丙二醛标准曲线
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植物体内丙二醛含量的测定一、原理丙二醛(MDA)是由于植物器官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。
它的含疑与植物衰老及逆境伤害有密切关系。
测定植物体内丙二醛含量,通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕色的三甲川<3, 5, 5-三甲基恶哇-2, 4-二酮),三甲川最大的吸收波长在532nmo但是测左植物组织中MDA时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处,在532nm处也有吸收。
植物遭受干旱、髙温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加,因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一左要排除可溶性糖的干扰。
此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除,532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。
低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值,所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一立的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量为100 — 300 ng・g 根据植物样品量和提取液的体积,加入Fe‘‘的终浓度为0. 5nmo 1・L 在532nm、600nm和450nm波长处测從吸光度值,即可计算出丙二醛含量。
二、材料、仪器设备及试剂1.材料;植物叶片。
2.仪器设备:离心机,分光光度计:电子分析天平;恒温水浴;研钵;小烧杯(〉2), 容量瓶(100ml〉2);试管(>4):移液管(2ml>3、5ml>l)、试管架;移液管架;洗耳球:剪刀。
3.试剂及其配制:10%三氯乙酸:称取10g三氯乙酸加蒸锚水溶解后泄容至100ml;0. 6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液:称取0. 6g硫代巴比妥酸加蒸憎水溶解后定容至100ml:石英砂。
实验步L丙二醛的提取称取不同处理的植物叶片(尽量剪碎)0・2g,加入少咼石英砂和10%三氮乙酸2ml, 研磨至匀浆,再加3mll0%三氯乙酸进一步研磨,匀浆再经5ml三氯乙酸移入10ml离心管,以4000r/min离心lOmin, K上淸液为丙二醛提取液(10ml)。
丙二醛含量的测定(李合生p260)一、实验原理植物器官衰老时,或在逆境环境下,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛是其产物之一,通常利用它作为脂质过氧化指标,表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。
丙二醛在高温、酸性条件下与硫代巴比妥酸反应,形成在532nm波长处有最大光吸收的有色三甲基复合物,该复合物的吸光系数为150{mmol/(L.cm)},并且在600nm 波长处有最小光吸收。
二、材料、仪器设备及试剂1、5%的三氯乙酸(TCA),称取0.5g三氯乙酸,加蒸馏水稀释定容至10ml容量瓶中。
2、0.67%硫代巴比妥酸(TBA). 称取0.067g硫代巴比妥酸‘放入沸水中溶解,在定容至10ml容量瓶中。
新鲜的子叶或茎段、研钵2个、冰浴槽两个、研锤2个、1ml注射器2个、石英砂1瓶、药勺1把、吸水纸若干、试剂瓶1个、移液枪若干把、风光光度计一台、蒸馏水两瓶、干燥的试管若干个、试管架、离心机一台、离心管若36个、记号笔1个、标签纸若干、水笔1个。
三、试验方法与步骤1、丙二醛的提取准备工作:离心管36个,分别标号1~18和1Y~18Y(标有Y的装子叶研磨液,带0的表示实验组),拿出的研钵2个(带研锤),取1个棕色试剂瓶向里面放入TCA适量。
再拿出准备好的2个1ml注射器备用,取出石英砂和药勺(去石英砂用,用最小的那个)。
正式工作:从每个要测实验组中称取约0.2g的鲜重样品(从各个重复中抽取等个数的鲜样,切去根,再把茎和子叶分开,各部分混合均匀后,随即称取0.2g),放入研钵中,加少许石英砂,再加0.2~0.4mlTCA后研磨,研磨至糊状后用刚才用过的那个注射器中的剩余磷酸缓冲液冲洗研锤和研钵,倒入对应编号的离心管中,再用刚才用过的注射器再取1ml 磷酸缓冲液冲洗研钵,把冲洗液倒入离心管中,盖上盖摇匀,待全部都研磨完毕后放入离心机种离心(4℃、1200r/min、30min)。
离心好后放在室温下备用。
硫代巴比妥酸法(丙二醛含量测定)一:原理丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑-2,4。
