不同类型重症药疹患者外周血淋巴细胞亚群分析及其临床意义_孙杰

强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞亚群的检测及临床意义摘要：目的了解强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞亚群变化规律，研讨患者体内的免疫功能状态。

方法采用流式细胞术分别检测患者组及对照组外周血T细胞亚群，B细胞与NK细胞水平，并对结果进行比较分析。

结果CD3+T，CD4+T，B细胞百分率及CD4+/CD8+均明显高于对照组，且差异具有统计学意义（P<0.01或P<0.05），而NK细胞百分率显著低于对照组（P<0.01），CD8+T细胞百分率与正常对照组差异无统计学意义（P>0.05）.结论强直性脊柱炎患者机体免疫功能存在一定程度的紊乱，检测患者淋巴细胞亚群的变化具有重要的临床意义。

关键词：强直性脊柱炎；Ｔ细胞亚群；流式细胞术强直性脊柱炎是一种主要侵犯脊柱，并累及骶髂关节和周围关节，以慢性进行性炎症为主要表现的自身免疫性疾病。

近年来，AS发病机制的研究进展越来越提示人们该病与患者自身免疫功能的异常密切相关[1]，本文运用流式细胞仪对AS患者外周血T细胞亚群进行了检测，旨在探讨T细胞亚群在AS发病机制中的作用。

1材料和方法1.1研究对象60例AS患者，均符合1984年修订的纽约标准[2]。

其中男45例，女15例，年龄18~70岁，为本院风湿科2009~2015年入住病人。

正常对照组选择本院体检中心健康体检人群20例，男16例，女4例，年龄23~73岁。

1.2主要试剂和仪器PAS流式细胞仪，荧光抗体CD3-percp/CD4-FITC/CD8-PE，CD3-FITC/CD16CD56-PE，CD19-CY5以及溶血素与鞘液等淋巴细胞亚群测定试剂。

1.3方法所有对象在早晨空腹采集静脉血2ml，采用EDTA抗凝，标本于6h内处理并上流式细胞仪分析。

1.4统计学分析所有统计学处理均采用SPSS17.0软件进行，数据以（±s）表示，计量资料组间比较采用t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

A Dissertation Submitted to Huazhong University ofScience and Technology for the Degree ofMaster of MedicineThe study of peripheral blood Lymphocyte Subsets in myasthenia gravisCandidate : Lai XiaoyinMajor : NeurologySupervisor : Prof. Bu BitaoHuazhong University of Science & TechnologyWuhan 430074, P. R. ChinaMay, 2014独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。

尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。

对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式表明。

本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。

学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学习有权保留并向国家有关部分或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。

本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。

保密□，在___年解密后使用本授权书。

本论文属于不保密□。

（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目录中文摘要 (1)Abstract (2)引言 (4)研究对象 (7)实验材料 (8)实验方法 (9)结果 (11)讨论 (29)参考文献 (35)综述 (39)参考文献 (44)附录 (48)致谢 (49)华中科技大学硕士学位论文重症肌无力患者外周血中淋巴细胞亚群的相关研究中文摘要目的：对不同临床分型及同一临床分型中症状严重程度不同的重症肌无力（MG）患者的临床特点和外周血中淋巴细胞亚群的变化进行分析，研究MG患者外周血中淋巴细胞亚群的改变以及这种改变与重症肌无力患者病情严重程度的关系。

外周血淋巴细胞亚群的临床应用理论说明1. 引言1.1 概述外周血淋巴细胞亚群是指在外周血液中存在的不同类型的淋巴细胞，它们在免疫系统中起着重要的作用。

随着医学技术的进步，越来越多的研究将外周血淋巴细胞亚群与各种疾病之间的关系联系起来。

通过对外周血淋巴细胞亚群进行分析和检测，可以为临床诊断、治疗和预后评估提供有价值的信息。

1.2 文章结构本文将会围绕外周血淋巴细胞亚群的临床应用展开介绍和探讨。

首先，将详细介绍外周血淋巴细胞亚群的定义和分类方法。

其次，将重点讨论外周血淋巴细胞亚群在炎症性疾病中的应用以及在肿瘤诊断和治疗中的应用。

同时，本文还将从理论角度对免疫学原理与外周血淋巴细胞亚群之间的关系进行说明，并介绍流式细胞术在外周血淋巴细胞亚群分析中的原理与方法。

最后，将对外周血淋巴细胞亚群变化与临床意义展开理论探讨。

1.3 目的本文的目的是系统性地总结和阐述外周血淋巴细胞亚群对临床应用的重要性。

通过对相关理论知识的说明和实际应用案例的引用，旨在增进读者对该领域的理解和认识，并为临床医生、研究人员以及其他感兴趣的读者提供有关外周血淋巴细胞亚群的全面知识以及其在各种疾病中的应用前景展望。

2. 外周血淋巴细胞亚群的临床应用2.1 外周血淋巴细胞亚群的定义与分类外周血淋巴细胞是体内主要的免疫细胞之一，包括T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞。

这些淋巴细胞可以进一步分为不同的亚群。

T细胞是外周血淋巴细胞中最常见的类型，其亚群有CD4+辅助T细胞、CD8+杀伤性T细胞和调节性T 细胞。

B 细胞在体内生成抗体以对抗感染。

而NK 细胞则能直接识别并杀伤癌细胞和病原体感染的靶标。

根据特定表面标记物的表达，如CD4、CD8、CD19和CD56等，可以将外周血淋巴细胞进一步分为不同的亚群。

每个亚群具有不同功能，并在机体免疫应答中发挥重要作用。

2.2 外周血淋巴细胞亚群在炎症性疾病中的应用外周血淋巴细胞亚群在炎症性疾病的诊断和治疗中发挥着重要作用。

EV71感染重症病例外周血淋巴细胞亚群分析及意义目的对EV71感染重症病例及健康对照组患儿进行外周血淋巴细胞亚群测定及分析，以期能为临床工作提供实验室依据。

方法采用流式细胞仪术检测淋巴细胞亚群CD3T淋巴細胞（%）、CD4T淋巴细胞（%）、CD8T淋巴细胞（%）、CD4/CD8比值。

结果EV71重症重型组较对照组CD3、CD4、CD8百分比升高；EV71重症危重型组较其余2组CD3、CD4百分比减低，CD4/CD8比值降低，差异均有统计学意义。

结论EV71感染重症病例细胞免疫功能存在异常。

标签：EV71感染；外周血淋巴细胞亚群1. 资料与方法近几年来，EV71感染呈逐年上升趋势，其中重症病例发病率增高，死亡率及致残率高，社会危害极大，已引起社会各界的高度关注。

为探讨机体免疫功能变化与EV71重症病例发病机制及病情进展的关系，本文对2011-2013年间收入本院儿童抢救室的62例EV71感染重症病例进行外周血淋巴细胞亚群分析，现报道如下：1.1 一般资料回顾并收集2011年4月至2013年11月我院儿童抢救室收治的62例EV71重症病例，将其分为重症重型组32例、重症危重型组30例；随机抽取28例门诊同期健康体检儿童作为对照组。

其中，重症重型组男患儿21例，女患儿11例，年龄0.6-6岁，平均2.5±2.2岁；重症危重型组男患儿20例，女患儿10例，年龄0.9-8岁，平均2.4±2.1岁；对照组男17例，女11例，年龄0.8-7.1岁，平均2.4±2.3岁。

三组间年龄、性别比较无显著差异，（P>0.05），无统计学意义。

1.2 诊断依据：依据我国卫生部HFMD临床专家组共同制定的2011版《EV71感染重症病例临床救治专家共识》，62例患儿临床符合诊断条件，62例患儿均于入院当日采集粪便或肛拭子标本送本市传染病医院做RT-PCR检测，分离出肠道病毒EV71，为实验室确诊EV71感染病例。

不同病理类型狼疮性肾炎淋巴细胞亚群的变化及临床意义的开题报告一、研究背景：狼疮性肾炎（Lupus Nephritis，LN）是系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）最常见的累及器官之一，其发病率为59%~90%，同时也是SLE预后最差的类型之一。

但LN的病理类型繁多，临床表现及预后亦有所不同。

淋巴细胞是狼疮免疫病理学变化的重要指标之一，其中外周血淋巴细胞亚群的变化已有大量研究，但少有研究关注其在不同病理类型LN肾组织中的变化及临床意义。

因此，本研究旨在探讨不同病理类型LN肾组织中淋巴细胞亚群的变化及临床意义，为LN的诊治及预后评估提供参考，同时也为深入研究狼疮的发病机制提供理论支持。

二、研究内容：1.研究目的：探讨不同病理类型LN肾组织中淋巴细胞亚群的变化及临床意义。

2.研究方法：（1）研究对象：选择2010年1月至2020年12月罹患LN并接受肾穿刺检查的患者为研究对象，按肾组织病理分型标准分为Ⅰ~Ⅵ型，共分为6组。

其中Ⅰ型及Ⅱ型视为起病期，Ⅲ~Ⅴ型视为发展期，Ⅵ型为终末期。

（2）研究指标：分别采用流式细胞术和免疫组化技术检测LN肾组织中淋巴细胞亚群的变化，包括T淋巴细胞（CD3+），B淋巴细胞（CD19+），自然杀伤细胞（NK，CD3-CD56+），T辅助细胞（Th，CD4+），T细胞毒性细胞（Tc，CD8+），调节性T淋巴细胞（Treg，CD4+CD25+Foxp3+）及内皮细胞（CD31+），并分别统计各组肾组织中不同淋巴细胞亚群的比例及表达水平。

