动物实验技术2
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1. 定购实验动物时需要了解:品种,品系,近交系、封闭群,级别,包装,年龄、体重,性别2. 生命科学研究必备的四大支撑条件AEIR:动物animal,设备equipment,信息information, 试剂reagent3.实验动物是指经人工培育的、遗传背景清楚、对其携带微生物和寄生虫实行控制、用于科学实验、教学、检定及药品、生物制品生产的动物。
4.实验用动物(experimental animals)包括:实验动物 (Laboratory animals),家畜 (Farm animals),野生动物 (Wild life animals),伴侣动物 (Pets)5. 实验动物学是研究实验动物及其应用的科学,以生物学、动物科学、动物医学、医学、药理学、毒理学等学科为基础,综合发展形成的一门覆盖面极广的边缘学科。
6.实验动物科学内容:实验动物、实验动物医学、比较医学、动物实验7.1988年,国家科委发布《实验动物管理条例》;1996年10月,《北京市实验动物管理条例》出台8.实验动物科学发展趋势:基因修饰技术运用,实验动物福利,“3R”原则,实验动物商品化、社会化,SPF动物广泛应用9.实验动物福利:实验动物的一种康乐状态。
在此状态下,其基本需求得到满足,而痛苦被减至最小。
10.实验动物五项基本福利一,提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物,使动物不受饥渴之苦二,提供适当的栖息场所,能够舒适地休息和睡眠,使动物不受困顿不适之苦三,做好防疫,预防疾病和给患病动物及时诊治,使动物不受疼痛、伤病之苦四,保证拥有良好的条件和处置(包括安乐死),使动物不受恐惧和精神上的痛苦五,提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起,使动物能够自由表达正常的习性11.动物实验需要考虑实验动物伦理的几个环节:实验目的确定和必要性评估实验设计遵循3Rs原则实验操作过程避免或减轻动物疼痛及恐惧日常饲养及护理安乐死12.《关于善待实验动物的指导性意见》CRO: Contract Research Organization:Clinical trial & Preclinical research AAALAC认证(国际实验动物管理评估和认证协会)软硬件要求实验动物微生物与寄生虫控制•按微生物控制程度分类1.普通级动物(Conventional Animal, C.V)2.清洁级动物(Clean Animal,C.L)3.无特定病原体动物(Specific Pathogen Free, SPF)4.无菌动物(Germfree Animal, G.F)普通级动物:饲养在普通环境中,不携带人畜共患病和动物烈性传染病病原体的动物。
第二章动物实验的基本操作与技术动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法,因此,动物实验基本方法,已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。
第一节实验动物的抓取固定方法一、小鼠抓取固定方法小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤(见图2-1之一),将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可(图2-1之二)。
有经验者可直接用左手小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。
这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。
如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位(必要时先行麻醉),再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。
尾静脉注射时,可用小鼠尾静脉注射架固定(图2-2),先根据动物大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适后,露出尾巴,固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。
图2-1 小鼠的抓取固定方法图2-2 小鼠尾静脉注射方法二、大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取方法基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用袭击方式抓取,否则会被咬伤手指。
抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套。
如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时,同样可采用左手固定法,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心中,这样右手即可进行各种实验操作。
也可伸开左手之虎口,敏捷地从后一把抓住。
若做手术或解剖等,则需事先麻醉或处死,然后用细棉线绳活结缚腿,背卧位绑在大鼠固定板上;尾静脉注射时的固定同小鼠(只需将固定架改为大鼠固定盒)。