二酮),其最大吸收波长在532nm。
但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm,但532nm处也有吸收。
植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加,因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。
低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值,所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1,根据植物样品量和提取液的体积,加入Fe3+的终浓度为0.5umol·L-1。
二:试剂1:质量分数为10%三氯乙酸(TCA);2:质量分数0.6%硫代巴比妥酸:先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解,再用10%的三氯乙酸定容;三:方法1:MDA的提取称取剪碎的试材1g,加入2mll0%TCA和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA研磨,匀浆在4000r·min-1离心10min,上清液为样品提取液。
2:显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水),加入2ml 0.6%TBA溶液,混匀物于沸水浴上反应15min,迅速冷却后再离心。
取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。
四:结果C1=11.71D450C2={6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1)C2——MDA的浓度(·umol·L-1)D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。
实验1植物组织中丙二醛含量的测定1. MDA 的提取称取植物材料1g ,剪碎,加入50mmol/L的磷酸缓冲液(PH7.8),研磨,4℃,10000g离心10min,上清液定容为10ml为样品提取液.(取部分上清液立即分装于4℃保存,用于POD和蛋白质含量的测定.)2. 丙二醛含量测定: 吸取离心的上清液1.5 ml(对照加1.5 mL 蒸馏水),加入2.5ml 0.5% TBA 溶液,摇匀。
将试管放入沸水浴中煮沸30 min (自试管内溶液中出现小气泡开始计时),取出试管并冷却,4000g 离心10 min ,取上清液测定532 nm 、600 nm 和450 nm 处的吸光度值。
3.结果计算:MDA的浓度: C(μmol/L)= 6.45×(A 532 - A 600 )-0.56× A 450 MDA 含量( μmol/g)= [MDA浓度(umol/L)×提取液体积(mL)]/[样品重量(g)×1000]实验2 过氧化物酶活性(POD)的测定(比色法)反应混合液:100 mmol /L 磷酸缓冲液(pH6.0 )50 mL 于烧杯中,加入愈创木酚28 μl ,于磁力搅拌器上加热搅拌,直至愈创木酚溶解,待溶液冷却后,加入30 % 过氧化氢19 μl ,混合均匀,保存于冰箱中。
1.POD的制备:上一实验中提取并分装的上清液1ml (若浓度高用磷酸缓冲液稀释)2. 酶活性的测定:取反应混合液3 mL 和上述酶液1mL,立即开启秒表记录时间,于分光光度计上测量波长470 nm 下吸光度值,每隔1min 读数一次,共记录5次。
以反应混合液3 mL 和磷酸缓冲液1mL为对照。
3.以没加酶液的反应体系混合液为对照,于分光光度计上测量波长470nm 下吸光度值,每隔1min 读数一次,立即开启秒表记录时间)3.结果计算也可以用每min 内 A 470 变化0.01 为 1 个过氧化物酶活性单位(u )表示。
一.实验内容实验1 MDA(丙二醛)含量测定所需试剂:10%三氯乙酸(TCA)(纯) 0.25%硫代巴妥酸 (纯)实验2:可溶性蛋白含量测定所需试剂:考马斯亮蓝G-250 95%乙醇 85%磷酸实验3:SOD(超氧化物歧化酶)酶活性测定所需试剂:dl-甲硫氨酸(Met) NBT EDTA-Na2 核黄素实验4:CAT(过氧化氢酶)活性(过氧化氢酶)测定所需试剂:PBS(PH=7.0) 30% H2O2实验五:Apx(抗坏血酸过氧化物酶)活性(即ASA—POD活性)测定所需试剂:ASA(分子量167.12) (乙=胺四乙酸=钠)EDTA—Na2 PBS (pH7.0) 30%H2O实验6: ASA(维生素C)含量测定偏磷酸 95%乙醇磷酸 4% 2,2-二联吡啶 FeCl3(或FeCl3·6H2O)实验7:GSH(谷胱甘肽, 媚力肽GSH GSH是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成的三肽化合物)含量测定所需试剂:NaH2PO4·2H2O DTNB(二硫代硝基苯甲酸) PBS (PH6.8)实验8:脯氨酸测定所需试剂:磺基水杨酸甲苯茚三酮冰乙酸 85%磷酸试验9:叶绿素含量测定。
