与神经系统疾病相关的miRNA研究进展

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ｍｉＲＮＡ和ＭＡＰＫｓ信号传导通路与神经管缺陷关系的研究进展

张泽鹏１，刘菊芬２’３＋（１北京大学公共卫生学院预防医学系，北京１００１９１；２北京大学生育健康研究所，卫生部生育健康

重点实验室；３北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系；‘通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｊｕｆｅｎ＠ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ）

关键词：微小ＲＮＡ；丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路；神经管缺陷；细胞凋亡

中图分类号：Ｒ３６３文献标志码：Ａ文章编号：１００７－６６１１（２０１４）０８—０７７６—０５ＤＯＩ：１０．１３７５３／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７—６６１１．２０１４－０８．０３０

我国是人口大国，也是出生缺陷高发国家。根

据世界卫生组织估计，我国出生缺陷发生率约为

５．６％，与世界中等收入国家的平均水平接近ｏｌＪ；我

国每年新增出生缺陷数约９０万例，其中致残致死性

较高的神经管缺陷（ｎｅｕｒａｌｔｕｂｅｄｅｆｅｃｔｓ，ＮＴＤｓ）约１．８万例，每年因ＮＴＤｓ造成的直接经济损失超过２亿

元Ｈ］。ＮＴＤｓ发病机制至今尚不完全清楚，国内外

大量人群流行病学研究发现约有５０％一７０％的

ＮＴＤｓ可以通过妇女围孕期增补叶酸来预防口。５１。

２００９—２０１１年，我国卫生部利用中央财政专项补助

经费实施了增补叶酸预防神经管缺陷项目，对孕前

和孕早期农村妇女免费增补叶酸，尽管围产儿神经

管缺陷发生率持续降低，从１９９６年的１３．６／万下降

到２０１１年的４．５／万，但仍旧是我国围产儿前１０位

高发畸形之一－１ｊ。由于全国性出生缺陷监测系统

的监测对象是２８周以上的妊娠，因此目前所得到的ＮＴＤｓ出生患病率比总患病率低６０％左右∞ｏ。最近的研究发现，叶酸缺乏和ＤＮＡ甲基化异常能够导致

微小ＲＮＡ（ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ，ｍｉＲＮＡｓ）的错误表达，在神

经管发育期关键ｍｉＲＮＡｓ的错误表达会引起基因调

控发生变化，导致不同严重程度的ＮＴＤｓ发生一ｏ。

miRNA在生物医学上的应用非常广泛，主要体现在以下几个方面：

1. 疾病诊断和预后：通过检测和分析特定miRNA的表达水平，可以用于疾病诊断和预后判断。例如，一些特定的miRNA表达水平与癌症、心血管疾病、神经系统疾病等的发生和发展密切相关，因此可以作为生物标志物用于疾病的早期诊断和预后评估。

2. 药物研发：miRNA可以作为药物靶点，通过调节miRNA的表达水平来治疗疾病。例如，一些药物可以抑制特定miRNA的表达，从而调节细胞的生长、分化、代谢和发育等重要过程，达到治疗疾病的目的。

3. 基因治疗：miRNA可以作为基因治疗的工具，通过调节特定基因的表达来治疗疾病。例如，一些基因治疗策略是通过调节特定miRNA的表达来调节特定基因的表达，从而达到治疗疾病的目的。

4. 生物标志物研究：miRNA可以作为生物标志物用于研究疾病的发病机制和治疗方法。例如，一些研究通过比较健康人和患者之间的miRNA表达水平，可以发现与疾病发生和发展相关的miRNA，从而为疾病的诊断和治疗提供新的思路和方法。

总之，miRNA在生物医学上的应用非常广泛，为疾病的诊断、治疗和预防提供了新的思路和方法。

miRNA文献综述

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【精品文档】 miRNA研究综述

摘要：miRNA是近年来在真核生物和病毒中发现的一类内源性染色体上的非编码单链RNA。miRNA调节细胞生长，组织分化，最近的研究表明miRNA参与各种各样的调节途径，包括发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。本文主要从miRNA的生物学特征、生成、功能、miRNA与癌症、miRNA与免疫、miRNA鉴定、miRNA靶基因鉴定等方面作一概述。

