥， 在血管吻合后数分钟至数小时发生， 并导 致 移植物 功能 的丧 失… ． 这是 因为猪 染色 体 中存 在 ａ ， 一１３一半 乳糖 苷转 移酶 （ 一１３ Ｔ） 因， ａ ， 一Ｇ 基
它可 以催化 糖 的合成 ， 从而 使猪 体 内细胞 表 面 都 携 带 有该 糖 分 子 ， 为 Ｇ ＡＩ 而 人 体血 液 中 刚 好存 称 ＧＴ ． 在 相应 的抗 体 ． 因此 ， 用猪 ＯＴ后 ， ＧＴ Ｇ Ａ１就可 作 为 抗原 成 分 ， 人体 内 的抗 体 识 别 ， 被 从而 在 补 体 系统 参与 下触发 ＸＴ后 的 ＨＡ ６． 体 自己的组织 在 补体反 应 造 成破 坏 之 前会 使 它 们 无效 ， 有 保 护 功能 Ｒ［ 人 ］ 没
小同人基本一致， 且生长期也基本一致； ②与人亲缘关系远， 传染疾病的机率小； ③妊娠期短， 产仔数多， 繁殖快， 后代生长快 ； ④可以利用基因工程将基因添加到其基 因组中或将某基 因敲除， 在培养细胞中进
行基 因修饰 要 比在 整个 动物 身 上做 实验容 易得 多 ， 可 以利 用 分子 生物 学 方 法在 转 录 后 水 平 上对 其 且

猪内源性逆转录病毒对异种组织器官移植影响的研究进展

邱 玉涛 龚海燕¨ ， ， 袁 静。
（． １深圳市光 明华侨食 品有 限公 司， 广东深圳 ５ ８ ０ ｝． １ １７ ２ 中国农科院上海家膏寄生 虫病研究所 ． 上海 ２ ０ ３ ｆ ０ ２ ２ ３第三军 医大学 ． ． 重庆 ４ ０３ ） ０ ０ ８
中圈 分 类 号 ：８ ８ ２ ｌ８ ２ ６ ￥ ５． ８￥ ５ ． ５ 文 献 标识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ７５ ３ （０ ６０ －０ １０ １ ０ －０ ８ ２０ ） ２０ ４—５
细胞具有 感染性 的且 存在 于正 常猪体 内的痛 反转录酶活性， 但不对猪致病， 所以未对其感染性做
毒， 在异种 组 织 器官移 植 过程 中可 能 向人 传 深层次的研究・ 直至 １９ 年， Ｐ 一 细胞与其 ９７ 发现 Ｋ １ ５ 播， 直接 威 胁 到 接 受 移 植 者 的 健 康 甚 至 生命 ， 他细胞共培养时 ， 其释放 的病毒粒子可感染人胚胎
存在很大相似性 ， 是异种器官移植的首选供体， 但在 中分离到另一种 Ｐ Ｒ Ｐ Ｒ － Ｌ ， Ｅ Ｖ（ Ｅ Ｖ ＭＳ ） 称为 Ｐ Ｒ － Ｅ Ｖ
发展和完善这一医疗措施时 ， 出现了两大难题： 其一 ｃ， 其长度为 ８１２ｂ ， 与长臂猿 自血病病毒和鼠 ３ ｐ 且 是猪与人的免疫学背景差异较大 ， 可能 引起强烈 的 白血病病毒具有非常高 的核酸序列 同源性 ・ 多种猪
这是异种组织 器官移植 首要 克服 的难题 。 由 肾 细胞‘ Ｋ ９ 细胞） Ｐ Ｒ Ｅ ２３ ｎ ，Ｅ Ｖ再次引起了人们
Ｒ 年。 Ｖ 才 对 ｌ近 来
蠢
．
Ｐ ＲＶ 的分 类 ， 人 类 和 其 他 动 物 的 危 害 常的猪细胞也可能产生感染性病毒粒子从而 染人 Ｅ 对

