体内小鼠实验方案
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一、实验目的1. 掌握细菌接种小鼠的基本操作方法。
2. 观察细菌在小鼠体内的生长繁殖情况。
3. 了解细菌感染小鼠后对小鼠的影响。
二、实验原理细菌接种小鼠实验是微生物学实验中常用的实验方法之一。
通过将细菌接种到小鼠体内,观察细菌在小鼠体内的生长繁殖情况,可以了解细菌的致病性、毒力以及小鼠的免疫反应等。
三、实验材料1. 实验动物:昆明小鼠10只,体重20-25g。
2. 细菌:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
3. 培养基:肉汤培养基、琼脂培养基等。
4. 实验仪器:无菌操作台、接种环、接种针、酒精灯、温箱、显微镜等。
四、实验方法1. 细菌接种(1)将细菌从培养基中取出,用接种环挑取适量细菌,接种到肉汤培养基中,置于37℃温箱培养18-24小时,观察细菌生长情况。
(2)将培养好的细菌用接种环挑取适量,接种到琼脂培养基中,置于37℃温箱培养18-24小时,观察细菌生长情况。
2. 小鼠接种(1)将小鼠置于无菌操作台,用酒精棉球消毒小鼠的腹部,暴露出腹部皮肤。
(2)用接种针挑取适量细菌,将细菌接种到小鼠的腹部皮肤上。
(3)用无菌棉球覆盖接种部位,避免细菌污染。
3. 观察与记录(1)观察小鼠接种细菌后的生长情况,记录小鼠的体重、食欲、活动能力等。
(2)定期观察小鼠的腹部皮肤,观察是否有红肿、溃烂等症状。
(3)取小鼠的血液、内脏等组织,进行细菌培养,观察细菌的生长情况。
五、实验结果1. 细菌生长情况(1)大肠杆菌在肉汤培养基中生长良好,形成浑浊的菌液。
(2)金黄色葡萄球菌在琼脂培养基上形成圆形、黄色、表面光滑的菌落。
2. 小鼠接种细菌后的生长情况(1)接种大肠杆菌的小鼠,体重逐渐下降,食欲减退,活动能力下降。
(2)接种金黄色葡萄球菌的小鼠,腹部皮肤出现红肿、溃烂等症状。
3. 细菌培养结果(1)接种大肠杆菌的小鼠,血液、内脏等组织培养出大肠杆菌。
(2)接种金黄色葡萄球菌的小鼠,血液、内脏等组织培养出金黄色葡萄球菌。
六、实验结论1. 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有致病性,可导致小鼠感染。
动物实验设计方案作业1. 物种选择根据实验目的和研究需求,选择适合的动物物种进行实验。
考虑动物的生理特征、代谢能力、行为习性以及与研究对象的相似度等因素。
在这个实验设计中,我们选择了小鼠(Mus musculus)作为实验动物。
2. 样本分组将实验动物随机分成实验组和对照组。
实验组接受特定处理,对照组保持正常情况不作处理。
确保每组的样本数量足够,并且代表性好。
3. 处理措施针对实验目的,确定实验组的处理措施。
例如,如果我们的目的是测试某种新药物的疗效,那么实验组将接受给药处理,而对照组则接受安慰剂或常规治疗。
4. 实验参数设定实验的参数,包括给药剂量、给药时间、实验时长等。
确保参数设定在合理范围内,尽量模拟真实情况。
5. 数据采集制定数据采集方案,明确需要收集的数据指标和采集时间点。
可以使用仪器设备或者手工测量收集数据。
确保数据采集的准确性和一致性。
6. 实验环境为实验动物提供适宜的实验环境,包括温度、湿度、光照和饲养条件等。
确保实验环境稳定和无扰动。
7. 伦理审查在动物实验设计中,必须充分尊重动物权益和保护动物福利。
进行伦理审查,确保实验符合伦理要求和法规规定。
8. 实验记录详细记录实验过程中的每一个步骤和数据。