（3）研究分析：采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，采用多因素方差分析及LSD检验比较各组淋巴细胞亚群的比例及表达水平。

同时对不同病理类型LN肾组织淋巴细胞亚群的变化及临床意义进行研究。

3.研究意义：通过对不同病理类型LN肾组织中淋巴细胞亚群的变化及临床意义的探讨，可以更准确地诊断各病理型别的LN及预测其预后，同时也能为LN的防治提供理论基础，促进LN的研究进展。

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞亚群分析潘诚志;施宗明;杨国宗【摘要】目的探讨系统性红斑狼(SLE)疮患者外周血淋巴细胞亚群变化及临床意义.方法对18例活动期SLE患者,15例缓解期SLE患者及13例健康者采用标记免疫荧光染色和流式细胞计数检测.结果活动期CD4+细胞数明显少于健康对照组(P＜0.05),CD4+/CD8+比值也明显降低(P＜0.05)；而CD4+、CD8+T淋巴细胞对对照组比较则无统计学意义(P＞0.05),CD19+(B)细胞数则均高于缓解组和对照组(P ＜0.05).结论测定淋巴细胞亚群可作为判断SLE处于活动期与缓解期值参考的一个指标.【期刊名称】《中国卫生产业》【年(卷),期】2013(000)015【总页数】2页(P2-3)【关键词】系统性红斑狼疮(SLE);淋巴细胞亚群【作者】潘诚志;施宗明;杨国宗【作者单位】福建省漳州市中医院检验科,福建漳州 363000;福建省漳州市中医院检验科,福建漳州 363000;福建省漳州市中医院检验科,福建漳州 363000【正文语种】中文【中图分类】R593系统性红斑狼疮（SLE）系一种自身免疫性疾病，表现为免疫系统紊乱，其病因和发病机制尚不明确。

国外的Besedovsky等认为SLE发病机制可能是内外因素激发存在遗传易感性个体，致机体免疫系统紊乱而发病，紊乱以产生自身抗体为主要特征，还包括免疫系统、细胞因子的免疫异常。

为深入了解外周血淋巴细胞亚群变化规律，我院采用特异性荧光抗体标记流式细胞术，探讨SLE患者不同阶段T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞数变化，旨在为探讨SLE发病机制提供一些的参考。

现将结果报道如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选取2011年11月—2012年9月该院内科收治的33例SLE患者，其中男10例，女23例；年龄16～55岁，平均28.3岁。

全部病例均符合1997年美国风湿病学会修订的关于SLE诊断标准[1]。

采用1992年欧洲SLE活动性评分标准判定SLE病情活动性。

重症肌无力患者外周血淋巴细胞亚群水平及其临床意义罗婷，张艺凡 ，楚兰，陈美秋，夏聪，徐凯翎，刘磊（贵州医科大学附属医院神经内科，贵州贵阳　５５０００４）［摘　要］目的　探讨重症肌无力（ＭＧ）患者外周血淋巴细胞亚群水平及其临床意义。

方法　选取ＭＧ患者９０例，按受累肌群分为眼肌组（ｎ＝４０）和全身组（ｎ＝５０），同时选取４０例健康体检者作为对照组，ＭＧ患者于免疫治疗前采集空腹静脉血５～１０ｍＬ，对照组受试者于健康体检日抽取空腹静脉血５～１０ｍＬ，２组标本均取３～５ｍＬ分离血清，剩余样本加乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）抗凝；采用流式细胞法检测３组受试者外周血淋巴细胞亚群ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋及ＮＫ细胞比例，采用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测２组ＭＧ患者血清抗乙酰胆碱受体抗体（ＡＣｈＲ Ａｂ）的水平；采用重症肌无力定量评分（ＱＭＧ）及重症肌无力绝对和相对评分（ＡＲＳ ＭＧ）评价２组ＭＧ患者首次就诊时的病情严重程度，采用Ｐｅａｒｓｏｎ和Ｓｐｅａｒｍａｎ法分析ＭＧ患者外周血淋巴细胞亚群与病情严重程度及ＡＣｈＲ Ａｂ的关系。

结果　全身组ＭＧ患者外周血ＣＤ４＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋及ＮＫ细胞比例高于对照组和眼肌组（Ｐ＜０ ０５）、但ＣＤ８＋细胞比例低于对照组和眼肌组（Ｐ＜０ ０５），眼肌组ＭＧ患者外周血ＣＤ４＋／ＣＤ８＋和ＮＫ细胞比例高于对照组（Ｐ＜０ ０５）；全身组ＭＧ者ＱＭＧ评分和ＡＲＳ ＭＧ评分均高于眼肌组（Ｐ＜０ ０５）；ＭＧ患者外周血ＣＤ４＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋、ＮＫ细胞比例分别与ＱＭＧ评分、ＡＲＳ ＭＧ评分、血清ＡＣｈＲ Ａｂ阳性率呈正相关（Ｐ＜０ ０５），但ＣＤ８＋细胞比例与ＱＭＧ、ＡＲＳ ＭＧ评分、血清ＡＣｈＲ Ａｂ阳性率呈负相关（Ｐ＜０ ０５）。

结论　ＭＧ患者外周血淋巴细胞亚群水平在不同的临床分型之间存在差异，与疾病严重程度、ＡＣｈＲ Ａｂ阳性率存在相关，检测淋巴细胞亚群水平可作为评价ＭＧ病情严重程度的参考指标。

