下载文档原格式
Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程Ⅰ目的：制定Agilent 1290超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。
Ⅱ范围：适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。
Ⅲ规程： 1 开机 1.1 打开计算机，进入 Windows画面。
1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。
1.3 待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与12001290INFINITY HPLC 通讯。
1.4 从“View”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的“样品视图“系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
1.5 点击泵下面的瓶图标，选择‘瓶填充‘如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积。
点击“Ok”。
1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”，然后点击“改变…” 钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。
(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口2”) 2 排气2.1 首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的） 2.2 点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，出现如下图 2.3 勾上吹扫，并且输入流速，时间，比例就可以 purge 泵头。
排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。
2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备---开。
然后点击确定。
此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续20 次自动停止。
3 编辑数据采集方法 3.1 开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定” ，进入下一画面。
3.2 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。
点击“确定” ，进入下一画面。
3.3 进样方式选择根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式。
安捷伦液相1260高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料（最佳是外文文献）理解别人做该样品时惯用流动相和固定相。
如果还不清晰样品是什么物质，最起码也应当对其极性进行理解，为选取适当流动相和固定相打好基本。
流动相选取注意事项：①避免使用高粘度溶剂作为流动相；②所选用流动相一定要与样品相溶；③各流动相之间可以较好相溶；固定相选取注意事项：a.正相色谱正相色谱用固定相普通为硅胶（Silica）以及其她具备极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）键合相填料。
由于硅胶表面硅羟基（SiOH）或其她极性基团极性较强，因而，分离顺序是根据样品中各组分极性大小，即极性较弱组份最先被冲洗出众谱柱。
正相色谱使用流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
b.反向色谱反向色谱用填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团键合相。
反向色谱所使用流动相极性较强，普通为水、缓冲液与甲醇、乙腈等混合物。
样品流出众谱柱顺序是极性较强组分最先被冲洗出，而极性弱组分会在色谱柱上有更强保存。
惯用反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
2.准备工作①用于液相色谱分析样品溶液使用前要通过0.15µm过滤器过滤，必要达到均匀而无颗粒状态；②流动相一定要选用色谱级别（最佳是默克、飞世尔、时联等牌子），并且在使用之前一定要使用0.4µm过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气解决20-30min；③在连接柱子和色谱仪之前，阀件或管路一定要清洗干净，（普通用异丙醇将管路清洗）3.仪器操作（一）将所选取流动相加入相应试剂瓶中：棕色瓶相应A泵，该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水；B、C、D泵依照需要添加。
注：若流动相中有水、乙腈最佳现用现解决，不适当放置太长时间。
（二）先打开计算机登陆windows操作系统，再将仪器泵、色谱柱、检测器打开，待计算机界面显示连接好后，双击桌面“联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选取“办法和运营控制”画面。
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪（Agilent HPLC）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
