凝集反应题库1-2-10

姓名学号班级组别同组者科目细胞生物学实验题目动物细胞融合【实验目的】1.了解细胞膜的表面结构。

2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理。

3.学习研究细胞凝集反映的方法。

【实验原理】凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。

常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA)，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等，凝集素是它们的总称。

在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。

凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。

人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。

ABO血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。

另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。

如：植物凝集素可抑制受精；芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。

临床医学检验临床免疫技术：凝集反应考真题一1、单选下列哪一项不是为促进凝集现象的出现而采取的措施（）A.增加溶液的离子强度B.用胰酶或神经氨酸酶处理C.增加试液的黏度D.增加蛋白质或电解质E.离心使复合物（江南博哥）沉淀正确答案：A参考解析：为促进凝集现象的出现可采用增加电解质或蛋白质以降低溶液中离子强度从而缩短颗粒间的距离；增加溶液的黏度；用胰酶或神经氨酸酶处理，改变细胞表面化学结构；用离心的方法克服颗粒间的排斥力。

2、单选外斐试验最常采用的方法是（）A.正向间接凝集反应B.反向间接凝集反应C.玻片凝集反应D.试管凝集法E.间接凝集抑制反应正确答案：D参考解析：试管凝集反应是用定量抗原悬液与一系列递度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无相应抗体及其效价，可以用来协助临床诊断或流行病病原调查研究。

例如Widal反应、Well-Felix反应、输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。

3、单选自身红细胞凝集试验主要的单克隆抗体为（）A.抗人A型红细胞单抗B.抗人B型红细胞单抗C.抗人AB型红细胞单抗D.抗人O型红细胞单抗E.抗红细胞不完全抗体正确答案：D参考解析：自身红细胞凝集试验基本原理是抗人O型红细胞的单克隆抗体能与任何种血型的红细胞结合，但不引起凝集反应，这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗体，可用于检测标本中的抗原。

4、单选间接凝集试验和被动凝集试验（）A.是同义词B.是完全不同的两种试验C.二者均属凝集试验，但有区别D.前者属玻片凝集反应范畴，后者属试管凝集反应范畴E.是近义词正确答案：A5、单选凝集反应形成的反应现象（）A.肉眼可见B.必须用精密仪器测定C.肉眼不可见D.必须染色才可见E.必须借助显微镜正确答案：A6、单选间接血凝试验阳性，则（）A.红细胞不溶解B.红细胞溶解C.红细胞凝集D.红细胞不凝集E.乳胶颗粒不凝集正确答案：C7、单选冷凝集素在以下哪一温度时与红细胞结合最好（）A.4℃B.22℃C.32℃D.37℃E.42℃正确答案：A参考解析：冷凝集素(cold agglutinin)是冷反应型抗红细胞抗体，在0～4℃时最易和红细胞膜抗原结合。

实验一凝集反应（ABO血型的鉴定）[实验目的]1．掌握凝集反应的原理，玻片法和试管法凝集实验的实验方法和结果分析。

2．了解凝集反应基本类型及血型鉴定的各种方法包括正、反定型，血型板鉴定法和血型卡鉴定法。

[实验原理]在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。

人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种。

据此，将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集，据其凝集情况便可判定出受试者的血型。

[实验器材]1．器材：光学学显微镜，消毒缸2．材料：消毒干棉球，一次性采血针，载玻片，玻璃试管，一次性带刻度朔料吸管，医用黄色垃圾袋3．试剂：75%医用酒精，0.9%NaCl注射液，抗血清试剂抗A、抗B[内容与方法](一)玻片法凝集实验1.用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。