帕金森病患者外周血T淋巴细胞亚群检测及临床意义余能伟;刘洁;李晓佳;张剑波;杨友松;孙红斌【期刊名称】《四川医学》【年(卷),期】2012(033)008【摘要】目的通过检测PD外周血T淋巴细胞亚群变化,为细胞免疫与PD的关系提供实验依据.方法通过直接免疫荧光标记法,应用流式细胞仪检测PD外周血CD3+％、CD4+％、CD8+％及CD4+/CD8+,并与健康人对照组分析.结果①PD 组外周血CD3+％、CD8+％与对照组相比升高,差异有统计学意义(P＜0.05),CD4+％、CD4+/CD8+与对照组相比降低,差异有统计学意义(P＜0.01).②新发PD与服用药PD外周血CD3+％、CD4+％、CD8+％、CD4+/CD8+比较差异无统计学意义(P＞0.05).③PD组外周血T淋巴细胞亚群与年龄、病程、Webster评分、Hoehn-Yahr分级分期和UPDRS-Ⅱ、Ⅲ评分均无相关性.结论①PD存在外周血T淋巴细胞亚群失衡,发病与细胞免疫功能失调有关；②PD细胞免疫状态的改变不能归于外源性多巴的摄入,神经内分泌免疫网络紊乱参与了PD的发病过程.%Objective To provide experimental evidences partly for cell immunity and Parkinson's disease (PD) through T lymphocyte subgroups detected in peripheral blood. Methods We detected the changes of T lymphocyte subgroups by flow cy-tonletry Results The changes of T lymphocyte subgroups; CD3 + % (64. 77 ± 10. 76) and CD8 + % (28. 24 ± 9.39) in PD patients are higher than those in healthy controlled group with significiant differences, P ＜ 0. 05; CD4 + % ( 33- 55 ± 6. 84) and C D4+/CD8 + ( 1. 31 ±0. 55)are lower than those in controlled group with greatsignificant differences, P ＜0. 01; There is no significant difference between drug taken and without drug taken patients in CD3 + %、 CD4 + % 、 CD8 + % 、 CD4 + /CD8 + ( P ＞ 0. 05). There were no correlation between the results of T lyMphocyte subgroups in blood and drug intaken, age, course, Webster scale, H-Y grade and UPDRS scale. Conclusion (1)PD patients suffer from imbalance between T lyMphocyte subgroups in peripheral blood; The attack of PD resulted from cell immune imbalance. (2)The changes of cell immune is not resulted from dopa-mine intaken, which suggest that PD patients' neuroimmune net is dysfunction.【总页数】4页(P1487-1490)【作者】余能伟;刘洁;李晓佳;张剑波;杨友松;孙红斌【作者单位】四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科,中心实验室,四川成都610072;四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科,中心实验室,四川成都610072;四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科,中心实验室,四川成都610072;四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科,中心实验室,四川成都610072;四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科,中心实验室,四川成都610072;四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科,中心实验室,四川成都610072【正文语种】中文【中图分类】R742.5【相关文献】1.慢性髓系白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞检测的临床意义 [J], 张丹阳;田登梅;冯超;刘丽辉;施兵;张永清2.帕金森病患者外周血中骨髓来源抑制性细胞的检测及临床意义 [J], 杨毅;张晓玲;官俏兵;郭丽;张慧;韩晨阳;王琰萍3.结核病患者外周血T淋巴细胞亚群检测的临床意义 [J], 王靖良;宋长兴4.急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平检测及临床意义 [J], 吴朝阳;钱军;吴雅荣;王法春;陈巧云;季勇慧;钱震;杨小飞;盛晓静;张永宁5.急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群检测的临床意义 [J], 高然;李艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2018.01.016不同致敏模式支气管哮喘患儿外周血T 淋巴细胞亚群比较及临床意义①苗　青　刘永革　王　燕　李　珍　任亦欣　关　辉　皇惠杰　许　巍　向　莉(首都医科大学附属北京儿童医院过敏反应科,北京100045) 中图分类号　R725.6 文献标志码　A 文章编号　1000⁃484X (2018)01⁃0084⁃07①本文为北京市属医院科研培育项目(PX2018049)㊁公益性行业基金项目(No.2015SQ00136)㊁ 首都临床特色应用研究”专项(No.Z151100004015030)和北京市自然科学基金(No.7172074)㊂作者简介:苗　青,女,硕士,助理研究员,主要从事儿童变态(过敏)反应性疾病的免疫病理学机制研究,E⁃mail:bchmiaoqing@㊂通讯作者及指导教师:向　莉,女,博士,主任医师,主要从事儿童变态反应性疾病的机制研究,E⁃mail:drxiangli@㊂[摘　要]　目的:分析比较不同过敏原致敏模式下支气管哮喘患儿外周血T 淋巴细胞亚群,为进一步明确不同变应原致敏哮喘患儿机体的免疫功能状态差异提供更多依据㊂方法:入组374例在北京儿童医院过敏反应科确诊的哮喘患儿,行过敏原皮肤点刺试验确定患儿致敏模式,流式细胞术测定外周血T 细胞(CD3+CD19+)㊁CD4+T 细胞(CD3+CD4+)㊁CD8+T 细胞(CD3+CD8+)㊁Tregs(CD4+CD25+FOXP3+)㊁Th1(CD4+IFN⁃γ+T)㊁Th2(CD4+IL⁃4+T)以及Th17细胞亚群(CD4+IL⁃17A +T),横断面比较上述免疫学指标在不同致敏模式哮喘患儿组间是否存在差异㊂结果:根据SPT 检出阳性过敏原数量,将哮喘患儿分为未致敏哮喘组㊁单一致敏哮喘组及多重致敏哮喘三组㊂与健康对照组儿童相比,未致敏哮喘组㊁单一致敏哮喘组以及多重致敏哮喘三组哮喘患儿的外周血T 细胞㊁CD4+T 细胞㊁CD8+T 细胞㊁CD4/CD8比值㊁Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Tregs㊁Th17细胞㊁Tregs /Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义㊂进一步对三组患儿进行两两比较发现,Tregs㊁Th17细胞以及Tregs /Th17比值在三组间差异具有统计学意义(均P <0.05)㊂根据SPT 阳性检出过敏原种类,将入组哮喘患儿致敏谱主要分为尘螨组㊁霉菌组㊁动物皮屑组㊁花粉组及其他组㊂与健康对照组儿童相比,尘螨组㊁霉菌组㊁动物皮屑组㊁花粉组以及其他组过敏原致敏患儿的外周血T 细胞㊁CD4+T 细胞㊁CD8+T 细胞㊁CD4/CD8比值㊁Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Tregs㊁Th17细胞㊁Tregs /Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义(均P <0.05)㊂同样地,行两两比较发现,五组患儿的外周血Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Tregs㊁Th17细胞以及Tregs /Th17比值在三组间差异具有统计学意义(均P <0.05)㊂结论:不同致敏模式的哮喘患儿外周血T 淋巴细胞亚群分布状态存在差异,因此应注意不同致敏模式的哮喘患儿免疫应答状态差异㊂[关键词]　支气管哮喘;T 淋巴细胞;致敏模式;过敏原皮肤点刺试验An analysis of circulating T lymphocytes among asthmatic children with different sensitized patternsMIAO Qing ,LIU Yong⁃Ge ,WANG Yan ,LI Zhen ,REN Yi⁃Xin ,GUAN Hui ,HUANG Hui⁃Jie ,XU Wei ,XIANG Li .Allergy Department ,Beijing Children′s Hospital ,Capital Medical University ,Beijing 100045,China[Abstract ]　Objective :To investigate the difference in circulating T lymphocyte subsets among asthmatic children with differentsensitized patterns.Methods :A total of 374asthmatic children were enrolled in present study,and the sensitized patters were identifiedusing skin prick testing.The numbers of circulating T cells(CD3+,CD19+),CD4+T cells(CD3+,CD4+),CD8+T cells(CD3+CD8+),Tregs(CD4+CD25+FOXP3+),Th1(CD4+IFN⁃γ+T),Th2(CD4+IL⁃4+T)and Th17cells(CD4+IL⁃17+T)in peripheral blood weremeasured by flow cytometry.Results :According to positive skin responses detected by SPT,patients with asthma were divided into three groups:un⁃sensitized asthma group,mono⁃sensitive asthma group and poly⁃sensitized asthma pared with healthycontrols,there were significant variations in CD4+T cells and CD8+T cells and CD4/CD8ratio,Th1cells and Th2cells and Th1/Th2ratio,Tregs,Th17cells,Tregs /Th17ratio (all P <0.05).A further pairwise comparison indicated that the statistically significant difference in Tregs,Th17cells and Tregs /Th17were found among un⁃sensitized asthma group,mono⁃sensitive asthma group and poly⁃sensitized asthma group(all P <0.05).According to the type of allergens detected by SPT,the asthmatic patients were divided into thedust mite group,mould group,animal dander group,pollen group and other pared with healthy controls,there were significant variations in CD4+T cells and CD8+T cells and CD4/CD8ratio,Th1cells and Th2cells and Th1/Th2ratio,Tregs,Th17cells,Tregs /Th17ratio(all P <0.05).Similarly,a pairwise comparison indicated that the numbers of Th1cells,Th2cells,Th2cells,Th1/Th2ratios,Tregs,Th17cells and Tregs/Th17ratios were found significant among these5groups(all P<0.05).Conclusion:The finding highlights the importance of paying attention to the differences in the distribution of T lymphocyte subgroups among asthmatic patients with different sensitization patterns.