D101型大孔吸附树脂在分离纯化三萜皂苷方面的应用
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总之 , 在确定分离条件时应综合考虑被分离物极性大小 、 分子量 、溶液的 p H 值等因素的影响 , 以及树脂柱的清洗 、洗脱 液的选择等因素 。
4 结语
目前 , 大孔吸附树脂越来越广泛地被应用于中药的化学成
分及其制备工艺的研究中 [16 , , 17 ] 但就其使用也应注意一些问 题 。首先 ,在致孔剂和降解物的毒性方面 ,吸附树脂是由有机单 体加交联剂 、致孔剂 、分散剂等聚合而成的 ,这种多孔的球状聚 合物会残留有害的添加剂 , 因此应用于药物研究的吸附树脂自 身的规格标准和质量要求是至关重要的 。此外 , 由于 D 101 型 大孔吸附树脂大多应用于以水为介质的体系中 , 但三萜皂苷中 有许多成分在水中溶解度较小 , 这使得树脂的使用受到了限 制 ,因此这仍需要进一步深入研究 。
[ 9 ] 李宝馨 , 杨宝峰 , 郝晓敏 , 等 1 黄连素单用及合用谷维素 在家兔及健康志愿者体内的药动学研究 [J ] 1 中国药学 杂志 ,2000 ,35 (1) :331
[10] 赵玉男 , 邢东明 , 丁 怡 , 等 1 解热药 YL 2000 中小檗碱 在正常和发热大鼠体内的药动学比较 [J ] 1 中国药理学 通报 ,2003 ,19 (10) :1 1701
[11] Pan J F , Yu C , Zhu D Y , et al 1Identificatioa of t hree sulfate - co njugate metabolites of berberine chlo ride in healt h volunteers’ urine af ter o ral administ ratio n [J ] 1 A ct a Pha rm acol S i n ,2002 ,21 (1) :771
分子的极性大小直接影响分离效果 。当化合物的极性基团 增加时 , 树脂对其吸附力也随之增加 , 如果树脂和化合物之间 能发生氢键作用 ,吸附作用也将加强 。
成分是通过树脂的网孔扩散到树脂的网孔内表面而被吸 附 , 因此树脂吸附能力大小与分子体积密切相关 。在同一种树 脂中 , 树脂对分子体积较大的化合物的吸附作用较强 。分子体 积较大的化合物 , 宜选择较大孔径的树脂 , 否则将影响到分离 效果 。 313 上样溶剂性质
常用的型号有 D101 型 、AB - 8 型 、HP 系列 、XAD 系列 等 , 其中 D101 为非极性吸附树脂 , 常用于三萜皂苷的分离纯
化 。其吸附原理是吸附性及分子筛选性结合 , 对欲分离的三萜 皂苷依其分子体积的大小及吸附力的强弱 , 在一定规格的大孔 吸附树脂上 ,以适当的溶剂洗脱而分开 。
通常一种成分在某种溶剂的溶解度大 , 则在该溶剂中 , 树 脂对该物质的吸附力就小 , 反之亦然 。故在上样溶液中加入适 量的无机盐 (如氯化钠 、硫酸钠 、硫酸铵) 可使树脂的吸附量加 大 。由于无机盐在水中的溶解度很大 , 无机盐很快随溶剂前沿 排出 , 故可用大孔吸附树脂代替半透膜脱盐 。树脂吸附量一般 与上样溶液浓度成反比 , 通常以较低浓度进行吸附较为有利 , 如果上样溶液浓度偏高 ,则吸附量会显著减小 。 314 洗脱剂性质
学实践杂志 ,2006 ,24 (1) :13. [ 6 ] 王艳宏 ,李永吉 ,冯彩丽 ,等. 大孔吸附树脂在皂苷研究中
的应用[J ] . 中医药学刊 ,2004 ,22 (2) :373. [ 7 ] 王力生 ,邹节明 ,郭亚健. D 101 大孔吸附树脂纯化苦玄参
总皂苷的研究[J ] . 中草药 ,2004 ,35 (5) :515. [ 8 ] 梁少玲 ,蔡 宇 ,杨燕霞 ,等. 大孔树脂吸附在黄酮及皂苷
(收稿日期 :2007- 08- 16 修回日期 :2007- 10- 08)
