高三生物选修微生物的培养知识点

微生物培养知识点总结高中一、微生物培养的基本概念微生物培养是指在实验室条件下，利用培养基等培养物质，使微生物在一定的温度、湿度和气氛条件下生长繁殖的过程。

微生物培养是微生物学实验的基础，通过微生物培养可以获得大量的微生物菌株，进行鉴定、生理生化性质和应用价值的研究。

微生物培养技术在医学、环境科学、食品工业等领域都具有重要的应用价值。

二、微生物培养的基本要素1. 培养基培养基是支持细菌或真菌生长繁殖的物质，一般由碳源、氮源、磷源、无机盐和生长因子等组成。

根据微生物生长的特点和营养需求，培养基可分为无机培养基和有机培养基。

无机培养基是以无机盐为主要成分，有机培养基则含有有机物质。

微生物培养需要根据不同微生物的特性选择合适的培养基，以促进微生物的生长和繁殖。

2. 温度微生物培养的温度是微生物生长的关键条件，不同微生物对温度的适应范围不同。

一般来说，细菌适宜的培养温度为30-37摄氏度，而真菌则适宜的培养温度通常为25摄氏度左右。

因此，在微生物培养实验中，要根据具体的微生物种类选择适宜的培养温度。

3. 湿度微生物在培养过程中需要适当的湿度条件来维持细胞内外环境的稳定性。

通常情况下，微生物培养所处的环境湿度应保持在60-80%之间，这样可以促进微生物的生长和繁殖。

4. 氧气氧气是微生物生长所必需的气体，绝大多数微生物都需要氧气来进行呼吸作用。

在微生物培养过程中，需要保持适当的氧气供应以促进微生物的生长。

不同微生物对氧气的需求量和适应能力不同，因此在微生物培养实验中需要根据具体微生物的需求来调节氧气的供应。

5. pH值微生物的生长和繁殖需要适宜的pH条件，不同微生物对pH值的适应范围各有不同。

一般来说，细菌的适宜pH范围为6.5-7.5，而真菌则适宜的pH范围通常为4-6。

因此，在微生物培养实验中需要根据具体的微生物种类来调节培养基的pH值，以促进微生物的生长和繁殖。

三、微生物培养的常用技术方法1. 细菌单菌落分离在微生物培养实验中，通过单菌落分离可以获得纯种细菌，为细菌的鉴定和分类提供了基础。

选修一专题二课题1微生物的实验室培养考点一培养基1、概念？种类？在液体培养基中加入？后可以制成固体培养基2、琼脂的来源？本质？特性？（P14最左侧）3、培养基一般都含有哪些成分？4、培养基在提供主要营养物质的基础上，还需要满足微生物生长的哪些要求？培养乳酸菌时需要添加？培养霉菌是需要将PH调至？培养细菌是需将PH调至？考点二无菌技术1、获得纯净培养物的关键是？2、如何避免杂菌的污染？3、消毒的概念？常用的消毒方法有哪些？4、灭菌的概念？常用的灭菌方法有哪三种？5、灼烧灭菌的对象A:微生物的接种工具，如？直接在酒精灯火焰的？灼烧B:在接种过程中，？等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌6、干热灭菌的条件？对象？干热灭菌过程中灭菌对象要用？包裹严密（附录4）灭菌物品为什么不能与干热灭菌箱内壁的铁板接触？（附录4）7、高压蒸汽灭菌的条件？过程？（附录4）对象：如培养基8、除了消毒和灭菌，实验室里还可以用？方法进行消毒考点三制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、步骤？2、灭菌过程中用什么方法？3、倒平板时的温度是？过程？倒平板后平板倒置的原因？（即可防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快地挥发）考点四纯化大肠杆菌1、微生物接种的方法最常用的有？2、菌落的概念？3、平板划线法的概念？操作过程？用的工具？（接种环）4、稀释涂布平板法的概念？过程？用的工具？（涂布器）5、大肠杆菌的培养温度？是否需要设置空白对照？（P20最上）对照组有菌落生长说明什么？6、为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，对于频繁使用的菌种可以采用？方法。

具体过程？此方法的缺点？对于需要长期保存的菌种，可以采用？方法。

人教版高级高中生物选修一专题二微生物的培养与应用知识点归纳文件排版存档编号：[UYTR-OUPT28-KBNTL98-UYNN208]专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。

