染色体畸变和肿瘤的发生

连　ＨＥＲＥＤｌＴＡｓ（ＢｅＩｊｉｎｇ）　２ｏ０８年１２月，３ｏ（１２）：１５２９—１５３５　ｌＳＳＮ　０２５３・９７７２　ｗｗｗ．ｃｈｉｎａｇｅｎｅ．ｃｎ　综述　

ＤＯＩ：１０．３７２４，ＳＰ．Ｊ．１ＯＯ５．２ＯＯ８．Ｏ１５２９　

肿瘤染色体畸变分析方法新进展　

薛渊博，宋鑫　

昆明医学院第三附属医院（云南省肿瘤医院）肿瘤生物治疗中心，昆明６５ｏ０１８　

摘要：肿瘤的发生多与染色体畸变有关，确定染色体畸变与肿瘤的关系，必然离不开染色体畸变的检测分析。　

文章简要综述几种常用染色体畸变的检测方法及其新进展，包括Ｇ显带、荧光原位杂交（ＦＩｓＨ）、光谱核型分析　

（ｓＫＹ）、多色荧光原位杂交（Ｍ．ＦＩｓＨ）、多色显带分析技术（Ｒｘ．ＦＩｓＨ）、比较基因组杂交（ｃＧＨ）和微阵列比较基因　组杂交（Ａｒｒａｙ　ｃＧＨ），以及这些方法在肿瘤诊断和研究方面的应用。　

关键词：染色体；染色体分析；染色体杂交；检测　

Ｐｒ０ｇｒｅｓｓｅｓ　０ｎ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈ０ｄｓ　０ｆ　ｔｕｍ０ｒ　ｃｈｒ０ｍ０ｓ０ｍｅ　ａｂｅｒｒａｔｉ０ｎ　ａｎａｌｙｓｉｓ　

ＸＵＥ　Ｙｕａｎ—ＢＯ．ＳＯＮＧ　Ｘｉｎ　

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Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＭＯｓｔ　ｃａｎｃｅｒＳ　ａｒｅ　ｋｎＯｗｎ　ｔＯ　ｂｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｍ　ｃｈ１．０ｍｏｓｏｍｅ　ａｂｅｒｒａｔｉＯｎ，ａＩ１ｄ　ｃｈＩＤｍＯｓＯｍｅ　ａＩｌａｌｙｓｉｓ　ｉｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａ１　ｔｏ　ｕｎｄｅｒｓｔａＪ１ｄ　ｍｅ　ｒｅ１ａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｃｈｍｍＯｓＯｍｅ　ａｂｅｍｔｉｏｎ　ａＩｌｄ　ｃａＪｌｃｅｒ．Ｈｅｒｅ　ｗｅ　ｂｒｉｅｎｙ　ｉｎ仃０ｄｕｃｅ　ｓｅＶｅｒａｌ　ｍｅｍＯｄｓ　ｏｆ　ｃｈｒ０ｍｏｓｏｍｅ　ａｂｅｒｒａｔｉｏｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｉｎｃ１ｕｄｉｎｇ　Ｇ—ｂａＩｌｄｉｎｇ，ｎｕｏＩｌｅｓｃｅｎｃｅ　ｆ，ｌ　ｆｆＭ　ｈ）ｒｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＦＩＳＨ），ｓｐｅｃｔｒａ１　ｋａＩｙｏｔｙｐｉｎｇ　（ＳＫＹ），ｍｕｌｔｉ－ｎｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｆｍ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｍ—ＦＩＳＨ），ｃｍｓｓ—ｓｐｅｃｉｅｓ　ｃｏ１ｏｒ　ｂａＪ１ｄｉｎｇ（Ｒｘ—ＦＩｓＨ），ｃｏｍｐａｒａ廿ｖｅ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ｈｙｂ嘲ｉｚａｔｉｏｎ（ＣＧＨ）ａｎｄ　Ａ哪．ｙ　ｃｏⅡＩｐａｒａｌｉＶｅ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ｈｙｂ删ｉｚａｔｉｏｎ（ＡＴｒａｙ　ＣＧＨ）．　

