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第六章科学采样与诊断检测在非洲猪瘟的防控过程中，准确、快速、及时地诊断对尽早发现疫情，及时处理极其重要。
为确保能够从实验室检测中获得准确的诊断结果，在临床取样时应重点考虑动物发病的时间、治疗史、发病状态来选择最佳时机和最具代表性的动物进行采样。
其次，有效的样本采集后，如何使用正确的运输方式提交到实验室进行检测也会影响诊断结果的准确性。
临床兽医对诊断结果最大的贡献就是以最可靠的采集和运输方式向诊断实验室提供最合适的临床样本。
同时，实验室选择正确有效的检测方法对送检样品进行规范准确的检测是非洲猪瘟疫情确诊和阳性动物筛查的重中之重。
样品的采集、运送与储存我国要求对非洲猪瘟的诊断、报告与防控必须严格遵照《中生猪养殖与非洲猪瘟生物安全防控技术华人民共和国动物防疫法》《突发重大动物疫情应急预案》《非洲猪瘟防治技术规范》《非洲猪瘟防控应急预案》的要求执行。
疑似样品的采集、运送与保存必须符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》的规定，样品的采集，运送和存储单位必须具备相应资格。
样品的采集、运送与存储关乎诊断结果的可靠性、准确性。
实验室检验能否得出准确结果，与病料取材是否得当、保存是否得法和送检是否及时等有密切关系。
当有关单位或者个人怀疑发生非洲猪瘟疫情时，应及时向当地动物疫病预防控制机构报告。
病猪和病死猪的全血、组织、分泌物和排泄物中均可能含有病毒。
内脏器官弥漫性出血症状明显，故在采集组织病料时需首先通过剖检观察器官组织的病理变化，结合生前各项临床症状进行初步诊断，采集的脏器应尽可能全面，如疫点周边有野猪分布，应联合林业部门同时采集野猪样品。
一、 样品的采集1. 全血和血清采样前提前准备好采血所需器材，如注射器、真空采血针和管、1.5mL离心管、记号笔、样品袋、泡沫箱、冰袋、白纸和笔。
抗凝血采集，从耳静脉图6-1 前腔静脉采血示范第六章 科学采样与诊断检测或前腔静脉采集血液（图6-1）。
用注射器吸取EDTA 抗凝剂（不可用肝素抗凝，易抑制后续PCR 反应），静脉采集血液5mL ，颠倒混匀后，注入无菌容器。
样品采集样品采集是一种取样的方式。
样品采集- 样品的分类样品一般分为检样,原始样品和平均样品三种.检样:从整批待测食品的各个部分所采取的少量样品.原始样品:把质量相同的许多份检样综合在一起.平均样品:原始样品经过处理再抽取其中一部分供分析检验用.样品采集- 采样的数量采样的数量应能反映该批食品的卫生质量和满足检验项目对试样量的需要;采样的数量一式三份供检验,复检和备查用,每份不少于0. 5 kg 样品采集 - 采样的方法采样的一般方法具体样品的抽取方法采样的一般方法样品的采集通常采用随机抽样的方法.随机抽样是指不带主观框架,在抽样过程中保证整批食品中的每一个单位产品(为检验需要而划分的产品最小的基本单位)都有被抽取的机会.抽取的样品必须均匀地分布在整批食品的各个部位.最常用的方法有简单随机抽样,分层随机抽样,系统随机抽样和阶段随机抽样.(1)简单随机抽样整批待测食品中的所有单位产品都以相同的可能性被抽到的方法,叫简单随机抽样,又称单纯随机抽样.(2)系统随机抽样实行简单随机抽样有困难或对样品随时间和空间的变化规律已经了解时,可采取每隔一定时间或空间间隔进行抽样,这种方法叫系统随机抽样.(3)分层随机抽样按样品的某些特征把整批样品划分为若干小批,这种小批叫做层.同一层内的产品质量应尽可能均匀一致,各层间特征界限应明显.在各层内分别随机抽取一定数量的单位产品,然后合在一起即构成所需采取的原始样品,这种方法称为分层随机抽样.