·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。

在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。

微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。

合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。

·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。

如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。

异养微生物只能利用有机碳源。

单质碳不能作为碳源。

·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。

如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。

只有固氮微生物才能利用N2。

·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

1、培养基的类型及其应用注意：（1）选择培养基：①特点：培养基中加入有利某种微生物生长繁殖所需的营养物质，以抑制或阻止不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长；②用途：选择出用于培养、分离出特定的微生物 (如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐) （2）鉴别培养基：①特点：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或者化学药品；②用途：鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)2、培养基的营养成分：水、无机盐、碳源、氮源。

还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。

3、无菌技术——（微生物接种技术的核心）获得纯净培养物的关键是：防止杂菌污染。

（1）消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。

分为煮沸消毒法，巴氏消毒法（不耐高温的液体，如牛奶。

原因：可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营养成分不被破坏。

）化学药剂消毒法（如酒精、氯气、石碳酸等），紫外线消毒法（原理：破坏DNA的结构）。

（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

分为灼烧灭菌法（接种环、接种针等金属工具、试管口）、干热灭菌法（吸管、培养皿等玻璃器皿、金属用具，所用器械是干热灭菌箱）、高压蒸汽灭菌（培养基、无菌水等，所用器械是高压蒸汽灭菌锅）（3）防止杂菌污染的操作：在酒精灯火焰旁拔出锥形瓶瓶盖；在酒精灯火焰旁打开培养皿一条缝；打开的锥形瓶的瓶口通过火焰；平板冷却凝固后倒置。

4、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算—称量—溶化—灭菌—倒平板（1）各营养成分都有且有一定的比例。