包括动物个体的基本信息、实验前后的体重、观察到的症状和行为等。
确保记录准确、可靠且易于阅读。
9. 数据分析将收集到的数据进行统计分析和结果解读。
使用适当的统计方法来验证研究假设和得出结论。
确保分析过程严谨、逻辑清晰。
10. 结果和讨论根据数据分析的结果,撰写实验结果和讨论部分。
解释实验结果是否支持研究假设,讨论可能的原因和影响因素,并提出进一步研究的建议。
11. 结论和展望总结实验研究的目的、方法和结果。
指出实验的贡献和局限性,并展望未来改进和扩展的方向。
12. 参考文献列出实验设计过程中参考的文献和资料。
确保引用准确、完整,并符合科学规范。
以上是一个动物实验设计方案的基本框架。
具体的实验内容和实验步骤将根据不同的研究需求和实验要求进行调整和补充。
小鼠实验报告一、引言小鼠实验一直是科研领域中常用的实验方式之一。
通过对小鼠进行实验,可以帮助研究人员更深入地了解生物学、医学、心理学等领域的相关知识。
本文将从实验设计、操作步骤、实验结果和讨论等方面探讨小鼠实验的重要性和应用。
二、实验设计在进行小鼠实验之前,首先需要明确实验目的和假设。
通过明确实验目的,可以有针对性地设计实验方案,选取合适的小鼠种类和数量。
在设计实验时,需要考虑到实验组和对照组的设置,以及实验时长和操作流程等因素。
三、实验操作小鼠实验的操作过程较为复杂,需要严格按照标准操作流程进行。
首先,需要准备合适的实验设备和材料,如小鼠笼、饲料、水等。
然后,将小鼠转移到实验环境中,进行适应性训练和处理,以保证实验结果的可靠性。
接下来,根据实验设计设置实验组和对照组,给予不同的处理,比如不同药物的给予或环境刺激等。
在实验进行过程中,需要记录和观察小鼠的行为、生理指标等重要数据。
四、实验结果实验结果是小鼠实验的核心和关键。
通过对实验过程中收集到的数据进行统计和分析,可以得到相关结论和推论。
其中,数据统计和分析可以采用多种方法,如方差分析、t检验、回归分析等。
通过这些统计分析的结果,可以验证实验假设,得出科学结论。
五、讨论实验的讨论环节是对实验结果的解释和深入研究。
通过对实验结果的讨论,可以探索实验结果的可能原因和机制。
同时,还可以比较实验结果与已有研究成果的一致性和差异性,进一步加深对问题的认识和理解。
在讨论中,需要充分考虑研究中的局限性和不确定性,并提出可能的解决方案和改进措施。
六、应用与展望小鼠实验在科研中具有广泛的应用价值。
通过对小鼠进行实验,可以为新药开发、疾病治疗、行为学研究等提供重要的依据和参考。
未来,随着科技的不断进步,小鼠实验将会借助新的技术手段不断发展和完善,为科学研究提供更多可能性。
七、结论综上所述,小鼠实验是科研领域中常用的实验方式之一。
通过合理的实验设计和严格的实验操作,可以获得可靠的实验结果。
小鼠实验设计方案小鼠实验设计方案实验目的:本实验的目的是通过对小鼠进行实验观察和分析,从而得出某种药物对小鼠行为的影响及其机制。
实验材料:1.音箱和水平调节的台架2.药物样品3.小鼠(同龄、同性别、同品系)4.实验笼5.摄像机6.食物和水实验设计:1.实验组和对照组:将小鼠除了药物以外的条件保持一致,将小鼠随机分组成实验组和对照组。
实验组给予药物处理,对照组不给予任何处理作为对照。
2.实验流程:首先,将小鼠放置在笼子中,让其适应环境。
然后对小鼠进行体重、性别、年龄等信息的记录。
接下来,打开音箱,调节音量和频率,以确保音乐的条件一致。
在一定的音乐声或静音期后,使用视频摄像机记录小鼠的行为。
通过记录小鼠的活动情况,包括运动、呼吸、摇尾巴等行为,比较实验组和对照组的差异。