(4)分段随机抽样当整批样品由许多群组成,而每群又由若干组构成时,可用前三种方法中的任何一种方法,以群作为单位抽取一定数量的群,再从抽出的群中,按随机抽样方法抽取一定数量的组,再从每组中抽取一定数量的单位产品组成原始样品,这种抽样方法称为分段随机抽样方法.上述方法并无严格界线,采样时可结合起来使用,在保证代表性的前提下,还应注意抽样方式的可行性和抽样技术的先进性.2. 具体样品的抽取方法采样时,应根据具体情况和要求,按照相关的技术标准或操作规程所规定的方法进行.(1)有完整包装(桶,袋,箱等)的食品首先根据下列公式确定取样件数:式中,n为取样件数;N为总件数.从样品堆放的不同部位采取到所需的包装样品后,再按下述方法采样.a.固体食品如粮食和粉状食品,用双套回转取样管插人包装中,回转180o取出样品.每一包装须由上,中,下三层取出三份检样,把许多份检样综合起来成为原始样品,再按四分法缩分至所需数量.b.稠的半固体样品如动物油脂,果酱等,启开包装后,用采样器从上,中,下三层分别取出检样,然后混合缩减至所需数量.c.液体样品如鲜乳,酒或其他饮料,植物油等,充分混匀后采取一定量的样品混合.用大容器盛装不便混匀的,可采用虹吸法分层取样,每层各取500mL左右,装人小口瓶中混匀后,再分取缩减至所需数量.(2)散装固体食品可根据堆放的具体情况,先划分为若干等体积层,然后在每层的四角和中心分别用双套回转取样管采取一定数量的样品,混合后按四分法缩分至所需数量.(3)肉类,水产,果品,蔬菜等组成不均匀的食品视检验目的,可由被检物有代表性的各部位(肌肉,脂肪,或果蔬的根,茎,叶等)分别采样,经捣碎,混匀后,再缩减至所需数量.体积较小的样品,可随机抽取多个样品,切碎混匀后取样.有的项目还可在不同部位分别采样,分别测定.(4)罐头,瓶装食品或其他小包装食品根据批号连同包装一起采样.同一批号取样数量, 250g以上包装不得少于3个,250g以下包装不得少于6个.样品采集- 采样的注定事项1. 采样工具应该清洁,不应将任何有害物质带人样品中.2. 样品在检测前,不得受到污染,发生变化.3. 样品抽取后,应迅速送检测室进行分析.4. 在感官性质上差别很大的食品不允许混在一起,要分开包装,并注明其性质.5. 盛样容器可根据要求选用硬质玻璃或聚乙烯制品,容器上要贴上标签,并做好标记.1.6.2 分析试样的制备样品的制备是指对所采取的样品进行分取,粉碎,混匀等过程.由于用一般方法取得的样品数量较多,颗粒过大且组成不均匀,因此必须对采集的样品加以适当的制备,以保证其能代表全部样品的情况并满足分析对样品的要求.一,常规食品样品的制备制备时,根据待测样品的性质和检验项目的要求,可以采取不同的方法进行,如摇动,搅拌,研磨,粉碎,捣碎,匀浆等.1. 液体,浆体或悬浮液体一般将样品充分摇匀或搅拌均匀即可.常用的搅拌工具有玻璃棒,搅拌器等.2. 互不相溶的液体如油和水的混合物,可分离后再分别取样测定.3. 固体样品可视情况采用切细,捣碎,粉碎,反复研磨等方法将样品研细并混合均匀.常用的工具有研钵,粉碎机,绞肉机,高速组织捣碎机等.需要注意的是,样品在制备前必须先除去不可食用部分,水果除去皮,核;鱼,肉禽类除去鳞,骨,毛,内脏等.固体试样的粒度应符合测定的要求,粒度的大小用试样通过的标准筛的筛号或筛孔直径表示,标准筛的筛号及筛孔直径的关系见表1.5.表1.5 标准筛的筛号与孔径大小4. 罐头水果类罐头在捣碎前要先清除果核;鱼类罐头,肉禽罐头应先剔除骨头,鱼刺及调味品(葱,姜,辣椒等)后再捣碎,混匀.制备过程中,还应注意防止易挥发性成分的逸散和避免样品组成及理化性质发生变化.二,测定农药残留量时样品的制备1. 粮食充分混匀后用四分法取20g粉碎,全部过0. 4mm筛.2. 肉类除去皮和骨,将肥瘦肉混合取样,每份样品在检测农药残留量的同时还应进行粗脂肪的测定,以便必要时分别计算脂肪与瘦肉中的农药残留量.3. 蔬菜,水果洗去泥砂并除去表面附着水,依当地食用习惯,取可食用部分沿纵轴剖开,各取1/4,然后切碎,混匀.4. 