中国药房 2008 年第 19 卷第 30 期
China Phar macy 2008 Vol . 19 No . 30 ·2399 ·
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
2 大孔吸附树脂分离纯化三萜皂苷的应用 [6 ,7 ]
在三萜皂苷类成分的提取物中 , 往往伴随着诸如糖类 、鞣 质等亲水性较强的植物成分 , 给皂苷类成分的分离纯化增加了 难度 。因皂苷的苷元部分多为疏水性 ,能被非极性树脂所吸附 , 同时皂苷分子较大 , 故应选择孔径较大的 D 101 型大孔吸附树 脂。吸附后 ,很容易用水将糖等亲水性成分洗脱下来 ,然后再用不 同浓度的乙醇洗下被大孔树脂吸附的苷类 ,达到纯化的目的 [8 ]。 211 预处理 [9 ,10 ]
3 影响 D101 型大孔吸附树脂吸附的因素 [13 ,14 ]
311 树脂本身化学结构的影响 [15 ] 大孔吸附树脂是一种表面吸附剂 , 其吸附力与树脂的比表
面积 、表面电性 、能否与被吸附物形成氢键等因素有关 。引入极 性基团可以改变表面电性或使其与某些被分离的化合物形成 氢键 ,影响吸附作用 。 312 被分离成分的性质
1 大孔吸附树脂的性质及分类
111 性质 [4 ] 常见的大孔吸附树脂 , 是一种不含离子交换基团 、具有大
孔结构的高分子吸附剂 。主要以苯乙烯 、2 - 甲基丙烯酸酯 、丙 烯腈等为原料 ,加入一定量致孔剂 、分散剂 、交联剂 (二乙烯苯) 等聚合而成 。一般为白色颗粒状 ,粒度多为 20～60 目 ,理化性 质稳定 ,不溶于酸 、碱及有机溶剂 ,不受无机盐类存在的影响 。 112 分类 [5 ]
对 D101 型大孔吸附树脂 , 洗脱剂极性越小 , 洗脱能力越 强 。为达到满意的效果 ,可设几种不同浓度洗脱 ,以确定最佳洗 脱液浓度 。 315 其他影响因素
药液在上柱之前一般要经过预处理 , 预处理不好则会使大 孔树脂吸附的杂质过多 , 从而降低其对有效成分的吸附 。树脂 的粒径 、树脂柱的高度也会产生一些影响 , 通常较小的树脂粒 径和较低的树脂高度有利于增大吸附速度 , 但同时也使柱的吸 附量有所降低 。玻璃柱的粗细也会影响分离效果 ,当柱子太细 , 洗脱时树脂易结块 ,壁上易产生气泡 ,流速会逐渐降为零 。洗脱 流速一般控制在 015～5 mL ·min - 1 为宜 。
树脂的量一般为样品量的 8 倍量左右 。湿法装柱 。 药材可用热水 、适当浓度的乙醇或其它溶剂进行提取 , 再 将提取液经过过滤 、沉淀等处理 ,除去部分杂质 ,制成澄清或略 混浊的上样溶液。湿法上样以后 ,放置一段时间 ,以使树脂对化学 成分达到吸附平衡 ,其吸附性能也可通过试验进行考查 [11 ,12 ]。
213 洗脱 常见的洗脱剂有甲醇 、乙醇 、丙酮 、乙酸乙酯等 , 在实际工
作中 , 乙醇应用较多 。可根据吸附力强弱选用不同的洗脱剂及 浓度 。一般常用的系统是 : 水 →不同浓度乙醇/ 水 →95 %乙 醇 。分级分离 :水洗脱糖 、水溶性色素 ; 30 %乙醇洗脱极性大的 成分 ; 50 %～75 %乙醇洗脱皂苷类等成分 ; 95 %乙醇洗脱极性 小成分 。
类成分分离纯化中的应用 [J ] . 时珍国医国药 , 2006 , 17
(2) :277. [ 9 ] 贾存勤 , 李阳春 , 屠鹏飞 , 等. HPD 系列大孔吸附树脂预
处理方法研究[J ] . 中国中药杂志 ,2005 ,30 (18) :1 425. [10] 胡 军 ,周跃华. 大孔吸附树脂在中药成分精制纯化中的
份提取分离中的应用 [J ] . 河北医科大学学报 , 2002 , 23
(2) :121. [ 4 ] 王冬梅 ,尉 芹 ,马希汉 ,等. 大孔吸附树脂在药用植物有
效成分分离中的应用[J ] . 西北林学院学报 ,2002 ,17 (1) :