滴1至2滴血液于含有1ml生理盐水的试管内，摇匀，制成约0.5%血球悬液。

用干棉球止血。

2．取洁净载玻片1块，在中间用蜡笔画一条竖线，将抗A、B分型试剂分别加1滴于载玻片两端。

3. 用毛细吸管吸取血球悬液，在白瓷板的两个圆孔内各加一滴,并充分混匀，放置5－10分钟。

4.肉眼观察红细胞有无凝集发生。

如有凝集，可见红细胞凝集成块；无凝集，红细胞呈均匀分散。

若肉眼观察不明显，可在显微镜下观察是否存在微小凝集5.记录凝集情况，判定受检者的血型。

（二）试管法凝集实验1．用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。

滴1至2滴血液于含有生理盐水的试管内，摇匀，制成约0.5%血球悬液。

用干棉球止血。

2．取洁净试管2支，分别标记上A、B字样，将抗A、B分型试剂分别加1滴于相应标记的试管中3．用一次性吸管吸取血球悬液，在2支标记试管中各加一滴,并充分混匀，放置5－10分钟。

凝集反应是一种免疫学实验技术，广泛应用于临床诊断和研究领域。

它是通过抗原与抗体的特异结合来发生凝聚现象，从而实现对特定抗原的检测和定量。

凝集反应的原理是基于抗原与抗体相互结合后形成免疫复合物，使得溶液中的物质发生可见的沉淀或凝聚现象。

这种凝聚现象可以通过肉眼观察或者光学仪器来进行定性或定量分析。

凝集反应主要包括直接凝集反应、间接凝集反应和双重凝集反应等类型：1. 直接凝集反应直接凝集反应是指抗原与抗体直接结合形成凝集物质的反应。

在这种反应中，抗原与抗体的结合是直接发生的，不需要其他介质的参与。

该反应通常用于检测红细胞凝集抗体、细菌抗原等。

2. 间接凝集反应间接凝集反应是指抗原与抗体先间接结合，再与介体结合形成凝集物质的反应。

在这种反应中，介体起到传递抗原-抗体复合物的作用，使得凝集反应能够进行下去。

间接凝集反应通常用于检测病毒抗体、梅毒螺旋体抗体等。

3. 双重凝集反应双重凝集反应是指两种抗体与抗原之间分别发生凝集反应，最后抗原-抗体复合物之间再发生凝集现象的反应。

这种反应在研究免疫球蛋白结构和功能、检测致病微生物等方面具有重要意义。

凝集反应的类型多种多样，各自在临床诊断和免疫学研究中发挥着重要作用。

通过对不同类型凝集反应的原理和特点的深入研究，可以更好地理解免疫学的基本原理，提高临床诊断的准确性和敏感性。

凝集反应也为药物研发和免疫治疗提供了重要依据和支持。

希望未来能有更多的科研人员投入到凝集反应领域的研究中，推动该领域的发展，为人类健康做出更大的贡献。

凝集反应是一种免疫学实验技术，广泛应用于临床诊断和研究领域。

它是通过抗原与抗体的特异结合来发生凝聚现象，从而实现对特定抗原的检测和定量。

凝集反应的原理是基于抗原与抗体相互结合后形成免疫复合物，使得溶液中的物质发生可见的沉淀或凝聚现象。

这种凝聚现象可以通过肉眼观察或者光学仪器来进行定性或定量分析。

凝集反应主要包括直接凝集反应、间接凝集反应和双重凝集反应等类型。

实验一凝集试验颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应抗体结合后，在有适量电解质存在下，抗原颗粒可相互凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反应(Agglutination reaction)或凝集试验。

参与凝集反应的抗原称为凝集原（Agglutinogen），抗体称为凝集素（Agglutinin）。

细菌或其它凝集原都带有相同的负电荷，在悬液中相互排斥而呈现均匀的分散状态。

抗原与相应抗体相遇后可以发生特异性结合，形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的静电排斥力，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参与下，由于离子的作用，中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之失去了彼此间的静电排斥力，分子间相互吸引，凝集成大的絮片或颗粒，出现了肉眼可见的凝集反应。