[Key words]　Bronchial asthma;T lymphocytes;Sensitized patterns;Skin prick testing 支气管哮喘(简称哮喘)是儿童常见的慢性呼吸系统疾病,由多种免疫细胞㊁气道结构细胞和炎症介质等共同参与的慢性炎症性疾病[1]㊂一直以来, Th1/Th2失衡被认为是导致哮喘发生的主要免疫病理学机制,近年来随着研究的深入,已证实多种效应性T淋巴细胞亚群(例如调节性T细胞㊁Th17细胞等)均参与到气道炎症事件中,其细胞亚群数目和功能的异常与哮喘㊁过敏性鼻炎的发生㊁病程进展密切相关[2,3]㊂本研究前期工作发现:具有不同变应原致敏模式(致敏变应原种类㊁致敏程度)的哮喘患者其气道炎症水平及肺功能参数指标上均存在显著差异[4,5]㊂国外的一项出生队列研究也证实[6]:出生后早期即出现对于多种变应原致敏的婴幼儿,其未来发生哮喘㊁过敏性鼻炎的风险显著高于非致敏者和单一致敏者,但是具体机制尚未完全明确㊂基于此,本研究将根据不同致敏模式(SPT检出阳性过敏原数量㊁种类)的哮喘患者进行分组,横断面比较不同组间哮喘患者外周血T淋巴细胞亚群数目差异,希望能够为进一步明确不同变应原致敏哮喘患者机体的免疫功能状态差异提供更多依据㊂1　材料与方法1.1　实验材料㊁试剂　双色及四色淋巴细胞亚群分析试剂盒㊁FACS Calibur型流式细胞仪㊁荧光素标记抗体和配套溶血剂均为美国Beckman Coulter公司产品㊂1.2　实验方法1.2.1　研究对象　选取2016年1~6月在北京儿童医院哮喘过敏门诊确诊为哮喘患者374例,男184例㊁女190例,年龄3~14岁,平均(8.8±2.5)岁㊂哮喘诊断均符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制订的诊断标准[7]㊂排除标准:重度和极性发作期哮喘;近4周内有呼吸道感染;近3个月内全身或局部使用过激素或免疫抑制剂;过敏原皮肤点刺试验前3天使用过抗过敏药物;合并其他心肺疾病㊁患有呼吸系统其他疾病及其他系统已确诊疾病者㊂根据SPT检出阳性变应原数目将研究对象分为3组(非致敏组㊁单一致敏组㊁多重致敏组);根据SPT检出阳性变应原种类将研究对象分为5组(尘螨组㊁霉菌组㊁动物皮屑组㊁花粉组㊁其他组)㊂本研究经首都医科大学附属北京儿童医院伦理委员会审核通过,研究前向患儿家长讲述本研究的目的和实施方案,征得患儿家长同意,并签署知情同意书㊂1.2.2　过敏原皮肤点刺试验(Skin prick testing, SPT)　皮肤点刺制剂包括尘螨组(户尘螨㊁粉尘螨)㊁霉菌组(黑曲霉㊁链格孢㊁产黄青霉)㊁动物皮屑组(狗毛皮屑㊁猫毛皮屑)㊁花粉组(大籽蒿花粉㊁葎草花粉㊁豚草花粉㊁藜草花粉㊁圆柏花粉㊁洋白蜡花粉㊁臭椿花粉㊁梧桐花粉㊁桦树花粉)㊁其他组(蟑螂)等五大类共计18种常见吸入过敏原,均由北京新华联协和药业有限责任公司提供㊂具体操作:选择双侧前臂掌侧点刺,用点刺针分别透过液滴,刺破真皮后维持数秒,以不出血为度,然后快速轻提针尖弃去针头,每一试区间隔不少于1cm㊂点刺完成后立刻用吸水棉球从侧边轻轻吸去部分多余的点刺液,避免流淌互相干扰㊂等待20min,观察结果㊂同时设阴性对照组(缓冲盐水⁃甘油对照液)和阳性对照组(5mg/ml盐酸组胺对照液)㊂结果判断标准:①无风团和红斑反应或风团块反应范围小于点刺阳性对照组1/3记为(-);②风团块反应范围为点刺阳性对照组1/3及以上记为(+);③风团块反应范围为点刺阳性对照组2/3及以上记为(++);④风团块反应范围与点刺阳性对照组基本相同记为(+++);⑤风团块反应范围大于点刺阳性对照组记为(++++)㊂凡出现过敏原皮肤点刺试验阳性结果者,即定义为该大类过敏原阳性致敏㊂仅对于一类过敏原阳性致敏者判定为单一致敏;存在至少一类过敏原阳性致敏者判定为多重致敏;上述五大类过敏原结果均阴性者判定为未致敏㊂1.2.3　标本采集及外周血淋巴细胞分型　抽取EDTA抗凝血4ml,一部分通过流式细胞仪进行外周血CD3㊁CD4㊁CD8㊁CD4/CD8以及Tregs亚群测定;另一部分进行外周血Th1㊁Th2㊁Th17细胞亚群测定㊂使用Beckman Coulter公司专用的荧光校正微球对仪器进行光路与流路的校准,使流式细胞仪的准确度㊁精确度㊁荧光与散射光灵敏度和分辨率处于最佳的运行状态㊂按照试剂使用说明书的要求,根据所测的样本数取相应数目的流式细胞仪专用试管㊂①外周血CD3㊁CD4㊁CD8㊁CD4/CD8㊁NK㊁B㊁Tregs亚群测定:向每支试管中分别加入荧光素标记的抗体试剂各10μl,再加入EDTA抗凝全血100μl,混匀置室温㊁避光孵育20min取出后向每支试管中分别加入溶血剂500μl,混匀置室温㊁避光孵育10min后上机㊂分别计算T细胞(CD3+CD19+)㊁CD4+T细胞(CD3+CD4+)㊁CD8+T细胞(CD3+CD8+)和Tregs(CD4+CD25+FOXP3+)占总淋巴细胞的百分比;②外周血Th1(CD4+IFN⁃γ+T)㊁Th2(CD4+IL⁃4+ T)和Th17细胞亚群(CD4+IL⁃17A+T)测定方法参照陈啸洪等[8]方法㊂所有流式数据应用FlowJo软件进行分析,数据均由同一技术员(本文第1作者)在同一标准下进行读取,数据的取舍和分析则由本文第二作者共同完成㊂1.3　统计学处理　采用SPSS20.0软件对数据进行统计学分析㊂正态分布计量资料采用x±s表示,非正态分布资料以中位数(四分位数)表示;两样本均数的比较采用独立样本均值t检验;多组间均数比较采用单因素方差分析,若方差不齐,采用秩和检验;进一步两两比较采用LSD法或两独立样本的秩和检验㊂以P<0.05为差别有统计学意义㊂2　结果2.1　不同SPT检出阳性过敏原数目患者外周血T 淋巴细胞亚群比较　根据SPT检出阳性过敏原数量,将哮喘患者分为未致敏哮喘组(109例,男59例,女50例,平均年龄8.3岁)㊁单一致敏哮喘组(112例,男42例,女70例,平均年龄9.2岁)及多重致敏哮喘(153例,男83例,女70例,平均年龄12.2岁)三组,另选取健康对照组儿童102例(男52例,女50,平均年龄8.9岁),各组间T淋巴细胞亚群测定结果见表1㊂与健康对照组儿童相比,未致敏哮喘组㊁单一致敏哮喘组以及多重致敏哮喘三组哮喘患者的外周血T细胞㊁CD4+T细胞㊁CD8+T细胞㊁CD4/CD8比值㊁Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Tregs㊁Th17细胞㊁Tregs/Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)㊂进一步对三组患者外周血效应性T细胞亚群进行两两比较发现,Tregs㊁Th17细胞以及Tregs/Th17比值在三组间差异具有统计学意义(均P<0.05),未观察到三组间Th1细胞㊁Th2细胞以及Th1/Th2比值两两比较差异无统计学意义(均P>0.05),见表2,图1㊂2.2　不同致敏变应原组间淋巴细胞亚群测定结果比较　根据SPT阳性检出过敏原种类,将入组哮喘患者致敏谱主要分为尘螨组(213例,男126例,女87例,平均年龄8.3岁)㊁霉菌组(176例,男76例,女100例,平均年龄8.6岁)㊁动物皮屑组(93例,男36例,女57例,平均年龄8.8岁)㊁花粉组(137例,男64例,女73例,平均年龄9.1岁)以及其他组(27例,男13例,女14例,平均年龄9.4岁)各组间淋巴细胞亚群测定结果见表3㊂与健康对照组儿童相比,尘螨组㊁霉菌组㊁动物皮屑组㊁花粉组以及表1　不同SPT阳性检出过敏原数目组外周血T淋巴细胞亚群分布比较(%,x±s)Tab.1　Comparison in T lymphocytes subsets among asthmatics with different positive skin responses(%,x±s)Items(%)Un⁃sensitized asthma(n=109)Mono⁃sensitized asthma(n=112)Poly⁃sensitized asthma(n=153)Heath controls(n=102)F PT cell(CD3+)59.4±13.744.1±12.550.2±13.467.8±11.915.9<0.05 CD4+T cell(CD3+CD4+T)35.1±10.333.1±14.132.0±10.236.6±9.118.7<0.05 CD8+T cell(CD3+CD8+T)25.6±9.026.9±12.523.3±7.920.5±6.710.6<0.05 CD4/CD8ratio1.4±1.11.4±1.21.4±1.41.8±1.414.1<0.05 Th1cell(CD4+IFN⁃γ+T)9.1±3.99.9±5.88.6±6.913.9±4.216.8<0.05 Th2cell(CD4+IL⁃4+T)1.1±0.51.0±0.40.9±0.50.5±0.310.7<0.05 Th1/Th2ratio8.3±4.89.0±3.98.7±1.725.9±10.526.3<0.05 Tregs(CD4+CD25+FOXP3+T)3.5±1.72.1±0.21.8±0.45.5±2.821.4<0.05 Th17cell(CD4+IL⁃17A+T)0.9±0.51.1±0.41.3±0.80.6±0.222.6<0.05 Tregs/Th17ratio3.8±1.91.6±0.51.6±0.39.1±1.833.9<0.05表2　未致敏㊁单一致敏㊁多重致敏三组哮喘患者外周血效应性T细胞亚群两两比较(LSD⁃t,P)Tab.2　Pairwise comparison in T lymphocytes subsets among un⁃sensitized asthma group,mono⁃sensitive asthma group and poly⁃sensitized asthma group(LSD⁃t,P)Items Th1cells Th2cells Th1/Th2ratio Tregs Th17cells Tregs/Th17ratio Un⁃sensitized vs mono⁃sensitized6.1,>0.0511.5,>0.054.8,>0.0511.1,<0.0511.3,<0.0510.2,<0.05 Un⁃sensitized vs ploy⁃sensitized8.3,>0.0510.4,>0.057.9,>0.0519.4,<0.0520.6,<0.0521.6,<0.05 Mono⁃sensitized vs poly⁃sensitized10.9,>0.057.9,>0.056.2,>0.0513.1,>0.0519.8,<0.0511.4,>0.05图1　未致敏㊁单一致敏㊁多重致敏三组哮喘患者外周血效应性T细胞亚群两两比较(%,x±s)Fig.1　Pairwise comparison in T lymphocytes subsets among un⁃sensitized asthma group,mono⁃sensitized asthma group and poly⁃sensitized asthma group(%,x±s)图2　