蛋类去壳后全部混匀.5. 禽类去毛及内脏,洗净并除去表面附着水,纵剖后将半只去骨的禽肉绞成肉泥状.检测农药残留量的同时应进行粗脂肪的测定.6. 鱼每份鱼样至少三条,去鳞,头,尾及内脏后,洗净并除去表面附着水,纵剖取每条的一半,去骨,刺后全部绞成肉泥状,混匀.1.6.3 样品的保存样品采集后应于当天分析,以防止其中水分或挥发性物质的散失以及待测组分含量的变化.如不能马上分析则应妥善保存,不能使样品出现受潮,挥发,风干,变质等现象,以保证测定结果的准确性.制备好的平均样品应装在洁净,密封的容器内(最好用玻璃瓶,切忌使用带橡皮垫的容器),必要时贮存于避光处,容易失去水分的样品应先取样测定水分.容易腐败变质的样品可用以下方法保存,使用时可根据需要和测定要求选择.1. 冷藏短期保存温度一般以0～5 0C为宜.2. 干藏可根据样品的种类和要求采用风干,烘干,升华千燥等方法.其中升华干燥又称为冷冻干燥,它是在低温及高真空度的情况下对样品进行干燥(温度:-30～-100C,压强:10～40Pa),所以食品的变化可以减至最小程度,保存时间也较长.3. 罐藏不能即时处理的鲜样,在允许的情况下可制成罐头贮藏.例如,将一定量的试样切碎后,放人乙醇(φ=96%)中煮沸30min(最终乙醇浓度应在78%～82%的范围内),冷却后密封,可保存一年以上.一般样品在检验结束后应保留一个月以备需要时复查,保留期从检验报告单签发之日起开始计算;易变质食品不予保留.保留样品加封存入适当的地方,并尽可能保持原状. 采样时,必须注意样品的代表性和均匀性,要认真填写采样记录.样品一般分为检样,原始样品和平均样品三种.采样是指从整批被检食品中抽取一部分有代表性的样品,供分析化验用.采样是食品分析的首项工作.采样的正确与否,是检验工作成败的关键.采样的数量应能反映该批食品的卫生质量和满足检验项目对试样量的需要;采样的数量一式三份供检验,复检和备查用,每份不少于0. 5 kg .样品的采集通常采用随机抽样的方法.最常用的方法有简单随机抽样,分层随机抽样,系统随机抽样和阶段随机抽样.样品的制备是指对所采取的样品进行分取,粉碎,混匀等过程.由于用一般方法取得的样品数量较多,颗粒过大且组成不均匀,因此必须对采集的样品加以适当的制备,以保证其能代表全部样品的情况并满足分析对样品的要求.样品采集后应于当天分析,如不能马上分析则应妥善保存,容易腐败变质的样品可用冷藏,干藏,罐藏等方法保存,一般样品在检验结束后应保留一个月以备需要时复查.样品采集- 注意事项定义:所谓采样是指从整批被检食品中抽取一部分有代表性的样品,供分析化验用.采样是食品分析的首项工作.意义:采样的正确与否,是检验工作成败的关键.食品的种类繁多,且组成很不均匀.不管是制成品,还是未加工的原料,即使是同一种样品,其所含成分的分布也不会完全一致,如果采样方法不正确,试样不具有代表性,则无论操作如何细心,结果如何精密,分析都将毫无意义,甚至可能导致得出错误的结论.要求:1. 采样时,必须注意样品的代表性和均匀性,以确保所采样样品能代表整个供试材料的平均组成.2. 采样时,要认真填写采样记录,写明样品的生产日期,批号,采样条件,方法,数量,包装情况等.外地调入的食品还应结合运货单,商检机关和卫生部门的化验单,厂方化验单等,了解起运日期,来源地点,数量,品质及包装情况.同时注意其运输及保管条件,并填写检验目的,项目及采样人.。
样品采集的原理和方法样品采集是指在科学研究和实践中，收集原料样品或代表性样本以及外来物质的过程。
样品采集的原理和方法可以根据具体的研究对象和要求有所不同，下面以地质样品和生物样品为例进行介绍。
1. 地质样品采集：地质样品采集的原理是通过收集地质物质的样品，了解地球的组成、性质和变化。
采集地质样品的方法主要有以下几种：- 露天采集：对于露天地质样品，可以直接在地表或者露天矿坑、露天矿石中进行采集，如用铲子、锤子和钻石等工具进行破碎和采集。