60. [ 5 ] 董 珂. 大孔树脂技术在中药研究中的应用概况 [J ] . 药
参考文献
[ 1 ] 李焕杰. 中药提取分离技术的进展 [J ] . 中国药房 , 2007 ,
18 (18) :1 429. [ 2 ] 汪洪武 ,刘艳清. 大孔吸附树脂的应用研究进展 [J ] . 中药
材 ,2005 ,28 (4) :353. [ 3 ] 李作平 ,霍长虹. 大孔吸附树脂在水溶性天然药物化学成
D101 型大孔吸附树脂在分离纯化三萜皂苷方面的应用
关颖丽 1 ,2 * ,刘建宇 2 ,尹 虹 2(11 通化师范学院制药与食品科学系 ,通化市 134002 ; 21 沈阳药科大学中药学 院 ,沈阳市 110016)
中图分类号 R28412 ; R943
文献标识码 A
文章编号 1001- 0408 (2008) 30 - 2399 - 02
2005 ,40 (5) :3951 [14] 冯年平 , 狄 斌 , 刘文英 1 药物代谢研究与中药现代化
[J ]1 世界科学技术 - 中医药现代化 ,2003 ,5 (2) :51 [15] 吴秀君 , 肇丽梅 1 液相色谱 - 质谱联用技术在中药药动
学研究中的应用进展 [J ] 1 中国临床药理学杂志 , 2006 , 22 (6) :4601 [16] 裴利霞 1 中药药动学研究集粹[J ]1 中医药学刊 ,2005 ,23 (1) :1211 [17] Plumb RS ,St umpf CL , Granger J H , et a1. U se of liquid chro matograp hy/ time - of - flight mass spect ro met ry and multivariate statistical anal ysis shows p ro mise fo r t he detectio n of drug metabolites in biolo gical fluids [J ] . Papi d Com m u nic i n M ass S pect rom e , 2003 , 17 (23) :2 632.
4 结语
目前 , 大孔吸附树脂越来越广泛地被应用于中药的化学成
分及其制备工艺的研究中 [16 , , 17 ] 但就其使用也应注意一些问 题 。首先 ,在致孔剂和降解物的毒性方面 ,吸附树脂是由有机单 体加交联剂 、致孔剂 、分散剂等聚合而成的 ,这种多孔的球状聚 合物会残留有害的添加剂 , 因此应用于药物研究的吸附树脂自 身的规格标准和质量要求是至关重要的 。此外 , 由于 D 101 型 大孔吸附树脂大多应用于以水为介质的体系中 , 但三萜皂苷中 有许多成分在水中溶解度较小 , 这使得树脂的使用受到了限 制 ,因此这仍需要进一步深入研究 。
[ 9 ] 李宝馨 , 杨宝峰 , 郝晓敏 , 等 1 黄连素单用及合用谷维素 在家兔及健康志愿者体内的药动学研究 [J ] 1 中国药学 杂志 ,2000 ,35 (1) :331
[10] 赵玉男 , 邢东明 , 丁 怡 , 等 1 解热药 YL 2000 中小檗碱 在正常和发热大鼠体内的药动学比较 [J ] 1 中国药理学 通报 ,2003 ,19 (10) :1 1701
[11] Pan J F , Yu C , Zhu D Y , et al 1Identificatioa of t hree sulfate - co njugate metabolites of berberine chlo ride in healt h volunteers’ urine af ter o ral administ ratio n [J ] 1 A ct a Pha rm acol S i n ,2002 ,21 (1) :771
分子的极性大小直接影响分离效果 。当化合物的极性基团 增加时 , 树脂对其吸附力也随之增加 , 如果树脂和化合物之间 能发生氢键作用 ,吸附作用也将加强 。
