湿热灭菌柜验证

湿热灭菌验证与干热灭菌验证的对比1、概念：（1）湿热灭菌验证:主要是对产品、灭菌设备和装载方式的验证。

验证活动包括：对照灭菌设备设计的灭菌参数来校核灭菌器的性能、建立某产品灭菌程序及装载方式的有效性和重现性、估计灭菌过程中产品可能发生的变化。

（湿热灭菌（118-134℃）——蒸汽、过热水）（2）干热灭菌验证：主要用于内包装用的玻璃容器或金属制品的灭菌和去热源，所使用的灭菌程序应通过验证试验。

(干热灭菌（160-320 ℃）——热空气)2、验证目的：（1）湿热：通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据，从而找到最有效最合理的灭菌参数，并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌工艺参数应用到产品生产的除菌过程中去，以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备过程和灭菌效果具有可靠性和重现性。

主要适用于能耐受高温、高压饱和蒸汽的产品。

（2）干热：间歇式或隧道式热空气灭菌常用来处理可耐受较高温度而不适宜用湿热灭菌法的物品，如玻璃瓶、粉末、油类、玻璃器皿、不锈钢设备等。

3、灭菌原理：（1）湿热灭菌—导致细胞内关键性蛋白质和酶发生热变性或凝固，湿度对该破坏性过程起促进作用。

（2）干热灭菌—使微生物氧化而不是蛋白质变性。

4、灭菌工艺：（1）湿热：采用附加排气系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加真空系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加空气加压系统的饱和蒸汽灭菌工艺。

（2）干热：1）残存几率法：该法以灭菌为目的。

通常适用于热不稳定性物质。

灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物残存几率为10-6，即在一百万个已灭菌单元中，染菌单元的数目不得超过 1 个。

2）过度杀灭法：该法也以灭菌为目的。

通常适用于耐热性能较好的物质。

灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物的残存几率小于10 -6， “ 过度杀灭 ” 的灭菌程序所获得干热灭菌值F H 可使耐干热灭菌生物指示剂的总量下降 12 个对数单位。

3）无菌无热原法：该法的目的是达到无菌和无热原。

用于最终灭菌药品（注射剂）的蒸汽灭菌工艺及验证指南一、范围由于蒸汽－湿热灭菌本身具备无残留，不污染环境，不破坏产品表面，并容易控制和重现等优点，被广泛应用于最终灭菌药品（注射剂）的除菌过程中。

本指南为有关人员提供最终灭菌药品（注射剂）的蒸汽灭菌柜的验证指南，以及蒸汽灭菌工艺及验证的一些操作方法的指南。

本指南依据《药品生产质量管理规范》（1998年修订）的相关准则，但本指南叙述的通用原则和方法不是法定的。

本指南的着重于最终灭菌药品（注射剂）的蒸汽-湿热灭菌工艺的验证，但有些通用原则和方法对于冻干机的湿热灭菌、某些设备的在线蒸汽灭菌等可能也具备参考价值。

二、目的蒸汽－湿热灭菌验证的目的，就是通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据，从而找到最有效最合理的灭菌参数，并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌工艺参数应用到药品生产的除菌过程中去，以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备都能起到灭菌的效果，并且对不同灭菌物品的灭菌过程和灭菌效果具有可靠性和重现性，即验证结果必须证明生产中所采用的灭菌过程对经过灭菌的物品能够保证残存微生物污染的概率或可能性低于百万分之一。