80%丙酮试验9:GR活性测定试验10:过氧化氢含量测定。
三氯乙酸试验11:超氧阴离子含量测定二.酶液和母液提取1. 酶液提取所需试剂:50mmol/L磷酸缓冲液(PH=7.8)(内含1% (m/v) 聚乙烯吡哆烷酮PVP),0.1mmol/L EDTANa2或EDTA),也可为(内含2% (m/v)PVP),0.2mmol/L EDTA Na2或EDTA)(先配制后用缓冲液定容)2. ASA . GSH母液提取所需试剂:5%偏磷酸1.抗氧化酶酶液提取(SOD.POD.CAT):1g(根据样品的量,少的可以适当减少)叶片加入预冷5ml. 50mmol/L磷酸缓冲液(PH=7.8)↓4℃冷冻15000g离心20分钟↓上清液即为酶液(5℃下保存一两天内备用,中短期用-20℃保存)2.ASA . GSH母液提取:0.1g叶片加入3ml预冷5%偏磷酸溶液↓4℃冷冻14000g离心10分钟↓上清液即为母液(5℃下保存备用)(偏磷酸可显著沉淀蛋白质和保护ASA)酶液提取所需试剂:PVP(聚乙烯吡哆烷酮):1%(1g溶于100ml水),1000ml需称取10g,此处用PBSEDTA-Na 2 : 0.1mmol/L (37.2mg EDTA-Na2溶于1000ml蒸馏水),此处用PBSPBS(缓冲液)配制方法:① Na2HPO4·12H2O ② NaH2PO4·2H2O取① 71.64g,蒸馏水定容至1L,取② 31.21g定容至1L,放置4℃冰箱备用PH=7.8 取① 91.5ml+② 8.5ml=100ml (浓度0.2mol/L)需要0.05mol/L→将上述溶液烯释至400ml (0.2mol/L*0.1=0.05mol/L*V)母液提取所需试剂:5%偏磷酸:称5g纯偏磷酸,定容至100 ml蒸馏水(需加热溶解,温度在50-60℃)偏磷酸有剧毒(偏磷酸难溶解,先得用研钵提前研碎,后用磁力搅拌器溶解一到两天后再定容)(现所用为38%HPO3,所以需称65.7895g,定容至500ml)三.实验步骤实验1:MDA含量测定1.1所需试剂:10%三氯乙酸(TCA)(纯)称10g定容至100ml0.25%硫代巴妥酸 (纯) 称0.25g用10%TCA定容至100ml(配制时,可一次完成,先配TCA,不要定容,再加入硫代巴比妥酸,然后定容,若难溶解,可以在磁力搅拌器上微热)1.2步骤:取0.3g叶片,加4ml磷酸缓冲液研磨,加入 4ml 0.25%的硫代巴比妥酸(溶于10%的三氯乙酸)溶液↓摇匀95℃加热15分钟↓快速冷却3000g离心15分钟↓取上清测定 OD532,OD600,OD450值↓按公式求 MDA浓度=6.45×(OD532-OD600)-0.56OD450 (μmol/L)可溶性糖浓度=11.71×OD450 (mmol/L)最后计算 MDA含量(μmol/g FW)= [4×(MDA浓度x)×10-3/0.1]同时,可测得可溶性糖含量(m mol/g FW)= 4×(可溶性糖浓度χ)×10-3/0.1(用多波长测定,在测定之前一定要矫正基线,公式中的参数可以直接在分光光度计上输入)注意:以0.25%的硫代巴妥酸溶液作空白调零MDA含量测定的改进1.可以用做酶活性时提取的酶液来直接测定MDA含量,用量可以定为1.0、1.5或2.0(较好)ml。
丙二醛测定方法植物器官衰老或在逆境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物,其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。
从膜上产生的位置释放出后,可以与蛋白质、核酸反应,从而丧失功能,还可使纤维素分子间的桥键松驰,或抑制蛋白质的合成。
因此,MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。
[原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm,在600nm处有最小光吸收,该复合物的吸光系数为155[mmol/(L*cm)],可按公式:A532-A600=155000CL(a)式中:A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值L表示比色杯厚度cm算出MDA浓度C(μmol/L),进一步算出单位重量鲜组织中MDA含量(μmol/g)。
需要指出的是,植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。
为消除这种干扰,经试验,可用下列公式消除有蔗糖引起的误差:C(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450 (b)式中:A532、A600和A450分别表示532nm和600nm处的吸光度值算出植物样品提取液中MDA的浓度后,进一步算出其在植物组织中的含量。