关键词：miRNA、癌症、免疫、功能、靶基因

miRNA简介：

MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链 RNA前体经过Dicer酶加工后生成，它们在动植物中参与转录后基因表达调控。miRNA能够通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对,引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。miRNA的组织特异性和时序性，决定组织和细胞的功能特异性，miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用。

到目前为止,在动植物以及病毒中已经发现有4361个miRNA分子。第一个被确认的miRNA是在线虫中首次发现的lin-4 和let-7，随后多个研究小组在包括人类、果蝇、植物等多种生物物种中鉴别出数百个miRNA。

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【精品文档】 miRNA生物学功能：

miRNA分子有以下几个明显特征：[1]广泛存在于真核生物中，是一组不编码蛋白质的短序列RNA，它不具有开放阅读框架( ORF) 。[2]miRNA的长度一般为20-24个nt，但在3’端可以有1-2个碱基的长度变化。[3]成熟miRNA的5’端有一磷酸基团， 3’端为羟基，这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA的降解片段区别开来。[4] miRNA基因在基因组上不是随机排列的，其中一些通常形成基因簇。来自同一个基因簇的miRNA具有较强的同源性，而不同基因簇的miRNA同源性较弱。[5]有些miRNA分子在一些物种中是高度保守的。约12%的

ｍｉｃｒｏＲＮＡ调控紧密连接功能的研究进展黄　燕１　吴立玲２　俞光岩１　向若兰２，△（１北京大学口腔医学院口腔颌面外科，北京１０００８１；２北京大学基础医学院生理学和病理生理学系，北京１００１９１）摘要　紧密连接（ｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎ，ＴＪ）是构成机体上皮和内皮屏障的重要结构，在维持细胞极性，调控物质扩散，防止毒素、过敏原以及病原体入侵中发挥重要作用。微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）长度约１９～２５个核苷酸，是能在转录后水平调控基因表达的内源性非编码ＲＮＡ。研究表明，ｍｉＲＮＡ可以调节编码ＴＪ蛋白基因的稳定性和翻译过程，调控ＴＪ功能，影响肠道、呼吸道、脑和视网膜等众多组织器官的屏障功能，从而参与全身多种疾病的发生发展过程。本文就ｍｉＲＮＡ对ＴＪ的调节作用以及与相关疾病发生发展的关系进行综述，为防治与ＴＪ改变相关的疾病提供新的思路。关键词　微小ＲＮＡ；紧密连接；上皮屏障；内皮屏障中图分类号　Ｒ３６３ＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎｔｈｅＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡｏｎＴｉｇｈｔＪｕｎｃｔｉｏｎ　ＨＵＡＮＧＹａｎ１，ＷＵＬｉＬｉｎｇ２，ＹＵＧｕａｎｇＹａｎ１，ＸＩＡＮＧＲｕｏＬａｎ２，△（１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒａｌａｎｄＭａｘｉｌｌｏｆａｃｉａｌＳｕｒｇｅｒｙ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌａｎｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ；２ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｓ（ＴＪｓ）ａｒｅｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｂａｓｉｓｏｆｅｐｉｔｈｅｌｉａｌａｎｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｂａｒｒｉｅｒｓ．Ｔｈｅｙｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇｃｅｌｌｐｏｌａｒｉｔｙ，ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｄｉｆｆｕｓｉｏｎｏｆｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ，ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｔｏｘｉｎｓ，ａｌｌｅｒｇｅｎｓ，ａｎｄｐａｔｈｏｇｅｎｓｆｒｏｍｉｎｖａｄｉｎｇ．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ（ｍｉＲＮＡｓ）ａｒｅｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｎｏｎｃｏｄｉｎｇＲＮＡｓｔｈａｔａｒｅａｂｏｕｔ１９２５ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｉｎｌｅｎｇｔｈａｎｄｃａｎｒｅｇｕｌａｔｅｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｔｔｈｅｐｏｓｔｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｌｅｖｅｌ．ＳｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｍｉＲＮＡｓｃａｎｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆＴＪｐｒｏｔｅｉｎｃｏｄｉｎｇｇｅｎｅｓ，ｒｅｇｕｌａｔｅＴＪｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｆｆｅｃｔｔｈｅｅｐｉｔｈｅｌｉａｌａｎｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｂａｒｒｉｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｏｒｇａｎｓｓｕｃｈａｓｇｕｔ，ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｔｒａｃｔ，ｂｒａｉｎａｎｄｒｅｔｉｎａａｎｄｔｈｕｓｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｄｉｓｅａｓｅｓ．ＴｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｍｉＲＮＡｓｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＴＪ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓｎｅｗｉｎｓｉｇｈｔｉｎｔｏｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓｔｒａｔｅｇｙｏｆＴＪｉｍｐａｉｒｍｅｎｔｒｅｌａｔｅｄｄｉｓｅａｓｅｂｙｔａｒｇｅｔｉｎｇｍｉＲＮＡｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　ｍｉｃｒｏＲＮＡ；ｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎ；ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｂａｒｒｉｅｒ；ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｂａｒｒｉｅｒ 微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）是一类长度约为１９～２５个核苷酸的内源性单链非编码ＲＮＡ，广泛存在于真核生物及病毒中。