・２７６・　

文章编号：１００７—６６１１（２００８）０３—０２７６—０３　山西医科大学学报（Ｊ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ）２００８年３月，３９（３　

ＳＣＧＥ和染色体畸变分析用于遗传毒性检测的比较　

张新旺，　杨建一，　杜圣家　（山西医科大学基础医学院细胞生物与遗传学教研室，太原０３０００１）　

摘要：　目的　比较单细胞凝胶电泳技术（ｓＣＧＥ）和染色体畸变分析（ＣＡ）在遗传毒性检测中的灵敏性。　方法４８只小鼠　

分为４组，３个实验组小鼠分别用不同剂量（０．５，１，２ｒｎｇ／ｋｇ）的丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）进行一次性腹腔注射，对照组小鼠注射等体　

积生理盐水，分别用５Ｆ＿ＧＥ和ＣＡ对小鼠骨髓细胞的遗传损伤进行检测。　结果采用ＳＣＧＥ方法检测，三个ＭＭＣ剂量组　

的小鼠骨髓细胞拖尾率与平均尾长均高于对照组，差异有统计学意义；采用ＣＡ检测，只有２　ｍｇ／ｋｇ　ＭＭＣ组的畸变细胞率显　

著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。　结论对于遗传毒性的检测，ｓ０ＧＥ更为敏感，更适用于低剂量致变因子遗传毒性的检测分析。　

关键词：单细胞凝胶电泳；染色体畸变；遗传毒性　

中图分类号：Ｒ５９６．１　文献标识码：Ａ　

Ｃ０ｍｐａ咄加ｏｆ　ａｎｄｄｌｒｏｍｅｓｌ￣ａｂｅｒｒａｔｉｏｎｓｆｏｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｇｅｎｅｔｉｃｔｏｘｉｃｉｔｙ　

ＺＨＡＮＧ　Ｘｉｎ．ｗａｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｊｉａｎ—ｙｉ，Ｄｉｄ　Ｓｈｅｎｇ－ｊｉａ（Ｄｅｐｔ　ｏｆ　Ｃｙｔｄｍ＇ｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｓｈａｎｘｃｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ　

Ｄ３ｏＤ０】，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ咖ｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｓｉｎｇｌｅ　ｃｅｌｌ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＳＣＧＥ）ａｎｄ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ａｂｅｒｒａｔｉｏｎｓ（ＣＡ）ｉｎ　ｄｅ—　

ｔｅｃｔｉｎｇ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｏｒｔｙ－ｅｉｇｈｔ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　４　ｇｒｏｕｐｓ￣ｔｈｒｅｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ、Ｔｈｅ　

２０１５年３月第３１卷第３期Ｊ　Ｐｒｅｙ　Ｍｅｄ　Ｉｎｆ。Ｍａｒ．２０１５．Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．３　１８５　