其操作流程和注意事项如下：
操作流程：
1. 准备样品溶液：根据分析目的选择适当的溶剂，将样品溶解或稀释至所需浓度。
2. 准备色谱柱：根据分析需求选择合适的色谱柱，并按照柱床规定的要求进行预处理，如洗涤、调pH等。
3. 连接系统：将色谱柱安装在仪器上，连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件，确保连接紧密无漏。
4. 设置方法参数：根据分析需求，设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。
5. 系统平衡：启动泵和检测器，运行空白试验，确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。
6. 样品进样：将样品进样器插入样品瓶中，抽取足够的样品并注入进样器，按下进样按钮进行进样。
7. 进行分离：启动泵，使流动相通过柱床，样品分离过程中不断采集检测器的信号。
8. 数据处理：分析和处理检测器输出的信号，得出对应的峰面积、峰高度等结果，进行数据分析和解释。
注意事项：
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器，遵循操作规程，避免误操作和事故发生。
- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好，防止泄漏和污染。
- 选择适当的溶剂和流动相，避免与柱材和样品相互作用，影响分析结果。
- 定期检查和维护仪器，如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等，确保仪器正常运行。
- 样品处理过程中，注意避免光线、温度和湿度的影响，尽量保持稳定的分析环境。
- 使用仪器前，需提前熟悉相关方法和仪器操作，做好实验前的准备工作。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。
为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器，以下是一些规范操作的步骤和注意事项。
1.仪器准备-开启仪器电源，并等待仪器自检完成。
-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。
-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净，并按需更换柱筒。
2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品，并确保其纯度和浓度符合实验要求。
-制备规范的稀释液或内标溶液，以便进行质量控制和校准。
3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。
-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。
-根据实验要求选择合适的检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）。
4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱，并将柱安装在柱底座上。
-将导线连接到柱温控制系统，并设置柱温。
-选择适当的流动相溶剂，用它们预平衡柱，以确保柱达到稳定状态。
5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。
-定期进行质控分析，以检验仪器的准确性和精确性。
-根据需要，进行合适的质量控制和校正操作。
6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式（如自动进样器、手动进样器等）。
-通过进样器吸取样品，并确保进样量准确无误。
-进行一定的进样准备，如过滤、稀释等。
7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置，样品进样准备完毕，并进行柱的平衡。
-点击“开始”按钮，启动分析程序。
-监测分离曲线或结果，确保分析结果的准确性与可靠性。
8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。
-对结果进行后处理和数据分析，如绘制色谱图、峰面积计算等。
-存储数据，以备后续分析和查阅。
9.仪器维护与清洁-使用完毕后，关闭仪器并断开电源。
-清洗注射器和柱等关键部位，以防止残留的样品引起交叉污染。
安捷伦高效液相操作方法
安捷伦高效液相操作方法（Agilent High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种用于分离、定量和分析化合物的常见技术。
下面是一般的HPLC操作方法：
1. 样品准备：将待测试的样品准备成溶液状。
可以用溶剂、酸或碱来溶解固体样品，并用适当的容器过滤以去除杂质。
2. 选择合适的柱：根据待测样品的性质和分离要求选择合适的色谱柱。
常见的柱包括反相柱、阳离子交换柱、阴离子交换柱等。
3. 设置流动相：准备好适合待测试样品的流动相。
流动相一般由溶剂和缓冲液组成，根据需要可以调整溶剂比例和缓冲液pH值。
4. 建立方法：设置进样样品量、流速、柱温等参数。
根据待测样品的特性，选择合适的检测波长进行检测。
5. 运行实验：将样品注入进样器，并设置流动相的流速。
开始运行实验，记录数据。
6. 数据分析：根据实验结果进行数据分析和解释。
可以通过峰高、峰面积、保留时间等指标对样品进行定量分析。
7. 清洗和维护：在实验结束后，定期清洗HPLC系统的各个部件，以保持仪器的良好运行状态。
可以用纯水、有机溶剂等进行清洗。
以上是一般的HPLC操作方法，具体的操作步骤和条件可能因不同的仪器和样品而有所不同。
