恶性细胞无接触抑制现象,所以可将其作为区 别正常细胞与癌细胞的标志之一。
密度抑制(density inhibition):培养液 中营养成分减少,代谢产物增多时,细胞因营养 的枯竭和代谢物的影响,发生密度抑制,导致细 胞分裂停止。
传代细胞可连续传7~10代,细胞形状基本相同, 但随着传代次数增多,细胞逐渐呈老化现象,表现 为:细胞增殖速度明显减慢,胞浆中出现空泡及颗粒 样物质,细胞碎片增多,细胞形态变为扁平,失去 贴壁能力,从培养瓶底脱落。
组织培养细胞生命期
原代培养期 传代期 衰退期
原代培养期
又称初代培养期 (primary culture),从体内取出组织接种培养 到第一次传代阶段,一般持续1~4周。
此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛;细胞形态相似。
细胞群是异质的,也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存 性强。
传代培养期
一般经数小时-几天
过程:
游离:悬浮,胞质回缩, 全部细胞变为圆球形 吸附:贴附底物,一般24小时内贴壁 潜伏期:可有运动活动,基本无增殖, 少见分裂相
初代培养细胞贴附慢,可长达10~24小时或更多;连续细胞系和恶性 细胞系快,10~30分钟即可贴附。细胞贴附现象是一个非常复杂和与多种 因素相关的过程。支持物能影响细胞的贴附;底物表面不洁不利贴附,底 物表面带有阳性电荷利于贴附。另外在贴附过程中,有一些特殊物质如纤 维连接素(Fibronectin),又称LETS(Larger External Transformation Substance),细胞表面蛋白(Cell Surface Protein: CSP)等也参与贴附过程。这些物质都是蛋白类成分,它们有的存在于细 胞膜的表面(如 CSP),有的则来自培养基中的血清(LETS)。近年又从 各种不同组织和生物成分中提取出了很多促贴附物质。贴附是贴附类细胞 生长增殖条件之一。