不同变应原致敏的哮喘患者外周血效应性T细胞亚群两两比较(%,x±s)Fig.2　Pairwise comparison in T lymphocytes subsets among asthmatics with different types of sensitized allergens(%,x±s)表3　不同SPT阳性检出过敏原种类间外周血T淋巴细胞亚群分布比较(%,x±s)Tab.3　Comparison in T lymphocytes subsets among asthmatics with different types of sensitized allergens(%,x±s)Items House dust mitegroup(n=213)Mould group(n=176)Animal dandergroup(n=93)Pollen group(n=137)Other group(n=27)Healthg controls(n=102)F PT cell(CD3+)42.6±9.740.0±7.141.7±8.744.4±8.742.8±10.867.8±11.917.7<0.05 CD4+T cell(CD3+CD4+)32.6±13.434.1±10.534.9±11.734.1±14.032.7±12.236.6±9.125.1<0.05 CD8+T cell(CD3+CD8+T)25.9±7.826.4±10.527.0±10.122.6±8.523.9±8.420.5±6.76.9<0.05 CD4/CD8ratio1.3±1.01.3±1.01.2±0.91.4±0.81.4±0.91.8±1.423.7<0.05 Th1cell(CD4+IFN⁃γ+T)9.5±3.48.9±2.610.2±4.99.6±3.48.9±3.411.9±4.231.3<0.05 Th2cell(CD4+IL⁃4+T)1.4±0.61.2±0.50.7±0.21.1±0.40.6±0.10.5±0.337.2<0.05 Th1/Th2ratio7.6±4.17.8±3.410.1±8.68.1±3.415.4±3.625.9±10.531.0<0.05 Tregs(CD4+CD25+FOXP3+T)1.6±0.82.4±1.22.3±1.11.9±0.82.0±1.05.5±2.831.6<0.05 Th17cell(CD4+IL⁃17A+T)1.4±0.61.0±0.70.8±0.31.2±0.40.7±0.40.6±0.239.7<0.05 Tregs/Th17ratio1.1±0.22.1±1.02.9±1.51.6±0.61.9±0.69.1±1.840.5<0.05表4　不同变应原致敏的哮喘患者外周血效应性T细胞亚群两两比较(LSD⁃t,P)Tab.4　Pairwise comparison in T lymphocytes subsets among asthmatics with different types of sensitized allergens(LSD⁃t,P) Items Th2cells Th1/Th2ratio Tregs Th17cells Tregs/Th17ratio House dust mite vs Mould6.1,>0.0510.3,>0.0521.3,<0.0531.2,<0.0525.8,<0.05 House dust mite vs Animal dander21.6,<0.0514.0,<0.0527.3,<0.0528.4,<0.0521.3,<0.05 House dust mite vs Pollen6.9,>0.058.5,>0.0531.2,<0.0526.7,<0.0521.6,<0.05 House dust mite vs Other23.6,<0.0511.2,<0.0536.1,<0.0539.7,<0.0529.1,<0.05 Mould vs Animal dander31.7,<0.0514.9,<0.0510.2,>0.0511.6,>0.0528.1,<0.05Mould vs Pollen19.2,<0.054.7,>0.0534.5,<0.0529.1,<0.0532.1,<0.05Mould vs Other21.3,<0.0515.3,<0.0537.1,<0.0526.3,<0.0510.4,>0.05 Animal dander vs Pollen18.7,<0.0516.4,<0.0538.0,<0.0522.5,<0.0533.5,<0.05 Animal dander vs Other8.3,>0.0515.2,<0.059.1,>0.0524.1,<0.0531.5,<0.05Pollen vs Other17.4,<0.0513.4,<0.057.8,>0.057.9,>0.0527.6,<0.05其他组过敏原致敏患者的外周血T细胞㊁CD4+T细胞㊁CD8+T细胞㊁CD4/CD8比值㊁Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Tregs㊁Th17细胞㊁Tregs/Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义(均P< 0.05)㊂同样地,对上述5组不同变应原致敏的哮喘患者外周血效应性T细胞亚群进行两两比较发现,5组患者的外周血Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Tregs㊁Th17细胞以及Tregs/Th17比值存在组间差异,且差异具有统计学意义(均P<0.05)(表4,图2)㊂3　讨论支气管哮喘是一种常见的气道变态反应性(过敏)疾病,主要特征是可逆性气道阻塞㊁气道高反应性及气道慢性炎症,其发病本质属于Ⅰ型变态反应,主要包括 致敏⁃激发⁃效应”三阶段,即变应原物质进入机体后引起由IgE介导的速发型变态反应[9,10]㊂其中,变应原(也称为过敏原)致敏是引发变态反应发生的关键起始步骤㊂美国的一项研究报道显示3岁以上罹患过敏性哮喘的儿童中80%都是由于对室内环境过敏引发的[11,12]㊂不仅如此,来自国外的多项出生队列研究结果证实出生后早期多种变应原致敏是未来发生过敏性疾病的独立风险因素[13,14]㊂一直以来,哮喘㊁过敏性鼻炎等气道变态反应性疾病的发生被认为是与机体Th1/Th2免疫失衡相关,表现为Th2的优势反应状态,易于对过敏原产生超常的免疫应答㊂然而随着近年来 免疫组学(Immunomics)”概念的提出[15],为疾病免疫病理学机制开拓了新的视野,特别强调应将免疫系统看作是一个整体,重视 系统免疫学(System immunology)”的研究㊂因此,人们逐渐发现这种以Th1/Th2平衡理论来解释疾病的发生过于简单化,不够全面㊂基于此,本研究对于哮喘患者的致敏模式进行细化,并分析各组间细胞免疫应答状态的差异,希望能够为进一步理解哮喘疾病的发病机制及制定针对性治疗方法提供新的思路㊂在本研究中,与健康儿童相比,哮喘患者外周血T细胞㊁CD4+T细胞㊁CD8+T细胞㊁CD4/CD8比值㊁Th1细胞㊁Th2细胞㊁Th1/Th2比值㊁Th17细胞等效应性T细胞亚群数目均存在统计学差异㊂T细胞是免疫系统最主要的效应细胞,在细胞免疫应答的发挥中处于核心地位㊂T细胞活化后除了表达细胞表面活化抗原外,主要释放特征性细胞因子发挥免疫调节功能,不同细胞因子间功能相互拮抗,从而保证机体免疫自稳状态的维持㊂例如,IFN⁃γ(Th1细胞来源)与IL⁃4(Th2细胞来源)二者间功能相互抑制, IFN⁃γ主要由活化的T细胞及吞噬细胞产生,具有免疫调节作用,可诱导幼稚型T细胞向Th1细胞转化,抑制Th2细胞生成;而Th2细胞功能亢进可刺激IL⁃4㊁IL⁃10等细胞因子生成过多,从而抑制Th1细胞因子功能可导致IL⁃2㊁IFN⁃γ水平下降[16,17]㊂然而在变态反应性疾病等病理条件下,外周血中Th1/ Th2细胞比例失衡,Th1细胞减低及其细胞因子功能被抑制,都进一步促进了偏向Th2细胞介导的气道变态反应的发生,这一现象在本研究中也同样被观察到㊂Th17细胞是近年来新发现的一种新的活化的CD4+T细胞亚群,Th17细胞的主要效应因子IL⁃17,本身不仅是强大中性粒细胞的趋化剂,同时还可以促进支气管纤维母细胞㊁上皮细胞和平滑肌细胞的活化,使这些细胞高表达IL⁃6㊁IL⁃8㊁粒细胞集落刺激因子(Granulocytecolony stimulated factor, G⁃CSF)等因子,促使中性粒细胞在气道局部浸润增殖,加重气道炎症反应[18]㊂早期多项动物实验和临床研究均表明Th17细胞及细胞因子IL⁃17能加重过敏性哮喘的气道炎症和气道高反应,且其水平与哮喘患者病情活动状态㊁控制水平密切相关[19]㊂调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是近年来发现的一群具有免疫抑制效应的T细胞,可通过分泌细胞因子(IL⁃10和/或TGF⁃β)或者细胞间的直接接触等方式,降低抗原特异性免疫应答,诱导机体产生免疫耐受㊂虽然Th17细胞与Treg细胞之间在功能上互相拮抗,但是由于二者在分化途径中均共用诱导因子TGF⁃β[20],因此有学者提出:机体内除了Th1/Th2平衡外,Th17细胞与Treg之间亦存在动态交互平衡关系㊂本研究中亦发现哮喘患者同时存在Th17细胞应答增加和Treg细胞减少的现象,因此再次提示:哮喘患者机体存在免疫激活和免疫失衡状态,不同T细胞亚群之间的失衡引起细胞因子产生的异常是导致疾病发生的重要作用机制之一,除了Th1/Th2平衡之外,哮喘患者体内亦存在的Th17/ Treg失衡现象同样值得关注㊂根据SPT阳性检出过敏原数量,将哮喘患者分为未致敏哮喘组㊁单一致敏哮喘组以及多重致敏哮喘三组,并就三组间上述参数进行组间比较,结果发现Tregs㊁Th17细胞以及Tregs/Th17比值三项指标间存在组间差异㊂进一步根据SPT阳性检出过敏原种类,将入组哮喘患者致敏谱主要分为尘螨组㊁霉菌组㊁动物皮屑组㊁花粉组以及其他组,同样发现五组研究对象间Th2细胞(CD4+IL⁃4+T)㊁Th1/Th2比值㊁Tregs(CD4+CD25+FOXP3+T)㊁Th17细胞(CD4+ IL⁃17A+T)以及Tregs/Th17比值等指标存在差异㊂曾有学者就喘息性支气管炎患者按照不同类型过敏原分组,分析不同组内细胞免疫和体液免疫的功能变化,结果发现:吸入性过敏原更易诱发喘息性支气管炎患者细胞免疫应答功能的改变[21]㊂变应原是一组具有致敏原性的抗原物质,当特应性个体(Atopy)吸入变应原后,变应原物质可以沉积于气道黏膜表面,引发局部黏膜免疫系统甚至全身免疫反应的发生,最终诱发以气道慢性炎症和气道高反应性为特征的Ⅰ型变态反应性疾病的出现㊂最新研究表明反复过敏原暴露引发的气道上皮细胞损伤对于决定下游免疫应答方向起到了重要的免疫调节作用㊂以尘螨变应原(House dust mite)为例,其内源性的蛋白酶活性可以直接裂解上皮细胞间紧密联接,增加支气管上皮细胞通透性,促进上皮细胞凋亡,最终造成气道上皮屏障功能损伤促进过敏原穿越上皮细胞屏障[22,23]㊂破损的气道上皮细胞可以进一步分泌大量内源性危险信号分子,又称为 警报素”(Alarmin),如:IL⁃25㊁TSLP等,这些物质可以快速活化动员黏膜下的固有淋巴样细胞亚群(Group2innate lymphoid cells,ILC2s),活化后的ILC2可以继而分泌大量Th2型细胞因子,促进炎症反应的发生与进展[23]㊂国内孟文霞等[24]学者就尘螨㊁花粉㊁真菌三类过敏原引起上下气道变应性疾病的发生率进行比较,结果显示:易引起鼻炎的变应原由高到低依次是花粉㊁尘螨㊁真菌,易引起哮喘的变应原依次是真菌㊁尘螨㊁花粉,即花粉最易引起鼻炎,真菌最易引起哮喘㊂综上所述,笔者认为具有不同免疫原性差异的过敏原物质与气道上皮屏障之间的相互作用可能对于决定机体细胞免疫应答状态十分关键,下一步需要开展进一步机制研究予以明确㊂总之,不同致敏模式的哮喘患者外周血T淋巴细胞亚群分布状态存在差异,对于哮喘这一类复杂的异质性疾病而言,了解患者致敏模式情况下机体细胞免疫应答水平差异,不仅可以寻找到能反映哮喘异质性㊁指导哮喘个体化治疗的内因型分类,也为未来针对不同哮喘内因型尝试更多崭新的个体化治疗手段提供一定依据㊂参考文献:[1]　Mims JW.Asthma:definitions and pathophysiology[J].Int ForumAllergy Rhinol,2015,5(Suppl1):S2⁃S6.[2]　Shi 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特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其临床意义黄枝宁【摘要】目的观察特发性血小板减少性紫癜（ ITP）患者外周血淋巴细胞亚群水平变化情况，评价其在ITP发病中的作用及意义。