【论著】　

育发剂对中国仓鼠肺细胞活力和染色体畸变的影响研究　

徐薇，田嘉军，葛字杰，敬明武，周静，曾怡，卢润生　

［摘要］目的评估２种育发剂对中国仓鼠肺细胞（ＣＨＬ）细胞活力的影响及其诱导染色体畸变的能力。方法在非代谢　活化和代谢活化情况下，采用ＭＴＴ法和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验检测２种（编号Ａ和Ｂ）育发剂对ＣＨＬ细胞活　力和染色体畸变率的影响。结果　Ａ育发香波在不含ｓ９的系统中，受试物终浓度为０．１５６　ｐ．１／ｍｌ时细胞存活率为　５４．９％；在含ｓ９的系统中，受试物终浓度为０．３１３　Ｌ／ｍｌ时细胞存活率为５２．４％；Ｂ育发膏在不含或含ｓ９的系统中，受试　物终浓度为５　ｍｓ／ｍｌ时细胞存活率均超过９０％。与对照组比较，Ａ育发香波各剂量组的染色体畸变率差异无统计学意义　（不加ｓ９的体系下Ｐｅａｒｓｏｎ　Ｃｈｉ—Ｓｑｕａｒｅ值＝０．３４１，Ｐ＝０．９５２，在ｓ９体系下的Ｐｅａｒｓｏｎ　Ｃｈｉ—Ｓｑｕａｒｅ值＝０．６８７，Ｐ＝０．８７６），　Ｂ育发膏在加ｓ９和不加Ｓ９试验体系下高剂量组的染色体畸变率与阴性对照组相比，有显著性差异（不加Ｓ９的体系下　Ｐｅａ￣ｏｎ　Ｃｈｉ—Ｓｑｕａｒｏ值　１６，６１１，Ｐ＝０．０００，在ｓ９体系下的Ｐｅａｒｓｏｎ　Ｃｈｉ—Ｓｑｕａｒｅ值　１１．９７１，Ｐ＝０．０１；重复试验不加ｓ９的　体系下Ｐｅａｍｏｎ　Ｅｈｉ—Ｓｑｕａｒｅ值＝１５．４５７，Ｐ＝０．０００，在ｓ９体系下的Ｐｅａｒｓｏｎ　Ｃｈｉ，－Ｓｑｕｍ；ｅ值＝１５．３４１，Ｐ＝０．０００），低、中剂　量组的染色体畸变率无显著性差异（不加ｓ９的体系下Ｐｅａｒｓｏｎ　Ｃｈｉ—Ｓｑｕａｒｅ值　０．０００　Ｐ＝１．０００，在ｓ９体系下的Ｐｅａｒｓｏｎ　Ｃｈｉ—Ｓｑｕａｒｅ值＝０．６８７，Ｐ＝０．７０９）。结论在本实验条件下，Ａ育发香波无致突变性，Ｂ育发膏有致突变性。　

・１３２　中国优生与遗传杂志２００２年第ｌ０卷第ｌ期　

端粒、端粒酶和肿瘤发生　

赵剩样（菏泽医学专秤学校生轴学袭研宣，山东菏泽．２７４０３０）　

摘要：　端粒是真橱生枷染色体柬端的ＤＮＡ序列．对橐色体的箍定起重要作用。其长度缩短或丢失可导最蛔胞的疙　亡或恶变。端粒酶是一种特球的板糖橱蛋白逆转录酶．它的活性可以自身ＲＮＡ为模扳合成端粒ＤＮＡ，加割集色俸的末端，越　堆持鹕粒的长度，使细胞永生　鹕粗和端粒酶对于细胞的生存和肿瘤的发生其有非常重要的意义．它们之间的关系已成为近　年柬研究的热点。　关键词：橐色俸；端粒；端粒酶；肿瘸发生　