在进行HPLC实验时，应根据实际情况进行调整和优化，确保准确的分离和分析结果。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作1. 目的：明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作，确保数据的准确性。
2. 范围：适用于安捷伦高效液相色谱仪。
3. 职责：检验人员对此负责。
4.操作规程：4.1 系统组成本系统由1个溶剂二元输送泵（分主/A泵和副/B泵）、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。
4.2 准备4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常4.1 将待测样品按要求前处理，准备HPLC 所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。
4.3开机：4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。
4.3.3 待各模块自检完成后，双击[Instrument 1 Online]图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏]，[ 显示状态工具栏]，[系统视图],[样品视图]，使其命令前有[√]标志，来调用所需的界面。
4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。
4.3.6 打开冲洗阀。
4.3.7 点击[泵]图标，点击[设置泵…]选项，进入泵编辑画面。
4.3.8 设流速：5ml/min，点击[确定]。
4.3.9 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[启动]，点击[确定] ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
4.3.10 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[关闭]，点击[确定]关泵，关闭冲洗阀。
Agilent高效液相色谱仪标准操作程序1.目的：建立一个高效液相色谱的标准操作程序。
2.范围：适用于Agilent高效液相的使用。
3.责任：使用Agilent高效液相的化验员。
4.程序4.1工作环境实验室温度为20～27℃，温度变化<3℃/hr，相对湿度<80%，液相色谱仪工作台，长2米、宽0.8米、承重大于80公斤，离墙距离0.3米以上。
单相交流220V，（+5%～10%），50～60Hz，有单独的良好接地。
配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。
4.2使用前的准备4.2.1二次蒸馏水，（建议用0.45微米水相滤膜过滤）；甲醇或乙晴（色谱纯），（建议用0.45微米有机相滤膜过滤）；其他样品所需流动相，（都需经过0.45微米滤膜过滤）。
将上述溶剂放入超声波池，除去气泡，方可使用。
4.2.2把流动相放入溶剂瓶中，打开purge阀，单击pump图标，出现参数设定菜单，单击setup选项，进入pump编辑画面，设flow：5ml/min，单击OK；单击pump图标，出现参数设定菜单，单击pump control选项，选中ON，单击OK，则系统开始purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续purge，直到所有要用通道无气泡为止；单击pump图标，出现参数设定菜单，单击setup选项，进入pump编辑画面，设flow：1.0ml/min，关闭purge valve。
单击pump下的的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入阻止分析和关泵的体积，单击OK。
4.2.3进行样品前处理（稀释或溶解至所需浓度）。
4.3实验步骤4.3.1准备4.3.1.1开启Agilent 1100LC各模块电源。
4.3.1.2打开计算机，双击online图标。
4.3.1.3从"view"菜单中选择"method and run control"画面，单击"view"菜单中的"show top toolbar","show status toolbar","system diagram","sampling diagram"使其命令前有"√"标志。
安捷伦液相操作规程安捷伦液相操作规程液相操作是化学实验室中常见的一种实验操作，适用于溶液的制备、分离和纯化等实验需求。
为了确保操作的安全性和实验结果的准确性，制定液相操作规程十分重要。
以下是针对安捷伦液相操作的规程，以保证实验操作的标准化和规范化。
1. 实验前准备：1.1. 准备所需试剂和试验仪器，确保实验所需材料的完整性和干净度。
1.2. 检查实验室仪器及设备的运行状态，确保其正常工作。
1.3. 根据实验需求，准备所需的溶剂和溶液，确保其质量和浓度的准确度。
2. 个人防护：2.1. 戴上实验室必备的个人防护装备，如实验手套、实验眼镜等。
2.2. 当液相操作涉及有毒或腐蚀性试剂时，应穿戴全身防护服，并配备呼吸器具。
3. 操作条件：3.1. 确保实验操作区域的整洁和干净，防止交叉污染。
3.2. 控制实验室的温度、湿度和通风等环境条件，以满足实验操作的要求。
4. 操作步骤：4.1. 按照实验步骤依次进行液相操作。
4.2. 操作前进行必要的实验器材和试剂的标定和校准，确保实验参数的准确性。
4.3. 使用专用的操作工具和仪器，避免手工直接接触试剂。
4.4. 操作过程中遵循安捷伦仪器的使用说明书，合理设置操作参数，确保实验结果的准确性。
4.5. 在液相操作过程中，注意保持实验器材和试剂的干净和无污染，防止交叉污染的发生。