根据是否出现凝集反应及其程度，对待测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。

凝集反应包括直接凝集反应和间接凝集反应两大类，本实验主要介绍直接凝集反应。

[目的要求]1. 掌握平板凝集试验和试管凝集试验的操作方法。

2. 掌握凝集试验的结果判定及判定标准。

3. 熟悉平板凝集试验和试管凝集试验所需材料和试剂。

[材料与试剂]1. 玻板，载玻片，试管（1cm x 8cm），试管架，刻度吸管，滴管，微量可调加样器，滴头（tip头），牙签或火柴棒，记号笔。

2. 灭菌的生理盐水，灭菌的0.5%石炭酸生理盐水。

3. 布氏杆菌病试管凝集抗原，布氏杆菌病平板凝集抗原，布氏杆菌病虎红平板凝集抗原，布氏杆菌病阳性血清，布氏杆菌病阴性血清，被检血清（牛、羊或猪）。

4. 鸡白痢平板凝集抗原，鸡白痢阳性血清，鸡白痢阴性血清，被检鸡血清。

[实验内容及操作方法]（一）试管凝集试验以牛布氏杆菌病试管凝集试验为例。

1. 试管准备：每份血清用试管4支，另取3支试管作为对照，作好标记，置试管架上。

如被检血清有多份，对照只需做1份。

2. 被检血清稀释：第1管加入2.3ml 0.5% 石炭酸生理盐水，第2、3、4管加入0.5 ml 0.5% 石炭酸生理盐水；然后用加样器或刻度吸管吸取被检血清0.2 ml，加入第1管中，反复吹吸5次混匀，吸取1.5 ml弃之，再吸取0.5 ml加入第2管中，混匀后吸取0.5 ml加入第3管，依此类推至第4管，混匀后吸弃0.5 ml（见表1-1）。

生理学血液凝固和抗凝习题和参考答案（一）血液凝固的基本步骤血液凝固是指血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程，其本质为血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白。

纤维蛋白交织成网，把血细胞及血液的液体成分网罗在内，从而形成血凝块。

血液凝固是一系列复杂的酶促反应过程，需要多种凝血因子参与。

血液凝固是凝血因子按一定顺序激活，最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程，可分为凝血酶原酶复合物的形成；凝血酶形成；纤维蛋白形成三个基本步骤，即：第一步凝血酶原酶复合物（形成）↓第二步凝血酶原→凝血酶↓第三步纤维蛋白原→纤维蛋白1.凝血酶原酶复合物的形成：凝血酶原酶复合物为Ⅹa、V、Ca2+和PF3（血小板第3 因子，为血小板膜上的磷脂）复合物，它的形成首先需要因子Ⅹ的激活。

根据凝血酶原酶复合物形成始动途径和参与因子的不同，可将凝血分为内源性凝血和外源性凝血两条途径。

（1）内源性凝血途径：由因子Ⅻ活化而启动。

当血管受损，内膜下胶原暴露时，可激活Ⅻ为Ⅻa，进而激活Ⅺ为Ⅵa。

Ⅵa 在Ca2+存在时激活Ⅸa，Ⅸa 再与激活的Ⅷa、PF3、Ca2+形成复合物进一步激活Ⅹ。

上述过程参与凝血的因子均存在于血管内的血浆中。

故取名为内源性凝血途径。

由于因子Ⅷa 的存在，可使Ⅸa 激活X 的速度加快20 万倍，故因子Ⅷ缺乏使内源性凝血途径障碍，轻微的损伤可致出血不止，临床上称甲（A）型血友病。

（2）外源性凝血途径：由损伤组织暴露的因子Ⅲ与血液接触而启动。

当组织损伤血管破裂时，暴露的因子Ⅲ与血浆中的Ca2+、Ⅶ共同形成复合物进而激活因子Ⅹ。

因启动该过程的因子Ⅲ来自血管外的组织，故称为外源性凝血途径。

2.凝血酶形成：在凝血酶原酶复合物的作用下，血浆中无活性的因子Ⅱ（凝血酶原）被激活为有活性的因子Ⅱa（凝血酶）。

3.纤维蛋白的形成：在凝血酶的作用下，溶于血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白单体；同时，凝血酶激活Ⅻ为Ⅻa，使纤维蛋白单体相互连接形成不溶于水的纤维蛋白多聚体，并彼此交织成网，将血细胞网罗在内，形成血凝块，完成血凝过程。