牛肉膏提供碳源、氮源和生长因子等；蛋白胨提供碳源、氮源和生长因子等；琼脂作为凝固剂。

（2）要将平板倒置的原因：防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

5、纯化大肠杆菌（1）纯化方法：微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。

高中生物选修微生物实验室培养介绍在高中生物教学中，微生物实验是一项重要的选修内容。

通过实验观察和培养微生物，学生可以加深对微生物的了解，并掌握一些基本的实验技巧。

本文将介绍一种适合高中生选修微生物实验的实验室培养方法。

本次实验的目的是培养并观察微生物，了解微生物的形态特征和生长规律。

实验器材和试剂•培养皿•培养基（如琼脂）•显微镜•移液管•级差显微镜•高温灭菌器步骤一：准备培养基1.将培养基分装到培养皿中，每个培养皿装满一层培养基即可。

2.将装满培养基的培养皿放入高温灭菌器中，进行高温灭菌处理。

灭菌温度和时间可以根据实验要求进行设置，常用的灭菌温度为121摄氏度，灭菌时间为15-20分钟。

步骤二：获取微生物样本1.从实验室常见的环境中，如空气、水或物体表面，使用移液管或棉签采集微生物样本。

2.将采集到的微生物样本均匀涂抹在培养基表面，可以在培养皿上划分格子，以便观察不同微生物样本的生长情况。

步骤三：培养1.将涂有微生物样本的培养皿密封放置在恒温箱中，一般温度设置为28摄氏度。

恒温箱可以提供恒定的温度和湿度条件，有利于微生物的生长。

2.定期观察培养皿上微生物的生长情况，可以使用级差显微镜进行观察。

观察时可以记录下微生物的形态特征、数量和分布情况。

实验注意事项1.进行实验时应注意无菌操作，避免外界细菌的污染。

2.在进行观察和操作时，避免将培养皿暴露在外界环境中，以免细菌和霉菌的污染。

3.培养皿和培养基的选择应根据实验要求进行，不同的微生物可能对不同的培养条件和营养需求有所差异。

实验结果和分析通过观察培养皿上微生物的生长情况，我们可以发现微生物的形态特征、数量和分布情况。

不同微生物可能呈现不同的形态，如球菌、杆菌、弧菌等。

同时，我们也可以观察到微生物在不同条件下的生长速度和生长规律，以及它们对环境的适应能力。

实验总结通过本次实验，我们学习了一种适合高中生选修微生物实验的实验室培养方法。

通过观察和培养微生物，我们加深了对微生物的了解，掌握了一些基本的实验技巧。

专题二微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、课题背景1．研究和应用微生物的前提是。

2．在实验室培养微生物，一方面需要，另一方面需要。

二、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质称为培养基。

2．种类：根据培养基的物理性质可将培养基可以分为、和半固体培养基。

3．琼脂：是一种从红藻中提取的，在℃以上熔化，在℃以下凝固，在常规培养条件下呈现。

琼脂是制备培养基时最常用的剂。

4．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加，培养霉菌时需将培养基的pH调至，培养细菌时需将pH调至或，培养厌氧微生物时则需要提供的条件。

5．牛肉膏，蛋白胨来源于，含有、和等营养。

三、无菌技术1．获得纯净培养物的关键是防止的入侵。

2．无菌技术围绕着展开，主要包括以下几个方面：(1)对实验操作的、操作者的衣着和进行清洁和。

(2)将用于微生物培养的器皿、和等进行。

(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。

(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_____ ______相接触。

3．无菌技术的目的：(1)防止，(2)避免。

4．消毒和灭菌四、大肠杆菌的纯化培养(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：1．计算：依据是培养基 的比例，计算配制某一体积（如100ml ）的培养基时，各种成分的用量。

2．称量：牛肉膏比较 ，可用玻棒挑取到 上，同其一块称量。

牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要 ，称后及时 。

3．溶化： 和称量纸＋少量的水（ ）取出_________→ 加_________和_________ →加 (注意：不断用玻璃棒搅拌，防止_____________而导致_____________)。

当_________完全熔化后→ 补加蒸馏水至100 mL 。

调节__________后再进行灭菌。

4．灭菌⎩⎪⎨⎪⎧培养基：_________灭菌培养皿：_____灭菌5．倒平板：待培养基冷却至_____左右时，在 附近倒平板。

专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。

·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。

在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。

微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。

合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。

·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。

如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。

异养微生物只能利用有机碳源。

单质碳不能作为碳源。

·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。

如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。

只有固氮微生物才能利用N2。

·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

第一章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用一、微生物的基本培养技术1.研究和应用微生物的前提（即发酵工程的重要基础）：防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物。

（P9）2.在实验室培养微生物的要求：(1)为微生物提供合适的营养和环境条件(培养基）。

(2)要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来（无菌技术）。

（P9）（一）培养基的配制1．培养基概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

（P9）2.培养基作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。

（P9）3．培养基的分类（按照物理性质分类）（P9）（1）液体培养基：不含凝固剂（如琼脂），呈液体状态。

用途：扩大培养获得大量菌种、常用于工业生产。

（2）固体培养基：含凝固剂（如琼脂），呈固体状态。

用途：分离、计数、鉴定等。

拓展了解：培养基的分类（按照化学成分分类）（1）天然培养基：含化学成分不明确的天然物质。

用途：工业生产。

（2）合成培养基：培养基成分明确。

用途：分类、鉴定。

培养基的分类（按照用途分类）（1）选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。

用途：培养、分离出特定微生物。

（2）鉴别培养基：在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物。

用途：鉴别不同种类微生物。

4.怎样将液体培养基制成固体培养基？加入适量琼脂。

（P9）5.实验室中最常用的培养基之一：琼脂固体培养基。

（P9）6.微生物在琼脂固体培养基的表面或内部生长，可以形成菌落。

（P9）7.培养基的基本成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物的需求。

（P10）质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O28.碳源:（1）概念：提供碳元素的物质。

（2）分类:无机碳源，如CO2、CO32-、HCO3-等。

有机氮源，如葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等。

（3）适用范围（一般情况下）添加无机碳源培养基用来培养自养微生物；添加有机碳源培养基用来培养异养微生物。

微生物培养技术[1][培养基技术]成分分类条件：pH、氧气、特殊营养物质常见培养基消毒与杀菌无菌技术的目的：•防止实验室的培养基被其它外来微生物污染•防止实验操作人员被污染培养基使用完后的处理：•进行高压蒸汽灭菌，然后丢弃目的：分离细菌，得到单菌落[平板划线法][稀释涂布平板法]稀释涂布平板法•用稀释涂布平板法进行接种•选用一定的稀释范围，使菌落数在30-300之间•稀释倍数通常为103-106•两个或多个细胞有时会连在一起，只形成一个菌落。