蒸汽-湿热灭菌周期的设计和开发与蒸汽灭菌柜的性能以及被灭菌产品的适用性有关。

蒸汽-湿热灭菌介质包含以下几种：饱和蒸汽，空气-蒸汽混合气体，过热水等等。

其中：饱和蒸汽的加热速度最快，但是对于大型的软包装产品，过热水浸泡灭菌的方法效率更高，然而在过热水灭菌法中，热量的转移很大程度上依赖于容器中介质的强制运动。

饱和蒸汽是与液体状态的水保持平衡时的水蒸汽，因此饱和蒸汽只能存在于水汽的分界线上，即温度与压力之间的关系是固定的。

灭菌效果是通过蒸汽，蒸汽-空气混合物，过热水等介质与灭菌物品的热传递或产生冷凝水的水合作用来实现的。

蒸汽-空气混合物与受压的水或蒸汽相比，单位体积所包含的热容量较低，但是，蒸汽-空气混合物作为灭菌戒指具有能够适当调整蒸汽-空气比例达到不同结果的优点。

一、验证概述1．验证对象本次验证的对象为冻干粉针车间湿热灭菌柜，主要采用自选一灭菌程序对铝盖进行灭菌处理。

工作原理：本设备操作系统采用触摸屏和可编程控制器控制。

对灭菌过程进行自动控制，具有控制准确、操作简便、F0值显示等特点。

密封门采用电机升降，气压密封结构，并设有安全连锁装置，即使电、汽意外中断或其它原因而引发开门命令，密封门也不会打开。

设备配置的温度记录仪可即时显示并记录灭菌温度。

设备主要参数如下：2．验证原因本湿热灭菌柜在2005年购入安装，并于2006年1月通过验证投入使用。

湿热灭菌柜验证周期为一年，已于2009年3月进行了再验证，现距上次验证已有一年，故需对湿热灭菌柜进行再验证。

3．验证目的通过再验证，确认该设备能够稳定、连续生产出合格的产品。

通过再验证，确定操作方法有效及操作参数未发生变化，以保证能够按照验证时的操作方法、操作状态进行生产，并确认操作及维护是否予以优化。

4．验证合格标准方案中规定的所有项目均需完成，对于不合格的项目，应根据评价内容执行下一项工作。

二、验证组织机构和职责1．验证领导小组2．验证实施小组三、验证实施计划1．验证实施前的培训在验证方案审核后组织实施人员进行培训，培训工作应在方案审核后一星期内完成。

2．时间安排验证内容的具体时间计划，以及验证执行后在一星期内完成验证报告和验证文件的归档工作。

2010年月日前，进行验证的相关培训工作；2010年月日前，执行安装检查、运行再确认、性能再确认项目；2010年月日前收集数据，完成验证的评价工作，完成验证结论、验证文件归档及验证结论的下发。

四、验证内容一、安装检查1．设备布局检查目的：确认设备安装是否改变，如有改变则按照原安装确认要求进行确认。

依据：《设备前期管理规程》规定及设备平面布局图。

2．介质连接情况检查目的：确保所有介质管道是根据PID图安装，未发生相关偏移，管道标识张贴到位。

依据：《固定管线的标识管理规程》规定。

湿热灭菌验证难题1、问：湿热灭菌性能确认热穿透考察F0还是温度时间？答：满载热穿透测试重点考察F0值，对热分布的温度没有硬性要求。

2、问：湿热灭菌柜空载热分布验证报告里如果统计了F0值，有没有问题？答：能有啥问题，只不过有点多此一举了，空载热分布统计F0值没啥用，找冷点？冷点是指灭菌阶段温度最低的点，而不是F0值最低的点，这个你可以查看一下2010版药品GMP指南-无菌药品，书中对干热灭菌确认和验证提到“空载热分布测试是为确定设备空载时的温度均勻度及设备“冷点”进行的测试，一般在运行确认时进行。

通过一组经过校正的温度传感器测定灭菌器腔室内各不同部位温度，并根据所测数据绘制温度分布图，以便于发现灭菌腔室内的冷点和热点。

”同理湿热灭菌空载热分布冷点确定原则。

3、问：湿热灭菌柜满载热穿透验证时，只需要考察生物指示剂培养结果和F0值，不需要考察最冷点是否保持了121度30分钟吗？答：2020版中国药典通则四部通则草案把所有灭菌方式的具体参数描述删除了（比如删除了121x15min的描述），因为灭菌工艺是验证出来的，通常采用温度-时间参数或结合F0值综合参考。

4、问：大家用的湿热灭菌柜验证时都能保证柜内的每个点温度不低于121度，不高于124度吗？我们的高温做不到怎么办？答：正常是不会有这种情况的，我们都是在121-123℃之间，根据你的情况，个人认为可能有几个原因：℃灭菌柜温度分布不均；℃药品装载方式不对；℃温度探头的摆放位置不恰当；℃灭菌过程中柜内补压空的时候，对个别温度探头产生影响；℃循环水系统出问题（洁净区的疏水阀被横向装了？这个洁净型疏水阀必须垂直安装）；℃喷淋盘和两次喷淋头存在堵塞或是错位情况。