5. 废物处理：5.1. 涉及有毒或腐蚀性试剂的实验废物应妥善处理，按照相关规定进行分类和处置。
5.2. 已使用的实验器材和试剂应及时清洗和归还到指定位置。
6. 实验记录：6.1. 在液相操作过程中，准确记录实验操作的必要参数和结果。
6.2. 对于实验中的异常情况或问题，及时记录并进行分析。
6.3. 实验结束后整理实验记录，确保其完整性和准确性。
7. 维护与校准：7.1. 定期对实验所需仪器和设备进行维护和校准，保证其正常运行。
7.2. 对实验操作过程中的操作工具和试剂进行定期检查和替换，确保其正常使用。
Agilent 1290 Infinity 蒸发光散射检测器(ELSD)适用于低分子量化合物前言由于不依赖化合物的光学特性，蒸发光散射检测器(ELSD) 非常适合检测没有UV 发色团的分析物。
Agilent 1290 Infinity ELSD 是一款高性能的ELSD ，得益于安捷伦近20 年的ELSD 设计制造经验。
1290 Infinity ELSD 是唯一能够进行低温操作的ELSD ，为热不稳定分析物提供了无可比拟的检测性能。
1290 Infinity ELSD 设计用于分析所有的化合物，蒸发温度可低至10 °C ，能够为30 °C 以下具有显著挥发性的化合物提供最高灵敏度。
进样过程中气流和温度的程序控制消除了溶剂的梯度效应，最大程度提高了响应，可获得更准确的检测结果。
要实现对进样物质中所有成分的高灵敏度检测，1290 Infinity ELSD 是适用于所有应用类型的理想ELSD 。
主要优势•高灵敏度可为低至纳克级的所有化合物提供优异的响应•采用帕尔帖冷却的蒸发管可提供低至10°C 的低温操作，可防止热不稳定化合物（其它ELSD 无法检测）发生降解•进样时通过可编程的Dimension 软件进行实时控制，确保在整个分析过程中保持最高灵敏度•采用Dimension 软件进行实时气体编程，消除了梯度洗脱过程中的溶剂增强效应，可获得出色的定量结果•低扩散性能与高数据输出速率，是快速LC 应用的理想选择•低于2% RSD 的极佳重现性将为您提供可靠而精确的实验结果产品说明实时气体管理，可消除溶剂效应，在梯度过程中保持一致的响应。
标准仪器控制和数据采集兼容多种供应商的软件平台，因此不需要模数转换器。
光源强度的即时调节可有效节约分析时间。
所有这些特性均整合在这一市面上最小巧的ELSD中。
1290 Infinity ELSD 是LC/MS 技术强有力的补充，并且拥有无与伦比的灵活性和灵敏度，是复杂应用的理想ELSD。
Angilent1290高效夜相色谱仪操作规程一：操作步骤1. 开机1.1 打开计算机，进入Windows XP画面。
1.2 打开Angilent1290高效夜相色谱仪各模块电源。
1.3 待各模块自检完成后，双击“仪器 1 联机”图标，进入工作站画面。
1.4 右键点击“泵”图标，点击“方法”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min，点击“确定”。
1.5 点击“泵”图标，点击“控制”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
1.6 点击“泵”图标，点击“控制”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
2. 数据采集方法编辑：2.1 开始编辑完整方法：2.1.2 方法信息：2.1.3 泵参数设定：2.1.4 自动进样器参数设定：2.1.5 柱温箱参数设定:2.1.6 VWD检测器参数设定:2.1.7 点击“方法”菜单，选中“方法另存为”，输入方法名，点击“确定”。
2.2 序列和数据采集2.2.1 在“序列”选项中选择“序列参数”，输入采集后数据的保存路径，点击确定。
3. 数据分析方法编辑:3.1 点击“仪器 1 脱机”图标进入数据分析界面。
3.2点击“调用数据文件的信号和光谱”图标，选出需要积分的文件。
3.3 积分：4. 打印报告:5. 关机:关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。
退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。
关闭Angilent1290高效夜相色谱仪各模块电源开关。
二、注意事项1. 溶剂过滤头每3天应清洗一次，清洗方法：金属溶剂过滤头：将溶剂过滤头放入装有超纯水的烧杯中，置入超声波中超声清洗5分钟；再用装有无水甲醇（AR）的烧杯中，置入超声波中超声清洗5分钟。
玻璃溶剂过滤头：将溶剂过滤头放入装有硝酸溶液（10mL水 + 30mL硝酸AR）中，浸泡2～3h，再用超纯水清洗干净。
检验人员能按规程正确使用仪器，确保仪器的准确性、精密度。
防止仪器损坏，延长使用寿命，保证仪器正常运行。
范围：适用于安捷伦1290 Infinity型高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
责任：质量管理部。
程序：1.开机1.1 打开计算机，进入 Windows XP 画面。
1.2 打开Agilent 1290 Infinity HPLC 各模块电源。
1.3 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与 Agilent 1290 Infinity HPLC 通讯。
1.4 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”、“系统视图”、“命令行”，使其命令前有“√”标志来调用所需的界面。
1.5 右键点击泵下面的瓶图标，选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积。
点击“确定”。