早在于２０世纪３０　４０年代，ＭｃＣｌｉｎ１０ｃｋ和ＭｕＵｅｒ在玉　米和果蝇的染色体研究中，发现真核生物染色体的末端对　于维护染色体的稳定性和完整性非常重要，从而提出了“端　粒”的概念；１９７８年Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ首扶在四膜虫ＤＮＡ分子的末　端研究中，阐明了端粒结构；１９８５年Ｇｒｅｉｄｅｒ等在四膜虫细　胞核提取物中首先发现了端粒酵；１９８９年Ｍ。ｒｉｎ在人Ｈｅｌａ　细胞中检测虱端粒酶话性；在　后的研究中．人们发现端　粒、端粒酶的结构和功能与细胞癌变的调控有重要差系。　于是，近年来．研究端粒、端粒酶与肿墙细胞的发生形成了　一个热点　】端粒　（１）端粒的结构　端牡（ｔｅ￣ｅｍｅｔｅ）是指位于真棱细胞线性染色体末端的一　种特殊结构．由富告Ｇ的ＤＮＡ重复序列和端粒结☆蛋白所　构成的一种核蛋白复合体。不同种娄的细胞端粒ＤＮＡ序　列并不相同．大多数长约５—８ｈＤ，以线性重复方式组成。现　已知四膜虫端粒ＤＮＡ的重复序列为５’一ＧＧＧＧＴＴ一３’。　人和其他哺乳动物的端粒ＤＮＡ序列由５’一ＴＴＡＧＧＧ一３’　重复组成，长度大约为５一ｔ５ｋｐ不等．是非结构基因．不具有　编码蛋白质的功能。端粒ＤＮＡ的３’末端较５’末端伸出长　１２—１６ｂｐ，且呈弯曲帽状。与端粒特异性结合的端粒结合蛋　白．目前为止．只在少数生物中确定了端粒结合蛋白的结构　及表达基因。Ｃｈｏｎｚ等在人类Ｈｅｌａ细胞中发现了一种端粒　结台蛋白，且成功地分离并克隆了ＴＲＦ基因，其编码的　ＴＲＢＦ（１ｅＪｏｍｅｒ￣ｒｅｐｅａｌ　ｈｉｎｄｉ￣　ｆａｃｔｏｒ）蛋白质被证明与端粒特　异性结合　不同种属的端粒结合蛋白在氨基酸序列上几乎　完全不同，但它们的３’氨基端都有与ｍｙｂ类癌基因结台的　序列　但人类染色体末端的ＤＮＡ一蛋白质复旨体的结构还　不太清楚。　（２）端粒的功能　从端粒的特殊结构，决定了端粒的特殊功能　端粒可　使染色体末端得到保护，有防止染色体末端丢失，端一端融　合、稳定染色体、调节细胞的生长，决定细胞的生命等功能。　①保证染色体的完整性和稳定性　在细臆周期中，细臆分裂，染色体ＤＮＡ进行半保留复　制　染色体束端出现丢失的现象．端粒ＤＮＡ不断减少．每个　周期约损失５０—６５ｈ口。由于染色体复制后丢失的仅是一些　无编码功能的端粒ＤＮＡ高度重复序列．因而对染色体上的　基因编码序列不产生任何影响。故端粒的存在维持了染色　体结构的完整性和稳定性，可防止染色体ＤＮＡ的降解、重　组和末端融合。同时．不同物种的端粒结构在进化中具有　高度的保守性，从而证明了端粒对维持染色体缩构的完整、　功能稳定具有重要作用　②保护染色体末端　真核生物端粒与核膜及棱基质中的某些蛋白有密切联　系。端粒ＤＮＡ与棱蛋白相互作用．以ＴＴＡＧＧＧ结构附着　于细胞棱基质．可使染色体的末靖免受化学物质恪饰或被　棱酶降懈　③决定细胞的分裂次数和细胞的寿命　在１９９１年．１ｉａｒｌｅＹ等就已认识到端粒对于细臆生命的　过程起重要作用，认为端粒长度对细臆分裂攻数具有决定　性作用。在没有其它因素帮助延长端粒时，靖粒在复制过　程中逐渐缩短是造成细臆衰老死亡的原因　。在ＤＮＡ复　制过程中，由于半保留的复制方式需要５’ＲＮＡ　Ｉ橱来引导　ＤＮＡ链的合成，模板染色体３’末端区域不艟被完全复制，　因而造成子代ＤＮＡ引物端粒的逐步蹯短。但当端粒的长　度缩短到一个临界值后，染色体末端的稳定机制被破坏．导　致细臆生理功能紊乱．进＾危象期（ｃｒｉｓｉｓ），最终死亡　。　所以，端粒的长度决定了细胞的寿命，通过潮定端粒的长　度，可以预测细胞的寿命　有人将端粒的长度旅为“生命时　钟”。端粒限制了细臆分裂次数，端粒的逐渐缩短．可能是细　胞计算和控制分裂的基础。　２端鞋聋　在一些永生化豹细胞系和大多数舯磨细胞中．存在着　一种特殊的恬性酶类，可以使端粒的长度不随细胞分裂次　数的增加而缩短，而且可以延长端粒，帮助细臆跨越衰老、　危象达到永生。这种酶称为端粒酵（１ｅｌｏｍｅｒａｓｅ）。