针对以上原因去排查，不能走形式，希望能帮助到你。

如果问题解决不了，那就用来灭一些不怕高温的不锈钢器具类吧。

5、问：为什么湿热灭菌验证时，要统计升温段和降温段，只统计恒温段，也就是灭菌段行不行？答：首先，只统计灭菌段肯定是不行的，已经出现过被专家落缺陷的情况了，其次，灭菌柜的验证考察灭菌效果是一个方面，更重要的还要考察你灭菌柜的整体性能，如脉动次数、脉动曲线、降温速率曲线、干燥等等，都是要分析的，比如来年再确认时候灭菌30min，但是脉动次数、降温时间、干燥时间等都不一致，能说灭菌柜性能稳定吗？再次，确认是要确认整个灭菌程序的，整个灭菌程序就包括脉动次数、压力、干燥等运行情况的，你的SOP肯定对这些参数也要进行规定。

一、法规要求：1、无菌药品附录第六十一条无菌药品应当尽可能采用加热方式进行最终灭菌，最终灭菌产品中的微生物存活概率（即无菌保证水平，SAL）不得高于 10-6。

采用湿热灭菌方法进行最终灭菌的，通常标准灭菌时间F0 值应当大于 8 分钟，流通蒸汽处理不属于最终灭菌。

对热不稳定的产品，可采用无菌生产操作或过滤除菌的替代方法。

2、无菌药品附录第六十三条任何灭菌工艺在投入使用前，必须采用物理检测手段和生物指示剂，验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。

3、无菌药品附录第六十四条应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次）。

设备重大变更后，须进行再验证。

应当保存再验证记录。

4、无菌药品附录第六十五条应当通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。

5、无菌药品附录第六十七条应当按照供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照试验确认其质量。

使用生物指示剂时，应当采取严格管理措施，防止由此所致的微生物污染。

6、无菌药品附录第六十九条每一次灭菌操作应当有灭菌记录，并作为产品放行的依据之一。

7、无菌药品附录第七十条热力灭菌通常有湿热灭菌和干热灭菌，应当符合以下要求：（一）在验证和生产过程中，用于监测或记录的温度探头与用于控制的温度探头应当分别设置，设置的位置应当通过验证确定。

每次灭菌均应记录灭菌过程的时间-温度曲线。

采用自控和监测系统的，应当经过验证，保证符合关键工艺的要求。

自控和监测系统应当能够记录系统以及工艺运行过程中出现的故障，并有操作人员监控。

应当定期将独立的温度显示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱进行对照。

（二）可使用化学或生物指示剂监控灭菌工艺，但不得替代物理测试。

（三）应当监测每种装载方式所需升温时间，且从所有被灭菌产品或物品达到设定的灭菌温度后开始计算灭菌时间。

（四）应当有措施防止已灭菌产品或物品在冷却过程中被污染。

除非能证明生产过程中可剔除任何渗漏的产品或物品，任何与产品或物品相接触的冷却用介质（液体或气体）应当经过灭菌或除菌处理。

湿热灭菌柜验证方案引言湿热灭菌柜是一种常用于实验室和医院的设备，用于对实验器皿、培养基、消毒纱布等物品进行有效的灭菌。

为了保证湿热灭菌柜的灭菌效果和安全性，验证是必不可少的环节。

本文将详细介绍湿热灭菌柜验证的目的、方法和步骤。

目的湿热灭菌柜验证的主要目的是确保设备能够达到预期的灭菌效果，并确认其在操作过程中的安全性。

通过验证，可以提高湿热灭菌柜的可靠性和可用性，保证实验和医疗过程的质量和安全。

方法湿热灭菌柜的验证方法主要包括以下几个方面：1.温度验证：通过在不同位置放置温度计，监测和记录湿热灭菌柜内部的温度变化。

验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，在一定的时间范围内，湿热灭菌柜内的温度应该能够保持在设定的温度范围内。