1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”，然后点击“改变…”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。
(如同时检测二个信号，则重复，选中“信号窗口2”。
)2.排气2.1 首先在泵模块单击右键，在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的）。
2.2 右键点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制。
2.3 勾上清洗，并且输入流量、时间、比例，开启“泵”、“清洗”功能，点击“确定”，就可以排空管道。
排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。
2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择开启“注入”，然后点击确定。
此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续 20 次自动停止。
3.编辑数据采集方法3.1 开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项，在方法编辑选项仅选择“仪器/采集”，点击“确定”，进图下一画面。
3.2 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!），点击“确定”，进入下一画面。
3.3 进样方式选择根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式，本机默认为“HipAls”。
Agilent 1200(四元泵)高效液相色谱仪的标准操作规程（美国安捷伦公司）一、准备工作1．更换纯净水，冲洗色谱柱的纯净水需每天更换，以免长菌。
各溶剂瓶需明确标明瓶内所装液体。
2．打开液相色谱仪柱温箱，按照色谱柱上标示的方向，连接试验所需色谱柱，连接色谱柱时切勿装反。
3．依次打开色谱仪各模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC联机”图标，化学工作站自动与1200 LC通讯，进入工作站。
4．将要使用的各通道上的滤头放入已经0.45um滤膜过滤、脱气（约10分钟）的水相或流动相中，点击“Methood and Run Control”界面中的“启动”图标，操作界面被激活，由灰色变为绿色；同时调出检测样品所需的方法。
5．打开Purge阀，点击泵图标，在Setup pump选项中设置流速和比例来排气泡。
若使用A、B两通道，则应分别以5ml/min的流速、100%的比例各排液5min。
（脱气机的内腔体积一般为12ml，故排液时间要长，以便能保证各通道管路中充满检测样品所需的水相和有机相）purge结束后，将泵的流速调为0，旋紧purge阀（切勿在5ml/min流速时旋紧purge阀）。
将流速设为1ml/min，以10%的甲醇水（或乙腈水），冲洗色谱柱30min。
6．点击泵的图标，改变所需通道（已purge完）的比例，已达到检测样品所需的流动相条件，平衡色谱柱。
同时按各溶剂瓶中液体的真实体积，设定溶剂瓶体积。
二、数据采集1．点击左上角样品瓶图标，选择样品信息，更改文件保存路径、样品名称、样品位置等信息按要求填写，确认无误后点击确定。
2．点击自动进样器图标，选择设置进样器，设定进样体积。
选择进样方式，一般选择洗针进样方式，洗针瓶位置一般设为样品托盘的第91位，洗针液体一般为50%的甲醇水溶液。
3．点击检测器图标，更改自己所需的检测波长，参比波长（如无需参比波长请关闭），打开紫外灯。
如为DAD检测器时，光谱信息储存请选择全部，以便为图谱处理时提供所需依据。
WATERS高效液相的标准操作规程（SOP）1流动相的处理1.1过滤溶剂溶剂在使用前要用过滤器过滤，有机相和纯水相通常可以不过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。
同时一些缓冲盐溶液过夜后易生菌，使用前要抽滤或者重新配制。
实验室应有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择（反光面朝上），过滤水相时，要先用1-2ml 水润湿过滤膜，有助于快速抽滤。
1.2保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
流动相瓶子要保持清洁。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：a、流动相再脱气；b、采用更有效的脱气方法（如抽滤）或两种方法配合使用；c、改系统内混合为系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装滤头沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞会引起管道和泵腔进气泡，压力不稳。
压力不稳时，如果已经排除流动相混合不均匀的状况，则观察滤头外部是否长毛（一般水相滤头易长毛），去掉过滤器后如果系统运转正常，说明已找出问题，是过滤器被微粒所阻塞或长霉。
解决方法：a、换上新的过滤器（滤头）。
b、将滤头拆下，先用纯水超声15min，再换50%甲醇水溶液超声，再换纯甲醇超声，如果是水相的滤头，在安装前还需要用纯水超声。
如果上述还不能解决问题，则使用10%稀硝酸水溶液超声滤头，可起到除去菌类微生物的作用。
1.4.3 检测器和流动相管路被污染由于污染，噪音越来越大，检测器被污染。
安捷伦液相色谱仪的标准操作程序液相色谱操作规程Agilent液相色谱仪标准操作程序1.目的：建立一个液相色谱的标准操作程序。
2.范围：适用于Agilent液相的使用。
3.责任：使用Agilent液相的化验员。