方法采用流式细胞术检测ITP患者49例及体检健康者45例外周血淋巴细胞亚群（ CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋、CD16＋56＋）水平。

结果 ITP 组CD3＋、CD4＋T淋巴细胞、CD16＋56＋自然杀伤细胞水平及CD4＋/CD8＋比值均明显低于对照组（P＜0．05），ITP 组CD8＋T淋巴细胞、CD19＋B淋巴细胞水平明显高于对照组（P＜0．05）。

结论 ITP患者外周血淋巴细胞亚群水平异常，可能伴有细胞免疫功能低下，而这些免疫功能变化可能参与ITP的发病。

【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2013(000)008【总页数】2页(P1021-1022)【关键词】特发性血小板减少性紫癜;T淋巴细胞;B淋巴细胞;NK细胞【作者】黄枝宁【作者单位】右江民族医学院附属西南医院暨百色市人民医院血液科,百色市,533000【正文语种】中文【中图分类】R554.6特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)是一种临床常见的获得性出血性疾病，目前认为其发病机制主要为病毒感染引起机体免疫功能和调节机制紊乱而导致抗血小板抗体产生，抗体与血小板结合并促进血小板被巨噬细胞系统清除，造成血小板数量减少［1］。

近年研究发现细胞免疫异常对ITP发病的作用不可忽视，而T、B淋巴细胞的表达与功能状态在其中起关键作用［2］。

笔者采用流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测 ITP患者外周血淋巴细胞亚群水平，探讨其在ITP发病中的临床意义，现报告如下。

1 资料与方法1．1 临床资料 2009年5月至2012年10月我院收治ITP患者49例为ITP组，均符合《血液病诊断及疗效标准》中有关ITP诊断标准［3］，并经血象及骨髓检查确诊。

重症肌无力患者外周血T淋巴细胞亚群分布特点及临床意义陈玉萍;魏东宁;肖漓【摘要】Objective Myasthenia gravis ( MG) is a T cell-dependent antibody-mediated autoimmune disease. In this study, we observed the distribution characteristics of T cell subsets in the peripheral blood and analyzed their corrections with the prognosis of MC. Methods We measured the percentages of CD4+ and CD8 +T cells by flow cytometry, and compared the distribution characteristics of T cell subsets in MC patients of different ages, sexes and clinical stages. We followed up the patients for 3 to 14 months after treatment with anticholinesterase, corticosteroids or thymectomy, and analyzed the correlation between the distribution of T cell subsets and clinical outcomes. Results The percentage of CD8 + T cells was significant decreased and the ratio of CD4 VCD8 + T cells was increased in the MG group as compared with the controls, but there was no statistically significant difference in the percentage of CD4+ T cells between the two groups. The abnormalities of T cell subsets in MG showed no correlation with sex and clinical stages, while the ratio of CD4 + /CD8 + T cells rose with the increase of the patients' age. The prognosis of MG was not correlated with the percentage of T cell subsets in the peripheral blood of the patients treated with anticholinesterase alone. Corticosteroid medication and thymectomy achieved fairly good results in those with decreased percentage of CD8 + T cells and increase ratio of CD4 + /CD8 + cells before treatment. Conclusion There is an abnormaldistribution of T cell subsets in MG patients, which becomes more obvious with the increase of age but is not related to the sex of the patients and clinical stages of the disease. Those with abnormality of T cell sub-sets respond favorably to corticosteroids or thymectomy. Determining the percentage of T cell subsets in the peripheral blood is significant for clinical treatment and outcome evaluation.%目的重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是T细胞依赖的、抗体介导的自身免疫性疾病.文中探讨MG患者外周血T细胞亚群分布特点及其与预后的相关性.方法采用流式细胞技术测定例MG患者外周血CD4+、CD8+细胞亚群百分比,分析不同年龄、性别、临床分型MG患者外周血T细胞亚群分布特点.随访MG患者经胆碱酯酶抑制剂、糖皮质激素及胸腺扩大切除术3种不同治疗方案后3～14个月的治疗效果,分析MG患者T淋巴细胞亚群异常与其临床转归的相关性.结果与正常对照组相比,MG患者外周血CD8 +T细胞百分比明显降低,CD4 +/CD8+比值异常升高,2组间CD4+T细胞百分比无差异.不同性别、临床分型MG患者外周血T细胞亚群分布无明显差异.但随着年龄的增加CD4 +/CD8+比值升高.仅服用胆碱酯酶抑制剂患者预后与外周血T细胞亚群百分比无关.治疗前患者T细胞亚群紊乱明显,即CD8+百分比下降、CD4+/CD8+比值升高明显者,经糖皮质激素及胸腺扩大切除术疗效较好.结论 MG患者体内存在T淋巴细胞亚群分布异常,且随着年龄的增加越明显,而与性别、临床分型无关.治疗前患者T细胞亚群紊乱者糖皮质激素及胸腺扩大切除术疗效明显.检测外周血T淋巴细胞亚群百分比对于临床指导治疗、判断预后有重要意义.【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2011(024)009【总页数】4页(P944-947)【关键词】重症肌无力;T淋巴细胞亚群;预后【作者】陈玉萍;魏东宁;肖漓【作者单位】100091北京,解放军第三○九医院神经内科重症肌无力中心;100091北京,解放军第三○九医院神经内科重症肌无力中心;100091北京,解放军第三○九医院移植中心实验室【正文语种】中文【中图分类】R445.10 引言MG是乙酰胆碱受体抗体介导的自身免疫性疾病，细胞免疫和补体参与其发病机制。