2.湿度验证：湿热灭菌柜在灭菌过程中需要保持一定的湿度，以确保灭菌效果。

湿度验证可以通过在不同位置放置湿度计，监测湿热灭菌柜内部的湿度变化。

验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，在一定的时间范围内，湿热灭菌柜内的湿度应该能够保持在设定的湿度范围内。

3.压力验证：湿热灭菌柜在灭菌过程中还需要维持一定的压力，以防止外界的空气进入灭菌室。

压力验证可以通过在不同位置放置压力计，监测湿热灭菌柜内部的压力变化。

验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，在一定的时间范围内，湿热灭菌柜内的压力应该能够保持在设定的压力范围内。

4.灭菌效果验证：湿热灭菌柜的最重要的验证内容之一是灭菌效果验证。

通过在灭菌柜内放置带有生物指示物的试验培养基或其他物品，进行灭菌操作，然后在相应的条件下孵育生物指示物，观察灭菌效果。

验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，灭菌柜的灭菌效果应该能够达到特定的标准要求。

步骤步骤1：准备验证设备1.温度计：用于测量湿热灭菌柜内部的温度。

2.湿度计：用于测量湿热灭菌柜内部的湿度。

3.压力计：用于测量湿热灭菌柜内部的压力。

4.生物指示物：用于评估湿热灭菌柜的灭菌效果。

湿热灭菌柜灭菌的原理是通过饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌，由于前者潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中常用的灭菌方法。

在使用湿热灭菌柜前，我们首先需要确定自己手头的湿热灭菌柜的质量安全性，这需要我们提前对其进行一次验证检测。

也就是湿热灭菌柜验证检测。

进行一次专业的湿热灭菌柜验证检测，需要准备很多设备。

其中主要的仪器包括了这些：ATI气溶胶光度计和发生器、64路温度验证系统、现场计量炉、臭氧浓度检测仪、大流量粒子计数器、Dragger压缩空气检测仪、TSI风量罩、气流流型检测仪等大中型检测仪器。

其具体的检测方法有这些：1)温度探头比对及探头布置①探头校正试验开始前将测试用湿热探头放到校验炉内进行温度校准，低温探头设置为低点、高点、测量点。

试验结束后，将所有的湿热探头进行“低点”和“高点”温度复核，确认试验后温度仪表的误差不大于0.5℃。

②探头布置将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头均匀地放在腔内各处。

各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

2）空载热分布试验①布点将经过校验的温度探头编号（一般为16根探头），通过设备的验证接口放入灭菌室内。

加热介质进口处于设备自身温度探头处必须各放一根探头。

将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头其余温度探头均匀地放在腔内各处。

各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

②程序运行按预定的灭菌程序如℃×min进行灭菌，设定采样间隔，采样时间不小于灭菌柜的工作周期，包括升、灭菌、降温过程，启动灭菌柜，在空载运行状态下进行热分布测定，连续运行3次，以确认灭菌过程中的重现性。