在进行行为观察时,可以根据实际情况进行时间的分段观察,例如,记录小鼠在音乐开始前、音乐进行过程中以及音乐结束后的行为变化。
3.实验参数的监测:饮食观察:记录小鼠的饮食情况,比较实验组和对照组之间的差异。
运动监测:使用红外传感器或摄像机等设备,记录小鼠的运动情况,如活动距离、运动速度等。
呼吸监测:使用呼吸频率测量仪或其他设备,记录小鼠的呼吸情况。
4.实验数据的统计分析:对实验所得数据进行统计和分析,比较实验组和对照组之间的差异,并进行显著性分析。
可以使用t检验、方差分析或非参数分析等方法对数据进行处理。
实验安全:1.实验过程中,要注意小鼠的饮食和生活环境的卫生,确保小鼠的健康和安全。
2.实施实验过程中要注重伦理,遵守实施实验的国家和地方的法律和规定,确保小鼠的使用符合伦理要求。
实验结果分析和结论:根据实验所得结果,对实验组和对照组的差异进行分析和研究,得出药物对小鼠行为的影响及其机制,提出相应的结论。
实验思考和展望:结合实验结果,进一步思考实验中的问题,并提出下一步研究的方向和展望,为进一步的研究提供参考。
以上就是小鼠实验设计方案,通过实验观察和分析,可以深入了解某种药物对小鼠行为的影响及其机制,为进一步的研究提供实验基础。
小鼠实验的原理引言:小鼠实验是生物学研究中常用的实验手段之一,通过对小鼠进行实验观察,可以获取大量有关生物学和医学的重要信息。
本文将介绍小鼠实验的原理,包括实验设计、操作步骤和数据分析等内容。
一、实验设计1. 确定实验目的:在进行小鼠实验前,首先需要明确实验目的,例如研究某种疾病的发病机制、药物的疗效等。
2. 选择合适的小鼠模型:根据实验目的选择合适的小鼠品系或突变株,确保实验结果具有可靠性和可重复性。
3. 制定实验方案:根据实验目的和样本量的要求,制定详细的实验方案,包括实验组和对照组的设定、实验时间和实验操作等。
二、实验操作1. 小鼠饲养:在实验开始前,需要将小鼠饲养在适宜的环境中,保证其生活条件良好。
这包括提供充足的食物和水,控制温度和湿度,并定期清理鼠笼。
2. 实验操作准备:在实验开始前,需要准备好所需的实验材料和仪器设备,以及对实验操作进行培训。
3. 实验操作步骤:根据实验方案进行实验操作,例如给小鼠注射药物、采集样本等。
4. 注意实验伦理:在进行小鼠实验时,需要遵守相关的实验伦理规定,确保动物的福利和权益。
三、数据分析1. 数据收集:在实验操作完成后,需要收集相关的数据,例如小鼠的生存率、体重变化、组织样本的分析结果等。
2. 数据处理:对收集到的数据进行统计分析,例如计算平均值、标准差,并进行图表展示。
3. 数据解读:根据统计分析的结果,对实验数据进行解读和讨论,得出结论并提出可能的机制或解释。
结论:小鼠实验是生物学和医学研究中常用的实验手段,通过合理的实验设计、准确的实验操作和科学的数据分析,可以获取有关生物学和医学的重要信息。
然而,在进行小鼠实验时,也需要注意实验伦理和动物福利的问题,以确保实验的科学性和道德性。
希望本文对于读者了解小鼠实验的原理有所帮助。
以下是连体共生小鼠实验方法的主要步骤:
1. 麻醉:抓取连体小鼠放置在体重秤上称重,按照1ul/g体重,腹腔注射1%戊巴比妥钠。
同时因为小鼠多次进行麻醉和手术,其对麻药的耐受减弱,麻药致死率增高,所以此次手术的麻药剂量相比以前手术的基础上再适当减量。
2. 备皮:用动物剃毛刀将连体共生小鼠连接处的毛发全部剃除干净,上下范围为小鼠耳后至后腿膝关节,左右范围为小鼠腹中线至背部的脊柱旁。
3. 维持术中小鼠的体温:将连体共生小鼠放置于温控仪的加热板,然后插入温控仪的肛温探头,调节温控仪的旋钮,使得小鼠体温可保持在36.8\~37.2℃之间。