4.程序4.1工作环境试验室温度为20～27℃，温度变化3℃/hr，相对湿度80%，液相色谱仪工作台，长2米、宽0.8米、承重点于80公斤，离墙距离0.3米以上。
单相交流220V，（+5%～10%），50～60Hz，有单独的良好接地。
配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。
液相色谱仪对四周的环境的要求液相色谱仪和大多数分析仪器一样，对仪器四周的环境有确定的要求，但没有太特别的的要求，充分一般分析仪器室的基本条件，就能保证仪器的稳定运行和安全操作。
（1）照明：室内照明要光线适中，避开阳光直射。
为避开直射光线对仪器操作、观测的影响，仪器（显示屏）应侧向光线。
试验室窗户要挂窗帘，以便随时调整光照强度。
（2）通风：使用液相色谱仪分析过程中，由于流动相中含有挥发性有机溶剂（甲醇、乙睛等）会产生有害气体，对仪器中的光学元件带来腐蚀，应注意仪器室的通风，以排出室内有害气体、保持空气清爽。
通风紧要有两种方式:一种自然通风，定时打开门窗，让内外空气对流；另一种是强制通风，如用通风柜、排风扇等，适时将有害气体排出室外。
（3）环境温度和湿度：适合的温度和湿度是保障HPLC仪正常运行、性能稳定的必要条件。
HPLC仪一般要求室温在20一30℃之间，日温度变化2一3℃，不要波动太大，否则，在开机分析时会影响色谱分别；夏季确定要掌控室温不要超过30℃，温度太高会使流路系统产生气泡，影响检测器的正常工作（如荧光检测器）。
室内相对湿度应掌控在60%以下。
（4）供电：液相色谱室应设有照明电源和动力电源，动力电可供仪器运行使用。
为削减噪音的干扰，仪器应阔别瞬时供电的大功率电器设备，如:大型电动设备（超低温冰箱、电烤箱等）、电梯、空调系统等。
安捷伦液相色谱仪操作及原理一、概述安捷伦液相色谱仪是一种高效、快速、准确的分离分析仪器，广泛应用于化学、生物、制药等领域。
本文将详细介绍安捷伦液相色谱仪的基本操作及原理，帮助用户更好地理解和使用该仪器。
二、安捷伦液相色谱仪操作1. 样品准备在进行液相色谱分析前，需要准备好待测样品。
样品应尽可能纯净，以避免杂质对分析结果的干扰。
根据不同的分析需求，可使用不同的样品处理方法，如萃取、沉淀、离心等。
2. 柱子安装柱子是液相色谱分析的核心部件，需要根据不同的分离需求选择合适的柱子。
安装柱子时，需确保柱子与仪器连接处紧密，无气泡产生。
柱子安装好后，需进行平衡操作，以确保分析结果的准确性。
3. 流动相配置液相色谱分析中，流动相是携带样品通过柱子的介质。
根据不同的分离需求，需选择合适的流动相。
配置流动相时，需注意比例、pH值等参数，以保证分析结果的准确性。
4. 样品进样将处理好的样品注入液相色谱仪中进行分析。
进样时，需注意进样量、进样速度等参数，以保证分析结果的准确性。
5. 检测器设置检测器是液相色谱仪的重要组成部分，用于检测样品中的组分。
根据不同的分析需求，需选择合适的检测器。
设置检测器时，需注意检测波长、灵敏度等参数，以保证分析结果的准确性。
6. 数据处理与分析液相色谱仪在完成样品分析后，会产生一系列数据。
这些数据需要通过相应的软件进行处理和分析，以得出最终的分析结果。
常用的数据处理软件有Agilent ChemStation等。
数据处理过程中，需注意数据清洗、峰识别、定量分析等步骤，以保证分析结果的准确性。
三、安捷伦液相色谱仪原理1. 色谱分离原理色谱分离是一种基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡差异的分离方法。
在液相色谱中，固定相是涂布在担体表面的高分子化合物，如硅胶、氧化铝、凝胶等。
流动相是携带样品通过柱子的介质，如有机溶剂、水和缓冲溶液等。
当流动相带着样品通过固定相时，由于不同组分在固定相和流动相之间的分配平衡不同，因此会以不同的速度通过柱子，从而实现各组分的分离。
Agilent-1290-超高效液相色谱仪标准操作规程Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程一、目的制定Agilent 1290超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。
二、范围适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。
三、操作规程1 开机1.1 打开计算机，进入 Windows画面。
1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。
1.3 待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与12001290INFINITY HPLC 通讯。
1.4 从“View”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的“样品视图“系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
1.5 点击泵下面的瓶图标，选择‘瓶填充‘如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积。
点击“Ok”。
1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”，然后点击“改变…”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。
(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口2”)2 排气2.1 首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的）2.2 点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，出现如下图2.3 勾上吹扫，并且输入流速，时间，比例就可以purge 泵头。