- 取样钻探：对于地下地质样品，可以利用水泥或金属钻头进行钻探，获取样品。
常用的取样钻探方法有手动钻探、旋转钻探和绳索钻探等。
- 抽样：对于岩石、土壤等地质样品，可以利用工具如小铲子、铁锨等进行抽样获取样品。
2. 生物样品采集：生物样品采集包括植物、动物、微生物等生物体的样品采集。
生物样品采集的原理是收集生物样品以研究其形态、生理、分子等特征。
采集生物样品的方法主要有以下几种：- 采摘：对于植物样品，可以直接将植物的叶子、花、果实等部分采摘下来，进行后续的研究。
- 标本采集：对于植物和动物样品，可以进行采集制作标本，将整个植物或者动物固定在标本纸上，保留其形态特征。
- 组织采集：对于植物和动物样品，可以采集其组织样品，如动物的皮肤、肌肉、器官等组织，植物的茎、根、叶等组织。
- 拭子采集：对于微生物样品，可以使用棉签、刷子等工具进行拭子采集，将微生物从表面采集下来。
除了以上的方法，样品采集还需要注意一些基本原则：- 样品的代表性：采集的样品应该能够代表整体的特征，避免局部现象的影响。
- 采集时机：根据研究对象的特性和变化规律，选择合适的时间进行采集，以确保样品的准确性。
- 采集环境：采集样品时要注意周围环境的影响，避免污染或干扰，保证样品的纯净性和完整性。
- 采集工具：根据需要选择合适的工具进行采集，确保样品的完整性和准确性。
样品的采集一、采样的一般原则基本原则⏹适时采样：强调发病期、病毒血症期采样，死亡动物应在死后6小时以内。
⏹合理采样：根据监测病种进行采样⏹典型采样：采取典型病例⏹无菌采样：⏹适量采样：采样数和每份样品的量应根据具体要求采集⏹安全采样：注意个人防护⏹规范处理：按照样品采集的规范要求采集，每个步骤做到无害化⏹严格包装:每份样品单独包装，贴标签，详细注明日期、组织或动物名称、采样人等⏹及时送检：采集后马上送检，或者-20度保存。
二、不同样品的采集与技术要求⏹血液样品分为耳静脉采血、颈静脉采血、前腔静脉采血、心脏采血、翅静脉采血，应根据工作实际选择合适的采血方式。
全血样品是在样品中加抗凝剂，可用0.1%肝素、阿氏液、3.8%枸橼酸钠。
我们通常做免疫效果抗体检测需要血清，血液在采集后室温静置2小时以上，冬季需要加温，高速离心，或者4度过夜，抽取血清。
⏹注意事项：1每份样品一定按要求采够量，比如禽血清一般要求不少于0.5 毫升，猪血清一般要求不少于1毫升。
⏹ 2血清样品要清亮、无溶血、无变质。
⏹ 3样品容器上贴详细标签⏹ 4尽量防止或避免反复冻融。
⏹组织样品：采集的每个组织块要单独放一个已消毒的容器内，贴详细标签，防止组织间相互污染，注意消毒，以防散毒。
做好个人防护。
⏹分泌物和排泄物：常用的就是禽流感咽喉拭子和泄殖腔拭子的采集。
容器中首先放入含有抗菌素的PH值为7.0-7.4的PBS液，原则上咽喉、泄殖腔拭子分别放置。
抗生素的浓度为青霉素2000IU/ml,链霉素2mg/ml,庆大霉素（卡那霉素）50ug/ml,制霉菌素10000IU/ml,粪便和泄殖腔拭子所用的抗生提高5倍。
加入抗生素后应调整PH值至7.0-7.4。
⏹粪便样品：常用的是禽流感野鸟粪便的采集，注意样品一定为新鲜粪便。
⏹皮肤样品三、采样前的准备采样器械剪刀、镊子、钳子、手术刀采样记录用品不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、采样记录表、紧急流行病学调查表、畜禽标识阅读器保存液阿氏液、30%甘油盐水缓冲液、肉汤、PBS液、双抗人员防护用具口罩、防护镜、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶靴其他保温箱或保温瓶、小青瓶、平皿、离心管、自封袋、冰袋等酒精棉，碘酒棉，注射器及针头四、采样注意事项采取一种病料，使用一套器械与容器，不可用其再采其他病料或容纳其他脏器材料采过病料的用具应先消毒后清洗检查病变与采集病料应统筹考虑。