4. 术前消毒:备皮后严格按照外科消毒方法对将进行手术的区域进行消毒。
5. 切开皮肤:备皮区域,用已高压灭菌和酒精浸泡的手术器械剪开皮肤。
如不小心损伤血管,尽早止血。
请注意,以上步骤需要在专业人士的指导下进行,以确保实验的安全和有效性。
同时,应严格遵守动物实验伦理和法规,确保动物的福利和权益。
小鼠缺氧实验报告1 缺氧实验简介小鼠缺氧实验是一种常用的实验方法,其旨在通过给小鼠施加缺氧刺激,来研究缺氧对小鼠生理和行为的影响。
缺氧条件下,小鼠的体内氧气供应不足,导致细胞功能受损,进一步影响各个系统的功能。
本文将介绍小鼠缺氧实验的具体步骤以及相关研究成果。
2 小鼠缺氧实验的步骤2.1 动物实验伦理小鼠缺氧实验需要对动物实验进行伦理审查,并经过合格的动物实验委员会批准。
实验过程中需要遵循动物实验规范,保证小鼠的生命和健康。
2.2 小鼠缺氧处理实验过程中,可以采用不同的方法给小鼠施加缺氧刺激。
最常用的方法是让小鼠置于缺氧箱内,让其暴露在一个低氧环境中,从而限制其氧气供应。
另一种方法是使用低氧气体注射技术,给小鼠直接注射低氧气体。
2.3 实验控制为了减少实验误差,需要对实验条件进行严格控制。
例如,需要标准化实验条件,如环境温度、湿度、光照等。
此外,为了确保实验结果的可靠性,需要设计对照组进行对比分析。
2.4 实验指标测定在实验过程中,需要对小鼠的各种指标进行测定,以评估缺氧刺激对小鼠的生理和行为的影响。
常用的指标包括血氧饱和度、动脉血气分析、神经元形态和功能等。
3 小鼠缺氧实验的应用小鼠缺氧实验常用于研究缺氧对感觉、运动、认知等行为的影响。
此外,该实验还常用于探索缺氧对神经系统、心血管系统、免疫系统等方面的影响。
针对不同的研究目的,可以采用不同的实验方案。
例如,可以通过不同的时间、强度和频率的缺氧刺激来了解缺氧对小鼠生理功能的影响。
也可以结合其他技术手段,如行为学、神经电生理学和影像学等,来对小鼠的行为和神经系统功能进行全面评估。
4 实验成果小鼠缺氧实验已被广泛应用于研究不同疾病的发生机制和治疗策略。
例如,研究表明缺氧可以通过激活心肌细胞代谢来促进心脏再生,从而有望成为心脏病治疗的一种新方法。
此外,缺氧刺激还可以促进神经系统的可塑性,可以作为治疗癫痫、帕金森病等神经系统疾病的潜在方法。
总之,小鼠缺氧实验是一种有效的实验方法,可以用于研究缺氧对小鼠生理和行为的影响,有望为研究不同疾病的发病机制和治疗策略提供新思路。
小鼠实验方案
嘿,朋友们!今天来给你们讲讲超有趣的小鼠实验方案哟!比如说,我们要研究小鼠的行为习惯,那可不得给它们弄个好玩的小天地呀!想象一下,那就是小鼠的专属游乐场。
咱先得选一群活蹦乱跳的小鼠吧,就像从一群小朋友里选出最调皮的那个。
然后呢,给它们准备各种好玩的,比如迷宫一样的通道,像探险一样,小鼠们肯定超好奇。
“嘿,小鼠们,敢不敢来挑战一下呀!”我们在旁边观察着,就像看着自己的小伙伴在比赛。
要是研究小鼠的饮食习惯,那就得弄不同的美食摆在它们面前。
“来来来,小宝贝们,看看喜欢哪个好吃的呀!”这不就像给小朋友们一堆糖果让他们选一样嘛。
有时候小鼠会犹豫不决,哎呀,那小模样太可爱啦!
咱还可以观察小鼠在不同环境下的反应。
给它们一个明亮温暖的地方,再给一个暗暗的角落,它们会咋选择呢?这就跟我们人一样,有人喜欢阳光,有人喜欢安静的角落呀。
做小鼠实验可不是随便玩玩哟!这是为了探索好多奥秘呢。
我们可以通过它们了解好多关于生命的事情。
小鼠虽然小,但它们身上可有大秘密等着我们去发现呢!