应用RNAi技术防控猪病毒病研究进展

Ｖｉ ｓＲｅ ，０ １ １ １ ２ ： ｒｓｉｇｔｅＶ５ｅ ｉ ｅｔｇ Ｊ ． ｒ ｓ ２ １ ， ６ （ ） ｏ ｕ
１ ５ １ ．
［ ７ Ｇａｎ ｎＣＡ， ｓ Ｆ ｎａ ｅ ｅ ａ．Ｅ ｒｅｃ ｆ ｅ ｐ ２］ ｇｏ ＭｕｉＮ，ｏ ｔｎ ｔ １ ｍｅｇｎｅｏ ｎｗ ｔ ｅ ｃ ｉ Ｇ， ａ ｙ
基 金项 目 ： 东省 自然 科 学 基金 项 目（ Ｒ ｏＯ ０ ２ 山 Ｚ ２ ｌＣＱ １ ） 作者简介 ： 吕素 芳 （ ９ ２ ） 女 ， 苏 东海 人 ， １８ － ， 江 助理 研 究 员 ， 士 ， 硕 主要 从 事 基 因 工程 与分 子 生物 学研 究 。 ＊通 讯 作 者
豢 豢 豢 粜 豢 张 豢 豢 求
Ａｂｓｒ ｃ ： ｒ ｉ ｅ ｃｒ ｏ ｉ ｕ ｙｐ （ ｔａ ｔ Ｐｏ ｃ ｎ ｉｃ ｖ ｒ ｓ ｔ ｅ ２ ＰＣＶ一 ２） ｉ ｈ ａ ａ ｉ ｅ ａ ｎｔｏｆａ ｃ ｌ ｃ ｉ ｉ ｅ ｓ ｙ ｒ ｍ ｅ ｎ ｓ ｔ ｅ ｃ ｕｓ ｔｖ ｇｅ ｏｌｅ ｔｏｎ ｏｆｄ ｓ ａ ｅ ｓ ｎｄ ｏ ｓｉ
ａ ｈ Ｎ Ｅ５ Ｂｅ ｃ Ｍ ２］
． ｍ ｉ ， ｍａ ｏ ｔ ｅ ｌ Ｃｈ ｍｅ ｉ ｏ — Ｓ ｔ Ｓ Ｍ Ｒａ ｍｏ ｒ ｈｙ Ｓ， ｔ ｈ ａ ｉ ｒｃ ｐ ｒ
ｃ ａ ａ ｔ ｒｓ ｔ ｆｒ ｃ ｍ ｂ ｎ ｎｔｐ ｒ ｉ ｅ ｃ ｒ ｏ ｉｕ ｙ ｅ ２ ｅ ～ ｈ ｒ ｃ ｅ ｉａ ｉ ｏ ｅ ｏ ｏｎ ｉ ａ ｏ ｃｎ ｉｃ ｖ ｒ ｓ ｔ ｐ ｘ
动 物 医 学 进 展 。０ ２ ３ （ ０ ：０ ７ ２ １ ，３ １ ） ７ —４
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖ ｅ ｅ ｉ ｒ ｅ ｉｉ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎａ ｙ Ｍ ｄ ｃｎｅ