③结果评价“冷点”确定：试验中，标准探头得的温度至低的区域，即灭菌器内“冷点”的位置。

予以特别标注，作为热穿透试验和生物指示剂试验重点监控的位置。

温度均匀度：每次灭菌程序运行过程中，灭菌器腔室内“冷点”及“热点”的温度，与其平均温度之差应≤±1℃（或符合该设备说明书中标注的设计要求）。

引言湿热灭菌柜是一种常用于医疗机构和实验室的设备，用于对器械、培养基及实验用具进行湿热灭菌。

为了确保湿热灭菌柜的有效性和安全性，验证方案必不可少。

本文将介绍一种湿热灭菌柜验证方案，以确保该设备在灭菌过程中的有效性。

1. 验证目的湿热灭菌柜验证的主要目的是验证其能否对菌落进行有效的杀灭并保持设备的稳定性。

通过验证过程，能够评估设备是否符合预期的灭菌效果和安全要求。

2. 验证范围湿热灭菌柜验证的范围应包括设备的各项重要参数，如温度、湿度和压力等。

此外，还应验证设备的各项功能是否正常，如加热系统、循环风扇和冷却系统等。

3. 验证方法3.1 初始条件在开始验证之前，需要确保设备已经完成预热并处于空闲状态。

检查设备的供电和连接情况，确保设备连接正确并供电稳定。

3.2 验证步骤1.设置灭菌时间和温度。

根据待灭菌物品的要求，设置适当的灭菌时间和温度。

通常，湿热灭菌柜的温度应在121°C至134°C之间。

2.放置标准生物指示物。

在灭菌柜内放置带有标准生物指示物的试管或培养皿。

确保生物指示物布置均匀，以确保验证结果的可靠性。

3.启动灭菌程序。

根据设备的说明书，启动湿热灭菌柜的灭菌程序。

4.监测温度、湿度和压力。

在灭菌过程中，使用温度计、湿度计和压力计等设备对设备的温度、湿度和压力进行监测。

5.记录数据。

在整个灭菌过程中，记录温度、湿度和压力等数据。

确保记录准确，并记录任何异常情况或问题。

6.灭菌完成，检查生物指示物。

在灭菌完成后，取出试管或培养皿，进行生物指示物的检查。

根据标准指引，验证生物指示物是否被完全杀灭。

7.分析验证结果。

根据验证过程中的数据和检查结果，进行验证结果的分析和评估。

如果验证结果符合预期要求，则可以确认湿热灭菌柜达到了其预期功能。

4. 验证频率和记录湿热灭菌柜的验证应定期进行，并记录验证过程中所得的数据和结果。

验证频率应根据设备的使用情况和要求进行确定，通常为每年一次。

验证记录应妥善保存，并在需要时提供给监管机构进行审核。

湿热灭菌柜URS（示例）湿热灭菌柜×X X和×××的URS1．总体介绍2．使用介绍3．工艺设计要求4．结构要求5．器具6．电子特征7．自动化8．安全性9．实施，跟进和最终通过10．维护11．培训12．文件13．公用设施14．供应的范围目录1．总体介绍1．1目的本文件的目的是要制定在中国制药工厂的一个湿热灭菌柜的设计、生产、安装、测试和供应的最低的要求。

此文件包括2台湿热灭菌柜：2台用在××大楼的灭菌柜。

这些灭菌柜是双门的，跨越和安装在以下区域的边界上：××X1．2术语ASME BPE：美国机械工程协会，生物工艺设备BSL 2：生物安区2级CAP：压缩空气工艺CW 6：冷水(6℃)CW l2：冷水(12℃)FDA：食品药品监督局GAMP：良好自动化生产规范GMP：药品生产质量管理规范HVAC：高效空气过滤系统IA：工业空气IS：工业蒸汽IQ：安装确认IW：工业废物HMl：人机界面OQ：操作确认P&ID：管道和仪表图表PLC：程序控制器PQ：运行确认PS：(药用蒸汽)洁净蒸汽WFl：注射用水SW0：软水(00TH法国度)1．3附带文件列表P＆ID：××大楼相关图纸：总体标准：包装标准：自动仪器电子特性：管道级别：流体列表：工作执行总体规程，参考客户申请注：负载物料(移动容器，手推车)的图纸会在工程期间提供。

药品质量受权人培训教材(第一册)1．4总体设计这些灭菌柜是用来对固体部件的灭菌，这些部件包括不锈钢、玻璃、塑料、纤维等……本标准包括的设备的设计和结构需要符合标准。

2．使用介绍2．1总体介绍这些灭菌柜是药用蒸汽类型的。

需要灭菌的材料要先清洗和准备。

在灭菌柜安装两道互锁的门。

环境分级：注：完成的灭菌柜前方必须按照千级区(IS0 6)设计。

2．2供应每个灭菌柜都会备完整装备(门，前方，腔体，探测器……)。

——型湿热灭菌柜验证方案年月日批准年月日实施目录一、引言1．验证方案审批表2．概述3．验证目的4．文件二、安装确认三、运行确认四、性能确认五、验证周期一、引言1．验证方案审批表2．概述设备简述见设备描述表。