排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。
2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备---开。
然后点击确定。
此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续 20 次自动停止。
3 编辑数据采集方法3.1 开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。
3.2 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。
点击“确定”，进入下一画面。
Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程
一、目的
制定Agilent 1290超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。
二、范围
适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。
三、操作规程
1 开机
1.1 打开计算机，进入 Windows画面。
1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。
1.3 待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与
12001290INFINITY HPLC 通讯。
1.4 从“View”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的“样品视图
“系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
1.5 点击泵下面的瓶图标，选择‘瓶填充‘如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也
可输入停泵的体积。
点击“Ok”。
1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口 1”，然后点击“改变…”钮，
将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。
(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口 2”)
2 排气
2.1 首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的）
2.2 点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，出现如下图
2.3 勾上吹扫，并且输入流速，时间，比例就可以 purge 泵头。
排空的时候阀会自动切换，
无需人为介入。
2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备---开。
然后点击确定。
此时泵会
用很强烈的方式朝外泵液体，并持续 20 次自动停止。
3 编辑数据采集方法
3.1 开始编辑完整方法：
从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外
的三项，点击“确定”，进入下一画面。
3.2 方法信息：
在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。
点击“确定”，进入下一画面。
3.3 进样方式选择
根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式。
3.4 泵参数设定：
在“流速”处输入流量，如 1.5ml/min，停止时间：10 min。
在“溶剂B”处输入 70.0，(A=100-B) ，也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
3.5 自动进样器参数设定:
选择合适的进样方式，如图所示，进样体积 1.0ul ，标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。
“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在针座旁边中洗针。
3.6 柱温箱参数设定:
在“温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：40度。
并选中它，点击“更多信息>>”键，如图所示，选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。
3.7 DAD检测器参数设定:
检测波长: 254nm，带宽=4nm，参比波长=360nm，带宽=100nm;
检测波长：一般选择最大吸收处的波长。
样品带宽：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。
参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。
参比带宽：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。
峰宽（响应时间）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。
狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。
同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。