四种小型猪内源性逆转录病毒基因研究

维普资讯
１Ｏ ６
实验动物与 比较 医学 Ｌ ｂ ｒ ｏｙ ｉ ｌｎ ｏ ａａｖ ￣ｃ ａ ｏａ ｒ Ａｎｍａ ａｄＣ ｍｐｒｔ ｅＭｅ ｍｅ ｔ ｉ
Ｊｎ２ ０，８３ ｕ ． ８２（） ０
四种小型猪 内源性逆转录病 毒基 因研 究
李 金 泽， 岳 敏， 张建 明， 玉珏 ， 为 望 王 顾 （ 南方 医科 大学 实验 动物 中心 暨 比较 医学研 究所 ， 州 ５ ０ １） 广 １５ ５
［ 摘要１ 目的 检测四种小型猪在 内源性逆转 录病毒基 因（Ｅ Ｖ 拷 贝数上的差异 ， 图找 出不含 ＰＲ ） 试
或含 有 较 低 拷 贝数 的 个体 或 品种 。方 法 采 用 半 定量 Ｐ Ｒ方 法检 测 了我 国四种 小 型猪 内源性 逆 Ｃ
转 录病毒基 因的拷 贝数 。 结果
贵州小型猪 、 五指 山猪 、 西藏小型猪 、巴马小型猪 的Ｐ Ｒ Ｅ Ｖ的拷
常用的小型猪 内源病毒 负载量较低 ， 表明其用于异种 器官移植研 究的可行性 。
［ 关键词 Ｊ型猪 内源性逆转 录病毒 贝数 、 猪 拷 半定量Ｐ Ｒ Ｃ
［ 中图 分类 号］ ３ ２ Ｒ一３ Ｑ９ — ３ ［ 献标 识码］ ［ 耄编 号 ］ ０ ４８ ４ （０ ８０ — １００ ５３ 文 Ａ 文 １ ０ －４ ８２ ０ ）３ ０ ６ —４
１ 主要 仪 器 设备 与试 剂 ． ２
中 国地 方 猪 种 在 地 域分 布 、进 化 程 度 等 方 面 存 在 着 较大 的差 异 ，具 有 良好 的 遗 传 多样 性， 易 容 找到 没有或低 拷 贝内源 病毒序 列 的品种 或 个体， 因此
本项 研 究主要 利用 半定 量 Ｐ Ｒ的方 法检 测 中国 的主 Ｃ 要几种 小 型猪 在猪 内源 性逆 转录 病 毒（Ｅ Ｖ 拷 贝数 ＰＲ ）

猪内源性逆转录病毒(PERV)γ1长末端重复序列(LTRs)的分子特性及鉴定

或少量 油性 食物 等） 调整 和药物 （ ） ＶＢ 等 治疗 。
３ 结 果
４ ２ 手 术 治疗效 果优 于保 守疗 法 会 阴疝 病 例 进 ．
行保 守疗 法 时 ， 由于该部 位 的特殊 性 （ 活动性 大且 无 固定 附着 点） 外 固定 很 难 确实 ， ， 几乎 起 不 到 治 疗作
大 小 的导 管 。
前 列腺或 膀胱 难 以复位 时 ， 先抽 出积 液或 尿液 ， 应 充 分 止血 ， 定无 误后 还 纳 回腹 腔 。 确
２２３ 缝 合 ．． 用 １ 丝线依 次穿 过肛 门外 括 约 肌 、 Ｏ
闭孔 内肌 和提肛 肌 的 中部 ， ２ 作 ～３个 扣 瓣 缝 合 或 ３
阴疝 的复发 有一 定作 用 。
猪 内源 性 逆 转 录病 毒 （ Ｅ Ｐ ＲＶ） Ｉ长 末 端 重 复 序 列 ７
（ ＴＲｓ 的 分 子 特 性及 鉴 定 Ｌ ）
Ｊ ｅ ｎＨｕ ａ－ Ｗｏ ｈ等 著 晋大鹏 摘 译
摘 要 ： 基 因 组 中 的 猪 内 源 性 逆 转 录 病 毒 （ Ｅ Ｖ） １ 猪 Ｐ Ｒ ７ 可能 是 异 种 移 植 （ 猪 到 人 ） 的有 害 因子 。众 所 周 知 ， 从 中 长末 端 重 复 序 列 （ Ｔ ） 强 启 动 元 件 ， 够 控 制 Ｐ Ｒ 元 件 和 Ｌ Ｒｓ是 能 Ｅ Ｖ 邻 近 功 能 基 因 片 段 的转 录 活 性 。 本 试 验 通 过 生 物 信 息 学 和 试 验 分 析 对 猪 组 织 中 Ｐ Ｒ １Ｌ ｓ的 转 录 活 性 进 行 了 研 Ｅ Ｖ７ ＴＲ 究 。经 Ｒ － Ｃ Ｔ Ｐ Ｒ扩 增 及 测 序 鉴 定 出 ６ ９个 不 同 的 Ｌ ＴＲ 转 录
３ １ 手 术结 果 ．
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