本灭菌柜为重力置换式的压力蒸汽灭菌设备，自带电热蒸汽发生器产生蒸汽作为灭菌蒸汽源。

本灭菌柜使用饱和蒸汽，灭菌过程分为升温、保温、降温等几个阶段。

升温阶段先用蒸汽置换空气，随后腔室继续升温至预定的灭菌温度。

灭菌至预定的时间后降温，打开灭菌柜门，取出物品。

灭菌过程温度、时间由温控仪自动控制，操作过程为半自动控制。

3．验证目的（1）检查并确认灭菌柜及其附件安装符合要求，资料和文件符合GMP要求。

（2）检查确认灭菌柜的运行性能，即灭菌柜空载和装载情况下灭菌柜室不同位置的热分布状况。

4．文件检查所需的各类文件二．安装确认目的：安装确认是对灭菌柜整机的技术指标进行确认，以证实灭菌柜的规格、材质、其它技术指标符合工艺设计及GMP要求；并对灭菌柜及相关管道的安装过程在安装后进行确认，以证实整个安装过程符合设计规范要求，安装质量满足要求。

主要内容包括以下几部分：1．开箱验收：验收范围包括设备的外观、随机资料、随机附属设备、备用件等，如发现有不符之处立即向生产厂家进行证实，并妥善处理。

方法：目测外观；其它项目清点核查，如发现有不符之处要立即向生产厂家进行证实，并妥善处理。

2．设备技术指标的确认：方法：根据工艺设计要求，参照随机所带资料，对灭菌柜的技术指标进行逐项对照，确保所引进的灭菌柜与要求相适应，其材质和质量符合GMP的规定及生产工艺要求。

3．灭菌柜的安装确认方法：目测或根据需要试运转。

相关项目与设计标准：（1）安装方位的确认：按设计要求对灭菌柜安装后进行检查。

灭菌柜的安装应通风良好，散热及排水设施畅通，整个安装方位应便于操作、维修。

（2）地脚固定确认：检查地脚固定是否牢固。

（3）柜内外有无碰伤：对灭菌柜的外壁及腔室仔细全面进行检查，不应有因安装等造成的损伤（影响灭菌柜的耐压性能或引起灭菌柜生锈腐蚀）。

湿热灭菌柜灭菌的原理是通过饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌，由于前者潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中常用的灭菌方法。

在使用湿热灭菌柜前，我们首先需要确定自己手头的湿热灭菌柜的质量安全性，这需要我们提前对其进行一次验证检测。

也就是湿热灭菌柜验证检测。

进行一次专业的湿热灭菌柜验证检测，需要准备很多设备。

其中主要的仪器包括了这些：ATI气溶胶光度计和发生器、64路温度验证系统、现场计量炉、臭氧浓度检测仪、大流量粒子计数器、Dragger压缩空气检测仪、TSI风量罩、气流流型检测仪等大中型检测仪器。

其具体的检测方法有这些：1)温度探头比对及探头布置①探头校正试验开始前将测试用湿热探头放到校验炉内进行温度校准，低温探头设置为低点、高点、测量点。

试验结束后，将所有的湿热探头进行“低点”和“高点”温度复核，确认试验后温度仪表的误差不大于0.5℃。

②探头布置将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头均匀地放在腔内各处。

各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

2）空载热分布试验①布点将经过校验的温度探头编号（一般为16根探头），通过设备的验证接口放入灭菌室内。

加热介质进口处于设备自身温度探头处必须各放一根探头。

将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头其余温度探头均匀地放在腔内各处。

各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

②程序运行按预定的灭菌程序如℃× min进行灭菌，设定采样间隔，采样时间不小于灭菌柜的工作周期，包括升、灭菌、降温过程，启动灭菌柜，在空载运行状态下进行热分布测定，连续运行3次，以确认灭菌过程中的重现性。

③结果评价“冷点”确定：试验中，标准探头得的温度至低的区域，即灭菌器内“冷点”的位置。

予以特别标注，作为热穿透试验和生物指示剂试验重点监控的位置。

温度均匀度：每次灭菌程序运行过程中，灭菌器腔室内“冷点”及“热点”的温度，与其平均温度之差应≤±1℃（或符合该设备说明书中标注的设计要求）。

湿热灭菌是灭菌方法中比较常见和通用的一种灭菌方法，其中常用的湿热灭菌设备就是脉动真空灭菌器。

脉动真空灭菌器其灭菌原理是通过真空泵借助水的流动抽出灭菌柜室内冷空气，使其处于负压状态，然后输入饱和纯蒸气，如此反复，在高温和高压力的作用下使微生物蛋白质变性凝固而灭活达到灭菌要求。