动物实验的基本操作技术实验报告实验报告一、实验目的1.学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术2.掌握健康小鼠的外观检查方法、性别鉴定、捉拿和固定方法、小鼠灌胃给药与小鼠腹腔注射给药等技术3.掌握小鼠颈椎脱臼法处死方法、小鼠脏器系数的概念及其测定方法、病理学意义4.熟悉小鼠的标记、小鼠解剖步骤及正常脏器观察5.了解实验动物的被毛去除方法、实验动物粪、尿的收集、小鼠血液样本采集方法二、实验材料和器材1.动物:小鼠2.器材:鼠笼、天平、注射器、灌胃针、止血钳、手术剪、平皿、托盘、烧杯若干。
三、实验方法1.对小鼠进行观察观察的指标主要包括:小鼠的体型、发育情况;毛发是否清洁浓密有光泽,是否顺贴不蓬乱;行动是否迅速,反应是否灵敏;眼睛是否明亮有神,瞳孔是否清晰等圆;天然孔道是否干净、有无分泌物。
2.小鼠的捉拿右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。
此时迅速用左手拇指和食指捏任小白鼠颈背部皮肤,并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中。
3.小鼠性别鉴定主要观察肛门与生殖器之间的距离。
雄性大鼠的距离较大,雌性的距离较小,且成年雄鼠尾部可见睾丸,成年雌鼠可见乳头。
4.小鼠称重打开电子天平,待读数显示稳定后,将平皿置于天平上,去皮;将小鼠置于平皿中,待读数显示稳定后,读数得25.95g。
5.小鼠灌胃1)准备灌胃针头,将注射器针头拔下,更换为灌胃针头;根据小鼠的体重,按0.1ml/10g 灌胃量计算:V=25.950*0.1/10=0.26ml用注射器取0.26ml液体(自来水);2)按“三-2-1)”的方法抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线;3)灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后即可推注药液,然后原方向将灌胃针抽出。
6. 腹腔注射1)吸取液体(自来水),将针头向上,吸取一段气体后,再缓慢排除气体,以达到取出气泡的效果。
动物实验技术题库3-2-10问题:[单选,A1型题]小鼠常用的处死方法是()A.空气栓塞法B.急性失血法C.破坏延髓法D.开放性气胸法E.脊椎脱臼法空气栓塞法、急性失血法、破坏延髓法和开放性气胸法是犬、兔、猫和豚鼠的处死方法。
问题:[单选,A1型题]下列不能用于犬的处死方法是()A.空气栓塞法B.断头法C.破坏延髄法D.开放性气胸法E.急性失血法断头法属于大鼠和小鼠的处死方法。
问题:[单选,A1型题]下列有关兔空气栓塞的处死剂量,正确的是()A.静脉内注入5~10ml空气即可致死B.静脉内注入10~20ml空气即可致死C.静脉内注入20~40ml空气即可致死D.静脉内注入40~60ml空气即可致死E.静脉内注入60~70ml空气即可致死(天津11选5 )问题:[单选,A2型题]实验犬,雄性,24月龄,体重12.5kg,为进行某药物在增加急性心源性休克的心排出量作用实验中,需制备急性心源性休克模型犬,所采用静脉注射方法应选()A.股静脉B.胫前静脉C.尾静脉D.头静脉E.足静脉问题:[单选,A2型题]实验中需给小鼠口服某药物,现查到人用量为一次静脉(成人体重60kg)300mg,将该药配成5%溶液,试计算一只25g体重小鼠需多少毫升()A.0.5mlB.0.4mlC.0.6mlD.0.45mlE.0.65ml计算方法:[(0.3÷60×50×0.025)÷0.05]×4=0.5ml。
问题:[单选,A2型题]某实验室采用鸡血细胞做DNA鉴定实验,应选用的采血方法是()A.股动脉采血B.颈静脉采血C.颈动脉采血D.翼根静脉采血E.摘眼球采血问题:[单选,B型题]豚鼠的采血方法()A.耳中央动脉采血B.摘眼球采血C.隐静脉采血D.翼根静脉采血E.足静脉采血问题:[单选,B型题]鸽的采血方法()A.耳中央动脉采血B.摘眼球采血C.隐静脉采血D.翼根静脉采血E.足静脉采血。
1、分别阐明剂型、剂量、给药途径、合并用药对药物作用的影响以及在临床上的意义。
〔1〕药物的作用或效应在一定剂量范围内随着剂量的增加而增强,治疗剂量的药物能发挥显著疗效,而对动物又无危险性;超过治疗剂量的药物,则能引起机体发生病理变化甚至死亡。
〔2〕不同的剂型能影响药物的吸收速度和血药浓度,即影响生物利用度,从而影响药物的作用。
〔3〕给药途径不同主要影响生物利用度和药效出现的快慢,有时还可产生质的变化。
例如硫酸镁内服时产生下泻作用,但静脉注射则可产生中枢解痉和抗惊厥作用。
2、肾功能影响药物作用的机制及其重要意义〔1〕肾脏是最重要的药物排泄器官,其排泄方式有3种:肾小球滤过、肾小管分泌和肾小管重吸收。
药物自肾排泄的速度各不相同,肾功能不全将减慢药物排泄。
〔2〕临床上可通过调节尿液的PH来加速或延缓药物的排泄,用于解毒急救或增强药效。
从肾排泄的原形药物或代谢产物由于小管液水分的重吸收,生成尿液时可以到达很高的浓度,有时可产生治疗作用,有利于恢复。
3、药酶抑制剂增强并用药物作用的机制?药酶抑制剂能够对肝脏细胞色素P450药物代谢酶产生抑制作用,通过降低肝药酶活性,减慢并用药物在肝的代谢,药物作用时间延长,从而增强并用药物的作用以及毒性。
4、药酶抑制剂在合并用药中的重要性?酶的诱导和抑制均可影响药物代谢的速度,使药物的效应减弱或增强,因此在临床上同时使用两种以上药物时,应注意药物对药酶的影响。
例如,运用氯霉素可使戊巴比妥的代谢减慢,使血药浓度升高,麻醉时间延长。
6、进行哺乳类动物离体组织器官实验时,需要控制那些条件?〔1〕控制浴槽中的水温,以保持肠段的收缩功能与药物反应。
〔2〕加药前,需先准备好每次更换用的38度的台氏液。
〔3〕每次加药出现反应后,必须立即更换浴槽中的台氏液,至少两次。
每项实验加入台氏液的量应相同,需保持肠段运动恢复正常后在进行下一项实验。
(4)供氧的气泡不能过大过急,否则会使悬线震动,导致标本较大幅度的摆动而影响记录结果。