[仪器设备]紫外可见分光光度计1台;离心机1台;电子天平1台;10ml离心管4支;研钵2套;试管4支;刻度吸管:10ml 1支,2ml1支;剪刀1把。
[试剂]1、5%三氯乙酸(TCA);2、0.6%硫代巴比妥酸(TBA):称取TBA0.6g,先加少量NaOH(1mol/L)溶解,溶于5%TCA溶液并用其定容至100ml。
3、石英砂。
[方法]1.实验材料:受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片或衰老的植物器官。
2.MDA的提取:称取剪碎的试材0.5-1g,加入2ml 5%TCA和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆在4000r·min-1离心10min,上清液为样品提取液。
丙二醛的测定方法丙二醛(Acetaldehyde)是一种广泛存在于自然界中的有机化合物,常见于水果、蔬菜、酒类等食品中。
由于其不仅能影响食品的品质和口感,同时也被认为是一种有害物质,因此对丙二醛的测定方法具有重要意义。
以下将详细介绍几种目前常用的丙二醛测定方法。
1. 乙酰-乙酸测定法该方法是通过丙二醛与乙酰丙酮反应生成1,1,3-三乙酰基二甲基衍生物,然后利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)等仪器进行定性和定量分析。
该方法具有操作简单、准确度高的特点,能够测定非常低浓度的丙二醛,适用于食品中丙二醛的测定。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)也是一种常用的丙二醛测定方法。
该方法的原理是通过样品中的丙二醛与某个发色试剂反应生成可检测的色素,然后利用HPLC进行分离和定量分析。
该方法具有分离效果好、灵敏度高、操作简单的优点,可以应用于各种食品中的丙二醛测定。
3. 荧光法荧光法是通过丙二醛与某种荧光试剂(如丙二酰肼)反应生成荧光物质,然后使用荧光光度计进行测定。
该方法具有灵敏度高、重现性好、操作简单的特点,可以用于食品中丙二醛的测定。
4. 气相色谱法气相色谱法(GC)也是一种常用的丙二醛测定方法。
该方法主要是利用气相色谱仪对样品中的丙二醛进行分离和定量分析。
通常采用柱前衍生化方法将丙二醛转化为适合气相色谱分析的化合物,然后通过GC进行分离和检测。
该方法具有分离效果好、重现性高的特点,适用于各种食品中丙二醛的测定。
需要注意的是,不同的样品矩阵可能会对丙二醛的测定方法产生一定的影响,因此在具体应用过程中需要选择适合的方法,并对其进行验证和适应性研究。
总结而言,目前常用的丙二醛测定方法包括乙酰-乙酸测定法、高效液相色谱法、荧光法和气相色谱法。
这些方法具有各自的特点和适用范围,可以满足不同食品中丙二醛的测定需求。
科学家们在实际应用中可以根据具体情况选择合适的方法进行测定。
同时,未来还有可能发展出更加高效和灵敏的测定方法,以提高对丙二醛的检测水平。
植物组织中丙二醛的测定实验原理:植物器官衰老或在逆境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化作用的最终分解产物,其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。
丙二醛在酸性和高温条件,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二酮),在532nm处有最大光吸收,在600nm处有最小光吸收,该复合物的吸光系数为155[mmol/( L.cm )] ,可按公式:A532-A600=155000×C×L算出MDA浓度C(μmol/L),进一步算出单位重量鲜组织中 MDA 含量(μmol/g)。
式中,A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。
L为比色杯厚度(cm )。
需要指出的是,植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。
为消除这种干扰,经试验,可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
C(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450式中: A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm处的吸光度值。
算出植物样品提取液中MDA的浓度后,可进一步算出其在植物组织中的含量。
实验材料、试剂与仪器设备(一)实验材料植物的根或叶片。
(二)试剂1、5%三氯乙酸(TCA)。
2、0.6 %硫代巴比妥酸(TBA)溶液:称取硫代巴比妥酸0.6g溶于5%TCA溶解并用其定容至l00mL 。
(三)仪器设备研钵,恒温水浴锅,分光光度计,离心机,天平,刻度试管,移液管实验步骤1.MDA的提取称取植物材料1g,剪碎,加入2mL5%TCA和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mLTCA进一步研磨,匀浆在4000r/min离心10min,上清液为样品提取液。