样品采集指南
1. 引言
本文档提供了样品采集的指南，以确保采样的准确性和一致性。
样品采集对于许多研究项目和实验非常重要，因此正确的采集方法
是至关重要的。
2. 采集前的准备工作
在进行样品采集之前，需要进行一些准备工作，以确保采集过
程的顺利进行。
以下是一些准备工作的基本步骤：
- 确定采集的目的和要求
- 确定采集的时间和地点
- 准备所需的采集工具和设备
- 清洁和消毒采集工具和
3. 样品采集步骤
采集过程中的步骤应按以下顺序进行：
1. 穿戴适当的个人防护装备，如手套和口罩。
2. 根据实验要求选择合适的采集工具，并确保其清洁和消毒。
3. 准备标签，并在上标明样品的相关信息，如采集日期和时间、采集地点等。
4. 在采集前，确定采集点，并将其清洁。
5. 采集样品时要小心，确保样品不受任何外界污染。
6. 将采集的样品放入清洁的中，并尽量避免污染。
7. 在完成采集后，确保密封，并进行适当的储存和运输。
4. 样品采集注意事项
在进行样品采集时需要注意以下事项：
- 遵守相关法律法规和伦理准则。
- 尽量避免交叉污染。
- 遵守采集工具和的使用说明。
- 避免使用过期或损坏的采集工具和。
- 注意采集过程中的卫生和安全问题。
5. 结论
本文档提供了样品采集的指南，包括采集前的准备工作、采集
步骤和注意事项。
通过遵循本指南，可以确保样品采集的准确性和
一致性，从而提高研究结果的可靠性。
样品的采集与处理食品样品的采集、制备与保存食品分析的一般程序：样品的采集、制备和保存；样品的预处理；成分分析；分析数据处理；撰写分析报告一、样品的采集采样的概念：在产品中抽取有一定代表性样品，供分析化验用。
样品采集的目的：确保分析结果准确无误。
由于被测样品品种与选取的部位不一，生产、运输、存储条件不同，因此，要确保取样有代表性，必需运用正确的采样技术。
此外，正确采集样品后对样品的制备与保存，为样品作进一步的加工及处理提供了必不可少的保障。
正确采样的原则1.采集的样品：均匀、有代表性，能反映全部被检食品的组成 2.采样过程中：要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散或带入杂质正确采样的步骤1.获取检样。
从各批样品中的各个部位，运用相应的技术手段或方法，取适量的样品。
2.将检样混合到一起，得到原始样品3.将原始样品经过技术处理后，抽取的作为分析检验用的部分称为平均样品。
正确的采样数量和方法数量：依据分析项目的要求、分析方法的要求及被检物的均匀程度三个因素确定采样数量。
平均样品：一式三份，分别供检验、复检、备查，每份样品不少于0.5kg。
检验掺伪物的样品取样数量要多一些方法：获得检样的方法应根据样品的类别、材质、类型、性状的作出相应的调整。
样品类别1)均匀固体物料(如粮食、粉状食)2)液体物料(如植物油、鲜乳等)5)小包装食品( 罐头、听装奶粉、瓶装饮料等)3)较稠的半固体物料(如稀奶油、果酱等)4)组成不均匀的固体食品(如肉、鱼、蔬菜等)1)均匀固体物料均匀固体物料有完整包装(袋、桶、箱等)的样品采样件数：总件数的1/2 的平方根原始样品：双套回转取样管上、中、下三层取出三份检样,综合检样成为原始样品平均样品:四分法无完整包装(袋、桶、箱等)的样品划分若干等体积层，每层的四角和中心点取得检样四分法四分法混合缩分弃去混合缩分弃去混合缩分混合弃去2)液体物料(如植物油、鲜乳等)包装体积不太大的大桶装的或散(池)装的确定采样件数，开启包装充分混合后取样虹吸法分层(大池还应分四角及中心五点)取样，每层500ml左右，充分混合后，分取缩减到所需数量采样实例：牛乳采样采样前：每次取样至少250mL。