所以呀,小鼠实验方案真的超级重要。
它能帮助我们解开好多我们不知道的谜题,让我们对这个世界有更深刻的认识呀!伙伴们,是不是觉得很有意思呀,快来一起加入吧!。
小鼠实验方案范文引言:小鼠实验是研究许多疾病和药物的动物模型之一、通过小鼠实验,可以深入了解疾病机理、评估新药的疗效以及研究可能的毒副作用。
本方案将介绍一种常见的小鼠实验方案,包括实验设计、实验材料和方法、实验数据处理和分析等方面的内容。
一、实验设计:1.实验目的:明确研究目的,例如评估药物的治疗效果、疾病模型的建立等。
2.小鼠品系和数量:选择适合实验的小鼠品系,确定所需实验的小鼠数量,一般建议使用同源、同性别小鼠,并尽量减少动物数量,以符合伦理要求。
3.实验组和对照组设置:设计不同的实验组和对照组,以对照组和实验组进行比较分析。
4.随机分组和盲法:使用随机方法将小鼠分为实验组和对照组,并采用盲法,使得实验操作员和数据分析者对实验组和对照组的情况不知晓。
5.倍数重复:对每个实验条件进行多次重复,以提高结果的可信度和统计学意义。
二、实验材料和方法:1.小鼠饲养和管理:根据小鼠品系提供合适的饲料和饮水,确保小鼠的良好健康状态。
2.疾病模型建立(可选):若需要建立疾病模型,则按照相关方法对小鼠进行相应处理,例如药物注射、基因敲除等。
3.药物处理(可选):按照实验设计,在实验组小鼠中给予药物处理,对照组给予相同剂量的溶剂。
4.制备样品:根据实验要求,对小鼠进行标本采集和处理,例如血液、组织样品等。
5.实验测定:采用合适的实验方法对样品进行测定,如酶活性、蛋白质表达、基因水平等。
6.数据记录:详细记录实验过程中的操作步骤、实验时间、实验地点等信息,以及所有获取的数据。
三、实验数据处理和分析:1.数据统计和计算:将实验数据录入电子表格软件,并进行统计和计算,如均值、标准差、方差等。
2.数据分析:使用合适的统计分析方法,比较实验组和对照组的差异,如t检验、方差分析等,并分析差异是否具有统计学意义。
3.结果展示:将数据处理和分析的结果进行可视化展示,例如制作条形图、散点图、曲线图等。
四、实验伦理和安全:1.伦理审批:在进行小鼠实验前,必须获得相关机构的伦理审批,并按照相关伦理准则进行实验。
实验报告
抗肿瘤药物体内活性研究
一、实验原理
聚合物胶束的粒径约为0-200 nm,可以利用肿瘤组织的增强渗透保留效应(EPR),选择性地透过肿瘤血管并积累在肿瘤组织,实现被动靶向;被特定官能团修饰的聚合物胶束则能响应部位的物理化学变化,实现靶向部位的载体聚集和药物定点释放。
抗肿瘤药物的反复使用容易导致肿瘤细胞产生多药耐药性(MDR),肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性后,对结构与作用机制不同的其它抗肿瘤药产生交叉耐药的现象极大的限制了化疗药物的疗效。
纳米药物传递系统如脂质体、胶束、纳米粒等作为MDR逆转策略越来越引起关注。
胶束能通过EPR效应使药物选择性地在肿瘤部位累积和释放,增加细胞内药物浓度,缓控释药物,并通过靶向细胞上特异受体对应的配体修饰,达到主动靶向,从而逆转肿瘤细胞耐药。
盐酸阿霉素(DOX·HCl),属于蒽环类抗生素,能够抑制癌细胞遗传物质核酸的合成,具有广谱的恶性肿瘤的治疗效果,广泛用于宫颈癌细胞、卵巢癌、乳腺癌、恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌等的治疗。
然而,阿霉素的急性和慢性毒副作用限制了其在临床上的广泛应用,急性毒副作用包括恶心、呕吐、骨髓抑制和心率失常;慢性毒性表现为肝脏、大脑和肾脏的损伤,对心脏具有不可逆的剂量依赖性的损伤。
用聚合物构建新型药物胶束传递系统,提高对疏水性药物的包载能力和药物稳定性;通过小分子修饰实现被动和主动靶向。
此外,通过相关实验考察作为药物载体的聚合物胶束的耐药能力,以此来证明聚合物胶束的生物安全性好、稳定性高、载药量高、响应性强、靶向性准、缓控释性能好。
二、实验目的
1.运用抗肿瘤药物在小鼠体内评价方法,筛选出具有高表达、特异性、高亲和力的主动/被动靶向、无细胞毒性、抗肿瘤效果好的聚合物胶束。
2.动物体内抑瘤实验基于活体成像技术,建立药物抗肿瘤效果活体动物影响研究方法。
三、实验内容
1.动物模型
将状态良好的细胞消化,用培养液稀释至1×106 cells/mL细胞密度,吹匀后于每只小鼠加入细胞悬液100 μL,培养。
受试溶液每孔加入100 μL,每个浓度3-5个平行孔,每组10-15只裸鼠;对照组,即不加待测药液,单一补加100 μL 生理盐水,培养。
2.体内抑瘤实验
给药后观察裸鼠体内肿瘤体积变化情况。
3.