灭菌后，抽真空使灭菌物品迅速干燥。

具有方便、省时、省力、总灭菌时间短、灭菌彻底可靠、物品干燥等特点。

湿热灭菌柜相关法规1、无菌药品附录第六十三条任何灭菌工艺在投入使用前，必须采用物理检测手段和生物指示剂，验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。

2、无菌药品附录第六十四条应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次）。

设备重大变更后，须进行再验证。

应当保存再验证记录。

3、无菌药品附录第六十五条应当通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。

4、无菌药品附录第六十七条应当按照供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照试验确认其质量。

使用生物指示剂时，应当采取严格管理措施，防止由此所致的微生物污染。

《中国药典(20版)》第四部1421：灭菌法灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件。

灭菌工艺经验证后，方可交付正式使用。

验证内容包括：⑴撰写验证方案及制定评估标准。

⑵确认设备的设计与选型。

⑶确认灭菌设备资料齐全、安装正确，并能正常运行。

⑷确认灭菌设备、关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行。

(5)采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确认各关键工艺参数符合预定标准，确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定。

(6)汇总并完善各种文件和记录，撰写验证报告。

灭菌工艺的日常监控：同时应持续评估灭菌工艺的有效性及被灭菌物品的安全性和稳定性，并建立相应的变更和偏差控制程序，确保灭菌工艺持续处于受控状态。

灭菌工艺应定期进行再验证。

当灭菌设备或程序发生变更(包括灭菌物品装载方式和数量的改变)时，应进行重新验证。

1目录2基本概念湿热灭菌系统的设计和确认3湿热灭菌工艺的设计和验证§-1 基本概念是一种采用湿热（蒸汽-空气混合物湿热菌指在一定温度下微生物杀灭90%或使之下降一个对数单位所需的时间（min）种采用湿热（蒸汽、蒸汽空气混合物、过热水）作为灭菌手段，来杀灭液体多孔/坚硬物品中活微生物的工艺。

湿热灭菌D值是微生物的耐热参数，指在定温度下，微生物杀灭90%或使之下降个对数单位所需的时间（min）。

指使某一种微生物的D值变化一个对数单位灭菌温度应升高或下降的度数D 值值Z值是灭菌温度系数，指使某一种微生物的D值变化一个对数单位，灭菌温度应升高或下降的度数。

即被灭菌物品在灭菌过程中获得参照标准条件（121℃Z 10℃）下相同灭菌效果Z F 是标准灭菌时间，即被灭菌物品在灭菌过程中获得参照标准条件（121 ℃ ，Z=10 ℃ ）下相同灭菌效果F 0、F T L是指在某一温度T（℃ ）下，灭菌1min所获得的标准灭菌时间。

L没有单位。

L (Tref,Z)=10（T ‐Tref ）/Z 灭菌率L§-1 基本概念耐热性曲线§-1 基本概念灭菌时间-温度曲线时间-灭菌率曲线§-1 基本概念§-1 基本概念灭菌器的参照测试点（通常为排水口）达到最低灭菌温度开始，到装载中所有点均达到灭升温时间菌常水到最菌度到装载中所有均到菌温度之间的时间间隔。

平衡时间灭菌保温灭菌程序中，为获得设定杀灭效果，保持设定灭菌温度的持续时间（保温时间或保温阶灭菌程序中灭菌完成之后的阶段该阶段的参数应符合用户对被灭菌物品阶段灭菌程序中灭菌完成之后的阶段。

该阶段的参数应符合用户对被灭菌物品冷却和干燥的技灭菌器腔室的冷点：灭菌程序中，装载区域中被灭菌物品F0值最低冷却阶段灭菌器腔室的冷点灭菌程序中，装载区域中被灭菌物品值最低和/或热分布试验中温度最低的位置。

容器冷点：灭菌程序中，密封液体容器中F0最低的位置。

蒸汽灭菌确认方案及报告确认编号：LW-VP-03医疗器械有限公司二0一九年九月确认方案签发表文件名称：蒸汽灭菌确认方案适用范围蒸汽灭菌的确认确认编号LW-VP-03预计开始确认2019年09月04 日起草人签名：日期：审核人签名：日期：批准人签名：日期：1、引言我公司蒸汽灭菌所用设备为水浴式灭菌柜，设备型号:JR.SG-0.6，生产厂家:张家港市嘉瑞制药机械有限公司，本设备编号为PD16。