成分是通过树脂的网孔扩散到树脂的网孔内表面而被吸 附 , 因此树脂吸附能力大小与分子体积密切相关 。在同一种树 脂中 , 树脂对分子体积较大的化合物的吸附作用较强 。分子体 积较大的化合物 , 宜选择较大孔径的树脂 , 否则将影响到分离 效果 。 313 上样溶剂性质
常用的型号有 D101 型 、AB - 8 型 、HP 系列 、XAD 系列 等 , 其中 D101 为非极性吸附树脂 , 常用于三萜皂苷的分离纯
化 。其吸附原理是吸附性及分子筛选性结合 , 对欲分离的三萜 皂苷依其分子体积的大小及吸附力的强弱 , 在一定规格的大孔 吸附树脂上 ,以适当的溶剂洗脱而分开 。
通常一种成分在某种溶剂的溶解度大 , 则在该溶剂中 , 树 脂对该物质的吸附力就小 , 反之亦然 。故在上样溶液中加入适 量的无机盐 (如氯化钠 、硫酸钠 、硫酸铵) 可使树脂的吸附量加 大 。由于无机盐在水中的溶解度很大 , 无机盐很快随溶剂前沿 排出 , 故可用大孔吸附树脂代替半透膜脱盐 。树脂吸附量一般 与上样溶液浓度成反比 , 通常以较低浓度进行吸附较为有利 , 如果上样溶液浓度偏高 ,则吸附量会显著减小 。 314 洗脱剂性质
学实践杂志 ,2006 ,24 (1) :13. [ 6 ] 王艳宏 ,李永吉 ,冯彩丽 ,等. 大孔吸附树脂在皂苷研究中
的应用[J ] . 中医药学刊 ,2004 ,22 (2) :373. [ 7 ] 王力生 ,邹节明 ,郭亚健. D 101 大孔吸附树脂纯化苦玄参
总皂苷的研究[J ] . 中草药 ,2004 ,35 (5) :515. [ 8 ] 梁少玲 ,蔡 宇 ,杨燕霞 ,等. 大孔树脂吸附在黄酮及皂苷
(收稿日期 :2007- 08- 16 修回日期 :2007- 10- 08)
中国药房 2008 年第 19 卷第 30 期
China Phar macy 2008 Vol . 19 No . 30 ·2399 ·
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
2 大孔吸附树脂分离纯化三萜皂苷的应用 [6 ,7 ]
在三萜皂苷类成分的提取物中 , 往往伴随着诸如糖类 、鞣 质等亲水性较强的植物成分 , 给皂苷类成分的分离纯化增加了 难度 。因皂苷的苷元部分多为疏水性 ,能被非极性树脂所吸附 , 同时皂苷分子较大 , 故应选择孔径较大的 D 101 型大孔吸附树 脂。吸附后 ,很容易用水将糖等亲水性成分洗脱下来 ,然后再用不 同浓度的乙醇洗下被大孔树脂吸附的苷类 ,达到纯化的目的 [8 ]。 211 预处理 [9 ,10 ]
3 影响 D101 型大孔吸附树脂吸附的因素 [13 ,14 ]
311 树脂本身化学结构的影响 [15 ] 大孔吸附树脂是一种表面吸附剂 , 其吸附力与树脂的比表
面积 、表面电性 、能否与被吸附物形成氢键等因素有关 。引入极 性基团可以改变表面电性或使其与某些被分离的化合物形成 氢键 ,影响吸附作用 。 312 被分离成分的性质
1 大孔吸附树脂的性质及分类
111 性质 [4 ] 常见的大孔吸附树脂 , 是一种不含离子交换基团 、具有大
孔结构的高分子吸附剂 。主要以苯乙烯 、2 - 甲基丙烯酸酯 、丙 烯腈等为原料 ,加入一定量致孔剂 、分散剂 、交联剂 (二乙烯苯) 等聚合而成 。一般为白色颗粒状 ,粒度多为 20～60 目 ,理化性 质稳定 ,不溶于酸 、碱及有机溶剂 ,不受无机盐类存在的影响 。 112 分类 [5 ]
对 D101 型大孔吸附树脂 , 洗脱剂极性越小 , 洗脱能力越 强 。为达到满意的效果 ,可设几种不同浓度洗脱 ,以确定最佳洗 脱液浓度 。 315 其他影响因素