裸鼠在给药2和12天后处死,取血液、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、肿瘤组织,置于近红外成像系统观察。
四、实验方案
1.动物模型的建立
通过MTT实验选取生物活性好、稳定性高、载药量高的聚合物纳米颗粒(NPs),为了考察不同给药剂量的DOX-NPs (阿霉素负载聚合物纳米颗粒)和DOX·HCl 溶液的抗肿瘤效果,选取HeLa细胞常规培养,待细胞扩增至一定数量,且生长状态良好,取对数生长期的细胞用0.25%胰酶消化2 min,l000rpm离心5min,弃去上清液,用新鲜无血清的DMEM培养基重悬细胞沉淀,配制成1×106个细胞/mL的细胞悬液。
然后用注射器吸取细胞悬液,排空气泡,注射于体重在20-22g左右的BALB/C雌性裸鼠左腋皮下组织中,每只接种100 µL,约含1×105个细胞,大约共接种120只。
观察裸鼠肿瘤生长情况,并定期称裸鼠体重,测量肿瘤大小。
(实验期间动物正常饮食喝水。
)
2.给药及抑制肿瘤效果评价
当肿瘤体积长到100~150 mm3时,将裸鼠随机分成4组,每组10只裸鼠(n=4),分别为阴性对照组(生理盐水组),DOX·HCl,NPs和DOX-NPs。
阴性对照组通过尾静脉注射100µL对照生理盐水。
DOX·HCl,NPs和DOX-NPs组分别通过小鼠尾静脉注射100µL的用无菌生理盐水配制的DOX·HCl。
并记为第一天。
(给药剂量分别为:5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg)。
隔天给药一次,给药后小鼠正常饲养,每天观察小鼠的生存状况,每两天记录一次小鼠体重,并用游标卡尺测量小鼠肿瘤的长短径,根据公式计算肿瘤体积(V)和相对肿瘤体积
(Relative tumor volume,RTV),绘制时间-小鼠相对体重和时间-小鼠相对肿瘤体积变化曲线。
给药后第12 天处死小鼠,摘取皮下肿瘤并称重。
肿瘤体积:V=a×b2/2(a为肿瘤的最长径,b为肿瘤的最短径)公式1 相对肿瘤体积:RTV = V a/V0(V a为每日肿瘤体积,V0为起始肿瘤体积公式2 按照以下公式:计算各给药组的抑瘤率:
Tumor inhibiton ratio % = (1─V test/V control)⨯100% 公式3 其中,V test为第12天时给药组的相对肿瘤体积,V control为第12天时生理盐水组的相对肿瘤体积。
3.药物体内脏器分布实验
由于DOX·HCl自身具有红色荧光,故可通过近红外成像仪观察药物在裸鼠体内各脏器的分布情况。
在尾静脉注射5mg/kg生理盐水、游离DOX·HCl、NPs和DOX-NPs组生理盐水溶液后,于第2、12天处死裸鼠,取血液、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏以及肿瘤置于在体近红外成像系统观察,分析给药后阿霉素在各
4.组织切片分析
通过肿瘤以及心脏组织切片可以判断不同制剂对肿瘤的抑制作用以及阿霉素对心脏的损伤情况。
在尾静脉注射生理盐水、5mg/kg游离DOX·HCl、NPs 和DOX-NPs组生理盐水溶液后,在预设时间处死给药后的裸鼠,剖取心脏以及肿瘤组织,通过10%多聚甲醛对组织进行固定(12小时以上)。
依次经过50%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精(两次)进行脱水处理(每级35-45分钟)。
100%酒精与二甲苯(1:1)透明处理30-40分钟,再移入二甲苯中15-20分钟。
将透明后的组织块置于刚过溶点的融化石蜡中浸渍,取代组织中含有的透明剂,将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包埋在其中。
修整蜡块,并进行切片。
经过苏木精-伊红染色(HE染色)或者醋酸铀和硝酸银染色后固定于铜网,通过近红外成像仪或荧光显微镜或TEM观察心脏受损
5.统计学处理
±表示, 组内和所有实验数据采用SPSS10.0统计软件分析处理。
数据X S
组间比较采用方差分析。
以P ≤0. 05 为差异有统计学意义。