河北农业科学，２０１０，１４（４）：８２—８４，１１２ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 编辑索相敏
原生质体培养及其在果树育种上的应用
李学营，鄢新民 ，王献革，郝 婕，冯建忠 （河北省农林科学院石家庄果树研究所，河北石家庄ｏ５ｏｏ６１）
摘要：综述了近年来原生质体技术的研究进展及其在果树育种上的应用，并讨论了原生质体技术存在的问题及
应用前景。
关键词：原生质体培养；原生质体融合；胞质杂种；果树育种
中图分类号：Ｑ９４３ 文献标识码：Ａ 文章编号：・１００８－１６３１（２０１０）０４－００８２－０３
Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｉｔｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ Ｆｒｕｉｔ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ
ＬＩ Ｘｕｅ—ｙｉｎｇ，ＹＡＮ Ｘｉｎ—ｍｉｎ ，ＷＡＮＧ Ｘｉａｎ—ｇｅ，ＨＡＯ Ｊｉｅ，ＦＥＮＧ Ｊｉａｎ・ｚｈｏｎｇ
（Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｐｏｍｏｌｏｇｙ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｈｅｂｅｉ Ａｃａｄｅｍｙ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００６ １，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ａｎｄ ｉｔｓ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｆｒｕｉｔ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ａｒｅ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｉｓｔｉｎｇ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ａｎｄ
ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ａｒｅ ａｌｓｏ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｃｕｌｔｕｒｅ；Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｆｕｓｉｏｎ；Ｃｙｂｒｉｄｓ；Ｆｒｕｉｔ ｂｒｅｅｄｉｎｇ
植物原生质体是去除了细胞壁被质膜所包围的、具
有生活力的“裸露细胞”，能在适宜的培养条件下诱导 再生植株。由于没有细胞壁的障碍，原生质体能够直接
高效地摄取外源ＤＮＡ或遗传物质、各种细胞器甚至细 胞核，也可与异源原生质体经诱导融合形成体细胞杂
２０１０年第６期
原生质体融合技术在遗传育种中的应用
张子栋，常胜合 ，董湘熔，杨飞飞，李宗伟，王雁萍，秦广雍
（郑州大学河南省离子束生物工程重点实验室，河南郑州４５００５２）
摘要：综述了原生质体的制备与再生因素、原生质体融合的促融方法、选择性遗传标记方法以及原
生质体融合技术在遗传育种中的应用，并且展望了原生质体融合育种的发展前景。
关键词：原生质体；原生质体融合；遗传育种
中图分类号：Ｑ８１３．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌＯＯ４—３２６８（２０１０）０６—０１５６—０４
原生质体融合育种（ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｆｕｓｉｏｎ）是２０世
纪６Ｏ年代发展起来的基因重组技术。通过２个遗
传性状不同的亲株原生质体融合从而达到杂交的目
的。１９６０年，法国的Ｂａｒｓｉ研究小组在进行２种不
同动物细胞混合时发现了自发融合现象，同时日本
的Ｄｋａｄａ发现仙台病毒可诱发内艾氏腹水病细胞
彼此融合，从而开始了细胞融合的探索。１９７４年， 匈牙利的Ｆｅｒｅｃｚｙ等口 采用离心力诱导的方法实现
了白地霉（Ｃｒｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ）营养缺陷型突变
株原生质体的融合；随后人们相继用ＮａＣ１、ＫＣＩ和
Ｃａ（Ｎｏ。） 等作为诱变剂进行融合，但融合率比较
低。１９７８年，国际工业微生物遗传学讨论会提出了
原生质体的融合问题，使这一技术迅速扩展到了育
种领域。１９７９年，匈牙利的Ｐｅｓｔｉ等 首先提出了
运用融合育种技术提高青霉素产量的报告，从而开
创了原生质体融合技术在遗传育种中的应用，综述
如下。
１原生质体的制备与再生技术
微生物细胞一般是有细胞壁的，进行该项技术
的第一步就是制备原生质体。当前去除细胞壁的方
法主要有机械法、非酶法和酶法。采用前２种方法