2. 显色反应和测定吸取离心的上清液2mL(对照加2mL蒸馏水),加入2 mL0.6%TBA溶液,摇匀。
将试管放入沸水浴中煮沸10min(自试管内溶液中出现小气泡开始计时),取出试管并冷却,3000r/min离心15 min,取上清液并量其体积。
植物中丙二醛测定方法研究摘要:建立了硫代巴比妥酸-分光光度法测定植物中丙二醛(MDA)的分析方法,该方法检出限在0.0004μmol/g,测定下限为0.0016μmol/g,方法回收率在94%~104%之间,精密度(n=6)为2.7%~5.2%,准确度为3.8%。
该方法简便快速,灵敏可靠,适用于植物中丙二醛(MDA)分析。
关键词:丙二醛;硫代巴比妥酸;分光光度法引言丙二醛(MDA)是植物在酸性或高温条件下膜脂过氧化的产物,可通过丙二醛含量变化了解膜脂过氧化程度,以间接掌握植物膜系统的受损程度。
目前MDA,测定方法主要有分光光度法[1]、荧光法[2]、HPLC法[3]、GC-MS法[4]、试剂盒法。
荧光法由于萃取溶剂不同或按照原文献方法无混匀器使萃取不完全而造成结果不准确[5];因此,考虑到硫代巴比妥酸法实验方法简单,无特殊实验条件要求,显色反应迅速,干扰物质少,灵敏度高,可以测定微克级的丙二醛含量,因此,本文采用以硫代巴比妥酸分光光度法测定植物中丙二醛含量。
1 实验部分1.1 方法原理在酸性和高温(温度高于80℃)条件下,丙二醛与硫代巴比妥酸反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),根据朗伯-比尔定律和双组份分光光度法,丙二醛的含量由波长分别为450 nm、532 nm、600 nm处的吸光度A450、A532、A600进行计算,其结果为丙二醛含量。
1.2 试剂与仪器1,1,3,3-四乙氧基丙烷(E.Mesck 97%),三氯乙酸(C2HCl3O2),硫代巴比妥酸(C4H4N2O2S),实验用水为二次蒸馏水。
紫外分光光度计,台式离心机,分析天平,水浴锅,研钵,剪刀,石英砂等。
1.3 溶液配制将1,1,3,3-四乙氧基丙烷(E.Mesck 97%)逐级稀释得到浓度分别为100.00、10.00、0.10μg/mL的丙二醛标准溶液,贮存于棕色瓶中,置于冰箱中4℃冷藏;配制10%三氯乙酸(C2HCl3O2)及0.5%硫代巴比妥酸(C4H4N2O2S)。
植物体内丙二醛含量的测定一、原理丙二醛(MDA)是由于植物器官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。
它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。
测定植物体内丙二醛含量,通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),三甲川最大的吸收波长在532nm。
但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处,在532nm处也有吸收。
植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加,因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。
此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除,532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。
低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值,所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量为100-300μg·g-1,根据植物样品量和提取液的体积,加入Fe3+的终浓度为0.5nmol· L-1。
在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值,即可计算出丙二醛含量。
二、材料、仪器设备及试剂1. 材料:植物叶片。
2. 仪器设备:离心机,分光光度计;电子分析天平;恒温水浴;研钵;小烧杯(>2),容量瓶(100ml>2);试管(>4);移液管(2ml>3、5ml>1)、试管架;移液管架;洗耳球;剪刀。
3. 试剂及其配制:10%三氯乙酸:称取10g三氯乙酸加蒸馏水溶解后定容至100ml;0.6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液:称取0.6g硫代巴比妥酸加蒸馏水溶解后定容至100ml;石英砂。
三、实验步骤1. 丙二醛的提取称取不同处理的植物叶片(尽量剪碎)0.2g,加入少量石英砂和10%三氯乙酸2ml,研磨至匀浆,再加3ml10%三氯乙酸进一步研磨,匀浆再经5ml三氯乙酸移入10ml离心管,以4000r/min离心10min,其上清液为丙二醛提取液(10ml)。