１９９３年，Ｌｅｅ和Ｗｉｇｈｔｍａｎ等首次在线虫体内发现ｍｉＲＮＡｌｉｎ４，为一种可通过转录后水平下调蛋白Ｌｉｎ１４表达的非编码ＲＮＡ（Ｌｅｅ等．１９９３，Ｗｉｇｈｔｍａｎ等．１９９３）。直到２０００年，调控线虫发育的第二个ｍｉＲＮＡｌｅｔ７以及靶基因Ｌｉｎ４１被发现（Ｓｌａｃｋ等．２０００）。随后，大量的ｍｉＲＮＡ被相继发现。迄今，已有累计超过２０００种人类ｍｉＲＮＡ被报道，调控人体约６０％的基因［１］。随着对ｍｉＲＮＡ研究的深入，发现其参与调控细胞的增殖、分化、衰老、凋亡以及自噬等多种生物学过程。因此，ｍｉＲＮＡ成为生命科学研究领域的热点问题。一、ＭｉｃｒｏＲＮＡ的生物学特性和功能与其他类型的ＲＮＡ相比，ｍｉＲＮＡ具有独特的生物学特性，表现为（１）ｍｉＲＮＡ不编码蛋白质，自身不具备开放阅读框架；（２）长度短，约１９～２５个核苷酸序列，且不同的ｍｉＲＮＡ长度相差小；（３）具有高度保守性，在各个物种间均存在同源体；（４）时序表达的差异性，在生命发育的不同阶段表达不同的国家自然科学基金（８１９７４１５１）；北京市自然科学基金（７２０２０７８）资助课题△通信作者　ｘｉａｎｇｒｌ＠ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎｍｉＲＮＡ；（５）组织表达的特异性，在不同组织中有特异类型的ｍｉＲＮＡ表达［１］。此外，同一种ｍｉＲＮＡ可参与上百种基因的表达调节，而一种基因可以同时受多种ｍｉＲＮＡ的调控。因此，ｍｉＲＮＡ独特的生物学特性决定了其功能的多样性和调控机制的复杂性。目前认为，ｍｉＲＮＡ参与调控的经典分子机制是在转录后水平通过其５＇端的种子序列与靶基因３＇非翻译区（３＇ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ，３＇ＵＴＲ）结合，抑制靶基因的翻译或者使ｍＲＮＡ降解，影响相关基因的表达，从而起到负向调控作用［２］。随着研究的不断深入，更多ｍｉＲＮＡ发挥作用的分子机制被发现，包括（１）一些ｍｉＲＮＡ的前体如ｐｒｉｍｉＲＮＡ可以进入到细胞质内被核糖体识别为ｍＲＮＡ，翻译为多肽行使生理功能；（２）与某些功能蛋白结合，抑制蛋白功能；（３）直接激活Ｔｏｌｌ样受体（Ｔｏｌｌｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴＬＲ）蛋白；（４）有些ｍｉＲＮＡ形成ＲＡＮ诱导的沉默复合物之后，结合了富含腺嘌呤／尿嘧啶元件的序列，促进靶标ｍＲＮＡ的翻译过程；（５）靶向调控线粒体相关基因，从而调节线粒体功能；（６）结合环氧合酶２启动子区序列，直接激活基因转录过程；（７）靶向负调控其他非编码ＲＮＡ的前体ＲＮＡ，从而调控非编码ＲＮＡ的表达［３］。二、紧密连接的特性紧密连接（ｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎ，ＴＪ）是细胞连接复合体的重要组成部分，位于细胞与细胞连接处最顶端，呈带状结构围绕上皮或内皮细胞。ＴＪ是一个大分子复合物，由多个跨膜蛋白和胞浆蛋白组成，广泛存在于全身多种组织器官的上皮和内皮细胞之间，是水、离子和小分子物质经由旁细胞途径转运的结构基础，对维持细胞极性及调控上皮和内皮的通透性至关重要（Ｚｈａｎｇ等．２０１３）。目前普遍认为ＴＪ既可以发挥栅栏功能，即将上皮或内皮细胞膜划分为顶膜和基底侧膜两部分；亦可发挥屏障功能，调控水、离子和小分子溶质的转运（Ｂａｋｅｒ等．２０１６）。此外，ＴＪ还可以通过调节多种不同的信号分子，影响上皮细胞的增殖和分化，从而发挥信息传导的功能［４］。因此ＴＪ的破坏与全身多种疾病的发生发展密切相关，常见的疾病如胃肠道疾病、脑血管病变、肾脏疾病、视网膜疾病、呼吸道疾病以及唾液腺疾病等。三、ＭｉｃｒｏＲＮＡ对紧密连接的调节作用近年来，大量的研究表明，ｍｉＲＮＡ作为生物功能的重要调节器，也参与调节ＴＪ的结构和功能，从而参与多种疾病的发生发展。（一）ＭｉｃｒｏＲＮＡ对肠上皮屏障的调节　肠上皮屏障主要由单层柱状肠上皮细胞和相邻细胞间的ＴＪ构成。ＴＪ可以封闭相邻细胞间的空隙，将机体内环境与肠道外环境相隔离，从而阻止已吸收的离子和营养物质流失回肠腔，阻挡病原微生物入侵，避免黏膜固有层免疫细胞激活［５］。