制备的原生质体效果差，活性低，仅适用于某些特定
菌株，因此，并未得到推广。在实际工作中，最有效
和最常用的是酶法。该法时间短，效果好。使用的
酶主要为蜗牛酶或溶菌酶，具体根据所用微生物的
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原生质体技术与园艺植物育种
作者：柴秋泉
来源：《吉林农业》2012年第11期
【摘要】 原生质体技术包括原生质体植株再生、原生质体融合技术等， 原生质体再生植株的变异为园艺植物育种工作提供了素材。原生质体融合技术则是育种工作的新途径，二者都对育种工作的发展起到了非常重要的作用。
【关键词】园艺植物 原生质体技术 原生质体融合 育种
过去，育种专家常收集家畜家禽及作物的自然突变型，以改良品种，但由于自然突变的发生率并不高，且所发生的突变性状无法控制，所以这样的方法逐渐被淘汰。近年来遗传学知识的大幅进步，以人工的方法来进行育种随着越来越广泛，如以人为的方法使基因发生突变，再选择优良的性状，以作品种改良之用。其中遗传工程可以说是目前最广泛应用与研究的人工育种方法。
遗传工程技术可以由植物中分离出单一基因，然后在细菌或酵母中使这些基因数量增多，即选殖（cloning）。选殖可决定单一基因的构造与机能。经选殖程序或许可将有用或改良的基因移入作物的基因群（genome）中，然后经过一连串的适应可使农作物更符合人类的需要。然而此种遗传工程技术可并入现有育种技术中以增强效果，并非完全取代传统的育种程序。
不仅主要的农作物如稻米、小麦、玉米、大麦、大豆，甚至菸草、甜菜及油菜等由人类种植已有数百年至四千年历史。植物栽培首先将自然界存在品种经过杂交、突变，再由其中选出大谷粒、无碎穗及抗病性强的品种。亚述古国对椰枣树进行人工授精历史记载可追溯到耶稣时代之前，但是否由Triticum monococcum、Triticum searsii及Triticum tauschii等三种品种的基因群经由人工传粉作用合并成具有42条染色体的小麦却没有记载。也许人工传粉作用亦可说明两个双套染色体菸草育种，此种植物可能远在哥伦比亚时代之前南美洲人即以Nicotiana
中国抗生素杂志２００６年１Ｏ月第３１卷第１Ｏ期 ・５８７・
文章编号：１００１．８６８９（２００６）１０－０５８７－０４
麦考酚酸产生菌原生质体诱变育种的研究
杨亚勇 李长洪盂文伟 （广东新北江制药股份有限公司， 清远５１１５１５）
摘要： 对麦考酚酸产生菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｒｅｖｉｃｏｍａｃｔｕｍ）的原生质体制备、再生条件进行了研究，建立了原生质体诱变筛选体系。 在此基础上，采用紫外线和亚硝酸复合诱变处理麦考酚酸产生菌的原生质体，经原生质体再生获得了Ａ．Ｓ．８的菌株，该菌株比对照菌 株生产能力提高２８．２％，摇瓶和５０Ｌ发酵实验的效价均可达到６０００ｍｇ／Ｉ 以上。 关键词：麦考酚酸；原生质体；诱变 中图分类号：Ｒ９７９．５ 文献标识码：Ａ
Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｍｙｃｏｐｈｅｎｏ！ｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｓｔｒａｉｎ，
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｒｅｖｉｃ・ｏｍｐａｃｔｕｍ
Ｙａｎｇ Ｙａ—ｙｏｎｇ，Ｌｉ Ｃｈａｎｇ—ｈｏｎｇ ａｎｄ Ｍｅｎｇ Ｗｅｎ—ｗｅｉ （Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ｎｏｒｔｈ Ｒｉｖｅｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．Ｌｔｄ．， Ｑｉｎｇｙｕａｎ ５１１５１５）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ Ｔｏ ｓｅｌｅｃｔ ｈｉｇｈ ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｍｕｔａｎｔｓ ｆｒｏｍ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｒｅｖｉｃｏｍｐａｃｔｕｍ，ｔｈｅ ｐｒｏ—
ｔｏｐｌａｓｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｗｅｒｅ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ．Ｔｈｅ ｍｕｔａｎｔ ｓｔｒａｉｎ Ａ—Ｓ一８ ｏｆ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｒｅｖｉｃｏｍ．
ｐａｃｔｕｍ ｗｈｉｃｈ ｐｏｓｓｅｓｓｅｄ ｈｉｇｈ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＵＶ ａｎｄ ＨＮ０２．