因此，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

•统计结果一般用菌落数而不用活菌数表示显微镜直接计数法/血细胞计数板计数法•显微镜直接计数/血细胞计数板计数法也是测定微生物数量的常用方法•由于观测到的细胞包括死细胞，因此统计结果偏大滤膜法•将已知体积的水过滤•将滤膜放在鉴别培养基上培养•根据培养基上菌落的数目，计算出水样中目标细菌的数量选择培养•筛选出所需要的微生物•增加所需要的微生物的浓度鉴别培养观察菌落特征•形状•大小•隆起程度•颜色临时保藏接种→培养→冰箱保藏→转移→保藏•将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养•菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏•每3-6个月，要重新将菌种从旧的培养基转移到新鲜的培养基上❖保存时间不长，菌种容易被污染或产生变异甘油管藏装甘油→灭菌→加菌液→混匀→冷冻箱保存•在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油，灭菌•将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀•放在-20℃的冷冻箱中保存❖供长期保存菌种[7][实验原则]检测是否有杂菌污染/检测培养皿灭菌是否合格❖设置空白对照•取一个空白的培养皿，滴加无菌水，置于相同条件下•若没有菌落生成，说明没有杂菌的污染判断选择培养基是否起到筛选作用❖用全培养基作为对比•若全培养基中的菌落数明显多于选择培养基的菌落数，说明选择培养基起到了筛选作用进一步鉴定分离出来的菌种❖部分微生物可以利用其它微生物的代谢分解产物，从而在不含某些必要营养物质的培养基上存活❖运用生物化学的方法进行鉴定。

高三生物微生物知识点高三生物学科是对学生知识的整合和综合，其中微生物是一个重要的知识点。

微生物是一类非常微小的生物体，包括了细菌、真菌和病毒等等。

本文将从不同角度探讨高三生物中关于微生物的知识点。

一、微生物的分类微生物的分类是高三生物学中的基础知识点。

根据生物学的分类系统，微生物主要分为细菌、真菌和病毒三类。

细菌是单细胞的微生物，具有细胞壁，可以利用光能、化学能或有机物等进行自养。

真菌是多细胞的微生物，体内没有叶绿素，主要通过分解有机物质来获取营养。

病毒是一种非细胞病原体，其寄生在宿主细胞内进行繁殖。

二、微生物的生活特性微生物的生活特性是高三生物学中的重要知识点，它们具有多样化的生活方式。

首先，细菌具有较强的适应性，可以在各种环境中生存，并具有不同的生活方式。

其次，真菌是一种寄生生物，它们可以寄生在植物和动物的组织中，对宿主造成危害。

再次，病毒具有侵染性和寄生性，它们依赖于宿主细胞来进行繁殖和生存。

三、微生物与人类的关系微生物与人类的关系是高三生物学中的重要知识点之一。

微生物对人类有积极的作用，例如参与人类的生物循环、维持生物多样性以及用于生产食品等。

然而，微生物同样也对人类带来了一定的危害，例如引发各种传染病、导致食品腐败以及破坏环境等。

因此，正确地认识和管理微生物与人类的关系对于保护人类健康和生态环境具有重要意义。

四、微生物与环境的关系微生物与环境的关系是高三生物学中的重要知识点之一。

微生物对环境具有重要的生态功能，例如参与有机物的分解、营养物质的循环以及氮的固定等。

另一方面，环境条件也对微生物的生存和繁殖产生影响，例如温度、湿度、光照等因素都是微生物生长和活动的关键因素。

因此，保护环境和合理利用微生物资源对于维持生态平衡和可持续发展具有重要意义。

五、微生物的应用微生物的应用是高三生物学中的重要知识点之一。

微生物在生物工程、食品工业、医药、生态修复等领域具有广泛的应用价值。

例如，利用微生物进行酒精发酵、面包发酵等食品加工过程；利用微生物合成药物来治疗疾病；利用微生物降解有机污染物来进行生态修复等。

专题二微生物的培养与应用1.实验室培养微生物需要解决哪两方面的问题?液体培养基和固体培养基的作用分别是什么?培养基中应具备哪些营养物质?实验室培养微生物要解决两方面问题:(1)需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件；(2)防止外来杂菌的入侵。