外周血T淋巴细胞亚群检测在不同呼吸科疾病中的运用效果比较及其临床价值评价贾民勇;王少芳;宋璐;陈景行;张军营【摘要】Objective To evaluate the efficacy and clinical value of peripheral blood T lymphocyte subsets in different respiratory diseases. Methods From April 2015 to December 2016,213 patients with pulmonary disease and 213 healthy subjects at the same time were selected as the control group. T cells (CD+3, CD+8), DP-T cells (double positive cells, CD+3, CD+4, CD+8) and DN-T cells (double- CD-3, CD+19), and NK cells (CD-3, CD+16, CD+56) were detected by immunohistochemistry. Results The sensitivity of traditional T lymphocyte subpopulation was 76.06%,and the percentage of T lymphocyte subsets was 78.87% and 73.32% respectively (P>0.05), but the percentage of complete T lymphocyte subsets was 85.92%,91.55% of intact lymphocyte subsets and 73.32% of routine blood. The percentage of traditional T lymphocyte subsets,the percentage and absolute count of traditional T lymphocyte subsets, lymphocyte subsets and complete lymphocyte subsets specificity, and the diagnostic rate was higher than routine blood,and its misdiagnosis rate and missed diagnosis rate were lower than routine blood. The ratio of CD+3,CD+4and T4/T8 in total T cell CD+3and T4 cells in pulmonary tuberculosis, respiratory tract infection and lung cancer were lower than those in the control group. The levels ofCD+3and CD+8in T8 cells of pulmonary tubercu-losis,respiratory tract infection and lung cancer were higher than those of the control group(P<0.05), but there was no significant difference between pulmonary tuberculosis and respiratory tract infection(P>0.05). Conclusion T lymphocyte subsets are involved in the development and progression of respiratory disease, and the comprehen-sive detection of peripheral blood T lymphocyte subsets is helpful to the diagnosis of disease,the judgmentof disease and the application of immune enhancer for clinical application.%目的评价外周血T淋巴细胞亚群检测在不同呼吸科疾病中的运用效果及临床价值.方法选取2015年4月至2016年12月医院呼吸科疾病患者213例以及同期健康体检者213例作对比研究,视为对照组.检测与比较纳入者总T细胞(CD+3)、T4细胞(CD+3、CD+4)、T8细胞(CD+3、CD+8)、DP-T细胞(双阳性细胞,CD+3、CD+4、CD+8)和DN-T细胞(双阴性细胞,CD+3、CD-4、CD-8)以及T4/T8比值、B细胞(CD-3、CD+19)、NK细胞(CD-3、CD+16、CD+56)水平.结果传统T淋巴细胞亚群百分比组成灵敏度76.06%、传统T淋巴细胞亚群百分比含量和绝对计数灵敏度78.87%与血常规的73.32%比较差异无统计学意义,P>0.05,但完整T淋巴细胞亚群的85.92%、完整淋巴细胞亚群的91.55%高于血常规的73.32%,传统T淋巴细胞亚群百分比组成、传统T淋巴细胞亚群百分比含量和绝对计数、完整T 淋巴细胞亚群和完整淋巴细胞亚群特异性、诊断率均高于血常规,误诊率和漏诊率低于血常规.肺结核、呼吸道感染和肺癌患者总T细胞CD+3、T4细胞CD+3、CD+4和T4/ T8比值均低于对照组,肺癌低于肺结核和呼吸道感染,差异均有统计学意义,P<0.05.肺结核、呼吸道感染和肺癌患者T8细胞CD+3、CD+8含量高于对照组,肺癌高于肺结核、呼吸道感染,差异均有统计学意义, P<0.05,但肺结核和呼吸道感染患者比较,差异均无统计学意义,P>0.05.结论 T淋巴细胞亚群参与了呼吸科疾病发生与发展过程,加强外周血T淋巴细胞亚群的全面检测有助于疾病诊断、病情判断以及为临床应用免疫增强剂提供了参考依据.【期刊名称】《临床肺科杂志》【年(卷),期】2018(023)004【总页数】4页(P732-735)【关键词】呼吸科;疾病;T淋巴细胞亚群;价值【作者】贾民勇;王少芳;宋璐;陈景行;张军营【作者单位】455000 河南安阳,安阳市人民医院呼吸和危重症医学科;455000 河南安阳,安阳市人民医院呼吸和危重症医学科;455000 河南安阳,安阳市人民医院呼吸和危重症医学科;455000 河南安阳,安阳市人民医院呼吸和危重症医学科;455000 河南安阳,安阳市人民医院呼吸和危重症医学科【正文语种】中文呼吸科疾病是一个针对气管、支气管、肺部及胸腔等部位为主的系统性疾病，包括肺结核、肺部感染、支气管哮喘、肺癌、肺部弥散性间质纤维化等，轻者表现为咳嗽、胸痛，重者出现呼吸困难、呼吸衰竭[1]。

外周血淋巴细胞亚群检测在肺癌患者临床评估及辅助治疗中的意义牛越;石晓宇【摘要】目的探讨外周血淋巴细胞亚群检测对肺癌患者临床评估及治疗的意义.方法收集不同病理类型的63例肺癌患者作为肺癌组,并选择体检健康的人群作为对照组.对比2组入院时外周血淋巴细胞亚群水平;不同病理分期患者外周血淋巴细胞亚群水平;血淋巴细胞亚群水平与肺癌分期的相关性;不同病理类型患者化疗前后外周血淋巴细胞亚群水平.结果肺癌组CD3+、CD4+、CD8+、NK及CD4+/CD8+与对照组存在差异(P<0.05);不同病理类型患者外周血淋巴细胞亚群水平不存在统计学差异(P>0.05).早期肺癌组、中期肺癌组和晚期肺癌组CD3+、CD4+、NK及CD4+/CD8+呈现递减趋势,CD8+呈现递增趋势,差异具有统计学意义(P<0.05);通过Spearman等级分析,提示CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞、NK细胞及CD4+/CD8+均与肺癌分期呈显著相关(P<0.05).患者化疗前、后外周血淋巴细胞亚群水平CD3+、CD4+、NK及CD4+/CD8+呈现递增趋势,CD8+呈现递减趋势,差异具有统计学意义(P<0.05).结论肺癌患者的免疫状态较健康人有一定程度减弱;随着肿瘤分期的增加,免疫功能进一步恶化,但不同病理类型肺癌患者的免疫功能无显著差异.通过辅助治疗可以改善肺癌患者的免疫功能.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2019(034)005【总页数】4页(P785-787,791)【关键词】肺癌;外周血淋巴细胞亚群;临床评估;辅助治疗【作者】牛越;石晓宇【作者单位】015000 内蒙古巴彦淖尔市医院;015000 内蒙古巴彦淖尔市医院【正文语种】中文【中图分类】R734.2近几年流行病学调查指出肺癌是所有癌症疾病中死亡率最高的疾病[1]。