猪内源性逆转录病毒的分子研究进展
摘要】 PERV是一种整合到猪基因组中的逆转录病毒，在异种移植、生物人工肝
等技术中可能感染人。

PERV存在于猪的各种组织器官中，并可体外感染人源细胞及细胞系，其复制、表达及对受体细胞的感染能力均与其分子结构相关，本文就PERV的分子方面进行综述，以期对PERV的进一步研究有所帮助。

【关键词】猪;内源性逆转录病毒;分子
【中图分类号】R394 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）17-0033-02
The pig endogenous retroviruses molecules is reviewed
Yue Shuai. Zhujiang Hospital of Southern Medical University, Guangdong Province, Guangzhou 510280, China
【Abstract】Passing PERV is an integrated in to the pig genome retroviruses, in xenotransplantation, biological artificial liver technology can infect people. Passing PERV exists in pigs of all kinds of tissues and organs, and can infection anthropogenic cells and cell lines in vitro, the replication, expression and infection ability of receptor cells are related to its molecular structure, molecular aspects were summarized in this paper, the passing PERV, in order to help the further study of the passing PERV.
【Key words】The pig; Endogenous retroviruses; Molecular
随着医学的飞速发展，异种移植及生物人工肝逐渐成为可能，供体器官的选
择成为该技术面临的重要问题之一。

由于猪的解剖结构等方面都与人较为相似，
因而成为异种移植较理想的供体来源，但随着检验方法的进步，猪源供体存在两
大主要问题，其一：猪与人的免疫背景差异较大，可能引起强烈的超急性免疫排
斥反应，但可以通过敲出Gal基因或是在供体细胞内转入补体调节因子来解决；
其二：生物安全问题，生物饲养的科学化管理可以避免部分微生物的感染，但是PERV在长期的进化中已整合到猪的基因组中，难以在供体猪器官中去除，并可能导致人兽共患病的发生。

1.PERV的分子结构
PERV是一种C型逆转录病毒，其内有三个开放阅读框架（gap、pol、evn）。

evn基因在猪基因组中高度变异，根据衣壳蛋白基因亚家族的不同PERV有三种亚型分别为PERV-A、PERV-B、PERV-C。

其中PERV-A、PERV-B可以感染不同种属的
细胞甚至是人源细胞，但是PERV-C只能感染同种属细胞。

[1]在体外培养的过程
中发现，PERV-A和PERV-B可以形成重组体PERV-A/C，它对人细胞株的易感性比PERV-A增强500倍。

2.PERV在猪基因组中的插入
不同猪种系中PERV有11个不同的插入位置，包括3个PERV-A的插入位置、6个PERV-B的插入位置，2个PERV-C的插入位置，且1347C1, B3-7F，C2-6C三个
位置拥有完整的开放阅读框架结构，可以表达完整的病毒颗粒。

[2]Moalic等发现
大多数可以感染人源细胞（HEK293）的PERV都插入在了5kb的CpG岛区域，利
用KNP和NIH小型猪染色体文库筛选11个PERV插入位置。

不同的引物序列对101只6个种族的猪进行检测，发现其中60%包含一个PERV-A（907F）的插入位
置和5个PERV-B（B3-3G,B3-7G,742H1,1155D9 ,465D1）的插入位置；2个PERV-A
的插入位置(A1-6C，1347C1)和1个PERV-B(B3-7F)的插入位置在杜洛克猪中不存在，2个PERV-C(C2-6C，C4-2G)的插入位置只存在于韩国自然猪及小型猪细胞内。