研究显示，ｍｉＲＮＡ可以调节肠上皮细胞增殖、分化和ＴＪ的形成，在维持正常肠上皮屏障功能中发挥重要作用。众所周知，大量共生细菌栖息在肠道内并调节肠道的各种生理功能，研究表明，肠道共生菌可通过ｍｉＲ２１５ｐ，靶向下调磷酸酶张力蛋白同源物（ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇ）和程序性细胞死亡因子４（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ４）的表达，激活ＡＫＴ和ＪＮＫ信号通路，从而上调肠上皮细胞中ＴＪ蛋白ｃｌａｕｄｉｎ４和ｏｃｃｌｕｄｉｎ的表达，降低肠上皮通透性［６］。ＭｉＲＮＡｌｅｔ７ｂ被认为对肠道屏障功能具有保护作用，当敲除小鼠肠上皮细胞剪切酶Ｄｉｃｅｒ１基因，诱导ｌｅｔ７ｂ缺失后，肠黏膜组织中ｃｌａｕｄｉｎ４、７、ｏｃｃｌｕｄｉｎ以及ｚｏｎｕｌａｏｃｃｌｕｄｅｎｓ１（ＺＯ１）表达减少且分布异常，伴炎症因子分泌增加，诱导肠道通透性增高和自发性肠道炎症反应［７］。在缺氧坏境中，肠上皮细胞中缺氧诱导因子１α（ｈｙｐｏｘｉａｉｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒ１α，ＨＩＦ１α）通过上调ｍｉＲ３２０ａ的表达，促进肠上皮屏障的形成，减少缺氧对肠道造成的损伤［８］。某些药物，如阿魏酸，则被报道可通过增加ｍｉＲ２００ｃ３ｐ表达，激活ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号通路，增加ＺＯ１和ｏｃｃｌｕｄｉｎ表达，缓解内毒素诱导的肠上皮屏障功能破坏［９］。相反，有些ｍｉＲＮＡ则扮演着破坏肠道屏障功能、诱导或加重肠道疾病的角色。Ｚｈａｏ等［１０］在克罗恩疾病患者肠黏膜组织中检测到ｍｉＲ１２４ａ表达增加；在结肠炎小鼠模型和肠上皮细胞中过表达ｍｉＲ１２４ａ，可以减少ｃｌａｕｄｉｎ１、ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ＺＯ１和连接黏附分子的表达，增加肠上皮通透性，加重肠道炎症反应。反之，抑制ｍｉＲ１２４ａ表达，可以增加ＴＪ蛋白表达，减少上皮通透性。此外，在缺血再灌注损伤中，ｍｉＲ２１的表达与炎症因子的分泌和肠屏障完整性受损有关。ｍｉＲ２１通过靶向ＲＯＣＫ１的３＇ＵＴＲ，抑制对ＴＪ具有调控作用的ＲｈｏＲＯＣＫ信号通路，从而降低ｏｃｃｌｕｄｉｎ和ＺＯ１的表达，破坏肠屏障功能［１１，１２］。综上所述，ｍｉＲＮＡ对肠道屏障功能发挥双重作用，一方面，ｍｉＲＮＡ可以保护肠上皮屏障的完整性，维持正常肠上皮屏障功能，抵御病原菌入侵，预防疾病的发生；另一方面，有些ｍｉＲＮＡ则会破坏肠上皮屏障，促进肠道疾病的发生和发展。因此，研究ｍｉＲＮＡ对ＴＪ的调控作用，有助于认清肠道疾病发生发展的机制，寻找到更有效的预防和治疗肠道疾病的方法。（二）ＭｉｃｒｏＲＮＡ对血脑屏障的调节　血脑屏障是存在于毛细血管与脑组织之间具有选择通透性的一道特殊屏障，可以有效阻止血液中的有害物质入脑，对维持中枢神经系统内环境稳态，保障脑的正常生理功能具有重要意义［１３］。ＴＪ是血脑屏障结构和功能完整性的重要组成部分，是调节血脑屏障通透性的中心环节。在脑缺血损伤过程中，ＴＪ结构和功能的破坏可直接导致脑水肿，是死亡的主要原因。因此，维系缺血区血脑屏障ＴＪ结构和功能，对防治缺血性脑损伤及其后遗症的发生发展具有重要意义［１４］。研究表明ｍｉＲＮＡ可以调控血脑屏障通透性。在缺血性脑损伤中，上调的ｍｉＲ１８２通过靶向下调ｍＴＯＲ和ＦＯＸＯ１，促进小鼠脑微血管内皮细胞凋亡，同时减少ｃｌａｕｄｉｎ５、ｏｃｃｌｕｄｉｎ以及ＺＯ１表达，从而破坏血脑屏障的结构完整性。当用ｍｉＲＮＡ拮抗剂抑制ｍｉＲ１８２功能后，ＴＪ蛋白表达增加，改善血脑屏障功能［１５］。脑血管内皮细胞是发挥血脑屏障功能的结构基础。研究显示，缺氧可以上调脑血管内皮细胞中ｍｉＲ２１２／１３２表达，进而靶向下调ｃｌａｕｄｉｎ１、紧密连接相关蛋白１（ｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ１，ＴＪＡＰ１）和连接黏附分子３的表达，增加ＴＪ通透性，损伤血脑屏障，从而增加脑中风危险［１６］。