目前治疗肺癌的手段主要有手术、放疗、化疗及生物反应调节剂等，其中化疗是最重要的手段之一。

多发性骨髓瘤患者外周血淋巴细胞亚群的变化及临床意义丁海;王森;高硕;徐学静;陈军浩【摘要】Objective To investigatethe lymphocyte subsets from patientswith multiple myeloma(MM),analysis the state of immune function and clinical significance.Methods 21 patients with MM in newly diagnosed and 25 healthy volunteers were recruitedfrom the Drum Tower hospital affiliated to Medical School of Nanjing University.The differences of CD3+T cells,CD3+CD4+T cells,CD3+CD8+T cells,B cells,NK cells,Th1,Th2 and Treg cells in peripheral blood between the patients of MM and healthy people were measured by the flow cytometry.Results Compared with the healthy volunteers and the patients with MM in newly diagnosed,the expression of CD3+ T cell,CD3+CD4+,T cell in lymphocyte were no statistically significant(P>0.05);the expression of B cells,Th1,Th2 cells and the ratio of CD4+/CD8+ in lymphocyte from the patients with MM were lower than healthy control(P<0.05);the expression of CD3+CD8+ cells,Treg cells and the ratio of Th1/Th2 were higher than the control group(P<0.05),the differences were statistically significant.Conclusion The immunefunction of patients with multiple myeloma was disorder,the imbalance of T cell subgroup may be associated with the occurrence,development and prognosis of disease.%目的探讨初发多发性骨髓瘤(MM)患者淋巴细胞亚群表达水平的变化,分析其免疫功能状态及临床意义.方法收集南京大学医学院附属鼓楼医院初诊为MM的患者20例(患者组),健康体检者25例(健康对照组).利用流式细胞仪分别检测2组研究对象的外周血淋巴细胞的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、B细胞、NK细胞、辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2,以及调节性T细胞(Treg)的表达水平,并进行比较.结果患者组与健康对照组比较,CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞比例的差异无统计学意义(P>0.05);CD4+/CD8+的比值、B细胞、Th1、Th2比例降低;CD3+CD8+T细胞、Th1/Th2、Treg所占比例比健康对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MM患者免疫功能发生紊乱,T细胞亚群的表达异常可能与疾病的发生、发展及预后相关.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2017(014)013【总页数】3页(P1880-1882)【关键词】多发性骨髓瘤;淋巴细胞亚群;辅助性T淋巴细胞1;辅助性T淋巴细胞2;调节性T细胞【作者】丁海;王森;高硕;徐学静;陈军浩【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008【正文语种】中文·论著·多发性骨髓瘤(MM)是一种以骨髓浆细胞恶性增生为主要特征的血液恶性肿瘤。

结直肠癌30例治疗前后外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意
义
赵志胜;王华
【期刊名称】《南通医学院学报》
【年(卷),期】1997(017)001
【摘要】应用全血微量细胞技术监测结直肠癌３０例手术前后Ｔ细胞亚群的变化。

资料显示，结直肠癌３０例治疗前Ｔ细胞亚群与正常人群比较，ＣＤ４下降ＣＤ８上升，ＣＤ４／ＣＤ８下降，差异均有极显著性（Ｐ〈０．０１）。

手术对患者Ｔ细胞亚九也有类似影响，结直肠癌术前，术后Ｔ细胞亚群比较仍如此，说明术后患者免疫功能受到抑制，治疗前后对Ｔ细胞亚群进行监测有助于对患者免疫状况的判断。

【总页数】2页(P33,35)
【作者】赵志胜;王华
【作者单位】泰兴市第三人民医院;泰兴市第三人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R735.303
【相关文献】
1.支气管哮喘患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义 [J], 林华;李佩贤
2.老年晚期结直肠癌病人化疗前后外周血T淋巴细胞亚群变化 [J], 张皓;李晓林
3.结直肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数目的变化及其临床意义 [J], 邱海波;伍小军;周志伟;万德森;陈功;卢震海;王国强;拉吉夫;潘志忠
4.结直肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞检测的临床意义 [J], 肖秀英;于宝华;颜歌;丁新;余琛;杜祥
5.晚期肺癌患者靶向治疗后外周血T淋巴细胞亚群表达变化及临床意义 [J], 周进;罗宏;林征;陈志刚;黄开荣
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外周血淋巴细胞亚群检测在肺癌患者临床评估与辅助治疗中的应用效果熊羽【期刊名称】《临床合理用药杂志》【年(卷),期】2021(14)12【摘要】目的探讨外周血淋巴细胞亚群检测在肺癌患者临床评估与辅助治疗中的应用效果。

方法选取新余市人民医院2017-2018年收治的晚期初治肺腺癌患者60例作为肺癌组,另选取同期于本院行体检的健康志愿者为对照组60例。

采集外周静脉血后置于流式细胞仪中进行检测,比较肺癌组化疗前与对照组外周血淋巴细胞亚群水平,肺癌组化疗前后外周血淋巴细胞亚群水平,肺癌组化疗后与对照组外周血淋巴细胞亚群水平。

结果肺癌组化疗前总T淋巴细胞、Th细胞、CD4^(+)/CD8^(+)细胞比值低于对照组,Tc细胞水平高于对照组(P<0.05)。

化疗后肺癌组总T淋巴细胞、Th细胞、CD4^(+)/CD8^(+)细胞比值高于化疗前(P<0.05);2组Tc细胞水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。

肺癌组化疗后Tc细胞水平高于对照组(P<0.05);2组总T淋巴细胞、Th细胞、CD4^(+)/CD8^(+)细胞比值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。

结论外周血淋巴细胞亚群检测在肺癌患者临床评估与辅助治疗中的应用效果良好,可及时评估肺癌患者化疗前后免疫状况,为指导临床治疗具有重要意义。

【总页数】3页(P13-15)【作者】熊羽【作者单位】江西省新余市人民医院【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.肺癌患者外周血液树突状细胞和淋巴细胞亚群的检测及临床意义2.外周血T淋巴细胞亚群检测用于恶性肿瘤患者中的临床效果3.肺癌患者外周血DNT细胞和T淋巴细胞亚群检测的临床意义4.外周血淋巴细胞亚群检测在肺癌患者临床评估及辅助治疗中的意义5.不同分期肺癌患者外周血淋巴细胞亚群检测与临床意义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

非霍奇金淋巴瘤患者外周血淋巴细胞亚群分析及临床意义郑贤干;江松福;沈志坚;高申孟;张君丽【期刊名称】《温州医学院学报》【年(卷),期】2001(031)004【摘要】目的:研究非霍奇金淋巴瘤患者血淋巴细胞亚群与临床分期的关系. 方法:采用流式细胞仪检测患者或正常成人血中淋巴细胞亚群比例、CD4/CD8比值. 结果:与正常成人比较,Ⅰ～Ⅲ期NHL患者血中总T、T辅助细胞、CD4/CD8及B细胞略降低,T抑制细胞略增高(P>0.05);而NK细胞明显增高(P<0.05).Ⅳ期NHL总T、T辅助细胞及CD4/CD8明显下降(P<0.05),NK细胞明显增高(P<0.05).与Ⅰ～Ⅲ期比较:Ⅳ期患者的总T、T辅助细胞、CD4/CD8和NK细胞明显下降(P<0.05),B细胞明显增高(P<0.05).结论:淋巴细胞亚群的分析有助于NHL病情的判断.【总页数】2页(P234-235)【作者】郑贤干;江松福;沈志坚;高申孟;张君丽【作者单位】浙江省苍南县第三人民医院内科,;温州医学院第一附属医院血液科,;温州医学院第一附属医院血液科,;温州医学院第一附属医院医学科学研究所,;温州医学院第一附属医院血液科,【正文语种】中文【中图分类】R730.263【相关文献】1.肺结核病患者外周血淋巴细胞亚群的绝对数分析及临床意义 [J], 吴映娥;蔡应木;彭文光;吴清花2.含氟达拉滨方案治疗后B细胞非霍奇金淋巴瘤患者外周血淋巴细胞亚群分析 [J], 董维;李群;翟晓;杨辉3.非霍奇金淋巴瘤患者的骨髓活检分析及其临床意义 [J], 李双兴4.重症肌无力患者外周血淋巴细胞亚群水平及其临床意义 [J], 罗婷;张艺凡;楚兰;陈美秋;夏聪;徐凯翎;刘磊5.重症肌无力患者外周血淋巴细胞亚群水平及其临床意义 [J], 罗婷;张艺凡;楚兰;陈美秋;夏聪;徐凯翎;刘磊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞检测分析孙朗炎;戴扬
【期刊名称】《东南大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2001(020)002
【摘要】目的：了解带状疱疹患者细胞免疫功能变化。

方法：应用流式细胞仪检测91例带状疱疹患者外周血T细胞亚群和NK细胞。

结果：患者外周血中T细胞亚群CD3、CD4水平明显下降，CD4/CD8值显著降低，与对照组相比均有显著性差异(P<0.005)；NK细胞检测结果两组相比无显著性差异(P>0.05)。

结论：带状疱疹患者的免疫功能有所下降，所以在临床治疗过程中须提高患者的细胞免疫功能。

【总页数】2页(P128-129)
【作者】孙朗炎;戴扬
【作者单位】常州市第一人民医院皮肤性病科,;金坛市中医院皮肤科,
【正文语种】中文
【中图分类】R752.12;R392.7
【相关文献】
1.不孕症患者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞特征分析 [J], 王群;高志芬;杨朝国
2.组织细胞坏死性淋巴结炎患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞检测及临床意义[J], 张国英;黄子慧;徐卫平;王丹霞
3.带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞分析 [J], 徐春兴;蒋诚
4.结核病患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的检测分析 [J], 黄其文
5.下咽鳞状细胞癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性研究 [J], 姜元芹;陈爱民;黄煦格;骆献阳;张炳煌;蔡成福;周燚;刘存山
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