选中所用的灯。
可以开启光学单元温度控制;可以设定8通道信号等。
3.8 FLD 检测器参数设定:
色谱条件：
响应时间=4s. 停止时间： 4min。
激发波长:200-700nm，步长为 1nm，或零级。
发射波长: 280-900nm，步长为 1nm，或零级。
PMT:多数应用适当的设定值为 10，若高浓度样品峰被切平头，则减少 PMT 值。
“峰宽”：大多数应用设为 4s，只有快速分析采用小的设定值。
多波长及光谱（激发）。
多波长及光谱（发射）。
同时可以输入范围、步长、采集光谱。
点击“确定”进入下一画面。
3.9 运行时选项表
在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击“确定”。
3.10 保存方法
从“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。
4 单次样品运行
从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，如下图所示，输入操作者名称，如“安装工程师”；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。
点击“确定”，从“系统视图菜单启动系统。
等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”，进样。
(若无自动样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。
)
5 面积百分比数据处理
5.1 选择界面
从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。
5.2 调用信号
从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名，如下图所示。
点击“确定”，则数据被调出。
5.3 做谱图优化：
从“图形”菜单中选择“信号选项”，如下图所示。
从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。
反复进行，直到图的比例合适为止。
点击“确定”。
5.4 积分优化:
从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，如下图所示。
选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“最小峰面积”，“最小峰高”。
从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。
如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
点击左边“√”图标，将积分参数存入方法。
5.5 打印报告:
从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，进入如下图所示画面。
点击“定量结果”框中“计算”右侧的黑三角，选中“面积百分比”，其它选项不变。
点击“确定”。
从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”底部的“打印”钮。
6 关机
关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。
退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机（用 shut down 关）。
关闭 Agilent 1290 各模块电源开关。
7 定量数据处理
7.1 点击“方法”菜单，选择“调用方法L..”，在方法目录中选择要进行定量设定的方法，
该方法是经过积分和谱图优化过的方法。
点击“确定”，则选择的方法被调出。
7.2 从“文件”菜单中选择“调用信号…”选项，选中标样的数据文件名，点击“确定”，
则数据被调出。
检查确认积分和谱图优化的参数是否合适。
7.3 从“校正”菜单中选择，“新建校正表”按钮，进入以下画面，确认选项在“自动设
定”；级别为“1”，点击“确定”。
若要信号单独计算，则选择前面的空白框。
7.4 在覆盖现有校准表中对话框中，选择“是（Y）”。
若方法中没有旧的校准表，无此项。
7.5 则所有积过分的峰，其保留时间、峰面积按序显示在校准表中。
如图所示，依次输入
化合物的名称、含量，校准曲线显示在右下方。
可以设定参考峰等。
若用内标方法定量，还须选择内标，点击“内标“下的区域，选择那个峰作为内标峰，指定每个色谱峰以那个内标为参比。
点击“确定”。
7.6 在删除含量为零的行对话框中选择“是（Y）”。
则校准表中未输入含量的峰从表中删除。
7.7 点击“校准”菜单，选择“校准设置”按钮，进入以下画面，输入单位：如“%”；其
它项不变。
点击“确定”。
7.8 打印报告:
从“报告”菜单中选择“指定报告…”选项。
点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变。
点击“确定”。
----若是用内标法定量，则选“内标法”。
从“报告”菜单中选择“打印报告“，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告“底部的“打印”钮。
---可以选择打印到文件中，如PDF格式。
7.9 若有多个浓度标样，则依次调出校准数据，调出每一个校准数据后，点击“校准”菜
单，选择“添加级别“，第2级数入”2“，类推。
在校准表中输入每级的组份浓度。
7.10 在方法菜单中，选择“运行时选项表”，确认“数据分析选项”也被选中，点击“确
定”。
点击“保存”按钮，存储修改的方法。
此方法包含校准表，建立完毕。
四、参考依据： Agilent1290超高效液相色谱仪使用操作说明书。