猪
的不同种群，甚至是同一种群中的不同个体，PERV的插入位置都有所区别，因此
在进行异种移植等治疗时可对不同种群的猪进行选择，以降低PERV感染的危险性。

[3]
3.PERV在猪细胞中的表达
在长期的进化中PERV已整合到猪的基因组中，猪的各种组织器官均可表达PERV，但在不同的猪种系内PERV的复制能力有所差别。

[2]对来源于不同种系猪
的外周血单核细胞进行有丝分裂原刺激或无刺激，发现尤卡坦微型猪等种系可表
达高滴度的PERV，尤其是385型。

猪的各器官均可表达PERV但表达的滴度有所
不同，小型猪的肺及胸腺组织、大白猪的肾脏和肝脏等部位表达的滴度较高。

[4-5]为进一步明确猪不同器官PERV的表达情况，Iris Bittmann等对来源尤卡坦微型
猪358型的38种不同的器官、组织进行检测，通过扩增gap、pol基因的RNA对
猪组织细胞中PERV的RNA进行定量评估，结果表明肺、淋巴结、脾脏表达水平
最高；肺、脾脏可表达PERV-A的env基因RNA；只有肺可以高滴度表达PERV-C；只有猪肾脏组织中可以检测到PERV-A/C的DNA，但并未检测到其表达的RNA。

利用Gap蛋白及p15E进行免疫组化检测，发现肺、脾脏、淋巴结均可表达PERV
的蛋白质，脾脏细胞中表达水平最高。

[6]有学者对小型猪各器官、组织PERV表
达情况进行研究，肺、胸腺、淋巴结、脾脏均可表达，但以肺、胸腺表达水平最高，肾脏、心脏不表达。

[5]大白猪种中肾脏和肝脏的PERV表达能力最强。

[5]PERV在脾脏、淋巴结组织的高表达，可能与这些组织中的免疫反应相关。

猪
外周血单核细胞中PERV表达情况可基本反映出相应种属猪组织器官的表达情况，因此，在临床应用猪源供体时可参考PERV在单核细胞中的表达情况，对供体组
织器官进行选择。

[6]
4.结语
总之，随着猪源器官、组织、细胞在多种临床技术中的应用，PERV可能引起的人兽共患病越来越受到人们的关注，已有实验表明PERV可以在体内及体外感
染细胞及细胞系，因此，对于供体器官、组织的选择较为重要。

在猪的不同种群
中PERV的插入及表达情况都有所不同，而这也将影响PERV的感染能力。

目前，
对于何种种群来源的猪供体对人的感染可能性最小，仍需进一步研究。

【References】
[1] Takeuchi, Y.,et al., Host range and interference studies of three classes of pig endogenous retrovirus. J Virol, 1998. 72(12): p. 9986-91.
[2] Yu, S.L., et al., Characterization of porcine endogenous retrovirus clones from the NIH miniature pig BAC library. J Biomed Biotechnol, 2012. 2012: p. 482568.
[3] Jung, W.Y., et al.,Characterization of insertional variation of porcine endogenous retroviruses in six different pig breeds. Asian-Australas J Anim Sci, 2012.
25(10): p. 1357-63.
[4] Akiyoshi,D.E., et al., Identification of a full-length cDNA for an endogenous retrovirus of miniature swine. J Virol, 1998. 72(5): p. 4503-7.
[5] Clemenceau, B., et al., Porcine endogenous retroviral mRNAs in pancreas and
a panel of tissues from specific pathogen-free pigs. Diabetes Metab, 1999. 25(6): p.
518-25.
[6] Bittmann, I., et al., Expression of porcine endogenous retroviruses (PERV) in different organs of a pig. Virology, 2012. 433(2): p. 329-36.。