药液在上柱之前一般要经过预处理 , 预处理不好则会使大 孔树脂吸附的杂质过多 , 从而降低其对有效成分的吸附 。树脂 的粒径 、树脂柱的高度也会产生一些影响 , 通常较小的树脂粒 径和较低的树脂高度有利于增大吸附速度 , 但同时也使柱的吸 附量有所降低 。玻璃柱的粗细也会影响分离效果 ,当柱子太细 , 洗脱时树脂易结块 ,壁上易产生气泡 ,流速会逐渐降为零 。洗脱 流速一般控制在 015～5 mL ·min - 1 为宜 。
树脂的量一般为样品量的 8 倍量左右 。湿法装柱 。 药材可用热水 、适当浓度的乙醇或其它溶剂进行提取 , 再 将提取液经过过滤 、沉淀等处理 ,除去部分杂质 ,制成澄清或略 混浊的上样溶液。湿法上样以后 ,放置一段时间 ,以使树脂对化学 成分达到吸附平衡 ,其吸附性能也可通过试验进行考查 [11 ,12 ]。
213 洗脱 常见的洗脱剂有甲醇 、乙醇 、丙酮 、乙酸乙酯等 , 在实际工
作中 , 乙醇应用较多 。可根据吸附力强弱选用不同的洗脱剂及 浓度 。一般常用的系统是 : 水 →不同浓度乙醇/ 水 →95 %乙 醇 。分级分离 :水洗脱糖 、水溶性色素 ; 30 %乙醇洗脱极性大的 成分 ; 50 %～75 %乙醇洗脱皂苷类等成分 ; 95 %乙醇洗脱极性 小成分 。
类成分分离纯化中的应用 [J ] . 时珍国医国药 , 2006 , 17
(2) :277. [ 9 ] 贾存勤 , 李阳春 , 屠鹏飞 , 等. HPD 系列大孔吸附树脂预
处理方法研究[J ] . 中国中药杂志 ,2005 ,30 (18) :1 425. [10] 胡 军 ,周跃华. 大孔吸附树脂在中药成分精制纯化中的
份提取分离中的应用 [J ] . 河北医科大学学报 , 2002 , 23
(2) :121. [ 4 ] 王冬梅 ,尉 芹 ,马希汉 ,等. 大孔吸附树脂在药用植物有
效成分分离中的应用[J ] . 西北林学院学报 ,2002 ,17 (1) :
60. [ 5 ] 董 珂. 大孔树脂技术在中药研究中的应用概况 [J ] . 药
参考文献
[ 1 ] 李焕杰. 中药提取分离技术的进展 [J ] . 中国药房 , 2007 ,
18 (18) :1 429. [ 2 ] 汪洪武 ,刘艳清. 大孔吸附树脂的应用研究进展 [J ] . 中药
材 ,2005 ,28 (4) :353. [ 3 ] 李作平 ,霍长虹. 大孔吸附树脂在水溶性天然药物化学成
D101 型大孔吸附树脂在分离纯化三萜皂苷方面的应用
关颖丽 1 ,2 * ,刘建宇 2 ,尹 虹 2(11 通化师范学院制药与食品科学系 ,通化市 134002 ; 21 沈阳药科大学中药学 院 ,沈阳市 110016)
中图分类号 R28412 ; R943
文献标识码 A
文章编号 1001- 0408 (2008) 30 - 2399 - 02
2005 ,40 (5) :3951 [14] 冯年平 , 狄 斌 , 刘文英 1 药物代谢研究与中药现代化
[J ]1 世界科学技术 - 中医药现代化 ,2003 ,5 (2) :51 [15] 吴秀君 , 肇丽梅 1 液相色谱 - 质谱联用技术在中药药动
学研究中的应用进展 [J ] 1 中国临床药理学杂志 , 2006 , 22 (6) :4601 [16] 裴利霞 1 中药药动学研究集粹[J ]1 中医药学刊 ,2005 ,23 (1) :1211 [17] Plumb RS ,St umpf CL , Granger J H , et a1. U se of liquid chro matograp hy/ time - of - flight mass spect ro met ry and multivariate statistical anal ysis shows p ro mise fo r t he detectio n of drug metabolites in biolo gical fluids [J ] . Papi d Com m u nic i n M ass S pect rom e , 2003 , 17 (23) :2 632.