液体培养基的作用:广泛应用于实验研究及大规模工业生产中，有利于广泛获得大量菌体或代谢产物。

固体培养基的作用:广泛应用于微生物的分离培养、菌种鉴定和保藏。

培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

2.霉菌和细菌适宜的pH分别是什么?消毒和灭菌的区别是什么?培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。

消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

3.消毒和灭菌方法分别有哪些?适用范围分别是什么?实验室中常用的消毒方法:巴氏消毒法(如牛奶)、化学药制进行消毒(如酒精擦拭双手、氧气消毒水源)、实验室还用紫外线或化学药物消毒(如接种室、接种箱或超净工作台)、煮沸消毒法。

实验室中常用的灭菌方法: 灼烧灭菌(如接种环、接种针、或其他金属用具)、干热灭菌(如玻璃器皿、吸管、培养皿和金属用具)、高压蒸汽天菌(培养基)。

4.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是?什么时候调节叫值?平板为什么要倒置?配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤:计算一称量+溶化→灭菌→倒平板。

调pH值应该在溶化后，灭菌前。

平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。

将平板倒置，可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

5.平板划线法的操作过程是什么?平板划线法的操作流程:(1)将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红；(2)在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞；(3)将试管口通过火焰；(4)将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液；(5)将试管口通过火焰，并塞上棉塞；(6)左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。

微生物的培养技术一、培养基1、概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

2、营养组成：一般都含有水、碳源（二氧化碳、糖类等）、氮源（尿素、牛肉膏、蛋白胨等）和无机盐。

此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。

3、种类：①按照物理性质可分为液体培养基（不加凝固剂）、半固体培养基（加凝固剂（如琼脂））和固体培养基（加凝固剂（如琼脂））。

②按照化学成分可分为天然培养基（化学成分不明确）和合成培养基（培养基成分明确）。

③按照功能可分为选择培养基（培养基中加入某些化学物质，依据微生物对某些物质的特殊需求或抗性，从众多微生物中分离所需的微生物）和鉴别培养基（培养基中加入某种指示剂或化学药品，通过产生特定的颜色或其他变化，鉴别不同种类的微生物）。

4、培养不同微生物所需pH不同：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0。

5、配制培养基要做到目的明确、营养协调、pH适宜。

用高压蒸汽灭菌，冷却至50℃左右时倒平板操作。

二、无菌技术1、含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法，以获得纯净培养物。

2、关键：防止外来杂菌的入侵。

3、常用方法：灭菌和消毒。

4、不同对象的无菌操作方法(连线)5、消毒与灭菌区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。

消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。

适合用于操作空间、操作者的衣着和手等。

灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

适合用于接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。

三、大肠杆菌的纯化培养1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算→称量→溶化→灭菌→倒平板②倒平板的方法及注意事项a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。

专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。

·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。

在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。

微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。

合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。

·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。

如CO、 NaHCO等无机碳源；糖类、石油、23花生粉饼等有机碳源。

异养微生物只能利用有机碳源。

单质碳不能作为碳源。

·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。

如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。

只有固氮微生物才能利用N 。

2·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH 调至酸性，培养细菌是需要将pH 调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

课题1 微生物的实验室培养一、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

1、★种类：培养基按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基（和半固体培养基）。

区别：液体培养基中加入凝固剂琼脂制成琼脂固体培养基，是实验室最常用的培养基之一。

结果：微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

2、★化学成分：包括水、无机盐、碳源、氮源等。

★培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养厌氧型微生物需要提供无氧条件，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，二、无菌技术1、研究和应用微生物的前提是防止杂菌入侵，获得纯净的微生物。

★获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。

注意：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

★无菌技术目的：防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，有效避免操作者自身被微生物感染。

★2、消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子）。

石炭酸或煤酚皂等消毒液消毒，再用紫外线照射三、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基★1、方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

（溶化后灭菌前调PH）①称量时，放在称量纸上称量；②熔化时，加入琼脂，补加蒸馏水至100ml；③灭菌前调PH；④待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。

★2、倒平板操作的步骤：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。

②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。

③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。