此外，将过表达ｍｉＲ１２６ａ３ｐ的骨髓间充质干细胞注射到Ⅶ型胶原酶诱导的脑出血大鼠体内，显著减少大鼠脑组织中蛋白酶激活受体１和基质金属蛋白酶９的表达，增加ＴＪ蛋白ＺＯ１和ｃｌａｕｄｉｎ５的表达，促进骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞的分化，改善脑出血后血脑屏障功能破坏和脑损伤［１７］。在一些认知功能障碍性疾病中，肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦα）通过上调ｍｉＲ５０１３ｐ，靶向下调ＴＪ蛋白ＺＯ１表达，破坏血脑屏障，促进脑血管认知功能障碍的发生［１８］。阿尔茨海默病是好发于老年人群的一种神经退行性病变，会导致患者进行性认知功能障碍。研究显示，阿尔茨海默病患者的脑实质中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＧＭＣＳＦ）显著增加，激活ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号通路，上调ｍｉＲ９６的表达。ＭｉＲ９６通过靶向下调红细胞转化特异性转录因子相关基因，抑制ＺＯ１的表达；而下调ｍｉＲ９６可以阻止ＧＭＣＳＦ诱导的ＺＯ１减少，表明ｍｉＲ９６介导的ＴＪ损伤促进老年痴呆的发生［１９］。此外，高糖通过抑制脑血管内皮细胞ｍｉＲＮＡｌｅｔ７ａ的表达，减少ＺＯ１、ｃｌａｕｄｉｎ５和ｏｃｃｌｕｄｉｎ表达，破坏血脑屏障，增加糖尿病中风的风险；而过表达ｌｅｔ７ａ可以上调ＴＪ蛋白表达，保护血脑屏障完整性，减少糖尿病中风的风险［２０］。这些研究表明，不同的ｍｉＲＮＡ对ＴＪ的调节在脑血管疾病的发生发展中作用不同，研究其在脑血管疾病中的作用机制可能为缺血性脑损伤、阿尔茨海默病及糖尿病脑血管病变等的治疗提供新的思路。（三）ＭｉｃｒｏＲＮＡ对血视网膜屏障的调节　视网膜是眼部发挥视觉功能的结构。血视网膜屏障将神经视网膜与血液、视网膜组织液与脉络膜组织液分离，避免血液中有害成分对视网膜的损伤。血视网膜屏障由内屏障和外屏障组成，内屏障由视网膜毛细血管内皮细胞以及细胞间的ＴＪ构成，外屏障则由视网膜色素上皮细胞和细胞间的ＴＪ构成，因此ＴＪ是实现血视网膜屏障选择性吸收营养物质和转运视网膜组织中代谢产物以及药物输送的重要结构，是维持视网膜最佳功能的基础［２１］。在缺氧、渗透压改变及某些化学物质的作用下，ｍｉＲＮＡ可以通过调节视网膜新生血管的形成，视网膜色素上皮细胞的增殖、分化和迁移以及ＴＪ的功能，在视网膜的发育和视网膜疾病的发生发展中发挥重要作用［２２］。研究显示，ｍｉＲ２１８／Ｓｌｉｔ／ｒｏｕｎｄａｂｏｕｔ（Ｒｏｂｏ）调控网络对正常视网膜血管形成至关重要，过表达ｍｉＲ２１８靶向减少Ｒｏｂｏ１表达，抑制Ｓｌｉｔ／Ｒｏｂｏ信号通路，促进上皮细胞迁移和视网膜新生血管形成（Ｈａｎ等．２０１６，Ｋｏｎｇ等．２０１６）。在缺氧环境中，ｍｉＲ１２６可以下调靶基因血管细胞黏附分子１（ｖａｓｃｕｌａｒｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ１，ＶＣＡＭ１）和Ｂｃｌ２样蛋白１１（Ｂｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ２ｌｉｋｅ１１，ＢＣＬ２Ｌ１１），增加视网膜上皮细胞ＴＪ蛋白ＺＯ１、ｏｃｃｌｕｄｉｎ和ｃｌａｕｄｉｎ５表达，抑制缺氧诱导的血视网膜屏障的损伤；另一方面，ｍｉＲ１２６通过激活Ｓｔａｔｅ３信号通络，促进视网膜的主要神经胶质细胞米勒细胞（Ｍüｌｌｅｒｃｅｌｌｓ）生长，维持视网膜的正常生理功能［２３］。在糖尿病视网膜病变中，ｍｉＲ１４６ｂ３ｐ通过抑制单核细胞中腺苷脱氨酶２的活性抑制巨噬细胞分泌炎症因子ＴＮＦａ和白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６），增加人视网膜内皮细胞中ｃｌａｕｄｉｎ５和ＺＯ１的表达，减轻糖尿病诱导的血视网膜屏障损伤，缓解糖尿病视网膜病变［２４］。同样，ｍｉＲ１５ａ／１６可以抑制高糖诱导的转化生长因子β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ，ＴＧＦβ）信号通