1.1概述，灭菌器所灭菌产品为：被灭菌产品的规格为： ml/瓶灭菌时，须将待灭菌产品放置在专门设计的不锈钢架子里，装载后，放置在不锈钢推车上，推入灭菌柜内。

腔室容量: 0.6m3。

本灭菌器采用过热水(介质)灭菌。

灭菌程序分为注水、升温、灭菌、检漏、清洗结束等几个阶段。

灭菌工艺控制使用可编程控制器(PLC)控制系统。

灭菌程序设定为121℃，保温30min，按灭菌程序自动执行。

温度控制系统使用2个Pt100温度探头。

放置在排水口，灭菌过程的温度用打印机进行记录。

1.2验证目的1.2.1检查并确认灭菌器安装符合设计要求，资料和文件符合GMP的管理要求。

1.2.2调查并确认灭菌器的运行性能，看装载情况下灭菌器不同位置的热分布状况。

1.2.3验证产品预定的灭菌程序121℃保温30min能符合灭菌工艺的要求。

1.3、文件检査所需的各类文件:序号文件名称存放地点1 使用说明生产部2 操作手册生产部3 备件清单生产部4 安装计划生产部5 压力容器检查合格证生产部检査人: 日期:2、职责2.1 验证领导小组2.1.1 负责确认方案的审批。

2.1.2 负责确认的协调工作，以保证本确认方案规定项目的顺利实施。

2.1.3 负责确认数据及结果的审核。

2.1.4 负责确认报告的审批。

2.2 生产部2.2.1负责设备的安装、调试，并做好相应的记录。

2.2.2 负责建立设备档案2.2.3负责起草水浴式灭菌柜操作、清洁、维护保养的标准操作程序。

灭菌柜验证方案一、概述1、名称及编号（1）设备名称：（2）设备编号：（3）生产厂家：（4）安装位置：2、用途和程序（1）用途：（2）灭菌程序：3、验证系统的组成3.1系统软件W&D Vs -DT2600严格按照FDA(21 CFR Part 11) 规范及CGMP对文件管理的相关标准，可实现对热电偶的自动校准并自动统计出各时刻的最高和最低温度及其所在位置以及平均温度和温度偏差值。

通过内置算法自动计算出F0值及最大值，最小值及其所在位置等参数。

3.2标准热电偶（10只）选用高温热偶，可达到0.5℃的精度。

3.3多路数据采集器多通道温度采集记录仪器FLUKE-，各通道间隔离互不影响以及其0.1度的精度用于对温度监控。

3.4温度干井温度干井FLUKE9143可提供均匀的温场，为热偶的校正提供温场。

3.5标准电阻为热偶校准提供一个参照标准。

用于热电偶的校准。

二、验证目的：通过对灭菌柜的验证，确认该设备始终能达到的灭菌程度。

三、验证目标1、确认灭菌柜的运行是否符合设定的标准。

2、在性能的试验中，可确认操作进行，满载热分布下温度达标，指示剂挑战性试验均是合格的。

四、性能确认试验1、空载热分布的验证（1）合格标准：最冷点F O≥12（2）测试仪器：多路数据采集器FLUKE-，标准热电偶（10只），电脑等。

（3）验证方法：①将温度校准后的热电偶的探头用铜丝固定在灭菌柜布点位置，记录设定温度②将测得数据记录在测试验证的记录表中。

③计算最冷点的F O值如≥12为合格。

④热电偶布点如附图确认结果见附件12、满载热分布试验（1）、合格标准：最冷点F0≥12（2）、测试仪器：同空载热分布（3）、测试方法：①准备好灭菌柜及灭菌生物指示剂等，启动加热程序使温度达到105/116℃的正常状态。

②将10个温度探头放置灭菌柜内，标出探头记号③热电偶分布同空载④测得的数据记录在测试验证记录表中。

⑤测得的数据，找出最冷点，计算出最冷点F O值必需≥12，否则找出原因，采取改进措施，再试验，直至合格。